■謝少林 陳平原 呂子君 王 超，3 向文洲 鄒記興

（1.華南農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)學(xué)院，廣東廣州 510642；2.三亞海洋生物科技有限公司，海南三亞 572029；3.清遠市興漁水產(chǎn)科技有限公司，廣東清遠 511510；4.中國科學(xué)院南海海洋研究所，廣東廣州 510301）

螺旋藻是藍藻門(Cyanophta)、顫藻目(Oscilata?rides)、顫藻科(Oscillatoridae)的一個屬，其分布廣泛，存在于世界各個海域及陸地淡水、咸水中,是營自養(yǎng)型的原核水生植物，具有很高的營養(yǎng)、保健和醫(yī)藥價值[1]。螺旋藻除含有大量的蛋白質(zhì)外，其維生素和不飽和脂肪酸的含量也很高，還含有較多的生物活性成分以及全面易吸收的礦物質(zhì)；螺旋藻因其全面且

豐富的營養(yǎng)，被聯(lián)合國糧農(nóng)組織譽為“21世紀(jì)最佳的理想食品”，也被世界衛(wèi)生組織評為“人類21世紀(jì)的最佳保健品”[2-3]。隨著對螺旋藻研究的逐漸深入，以及工廠規(guī)?；a(chǎn)的實現(xiàn)，當(dāng)前螺旋藻的生產(chǎn)不僅能夠滿足人類作為醫(yī)藥、保健食品的需要，而且逐漸擴展到作為添加劑在動物飼料中的應(yīng)用[4]。本試驗以添加1%螺旋藻的羅非魚飼料飼養(yǎng)彭澤鯽，通過與對照組對比，對其生長和肌肉營養(yǎng)品質(zhì)變化進行全面細致的分析，進而對螺旋藻的添加使用效果進行客觀綜合的評價，對螺旋藻在生產(chǎn)實踐中的應(yīng)用具有一定的指導(dǎo)意義。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 試驗飼料

對照組羅非魚飼料由清遠市金正飼料有限公司生產(chǎn)，試驗組飼料是在原羅非魚飼料配方中添加1%的螺旋藻，然后制成顆粒飼料；螺旋藻由三亞海王集團提供。具體試驗飼料營養(yǎng)水平見表1。

表1 試驗組和對照組所用日糧營養(yǎng)水平對比(%)

1.1.2 試驗用魚

由國家大宗淡水魚類產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系廣州綜合試驗站清遠石板基地提供的1齡左右彭澤鯽魚種。

1.2 方法

1.2.1 試驗方法

試驗在國家大宗淡水魚類產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系廣州綜合試驗站清遠石板基地8號塘進行。挑選個體大小均勻、體質(zhì)健壯的彭澤鯽魚種180尾，隨機放入6個大小為2 m×2 m×1.5 m的網(wǎng)箱中，每個網(wǎng)箱放入彭澤鯽30尾，稱取記錄每個網(wǎng)箱魚的初始重量。調(diào)節(jié)網(wǎng)箱深度使網(wǎng)箱水位控制在1 m左右，將6個網(wǎng)箱分成2組（對照組和試驗組），每組3個重復(fù)。本試驗所用飼料為羅非魚沉性飼料，故在網(wǎng)箱中用密網(wǎng)設(shè)置食臺，對照組投喂未添加螺旋藻的羅非魚料，試驗組投喂添加1%螺旋藻的羅非魚飼料。每天上午10:00和16:00各投喂一次，投喂量為魚體質(zhì)量的3%～5%，根據(jù)天氣和魚的吃食情況適當(dāng)調(diào)整。準(zhǔn)確稱量每天投喂的飼料質(zhì)量，定時清洗食臺，做好網(wǎng)箱的日常檢查維護。試驗時間為2013年8月10日到2013年11月10日，馴食時間為一周。

1.2.2 肌肉營養(yǎng)品質(zhì)分析

1.2.2.1 樣品制備

試驗結(jié)束稱取每個網(wǎng)箱魚總重量，從中隨機選取6條，取魚體頭部至尾柄兩側(cè)背部肌肉，取其中一部分于（105±2）℃烘干，粉碎后密封冷凍保存，用于常規(guī)營養(yǎng)成分的測定；另一部分進行冷凍干燥，粉碎后用于脂肪酸和氨基酸的測定。

1.2.2.2 常規(guī)營養(yǎng)成分的測定

水分采用烘箱(105±2)℃恒溫干燥失重法測定（GB/T6435—2006）[5]；粗灰分采用馬弗爐(550±20)℃高溫灼燒法測定（GB/T 6438—2007）[6]；粗脂肪采用脂肪測定儀，按照索氏提取的方法測定（GB/T 6433—2006）[7]；粗蛋白采用FOSS全自動凱氏定氮儀進行測定（GB/T 6432—94）[8]。

1.2.2.3 蛋白質(zhì)氨基酸分析

取上述冷凍干燥并粉碎的魚肌肉樣品30.0 mg（精確到0.1 mg），通過酸水解處理后，采用日立L-8800氨基酸分析儀進行分析。

1.2.2.4 營養(yǎng)價值評價

分別計算出對照組和試驗組肌肉干樣氨基酸評分(AAS)、化學(xué)評分(CS)和必需氨基酸指數(shù)(EAAI)[9-10]：

AAS=所測樣品蛋白質(zhì)氨基酸含量(%)/（FAO/WHO）評分標(biāo)準(zhǔn)模式中相同氨基酸含量(%)；

CS=所測樣品蛋白質(zhì)氨基酸含量(%)/雞蛋蛋白質(zhì)中相同氨基酸含量(%)；

EAAI=[(a/A)×100×(b/B)×100×……×(g/G)×100](1/N)。

式中：a、b…g——表示待測樣品中蛋白質(zhì)氨基酸含量；

A、B…G——與待測樣品對應(yīng)全雞蛋蛋白質(zhì)氨基酸含量；

N——氨基酸的種類數(shù)。

1.2.2.5 脂肪酸分析

按照JY/T021—1996分析型氣相色譜方法通則和GB/T6041—2002質(zhì)譜分析方法通則，使用TRACE GC-2000 GC-MSTM氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀，進行魚肌肉中脂肪酸組成分析。稱取冷凍干燥粉碎試樣60 mg（精確至0.1 mg），首先進行甲酯化處理，然后取上清液0.5 μl上機分析，通過脂肪酸甲酯峰面積歸一化法計算脂肪酸的組成[11]。

1.2.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與處理

采用SPSS統(tǒng)計軟件進行T-test檢驗對試驗組和對照組數(shù)據(jù)進行差異顯著性比較。試驗數(shù)據(jù)采用“平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差”表示（置信區(qū)間為0.05）。

2 結(jié)果與分析

2.1 螺旋藻對彭澤鯽生長的影響(見表2)

表2 螺旋藻添加劑對彭澤鯽生長性能的影響

由表2可以看出，試驗組彭澤鯽增重率要大于對照組，餌料系數(shù)要較對照組低并且差異都顯著(P＜0.05)。

2.2 肌肉常規(guī)營養(yǎng)成分對比分析(見表3)

表3 螺旋藻添加劑對彭澤鯽肌肉營養(yǎng)成分含量的影響(%)

由表3可以看出，試驗組的粗蛋白含量[（18.21±0.98）%]和粗脂肪含量[（2.38±0.01）%]均比對照組高，差異均達到顯著水平(P＜0.05)。

2.3 肌肉氨基酸組成與營養(yǎng)評價

2.3.1 氨基酸組成分析（見表4）

表4 彭澤鯽試驗組和對照組肌肉氨基酸組成比較（%，干樣）

由表4可以看出，試驗組氨基酸總量71.61%大于對照組；氨基酸組分中含量最高的都是谷氨酸，分別為12.10%和11.64%，其次是天門冬氨酸、賴氨酸、亮氨酸、丙氨酸，含量最低的都是胱氨酸。試驗組中天門冬氨酸、谷氨酸、賴氨酸、亮氨酸和精氨酸的含量比對照組高且有顯著差異(P＜0.05)，其中天門冬氨酸和谷氨酸為鮮味氨基酸；由表4可以發(fā)現(xiàn)，試驗組和對照組雖然在各個氨基酸含量上存在差異，但各個組分所占比例大小順序保持一致；試驗組鮮味氨基酸和必需氨基酸總量大于對照組，其中必需氨基酸和鮮味氨基酸含量差異達到顯著水平；必需氨基酸占總氨基酸的比例差異不明顯。

2.3.2 肌肉營養(yǎng)品質(zhì)的評價

依據(jù)氨基酸評分（AAS）、化學(xué)評分（CS）以及必需氨基酸指數(shù)（EAAI）的公式，計算對照組和試驗組必需氨基酸的AAS、CS、EAAI，結(jié)果見表5。根據(jù)氨基酸評分可以看出，對照組的第一限制性氨基酸是異亮氨酸和纈氨酸，試驗組的第一限制性氨基酸為纈氨酸；試驗組的氨基酸評分、化學(xué)評分和必需氨基酸指數(shù)均要大于對照組。

表5 彭澤鯽對照組和試驗組的AAS、CS、EAAI比較

2.4 肌肉脂肪酸種類組成

表6 試驗組與對照組彭澤鯽肌肉脂肪酸比較(%)

由表6可以看出，對照組和試驗組肌肉組織中均含有16種脂肪酸，其中飽和脂肪酸4種，單不飽和脂肪酸3種，多不飽和脂肪酸9種。對照組和試驗組除棕櫚酸和亞麻酸差異顯著外，其它各脂肪酸含量差異不顯著。對照組和試驗組飽和脂肪酸與不飽和脂肪酸的比值無明顯差異。

3 討論

螺旋藻營養(yǎng)成分的主要特點是蛋白質(zhì)含量高，而脂肪和纖維素含量較低，其氨基酸種類齊全，特別是必需氨基酸含量較多，其中賴氨酸、亮氨酸、異亮氨酸和纈氨酸的含量尤為突出[3]；螺旋藻營養(yǎng)豐富，含有豐富的胡蘿卜素和維生素E，并含有多種微量元素，特別是含有微量的硒[2]；而且易被動物消化吸收，具有促進動物生長增強動物體質(zhì)的功效。添加螺旋藻的試驗組，其生長速度要明顯高于對照組，對其肌肉進行營養(yǎng)成分分析可以發(fā)現(xiàn)，其粗蛋白含量要明顯高于對照組，部分氨基酸含量也明顯高于對照組，鮮味氨基酸就包括其中，而鮮味氨基酸是決定魚肉質(zhì)風(fēng)味的主要因素，可見添加螺旋藻對提高彭澤鯽肉質(zhì)品質(zhì)有一定的作用。另外，從氨基酸評分也可以看出，添加螺旋藻的試驗組，其各項評分均大于對照組[9-12]。魚類的脂肪酸多為不飽和脂肪酸，不飽和脂肪酸具有調(diào)節(jié)血脂、清理血栓、免疫調(diào)節(jié)等功能，其含量高低也是評價食物好壞的一個重要指標(biāo)[13-15]；螺旋藻含有豐富的亞麻酸、亞油酸和棕櫚酸[3]，添加螺旋藻的試驗組同對照組相比，顯著提高了棕櫚酸和亞麻酸的含量。這與劉立鶴等在凡納濱對蝦上的研究結(jié)果一致。因此，綜合常規(guī)營養(yǎng)成分、氨基酸組成和脂肪酸分析，在飼料中添加螺旋藻有提高彭澤鯽肉質(zhì)營養(yǎng)價值的作用。