趙興梅，陳華德

（浙江中醫(yī)藥大學(xué)，浙江杭州310053）

慢性心力衰竭（CHF）是一種復(fù)雜的進(jìn)展性臨床綜合癥，也是多種疾病的最終歸宿。隨著人口老齡化進(jìn)程的加快及高血壓、冠心病等心血管病發(fā)病率的上升，CHF的發(fā)病率及死亡率逐年增高，已經(jīng)對醫(yī)學(xué)界乃至全社會形成了巨大挑戰(zhàn)。目前，治療CHF主要以減慢心率、強(qiáng)心、利尿、擴(kuò)血管等手段為主，并取得一定療效，但也僅能延緩病情的進(jìn)展，在逆轉(zhuǎn)心肌重構(gòu)，恢復(fù)心臟功能方面仍舉步維艱。穴位注射療法產(chǎn)生于20世紀(jì)五六十年代，是根據(jù)傳統(tǒng)的中醫(yī)藥理論，結(jié)合現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的注射技術(shù)，按照穴位主治功能和藥物的藥理作用，采用小劑量中西藥注入人體的經(jīng)絡(luò)穴位以治療各種疑難病癥的一種方法［1］。此種注射療法簡便易行，起效快、效果好，且所需藥物的劑量也小，因而很快在全國范圍內(nèi)推廣使用［2］。本實驗旨在探討穴位注射對CHF的效應(yīng)及療效與所用藥物之間的關(guān)系，為CHF的治療提供更好的方法指導(dǎo)和實驗依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

1.1.1 實驗動物 Wistar大鼠45只，雄性，體重為（200±20）g，6 w 齡，購自上海西普爾-必凱實驗動物有限公司，生產(chǎn)許可證號：SCXK（滬）：2008-0016。

1.1.2 藥物與儀器 普萘洛爾（心得安，江蘇常州康普藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號：1202004）、丹參注射液（正大青春寶藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號：1108091）、肌苷注射液（山東方明藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司生產(chǎn)，批號：1107285）、蒸餾水（浙江中醫(yī)藥大學(xué)第三臨床醫(yī)學(xué)院實驗室提供）。1 mL注射器（4.5號針頭），購自浙江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第三醫(yī)院。

1.2 實驗方法

1.2.1 造模與給藥 實驗前先進(jìn)行動物游泳適應(yīng)能力的篩選：雄性Wistar大鼠45只，每天在游泳缸里強(qiáng)迫負(fù)重游泳2次，每次游至力竭（翻正反射消失）。連續(xù)3 d后淘汰無法適應(yīng)游泳的大鼠（淘汰率約3%），隨機(jī)選出8只大鼠作為正常對照組。其余大鼠繼續(xù)造模，實驗20 d后，從剩余大鼠中隨機(jī)選出32只，第21天起每日灌服普萘洛爾溶液2.4 mg/100 g體重，連續(xù)4 d。造模成功后，隨機(jī)分為丹參組、肌苷組、蒸餾水組、模型對照組4組，每組8只。造模成功后各組分別給予如下處理：①丹參組、肌苷組、蒸餾水組：選穴：雙側(cè)穴位足三里（穴位定位參考《實驗針灸學(xué)》［3］），手法：補(bǔ)法，即順著經(jīng)絡(luò)循行的方向緩慢注射相應(yīng)藥物1 min后迅速拔針。藥物：分別為丹參注射液、肌苷注射液、蒸餾水。給藥劑量：每穴0.20 mL（通過人與動物的用藥劑量換算公式算出）。②模型對照組：造模后不做任何處理。③正常對照組：常規(guī)飼料飼養(yǎng)，自由飲水，不予任何處理。各組按上述處理方案進(jìn)行，1次/d，連續(xù)治療1個療程（10 d）后，抽血及切取大鼠心肌細(xì)胞。

1.2.2 指標(biāo)檢測 通過酶動力學(xué)比色法檢測不同藥物組血清乳酸脫氫酶（LDH）含量，采用酶動力學(xué)法檢測血清肌酸激酶（CK）含量，通過透射電子顯微鏡檢測不同藥物組的心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件包對相關(guān)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理。所有數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，各組組間差異采用單因素方差分析（One-Way ANOVA）。

2 結(jié)果

2.1 各組大鼠血清LDH和CK的濃度比較

模型對照組血清LDH和CK濃度與正常對照組比較明顯升高（P<0.001），說明造模成功。丹參組、肌苷組血清LDH和CK濃度與模型對照組相比均明顯降低（P<0.01，P<0.001），蒸餾水組血清LDH濃度與模型對照組相比顯著降低（P<0.05），血清CK濃度雖然降低，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。肌苷組血清CK濃度與丹參組相比明顯降低（P<0.01）。說明通過穴位注射不同藥物可不同程度地降低血清LDH和CK濃度，其中肌苷注射液作用最強(qiáng)。結(jié)果見表1。

表1 治療后各組大鼠血清LDH和CK濃度對比 （±s）

表1 治療后各組大鼠血清LDH和CK濃度對比 （±s）

注：與正常對照組比較，1）P<0.001；與模型對照組比較，2）P<0.05，3）P<0.01，4）P<0.001；與丹參組比較，5）P<0.01

組別 n LDH濃度（U/L）CK濃度（U/L）丹參組 81852.143±302.423）753.571±69.9783）肌苷組 81594.857±316.4854）688.571±82.4784）5）蒸餾水組 81947.429±325.5152）879.714±72.394模型對照組 82344.143±301.3271）909.000±106.1671）正常對照組 81306.571±354.550602.143±92.526

2.2 各組大鼠心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)比較

正常對照組肌絲排列整齊有序，線粒體膜清晰完整。模型對照組肌絲排列紊亂、斷裂、溶解，線粒體嵴模糊，線粒體部分溶解，少量線粒體空泡化。肌苷組肌絲排列輕度紊亂，少量線粒體空泡化。丹參組肌絲排列紊亂，線粒體結(jié)構(gòu)紊亂，少量線粒體空泡化。蒸餾水組肌絲斷裂，線粒體嵴模糊，線粒體部分溶解，少量線粒體空泡化。結(jié)果見圖1。

3 討 論

心力衰竭是由于心臟負(fù)荷過重、血栓形成或炎癥等原因引起的心肌損傷，造成心肌結(jié)構(gòu)和功能的變化，最后導(dǎo)致心室泵血或充盈功能低下。臨床主要表現(xiàn)為呼吸困難、乏力和體液潴留。CHF是指持續(xù)存在的心力衰竭狀態(tài)，一旦惡化或失代償，嚴(yán)重威脅生命。通過本實驗研究，我們發(fā)現(xiàn)穴位注射對CHF療效顯著，且療效與所用藥物密切相關(guān)，而不只是由單純的穴位刺激決定。

LDH和CK是參與心肌細(xì)胞能量代謝的重要酶類，主要分布于心肌細(xì)胞內(nèi)，正常情況下，不易通過細(xì)胞膜。當(dāng)心肌受損、缺血缺氧、代謝異常時，血清LDH和CK的濃度才會升高，而且濃度的高低與損傷的程度密切相關(guān)。心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的損傷是心功能不全的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)；保護(hù)心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)方可防止和逆轉(zhuǎn)心肌重塑，恢復(fù)心功能。

圖1 各組大鼠心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)

本實驗結(jié)果顯示，和正常對照組相比，模型對照組血清LDH和CK濃度均升高（P<0.001）；心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)示，模型對照組肌絲排列紊亂、斷裂、溶解，線粒體嵴模糊，線粒體部分溶解，少量線粒體空泡化，說明造模成功。和模型對照組相比，各治療組大鼠血清CK和LDH濃度明顯降低，心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)損傷明顯減輕，其中蒸餾水組改變最小，肌苷組最接近正常。說明足三里穴位注射丹參注射液、肌苷注射液、蒸餾水都能改善心肌代謝，防止心肌重構(gòu)。丹參注射液的作用可能與丹參具有強(qiáng)心、擴(kuò)張冠脈、抗血栓形成、抑制纖維母細(xì)胞增生等作用有關(guān)［4］。肌苷注射液的作用可能與肌苷能直接通過細(xì)胞膜進(jìn)入心肌細(xì)胞活化丙酮酸氧化酶類，從而使處于低能缺氧狀態(tài)下的心肌細(xì)胞能繼續(xù)順利進(jìn)行代謝，并參與能量代謝和蛋白質(zhì)的合成有關(guān)［5］。蒸餾水的作用可能與它的體積和重量對穴位產(chǎn)生的機(jī)械刺激有關(guān)。

綜上所述，穴位注射可從改善心肌代謝，保護(hù)心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)，預(yù)防心肌重構(gòu)等不同層面對CHF起到治療作用。同時穴位注射對CHF的效應(yīng)與所用藥物直接相關(guān)，其效應(yīng)是穴位刺激和藥物作用有機(jī)結(jié)合的結(jié)果。中藥丹參注射液和西藥肌苷注射液均有效，且二者的療效明顯強(qiáng)于蒸餾水，其中肌苷注射液比丹參注射液更擅長于改善心肌代謝，保護(hù)心肌細(xì)胞。本研究提示若中西藥聯(lián)用，可能療效更佳。

［1］林靜瑜，許云祿，倪峰.穴位注射作用機(jī)制研究進(jìn)展［J］.遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報，2007，9（6）：189.

［2］李鏷.穴位注射療法臨床大全［M］.北京：中國中醫(yī)藥出版社，1996：68.

［3］李忠仁.實驗針灸學(xué)［M］.北京：中國中醫(yī)藥出版社，2007：327-328.

［4］王本祥.現(xiàn)代中藥藥理與臨床［M］.天津：天津科技翻譯出版公司，2004：1367-1369.

［5］龍琨.臨床藥物匯編［M］.北京：金盾出版社，1992：651-652.