● 李雪溦 張紅陽(yáng) 朱繼孝

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中藥復(fù)方藥物代謝動(dòng)力學(xué)研究進(jìn)展※

● 李雪溦 張紅陽(yáng) 朱繼孝▲

中藥復(fù)方成分較為復(fù)雜，作用靶點(diǎn)較多，其藥代動(dòng)力學(xué)研究與僅關(guān)注單一成分的經(jīng)典藥代動(dòng)力學(xué)研究具有較大的差異。近年來(lái)，國(guó)內(nèi)外中藥現(xiàn)代化的進(jìn)程加快，中藥復(fù)方藥代動(dòng)力學(xué)的研究也越來(lái)越多，其在體內(nèi)吸收、分布、代謝、排泄及作用機(jī)制日益明確。通過(guò)查閱相關(guān)研究文獻(xiàn)，綜述了中藥復(fù)方藥代動(dòng)力學(xué)近年來(lái)的研究現(xiàn)況和前沿進(jìn)展，對(duì)其中新思路、新方法進(jìn)行總結(jié)。

中藥復(fù)方 藥代動(dòng)力學(xué) 研究進(jìn)展

中藥復(fù)方藥代動(dòng)力學(xué)是在中醫(yī)藥理論的指導(dǎo)下，借助動(dòng)力學(xué)原理，研究復(fù)方中有效成分在體內(nèi)吸收、分布、代謝和排泄的動(dòng)態(tài)變化規(guī)律以及體內(nèi)時(shí)量-時(shí)效關(guān)系，并用數(shù)學(xué)模型和藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)進(jìn)行定量描述的一門邊緣學(xué)科[1]。在中醫(yī)理論的整體觀念指導(dǎo)下，中藥復(fù)方藥物能體現(xiàn)中藥配伍的整體性，發(fā)揮其綜合性作用。但中藥復(fù)方是由多種成分組成的復(fù)雜系統(tǒng)，有效成分不明確并且難以檢測(cè)，還具有多靶點(diǎn)、多效應(yīng)的特點(diǎn)，因此，單一成分的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)難以完全反映中藥復(fù)方藥物在體內(nèi)的作用規(guī)律，中藥復(fù)方藥代動(dòng)力學(xué)的研究受到一定限制。進(jìn)行中藥復(fù)方藥代動(dòng)力學(xué)的研究，對(duì)實(shí)現(xiàn)中醫(yī)藥現(xiàn)代化并走向國(guó)際市場(chǎng)具有重要意義。本文就近年來(lái)中藥復(fù)方藥代動(dòng)力學(xué)的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。

1 中藥復(fù)方藥代動(dòng)力學(xué)研究的特點(diǎn)

1.1 整體觀思想 中藥復(fù)方成分復(fù)雜，其藥效是由多種化學(xué)成分相互作用產(chǎn)生的，對(duì)機(jī)體產(chǎn)生的毒理作用也十分復(fù)雜。中藥復(fù)方“七情和合”、“君臣佐使”的配伍理論，“十八反”、“十九畏”的藥性理論以及辨證論治原則，體現(xiàn)了中藥復(fù)方的整體觀思想，是中醫(yī)用藥的精髓。整體觀是中藥復(fù)方藥代動(dòng)力學(xué)研究的一大特點(diǎn)和應(yīng)遵循的指導(dǎo)思想，單獨(dú)用一個(gè)或幾個(gè)指標(biāo)成分來(lái)研究中藥復(fù)方藥代動(dòng)力學(xué)是不能解決問(wèn)題的。近年來(lái)，國(guó)內(nèi)采用毒理、藥理效應(yīng)法研究中藥藥代動(dòng)力學(xué)正體現(xiàn)了這種整體觀。潘偉等[2]以毒理效應(yīng)法和藥理效應(yīng)法分別測(cè)定麻黃湯的體內(nèi)過(guò)程，毒理效應(yīng)法以小鼠死亡率為指標(biāo)，藥理效應(yīng)法以解熱效應(yīng)為指標(biāo)，分別測(cè)定其表觀藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)，結(jié)果表明毒理效應(yīng)法測(cè)得麻黃湯體內(nèi)呈二室開(kāi)放模型，藥理效應(yīng)法測(cè)得麻黃湯體內(nèi)呈一室模型，體現(xiàn)了中藥復(fù)方的整體思想。

1.2 科學(xué)性 隨著現(xiàn)代儀器及分析技術(shù)的迅猛發(fā)展，中藥復(fù)方藥代動(dòng)力學(xué)研究在中醫(yī)基礎(chǔ)理論指導(dǎo)之下，依靠現(xiàn)代分析技術(shù)對(duì)中藥復(fù)方體內(nèi)成分進(jìn)行分析研究，科學(xué)地揭示了中醫(yī)藥治療疾病的本質(zhì)，也充分體現(xiàn)了中藥復(fù)方藥代動(dòng)力學(xué)的科學(xué)性。如黃開(kāi)福等[3]建立大鼠灌胃給予四物湯后測(cè)定大鼠血漿中梓醇、藁本內(nèi)酯、阿魏酸、芍藥苷和川芎嗪的LC-MS/MS方法，結(jié)果顯示該方法專屬性強(qiáng)、靈敏度高和重復(fù)性好，適用于這5種成分在體內(nèi)的研究。

1.3 難點(diǎn)和熱點(diǎn) 首先，單味中藥即可視為一個(gè)小復(fù)方，若干味中藥組成的復(fù)方可視為一個(gè)復(fù)雜的系統(tǒng)、成分眾多，不同種類的成分可能對(duì)應(yīng)不同的藥理效應(yīng)，且成分之間存在復(fù)雜的交互作用。因此，選擇何種成分或藥理效應(yīng)為指標(biāo)才能代表整方就顯得尤為關(guān)鍵。其次，復(fù)方中藥間的相互作用如七情(相須、相使、相畏、相殺、相惡、相反)、方藥中的君臣佐使關(guān)系、組方配伍的多因素性可影響中藥化學(xué)成分在體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)。再次，存在多峰現(xiàn)象(即血藥濃度-時(shí)間曲線圖上出現(xiàn)兩個(gè)或多個(gè)血藥濃度峰)，單體藥物多峰現(xiàn)象的出現(xiàn)可能是因?yàn)槟c肝循環(huán)，多部位吸收，或其他再循環(huán)過(guò)程如胃腸循環(huán)、腸腸循環(huán)等[4]。

中藥復(fù)方化學(xué)成分的復(fù)雜性和多樣性、中藥配伍的變異性和機(jī)體狀態(tài)的不可預(yù)測(cè)性，給中藥復(fù)方藥代動(dòng)力學(xué)研究帶來(lái)許多問(wèn)題，但是現(xiàn)代分析技術(shù)和儀器的發(fā)展為認(rèn)識(shí)中藥體內(nèi)過(guò)程提供了有力武器，成為復(fù)方中藥的藥代動(dòng)力學(xué)研究的熱點(diǎn)。

2 中藥復(fù)方藥代動(dòng)力學(xué)的研究思路

由于中藥復(fù)方成分復(fù)雜，相互干擾大，有效物質(zhì)不明確，進(jìn)入體內(nèi)后藥物成分經(jīng)過(guò)吸收、代謝可能發(fā)生生物轉(zhuǎn)化，而不以原有形式存在，是一個(gè)動(dòng)態(tài)的過(guò)程。近年來(lái)，研究學(xué)者提出了一些新理論和方法，主要有證治藥代動(dòng)力學(xué)、中藥血清藥理學(xué)、中藥胃腸藥代動(dòng)力學(xué)、中藥指紋圖譜藥代動(dòng)力學(xué)和藥代動(dòng)力學(xué)與藥效動(dòng)力學(xué)(PK-PD)結(jié)合模型等。

2.1 證治藥代動(dòng)力學(xué) 證治藥代動(dòng)力學(xué)包括辨證藥代動(dòng)力學(xué)和復(fù)方藥代動(dòng)力學(xué)。辨證藥代動(dòng)力學(xué)是指同一藥物在不同證型的動(dòng)物模型或人體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)有顯著差異，這種差異明顯影響藥物療效和毒性，經(jīng)辨證用藥后，這種差異可消失或減輕。而復(fù)方藥代動(dòng)力學(xué)認(rèn)為中藥復(fù)方的君臣佐使可影響藥物成分在體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)，并與藥物的療效和毒副作用密切相關(guān)。李煒[5]探討了香附四物湯對(duì)婦科氣滯血瘀證原發(fā)性痛經(jīng)大鼠藥代動(dòng)力學(xué)的影響，其研究結(jié)果為證明該假說(shuō)提供了依據(jù)。韓靜文[6]探討了梔子柏皮湯不同配伍對(duì)梔子苷體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)的影響，其結(jié)果表明梔子柏皮湯藥材間相互作用有助于促進(jìn)梔子苷吸收，從而提高藥物生物利用度。

2.2 中藥血清藥理學(xué) 中藥血清藥理學(xué)主要是指將中藥或中藥復(fù)方經(jīng)口給動(dòng)物灌服一定時(shí)間后采集動(dòng)物血液、分離血清，用含有藥物成分的血清進(jìn)行體外實(shí)驗(yàn)的一種半體內(nèi)實(shí)驗(yàn)方法。趙長(zhǎng)江等[7]利用中藥血清藥理學(xué)研究清肺口服液抗呼吸道合胞病毒(RSV)感染，觀察清肺口服液及不同給藥方式對(duì)RSV的拮抗作用，結(jié)果顯示清肺口服液可以通過(guò)不同環(huán)節(jié)拮抗RSV病毒，是治療RSV感染的有效復(fù)方制劑。王喜軍等[8]通過(guò)研究六味地黃丸血中移行成分對(duì)氫化可的松致大鼠腎虛動(dòng)物模型的保護(hù)作用，初步確定所分離得到的六味地黃丸的血中移行成分是六味地黃丸補(bǔ)腎的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，其中以莫諾苷、獐牙菜苦素和馬錢子苷的作用最為明顯，是補(bǔ)腎的核心成分。陳一江等[9]應(yīng)用溫心湯藥物血清干預(yù)離體蛙心模型，觀察溫心湯藥物血清對(duì)離體蛙心收縮活動(dòng)的影響，結(jié)果顯示藥物濃度與心率呈極顯著量效關(guān)系，藥物濃度與平均肌張力呈極顯著量效關(guān)系。

2.3 中藥胃腸藥代動(dòng)力學(xué) 中藥胃腸藥代動(dòng)力學(xué)是考量胃腸道環(huán)境中多種因素對(duì)中藥復(fù)方有效成分溶出和吸收的影響，揭示各有效成分之間相互作用的規(guī)律，闡明有效成分在胃腸內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)的變化。韓麗等[10]研究了白芍總苷在大鼠體內(nèi)胃、腸道吸收的動(dòng)力學(xué)特征，結(jié)果表明白芍總苷在胃內(nèi)吸收可能為被動(dòng)擴(kuò)散機(jī)制，十二指腸可能為白芍總苷在腸段內(nèi)吸收主要部位。李圓圓[11]探討穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯在大鼠胃腸吸收動(dòng)力學(xué)特征，結(jié)果表明穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯在胃部均有一定的吸收；其在小腸的吸收不是簡(jiǎn)單的被動(dòng)擴(kuò)散，而可能是以主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)或促進(jìn)擴(kuò)散的方式被吸收；穿心蓮內(nèi)酯在pH為6.38時(shí)吸收最好，而PH對(duì)脫水穿心蓮內(nèi)酯的吸收沒(méi)有影響；穿心蓮內(nèi)酯在不同腸段的吸收為：十二指腸>空腸>回腸>結(jié)腸，脫水穿心蓮內(nèi)酯為：回腸>空腸>結(jié)腸>十二指腸。

2.4 中藥指紋圖譜藥代動(dòng)力學(xué) 指紋圖譜是先在體外利用液相色譜等方法測(cè)定建立血漿中藥物的指紋圖譜，作為質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)，其主要峰面積與藥效相關(guān)，然后通過(guò)探討藥物被實(shí)驗(yàn)動(dòng)物或人體吸收入血后的相應(yīng)指紋圖譜的變化得到藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)。血清指紋圖譜對(duì)闡明復(fù)方的藥代動(dòng)力學(xué)特性、藥理活性及作用機(jī)制有重要意義。如曾俊芬等[12]采用HPLC法監(jiān)測(cè)兔口服生化湯后體內(nèi)阿魏酸的含量變化，進(jìn)行藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)研究，結(jié)果顯示體內(nèi)阿魏酸的分布代謝呈二室模型，不同時(shí)間的血清指紋圖譜與空白血清指紋圖譜有顯著不同，這對(duì)闡明生化湯的藥代動(dòng)力學(xué)特性、藥理活性及作用機(jī)制提供了重要依據(jù)。王喜軍等[13]利用RP-HPLC建立六味地黃丸及其類方給藥后的大鼠血清色譜指紋圖，結(jié)果六味地黃丸及類方出現(xiàn)了14個(gè)共有血中移行成分；此外，知柏地黃丸產(chǎn)生了5個(gè)血中移行成分，桂附地黃丸產(chǎn)生了2個(gè)特有血中移行成分。

2.5 藥代動(dòng)力學(xué)與藥效動(dòng)力學(xué)(PK-PD)結(jié)合模型 目前PK-PD模型主要有以下幾種：(1)對(duì)數(shù)線性模型；(2)S型最大效應(yīng)模型；(3)Sheiner效應(yīng)模型；(4)Paalzow效應(yīng)模型；(5)多重受體反應(yīng)理論。PK-PD模型將時(shí)間、濃度和效應(yīng)結(jié)合起來(lái)，更加準(zhǔn)確地評(píng)價(jià)藥物在體內(nèi)的動(dòng)力學(xué)過(guò)程和產(chǎn)生藥理效應(yīng)的動(dòng)態(tài)變化，已逐漸成為中藥藥代動(dòng)力學(xué)研究的熱點(diǎn)方法。彭瓏[14]研究了以清開(kāi)靈注射液中黃薈苷和梔子苷在酵母致熱大氛體內(nèi)的血藥濃度為藥代動(dòng)力學(xué)指標(biāo)，以發(fā)熱大鼠體溫下降值為藥效指標(biāo)，以WmNonlin軟件建立清開(kāi)靈注射液的PK-PD結(jié)合模型，以闡明其解熱效應(yīng)隨血藥濃度及時(shí)間變化的規(guī)律，求得其藥效動(dòng)力學(xué)參數(shù)，結(jié)果表明黃薈苷和梳子苷均以有時(shí)間滯后的二房室模型擬合最優(yōu)。Chen YC等[15]成功地構(gòu)建基于神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)的PK-PD結(jié)合模型，較好地評(píng)價(jià)丹參的主要活性成分丹參素對(duì)心血管活性的貢獻(xiàn)率。嚴(yán)龍[16]建立中藥仙茅在大鼠體內(nèi)的PK-PD結(jié)合模型，研究仙茅水提物血藥濃度與游泳耐力之間的關(guān)系，結(jié)果表明中藥仙茅主要成分苔黑酚葡萄糖苷在大鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)模型符合一房室模型，仙茅PK-PD模型為促進(jìn)型S型最大效應(yīng)模型。李紅[17]從藥效學(xué)數(shù)據(jù)比較不同致炎時(shí)間對(duì)大黃水煎液、大黃酸解熱及降低血漿NO作用的差異，從藥代動(dòng)力學(xué)數(shù)據(jù)考察致炎物L(fēng)PS及其致炎時(shí)間對(duì)大黃在大鼠體內(nèi)代謝動(dòng)力學(xué)的影響，采用Kinetica軟件分別對(duì)藥物治療組中大黃酸血漿藥物濃度與體溫及血漿NO的降低值進(jìn)行PK-PD模型的擬合，結(jié)果表明PK-PD模型以效應(yīng)室聯(lián)接的無(wú)滯后時(shí)間二房室Sigmod Emax模型擬合最佳。劉史佳等[18]運(yùn)用PK-PD模型觀察血清樣本及雷公藤治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(RA)的抗炎作用，并分別對(duì)濃度-時(shí)間、效應(yīng)-時(shí)間曲線進(jìn)行相關(guān)分析，研究表明炎癥因子與雷公藤的血藥濃度存在一定的相關(guān)性。

3 中藥復(fù)方藥代動(dòng)力學(xué)的研究方法

3.1 血藥濃度法 主要適用于有效成分明確的中藥。將結(jié)構(gòu)已知的有效成分作為觀測(cè)指標(biāo)，測(cè)定該成分在血液或其他生物組織中的濃度隨時(shí)間變化過(guò)程，計(jì)算藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)。通常使用高效液相色譜-紫外檢測(cè)法(HPLC-UV)、氣相色譜法(GC)、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法(GC-MS)、高效液相色譜法(HPLC)、超高效液相色譜法(UPLC)、液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法(LC-MS)、液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜聯(lián)用法(LC-MS-MS)。如李勝男等[19]應(yīng)用HPLC-UV法測(cè)定大鼠血清中柴胡皂苷C濃度，研究了其在體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)行為，結(jié)果顯示大鼠血清中柴胡皂苷C在58.4～7300mg·L-1濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，該成分的最低檢測(cè)濃度(S/N=3)14.6mg·L-1，平均回收率在85%以上，日內(nèi)、日間精密度及穩(wěn)定性的RSD<8%。陳月鳳等[20]建立HPLC法測(cè)定大鼠灌胃給予葛根芩連微丸后血漿中葛根素、黃芩苷和小檗堿含量，測(cè)定單次給藥后血藥濃度的經(jīng)時(shí)變化。結(jié)果表明線性關(guān)系良好，各成分的低、中、高質(zhì)量濃度溶液的日內(nèi)和日間精密度、回收率良好，可作為葛根芩連微丸血中葛根素、黃芩苷和小檗堿血藥濃度同時(shí)測(cè)定的定量分析方法。Qingdan Xue等[21]建立了同時(shí)測(cè)定大鼠血漿中3種人參皂苷Rg1，Rb，Re1的HPLC法，結(jié)果顯示人參皂苷3個(gè)質(zhì)控濃度的樣品在24小時(shí)內(nèi)3次凍融循環(huán)后均穩(wěn)定，日內(nèi)、日間精密度良好，平均回收率較好，該方法能夠成功地應(yīng)用于大鼠血漿中參麥注射液3種人參皂苷成分的藥代動(dòng)力學(xué)研究。此外，研究者運(yùn)用血藥濃度法對(duì)紅景天苷[22]、麻黃堿、偽麻黃堿[23]、穿心蓮內(nèi)酯[24]、毛柳苷[25]、黃芩素及其代謝產(chǎn)物[26]、滋腎丸中多種成分[27]、瀉心湯中多種成分[28]、鉤藤堿[29]、補(bǔ)骨脂苷、異補(bǔ)骨脂苦、補(bǔ)骨脂素、異補(bǔ)骨脂素[30]、東萸菩亭、補(bǔ)骨脂素、佛手相內(nèi)酯、花椒毒素、二氫山序醇乙酸酯、白茅苷、蛇床子素、異歐前胡素[31]、六種環(huán)稀酸蔽苷類[32]、五味子乙素[33]等多種成分在動(dòng)物血漿中的藥代動(dòng)力學(xué)及在組織中的分布進(jìn)行研究，結(jié)果都顯示該方法專屬性強(qiáng)、靈敏度高和重復(fù)性好。

隨著現(xiàn)代儀器及分析技術(shù)的飛速發(fā)展，生物樣品檢測(cè)的靈敏度和專屬性得到了極大提高，使血藥濃度法在中藥復(fù)方藥代動(dòng)力學(xué)研究中占主導(dǎo)地位。但此法也存在一定缺陷，由于中藥復(fù)方化學(xué)成分的復(fù)雜性、中藥藥效的多效性，單用一個(gè)或幾個(gè)指標(biāo)成分測(cè)出的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)與復(fù)方實(shí)際的藥代動(dòng)力學(xué)過(guò)程可能存在一定的偏差。

3.2 生物效應(yīng)法 生物效應(yīng)法是研究中藥復(fù)方藥代動(dòng)力學(xué)的常用方法，體現(xiàn)了中藥復(fù)方的整體觀思想，符合中醫(yī)基礎(chǔ)理論，就臨床意義而言，其對(duì)評(píng)價(jià)中藥復(fù)方制劑的內(nèi)在質(zhì)量和指導(dǎo)臨床用藥更具有現(xiàn)實(shí)意義。針對(duì)成分尚不明確的中藥復(fù)方，主要以生物效應(yīng)法為研究手段，主要有藥理效應(yīng)法、藥物累積法、微生物指標(biāo)法。

3.2.1 藥理效應(yīng)法 此法是以用藥后的藥理效應(yīng)為指標(biāo)測(cè)定藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)。應(yīng)先選擇適當(dāng)?shù)乃幚硇?yīng)作為觀測(cè)指標(biāo)，建立劑量-效應(yīng)曲線、時(shí)間-效應(yīng)曲線和時(shí)間-體存藥量曲線，并據(jù)此得出藥代參數(shù)[34]。杜婷等[35]采用結(jié)扎冠狀動(dòng)脈法復(fù)制大鼠心源性休克模型，以血壓值作為效應(yīng)指標(biāo)，研究了參附注射液在體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)過(guò)程，結(jié)果顯示該注射液在大鼠體內(nèi)呈一室模型特征。肇麗梅等[36]采用小鼠熱板致痛模型，以鎮(zhèn)痛效應(yīng)為指標(biāo)，測(cè)定黃芩苷及清熱合劑的藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)，結(jié)果顯示黃芩苷及清熱合劑口服給藥后體存藥量在小鼠體內(nèi)呈一室開(kāi)放模型。

該法雖具有極大的發(fā)展前景，但因中藥復(fù)方成分復(fù)雜，能發(fā)揮多方面作用，僅一種作用并不能代表中藥復(fù)方整體的藥代動(dòng)力學(xué)特征，且由于生物的差異性以及所選藥效指標(biāo)的不同，所測(cè)得的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)差異較大。

3.2.2 藥物累積法 此法是將藥代動(dòng)力學(xué)多點(diǎn)測(cè)定的原理與動(dòng)物急性死亡率測(cè)定藥物蓄積性方法相關(guān)結(jié)合起來(lái)，按不同時(shí)間間隔對(duì)多組動(dòng)物重復(fù)給藥，求出不同時(shí)間點(diǎn)生存百分率的動(dòng)態(tài)變化，以此計(jì)算藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)。田海軍等[37]用此法研究中藥復(fù)方提取液在鯽魚體內(nèi)的藥物代謝動(dòng)力學(xué)，結(jié)果表明該復(fù)方提取液在鯽魚體內(nèi)代謝較快，藥物的生物利用度高。肖鳳霞等[38]采用此法研究四逆注射劑在大鼠體內(nèi)的藥物動(dòng)力學(xué)過(guò)程，結(jié)果表明在不同間隔時(shí)間累積給藥后，動(dòng)物的死亡率不同，反映出不同大小的毒性效應(yīng)。周昆等[39]用多次給藥的小鼠半數(shù)致死量法，測(cè)定了香加皮配方顆粒在體內(nèi)的殘存量和表觀毒代動(dòng)力學(xué)參數(shù)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)香加皮配方顆粒體內(nèi)殘存量并不是隨著時(shí)間而一直降低，在6，12h出現(xiàn)了兩個(gè)高峰點(diǎn)，其后呈一級(jí)動(dòng)力學(xué)消除，12h以后消除相的消除半衰期t1/2=7.55h，消除速度常數(shù)K=0.0918/h；可知香加皮配方顆粒的毒性成分代謝過(guò)程復(fù)雜，可能存在腸肝循環(huán)或毒性代謝產(chǎn)物生成。

此法觀察指標(biāo)明確，實(shí)驗(yàn)操作簡(jiǎn)便，但也存在一定局限性。以動(dòng)物死亡率為指標(biāo)，體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)過(guò)程不一定與藥效平行，給藥劑量、給藥途徑及觀察指標(biāo)都不完全同于臨床給藥。此法比較適用于毒性較大的中藥及其復(fù)方藥物或者是藥理效應(yīng)和毒理效應(yīng)是同一組分的中藥的藥代動(dòng)力學(xué)研究。

3.2.3 微生物指標(biāo)法 此法又稱為瓊脂擴(kuò)散法，可用于有抗菌活性的中藥復(fù)方，根據(jù)抗菌藥在含有試驗(yàn)菌株的瓊脂平板中擴(kuò)散，產(chǎn)生抑菌環(huán)，在一定濃度范圍內(nèi)，其抑菌環(huán)直徑大小與濃度對(duì)數(shù)呈線性關(guān)系，測(cè)定生物樣品的濃度，并計(jì)算藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)。如潘嘉等[40]以抑菌效應(yīng)為指標(biāo)，測(cè)定川芎揮發(fā)油藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)，結(jié)果表明藥代動(dòng)力學(xué)過(guò)程符合一室開(kāi)放模型。

此法操作簡(jiǎn)單易行、指標(biāo)明確、重復(fù)性好，但特異性不高，如存在抗菌活性的代謝物、機(jī)體內(nèi)外抗菌效應(yīng)作用機(jī)制的差異、細(xì)菌選擇的得當(dāng)與否等在一定程度上會(huì)影響藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)的準(zhǔn)確性。另外，中藥復(fù)方干擾因素較多，體內(nèi)有效成分濃度很難達(dá)到抑菌濃度，并且容易產(chǎn)生交叉感染，故此法在中藥復(fù)方藥代動(dòng)力學(xué)研究中應(yīng)用不多。

4 小結(jié)

近年來(lái)關(guān)于中藥復(fù)方藥代動(dòng)力學(xué)的研究有了一些進(jìn)展，這些進(jìn)展主要是新方法和新技術(shù)的應(yīng)用，由于中藥復(fù)方有效成分復(fù)雜、量甚微，多數(shù)研究停留在體內(nèi)原型效應(yīng)成分的檢測(cè)與動(dòng)力學(xué)分析上，準(zhǔn)確地評(píng)價(jià)復(fù)方的藥代動(dòng)力學(xué)特征還存在一定的難點(diǎn)。在今后的研究中應(yīng)建立適合的方法，更好地預(yù)測(cè)藥物在體內(nèi)的療效；應(yīng)注重采用新技術(shù)、新方法，獲得更多的化學(xué)信息；應(yīng)融合藥物分析、血清藥物化學(xué)、血清藥理學(xué)等學(xué)科，對(duì)中藥復(fù)方的代謝過(guò)程及作用機(jī)制進(jìn)行探索，以尋求更好的復(fù)方藥代動(dòng)力學(xué)研究途徑。

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▲通訊作者 朱繼孝，男，副教授，理學(xué)博士。主要從事中藥成分與作用機(jī)理研究工作。E-mail: zhujx81@sina.com