邵銀玲
摘 要 目的:探討GEB-600(高爾寶)尿液分析儀檢測紅細胞、白細胞酯酶(LEU)、尿葡萄糖(GLU)的效果。方法:收集臨床門診患者新鮮尿液680份,用尿液分析儀檢測紅細胞、LEU和GLU水平,并與鏡檢法檢測的紅細胞和白細胞、全自動生化分析儀定量檢測的GLU水平進行比較。結(jié)果:在檢測尿液中紅細胞和LEU時,聯(lián)合應(yīng)用尿液分析儀和鏡檢法可提高檢出準確性。在檢測尿液中GLU時,尿液分析儀與全自動生化分析儀的符合率較高。結(jié)論:尿液分析儀檢測紅細胞和LEU時需與鏡檢法聯(lián)合應(yīng)用才能確保結(jié)果的準確性,在檢測GLU時與全自動生化分析儀符合性較好,能滿足臨床篩查需要。
關(guān)鍵詞 尿液檢測 尿液分析儀 診斷
中圖分類號:R446.12+1 文獻標識碼:A 文章編號:1006-1533(2014)22-0029-03
醫(yī)學檢驗分析在疾病的診療中起著十分重要的作用,近年來,尿液干化學分析已在全國各地普及,越來越受到人們的重視,該法原理是利用成品尿試紙上各種特有發(fā)色膜塊與尿液中有關(guān)的化學成分、細胞發(fā)生顏色反應(yīng),經(jīng)尿液分析儀分析比較,結(jié)果打印顯示,其特點是操作簡單、快速、檢測少量尿液即可一次性獲得多項實驗數(shù)據(jù),能為臨床診斷及預(yù)后提供很高的參考價值,同時減少了實驗室的工作強度。檢測尿液中紅細胞、白細胞酯酶(LEU)、尿葡萄糖(GLU)水平,對泌尿系統(tǒng)疾病和糖尿病患者的診斷和疾病控制十分重要,但由于尿液干化學分析受自身檢測原理的局限,本文評估GEB-600(高爾寶)尿液分析儀檢測紅細胞、LEU和GLU的效果,并與鏡檢法和全自動生化分析儀結(jié)果比較。
材料與方法
對象與材料
收集門診及住院內(nèi)科680例患者的尿液,采用GEB-600(高爾寶)尿液分析儀檢測RBC、LEU和GLU水平,并用離心鏡檢法檢測RBC、LEU水平,用生化分析儀(HITACHI 7100)定量檢測GLU水平,比較不同方法的結(jié)果符合程度。
方法
尿液分析儀和生化分析儀每天開機后先分別按上海市臨床檢驗中心要求做室內(nèi)質(zhì)控。
用一次性清潔尿杯收集患者隨機尿,充分混勻后分為2管測GLU水平,1管用尿液分析儀檢測,另1管用生化分析儀檢測,檢測步驟均按說明書進行操作。
用尿液分析儀檢測的尿液再經(jīng)1 500 g離心5 min,取沉渣進行鏡檢。比較兩種方法的檢測符合率。
評定標準
尿液分析儀檢測結(jié)果中紅細胞、白細胞以鏡檢法為參考,正常參考值為紅細胞0~3/HP,白細胞為0~5/HP,超出正常范圍者為異常;尿葡萄糖以全自動生化分析儀定量結(jié)果為參考標準。
統(tǒng)計方法
用SPSS17.0軟件進行統(tǒng)計學分析,計數(shù)資料用卡方檢驗,P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
結(jié)果
采用尿液分析儀檢測和顯微鏡檢出紅細胞結(jié)果見表1,尿液分析儀檢測LEU和顯微鏡檢查白細胞符合率見表2。
采用尿液分析儀和生化分析儀檢測尿GLU水平比較見表3。
討論
儀器檢測與傳統(tǒng)鏡檢紅細胞
從表1可見,尿分析儀與鏡檢法檢測結(jié)果差異顯著(P<0.05),造成這一差異主要原因是兩者的檢測原理不同。尿液分析儀是利用尿液中紅細胞內(nèi)血紅蛋白或破壞釋放的血紅蛋白中含有的亞鐵血紅素具有的過氧化物酶活性,在有氧條件下,使過氧氫茴香素或過氧化氫烯鈷釋放出新生態(tài)氧,后者可將試帶中的聯(lián)苯胺氧化成聯(lián)苯胺藍而顯藍色,因此該法既可對完整紅細胞發(fā)生反應(yīng),也可檢測游離血紅蛋白,而鏡檢法是傳統(tǒng)的常規(guī)檢驗方法,能直接觀察紅細胞的形態(tài)。
本研究中,尿液分析儀檢出紅細胞異常者較多,鏡檢紅細胞數(shù)卻并不多,主要是泌尿系統(tǒng)感染時,尿中大多革蘭陰性菌和某些革蘭陽性菌能合成觸酶,過氧化物酶和超氧化物歧化酶能使試紙條呈色反應(yīng),因此假陽性率極高,常導(dǎo)致臨床誤診。還有一部分原因是由于尿比重低,尿pH過高或盛尿容器被污染等原因也可導(dǎo)致紅細胞在體內(nèi)或體外受到破壞,以致鏡檢找不到紅細胞,腎病患者終尿中的紅細胞可因各種因素變形裂解使血紅蛋白逸出,尿中某些氧化性污染物以及大劑量抗壞血酸存在均可出現(xiàn)假陽性反應(yīng)。此外,尿中含有易熱酶、肌紅蛋白也可引起假陽性。
還有少部分病例鏡檢法檢測到紅細胞而尿液分析儀檢測結(jié)果卻是正常,這是由于用尿液分析儀測定隱血時,維生素C會干擾試驗結(jié)果,引起假陰性,當維生素C濃度≥5.6 mmol/L時,紅細胞檢出假陰性率為100%[1]。用尿液分析儀時,高相對體積質(zhì)量和高蛋白在檢測中會降低紅細胞測定的靈敏度,服用還原型谷胱甘肽、硫代硫酸鈉、安乃近、甲硫丙脯酸均可致假陰性。
尿液分析儀是根據(jù)干化學試帶法原理檢測尿中紅細胞,能對大量標本進行簡便快速處理,但會出現(xiàn)與鏡檢結(jié)果存在差異的現(xiàn)象,顯微鏡法檢測尿中紅細胞能直接觀察紅細胞的形態(tài),有利于臨床治療觀察及病情變化監(jiān)測,但是大量標本檢驗時不利于快速、簡便出報告。從上述結(jié)果可見,兩種方法所測結(jié)果存在差異,尿液分析儀測定尿液存在許多影響因素,應(yīng)嚴格操作規(guī)程,加強尿液沉渣顯微鏡檢查[2]。因此,尿液分析儀檢測紅細胞時需結(jié)合人工顯微鏡檢查,兩種方法相互補充,可得到更為可靠的結(jié)果。此時除了排除干擾因素外,還需結(jié)合臨床進行綜合分析。
白細胞或LEU測定
從表2可見,尿液分析儀檢測結(jié)果與鏡檢法之間也存在顯著差異(P<0.05)。尿液分析儀檢測白細胞的原理是基于粒細胞質(zhì)內(nèi)含有酯酶,可作用于試帶模塊中的吲哚酚酯,從而釋放出吲哚酚,后者與重氮鹽反應(yīng)生成紫色縮合物,當尿中出現(xiàn)不含顆粒的淋巴或單核細胞時,試紙則檢測不出白細胞,只能靠鏡檢。
當尿中淋巴、單核細胞增多(如腎移植患者發(fā)生移植反應(yīng))時會使試紙條呈假陰性。另有報道,尿中有大量先鋒Ⅳ、慶大霉素或高糖、高比重、高蛋白尿和服用較多四環(huán)素,也可降低干化學法檢查白細胞的陽性程度,出現(xiàn)假陰性,這可能與蛋白質(zhì)與染料結(jié)合過程中的某種中間產(chǎn)物或氧化酶氧化GLU產(chǎn)生過氧化氫抑制白細胞胞質(zhì)內(nèi)的酯酶活性及GLU氧化反應(yīng)有關(guān)。另外,尿液分析試紙的保存中,如將干燥的紙片暴露在空氣中3 h對測定結(jié)果無影響,但將紙片用蒸餾水濕潤后,置空氣中3-5 min就會出現(xiàn)假陽性結(jié)果。因此,必須按要求保存試紙,除非立即使用,否則不得將紙片從瓶中取出[3]。還有部分病例尿液分析儀檢測陽性而鏡檢卻找不到白細胞,常見原因是女性陰道分泌物上皮細胞受污染,其有類似粒細胞的功能,與試紙上的白細胞模塊發(fā)生反應(yīng)。尿液分析儀檢測時,若尿液受甲醛、大量膽紅素、氧化型清潔劑等污染也可產(chǎn)生假陽性,另外,某些藥物(如呋喃坦啶)及高濃度膽紅素都可導(dǎo)致假陽性結(jié)果。鏡檢法檢測白細胞是將尿液離心沉淀后直接計數(shù)白細胞,因此鏡檢法檢測白細胞數(shù)明顯高于尿液分析儀法。
由上可見,尿液分析儀存在假陽性和假陰性結(jié)果,衛(wèi)生和計劃生育委員會規(guī)定的手工法是有效的復(fù)核方法,在檢測尿液中LEU時即使尿液分析法檢測陰性也應(yīng)用鏡檢法檢測尿沉渣,給臨床提供更準確的檢驗結(jié)果。
GLU測定
從表3可見,尿液分析儀與定量法檢測尿GLU正常或異常的符合度較好,差異不顯著(P>0.05)。尿液分析儀所采用的GLU氧化酶法操作簡單、快速,用于糖尿病患者的尿糖篩查,完全能滿足臨床需要。
干化學法檢測尿中GLU是采用GLU氧化酶法,即GOD-POD法,GLU先在GLU氧化酶作用下形成葡萄糖醛酸和過氧化氫,過氧化氫在過氧化物酶作用下釋放氧分子,氧分子再還原碘化鉀,其顏色由藍轉(zhuǎn)至綠或黃色至棕色。該法對GLU檢測有特異性,不與乳糖、半乳糖(酶)、果糖等還原糖反應(yīng),也不與萘啶酸、水楊酸等還原藥物反應(yīng)。但由于尿液分析儀檢測試帶為含酶制品,一些理化因素(高溫、低溫、PH等)均可使酶失去活性而呈假陰性;當尿中維生素C濃度達500~1 000 mg/L、而尿糖含量<14 mmol/L時或服用龍膽酸、尿黑酸、酚磺二胺及安乃近等藥物時,試紙條會因抑制反應(yīng)出現(xiàn)假陰性結(jié)果,隨著維生素C濃度逐漸增加,尿GLU含量呈逐漸下降趨勢,維生素C起著負干擾作用[4];高pH同時高比重(1.020以上)的尿液可降低試紙條對GLU的靈敏度出現(xiàn)假陰性結(jié)果;酮體也能降低試紙靈敏度 ,可使含低濃度GLU的尿液出現(xiàn)假陰性結(jié)果;當試紙條在空氣中暴露時間太久或存放尿液的容器中殘留如過氧化氫、漂白粉等具有氧化性的消毒劑或低比密尿時可出現(xiàn)假陽性結(jié)果。所以,出現(xiàn)兩種檢測方法結(jié)果不符合的情況是因為生化分析儀直接檢測尿中GLU含量,特異性比尿液分析儀更高,但其操作較復(fù)雜,且檢測時間長、成本高。由此可見,尿液分析儀檢測GLU氧化酶操作簡單、快速,作為糖尿病患者的尿GLU篩查,完全能滿足臨床需要。
綜上所述,尿液分析儀雖檢測速度較快,但測定中存在許多影響因素,受到試劑、方法及靈敏度等多方面影響,因該法不能替代病理性尿液標本的顯微鏡檢查[5],兩者應(yīng)聯(lián)合應(yīng)用才具有較高準確性和特異性。尿液分析儀與生化儀定量法在檢測GLU中符合性較高,但也會因諸多因素存在而產(chǎn)生假陰性和假陽性結(jié)果。因此,檢驗人員要有高度負責的態(tài)度,積累實踐經(jīng)驗,嚴格遵守操作規(guī)程,認真對待每份標本,從各個環(huán)節(jié)注意質(zhì)量控制,盡可能避免各種原因造成的漏診和誤診。
參考文獻
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(收稿日期:2014-07-30)
由上可見,尿液分析儀存在假陽性和假陰性結(jié)果,衛(wèi)生和計劃生育委員會規(guī)定的手工法是有效的復(fù)核方法,在檢測尿液中LEU時即使尿液分析法檢測陰性也應(yīng)用鏡檢法檢測尿沉渣,給臨床提供更準確的檢驗結(jié)果。
GLU測定
從表3可見,尿液分析儀與定量法檢測尿GLU正常或異常的符合度較好,差異不顯著(P>0.05)。尿液分析儀所采用的GLU氧化酶法操作簡單、快速,用于糖尿病患者的尿糖篩查,完全能滿足臨床需要。
干化學法檢測尿中GLU是采用GLU氧化酶法,即GOD-POD法,GLU先在GLU氧化酶作用下形成葡萄糖醛酸和過氧化氫,過氧化氫在過氧化物酶作用下釋放氧分子,氧分子再還原碘化鉀,其顏色由藍轉(zhuǎn)至綠或黃色至棕色。該法對GLU檢測有特異性,不與乳糖、半乳糖(酶)、果糖等還原糖反應(yīng),也不與萘啶酸、水楊酸等還原藥物反應(yīng)。但由于尿液分析儀檢測試帶為含酶制品,一些理化因素(高溫、低溫、PH等)均可使酶失去活性而呈假陰性;當尿中維生素C濃度達500~1 000 mg/L、而尿糖含量<14 mmol/L時或服用龍膽酸、尿黑酸、酚磺二胺及安乃近等藥物時,試紙條會因抑制反應(yīng)出現(xiàn)假陰性結(jié)果,隨著維生素C濃度逐漸增加,尿GLU含量呈逐漸下降趨勢,維生素C起著負干擾作用[4];高pH同時高比重(1.020以上)的尿液可降低試紙條對GLU的靈敏度出現(xiàn)假陰性結(jié)果;酮體也能降低試紙靈敏度 ,可使含低濃度GLU的尿液出現(xiàn)假陰性結(jié)果;當試紙條在空氣中暴露時間太久或存放尿液的容器中殘留如過氧化氫、漂白粉等具有氧化性的消毒劑或低比密尿時可出現(xiàn)假陽性結(jié)果。所以,出現(xiàn)兩種檢測方法結(jié)果不符合的情況是因為生化分析儀直接檢測尿中GLU含量,特異性比尿液分析儀更高,但其操作較復(fù)雜,且檢測時間長、成本高。由此可見,尿液分析儀檢測GLU氧化酶操作簡單、快速,作為糖尿病患者的尿GLU篩查,完全能滿足臨床需要。
綜上所述,尿液分析儀雖檢測速度較快,但測定中存在許多影響因素,受到試劑、方法及靈敏度等多方面影響,因該法不能替代病理性尿液標本的顯微鏡檢查[5],兩者應(yīng)聯(lián)合應(yīng)用才具有較高準確性和特異性。尿液分析儀與生化儀定量法在檢測GLU中符合性較高,但也會因諸多因素存在而產(chǎn)生假陰性和假陽性結(jié)果。因此,檢驗人員要有高度負責的態(tài)度,積累實踐經(jīng)驗,嚴格遵守操作規(guī)程,認真對待每份標本,從各個環(huán)節(jié)注意質(zhì)量控制,盡可能避免各種原因造成的漏診和誤診。
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(收稿日期:2014-07-30)
由上可見,尿液分析儀存在假陽性和假陰性結(jié)果,衛(wèi)生和計劃生育委員會規(guī)定的手工法是有效的復(fù)核方法,在檢測尿液中LEU時即使尿液分析法檢測陰性也應(yīng)用鏡檢法檢測尿沉渣,給臨床提供更準確的檢驗結(jié)果。
GLU測定
從表3可見,尿液分析儀與定量法檢測尿GLU正?;虍惓5姆隙容^好,差異不顯著(P>0.05)。尿液分析儀所采用的GLU氧化酶法操作簡單、快速,用于糖尿病患者的尿糖篩查,完全能滿足臨床需要。
干化學法檢測尿中GLU是采用GLU氧化酶法,即GOD-POD法,GLU先在GLU氧化酶作用下形成葡萄糖醛酸和過氧化氫,過氧化氫在過氧化物酶作用下釋放氧分子,氧分子再還原碘化鉀,其顏色由藍轉(zhuǎn)至綠或黃色至棕色。該法對GLU檢測有特異性,不與乳糖、半乳糖(酶)、果糖等還原糖反應(yīng),也不與萘啶酸、水楊酸等還原藥物反應(yīng)。但由于尿液分析儀檢測試帶為含酶制品,一些理化因素(高溫、低溫、PH等)均可使酶失去活性而呈假陰性;當尿中維生素C濃度達500~1 000 mg/L、而尿糖含量<14 mmol/L時或服用龍膽酸、尿黑酸、酚磺二胺及安乃近等藥物時,試紙條會因抑制反應(yīng)出現(xiàn)假陰性結(jié)果,隨著維生素C濃度逐漸增加,尿GLU含量呈逐漸下降趨勢,維生素C起著負干擾作用[4];高pH同時高比重(1.020以上)的尿液可降低試紙條對GLU的靈敏度出現(xiàn)假陰性結(jié)果;酮體也能降低試紙靈敏度 ,可使含低濃度GLU的尿液出現(xiàn)假陰性結(jié)果;當試紙條在空氣中暴露時間太久或存放尿液的容器中殘留如過氧化氫、漂白粉等具有氧化性的消毒劑或低比密尿時可出現(xiàn)假陽性結(jié)果。所以,出現(xiàn)兩種檢測方法結(jié)果不符合的情況是因為生化分析儀直接檢測尿中GLU含量,特異性比尿液分析儀更高,但其操作較復(fù)雜,且檢測時間長、成本高。由此可見,尿液分析儀檢測GLU氧化酶操作簡單、快速,作為糖尿病患者的尿GLU篩查,完全能滿足臨床需要。
綜上所述,尿液分析儀雖檢測速度較快,但測定中存在許多影響因素,受到試劑、方法及靈敏度等多方面影響,因該法不能替代病理性尿液標本的顯微鏡檢查[5],兩者應(yīng)聯(lián)合應(yīng)用才具有較高準確性和特異性。尿液分析儀與生化儀定量法在檢測GLU中符合性較高,但也會因諸多因素存在而產(chǎn)生假陰性和假陽性結(jié)果。因此,檢驗人員要有高度負責的態(tài)度,積累實踐經(jīng)驗,嚴格遵守操作規(guī)程,認真對待每份標本,從各個環(huán)節(jié)注意質(zhì)量控制,盡可能避免各種原因造成的漏診和誤診。
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(收稿日期:2014-07-30)