回瑞華,刁全平,侯冬巖,李鐵純
(鞍山師范學院化學與生命科學學院,遼寧鞍山114007)
學齡前兒童正處于生長發(fā)育的關鍵時期,蛋白質的供給特別重要.蛋白質由多種氨基酸組成,它是構成細胞組織的主要成分,是兒童生長發(fā)育所必要的物質.學齡前兒童需要蛋白質較成人多,因為他們不但需要蛋白質來補充丟失的熱量,而且還需要它來增長和構成新組織,學齡前兒童體重每增加1 kg,體內就要合成160 g新的蛋白質,以滿足身體細胞組織生長的需要.若長期缺乏蛋白質,可引起智力障礙、生長發(fā)育遲緩、體重過輕以及貧血等,健康受到影響.研究表明,食物中以豆類、干果、肉類、乳類、蛋類、魚蝦類蛋白質含量較高.除了保證學齡前兒童飲食中有足夠的蛋白質數量以外,還要注意飲食中蛋白質的質量,就是說動物性蛋白質和植物性蛋白質的量要占蛋白質總攝入量的1/2.據調查目前城區(qū)學齡前兒童普遍存在動物蛋白多、植物蛋白少,蛋白質的獲得不平衡.在植物性食物中,干果像松子仁、核桃仁、腰果、葵花子、黑芝麻、榛子仁、花生仁等營養(yǎng)成分很高[1-4],特別是蛋白質的含量均較高[5].本文采用光譜法對干果中蛋白質含量進行分析[6-7],為學齡前兒童合理補充植物蛋白提供參考.
KQ-250B型超聲清洗器(昆山市超聲儀器有限公司),UV036型紫外可見分光光度計(美國瓦里安公司),離心機(上海安亭科學儀器廠,4 000 r/min),0.085 946 moL/L鹽酸標準溶液,0.1 moL/L檸檬酸水溶液,8 moL/L尿素的2 moL/L氫氧化鈉溶液,試劑均為分析純,水為二次蒸餾水.
蛋白質標準品:牛血清白蛋白,北京北方同正生物技術發(fā)展有限公司.
樣品:松子仁、核桃仁、腰果、葵花子、黑芝麻、榛子仁、花生仁,均購于鞍山市場.
準確稱取樣品2.00 g,置于50 mL燒杯中,加入0.1 moL/mL檸檬酸溶液30 mL,超聲15 min,使其充分溶解,過濾后,以3 000 r/min的速度離心20 min,上清液過濾保存為儲備液.
精確稱取牛血清白蛋白2.0 g,置于50 mL燒杯中,加入0.1 moL/mL檸檬酸溶液30 mL,超聲15 min,使其充分溶解保存為儲備液.
1.4.1 測定波長的確定 取0.1 mL濾液于10 mL容量瓶中,8 moL/L尿素的2 moL/L氫氧化鈉溶液定容,充分振搖2 min,將濾液置于比色皿中,以8 moL/L尿素的2 moL/L氫氧化鈉溶液作參比液,在200~800 nm范圍內掃描,得到其吸收光譜,最大吸收波長為280 nm[4-6].
1.4.2 標準曲線的繪制 分別移取 0,0.30,0.60,0.90,1.20,1.50 mL1.3 中的儲備液于 10 mL 容量瓶中,以8 moL/L尿素的2 moL/L的氫氧化鈉溶液定容,充分振搖,以8 moL/L尿素的2 moL/L的氫氧化鈉溶液作參比液,在280 nm處分別測定其吸光度值A.以蛋白質濃度C為橫坐標,吸光度A為縱坐標,繪制標準曲線.回歸方程是
相關系數 r為0.999 9,線性范圍為0.447 8 ~1.497 3(mg/mL).
1.4.3 實驗方法 按1.2處理樣品,按照1.4.2測定方法分別測定其吸光度,按標準曲線法測定干果樣品中蛋白質含量.
用與繪制吸收曲線相同方法配置的樣品進行穩(wěn)定性實驗,結果表明:樣品放置60 min,測得其吸光度值基本不變.
移取1.3中的蛋白質標準品儲備液,按照1.4.2測定方法測定6次,計算該方法的RSD為0.24%.
準確移取3份相同質量濃度的樣品,加入不同質量濃度的標準溶液,按照1.4.2的方法進行測定,計算該方法的回收率見表1.
表1 方法回收率
按1.2分別處理干果樣品,按照1.4.3實驗方法分別測定其吸光度,按標準曲線法定量分析出干果樣品中蛋白質含量,結果如表2.
表2 干果中蛋白質含量測定結果 (mg/g)
由實驗結果表明,干果中松子仁、核桃仁、腰果、葵花子、黑芝麻、榛子仁、花生仁等蛋白質的含量均較高,其含量由大到小依次為:花生仁、榛子仁、黑芝麻、葵花子、腰果、核桃仁、松子仁,測定的干果樣品中花生仁蛋白質含量最高,為243 mg/g.
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