陶偉博，冷柏榕，嚴相平

（江蘇省藥物研究所，江蘇 南京 210009）

不同溶出介質(zhì)中利福昔明片體外溶出行為比較

陶偉博，冷柏榕，嚴相平

（江蘇省藥物研究所，江蘇 南京 210009）

目的考察利福昔明片自研制劑與原研制劑在不同溶出介質(zhì)中體外溶出行為的相似性。方法以國外上市的利福昔明片作為參比制劑，采用槳法進行溶出試驗。溶出介質(zhì)分別為pH=1．2鹽酸溶液[含1．0%十二烷基硫酸鈉溶液(SDS）]、pH=4．5醋酸-醋酸鈉緩沖液（含1．0%SDS）、pH=6．8磷酸鹽緩沖液（含1．0%SDS）和水（含1．0%SDS），采用紫外分光光度法檢測含量，以相似因子（f2）法對溶出曲線的相似性進行評價。結果在不同pH的溶出介質(zhì)中，自研制劑與參比制劑比較，f2均大于50。結論自研制劑和參比制劑在不同溶出介質(zhì)中的體外溶出行為相似。

利福昔明片；溶出曲線；相似因子

利福昔明是利福霉素類衍生物，為非氨基苷類半合成抗菌藥，抗菌譜廣，抗菌作用強，能在腸道內(nèi)形成較高血藥濃度，對革蘭陽性、革蘭陰性需氧菌均有高度的抗菌活性。利福昔明的不良反應遠低于氨基苷類，它不損傷聽覺功能，不引起腎臟功能不全，且可避免二重感染。2010年3月，美國食品和藥物管理局（FDA）批準了 Salix制藥有限公司的利福昔明（rifaximin)550 mg規(guī)格片劑（Xifaxan）的新藥申請，用于減少18歲及以上終末期肝病患者的顯性肝性腦病復發(fā)風險。利福昔明是近30年來在美國獲準用于治療此類患者的第1種藥物[1-4]。本試驗中以國外上市的原研制劑為參比制劑，考察江蘇省藥物研究所自研利福昔明片（規(guī)格為550 mg）在不同 pH的溶出介質(zhì)中的溶出情況，并采用相似因子 f2法評價其內(nèi)在質(zhì)量。

1 儀器與試藥

ZRS-8G型智能溶出儀（天津天大天發(fā)科技有限公司）；Sartorius BS21S型電子天平；島津 UV-2450型紫外 -可見分光光度計。利福昔明片（參比制劑，Salix Pharmaceuticals公司，商品名為Xifaxan，批號為CBPK；自研制劑，江蘇省藥物研究所藥物制劑與質(zhì)量研究室，批號為20101011，規(guī)格為550 mg）；利福昔明對照品（浙江思賢制藥有限公司，批號為100102）；水為實驗室自制純水，其余試劑均為分析純。

2 方法與結果

2．1 檢測波長確定

取不同溶出介質(zhì)配制的對照品溶液，按紫外-可見分光光度法在200～400 nm波長范圍內(nèi)掃描，均在235 nm波長處有最大吸收。圖1為水[含1．0%十二烷基硫酸鈉溶液(SDS)]配制的對照品溶液紫外掃描圖。

2．2 溶液制備

精密稱取經(jīng)105℃干燥至恒重的利福昔明對照品適量，用相應溶出介質(zhì)（含1．0%SDS）溶解并稀釋制成10 μg／mL的溶液，搖勻，即得對照品溶液。取不同時間點溶出液5 mL（同時補充同溫新鮮介質(zhì)5 mL），經(jīng)0．8 μm微孔濾膜濾過，作為供試品貯備液；再精密吸取貯備液1 mL，置50 mL容量瓶中，加相應溶出介質(zhì)稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液。

2．3 溶出度測定方法

參照2010年版《中國藥典（二部）》附錄ⅩC第二法[5]，即槳法，分別采用pH=1．2鹽酸溶液（含1．0%SDS）、pH=4．5醋酸-醋酸鈉緩沖液（含1．0%SDS）、pH=6．8磷酸鹽緩沖液（含1．0% SDS）和水（含 1．0%SDS）為溶出介質(zhì)，體積為 900 mL，轉(zhuǎn)速為75 r／min，以紫外-可見分光光度法為溶出度的檢測方法。

圖1 水（含1．0%SDS）配制的對照品溶液紫外掃描圖

2．4 方法學考察

空白輔料干擾試驗：取處方量空白輔料適量，以不同溶出介質(zhì)配制成相應濃度，在235 nm波長處測定吸光度。結果在4種溶出介質(zhì)中，空白輔料在235 nm波長處吸光度值均為0，表明空白輔料對溶出度測定無影響。

線性關系考察：取利福昔明對照品10 mg，置100 mL容量瓶中，用不同溶出介質(zhì)溶解，并稀釋至刻度，精密吸取 2．5，3．0，3．5，4．0，4．5，5．0，5．5，6．0，6．5 mL，置50 mL容量瓶中，用相應的溶出介質(zhì)稀釋至刻度，在235 nm波長處分別測定吸光度。以測定質(zhì)量濃度（C，μg／mL）為橫坐標、吸光度（A）為縱坐標進行線性回歸，回歸方程見表1。結果表明，利福昔明在4種溶出介質(zhì)中的線性關系均良好，質(zhì)量濃度線性范圍均在5～13 μg／mL之間。

表1 線性關系考察結果(n=9)

精密度試驗：取不同溶出介質(zhì)條件下溶出度測定的供試品溶液，測定235 nm波長處的吸光度，每份溶液平行測定6次。結果在4種溶出介質(zhì)中吸光度的 RSD均小于1．0%（n=6），表明儀器精密度良好。

重復性試驗：取同一溶出杯中的供試品溶液，在每個溶出介質(zhì)條件下取6份，分別依法進樣測定。結果在4種溶出介質(zhì)中溶出度的 RSD均小于2．0%（n=6），表明方法重復性良好。

穩(wěn)定性試驗：取測定同一供試品溶液，分別于0，1，2，4，6，8 h時在235 nm波長處測定吸光度。結果在4種溶出介質(zhì)中吸光度的RSD均小于2．0%（n=6），表明供試品溶液在8 h內(nèi)穩(wěn)定。

回收率試驗：稱取空白輔料約84 mg（共9份），置100 mL容量瓶中，分別加利福昔明約80，100，120 mg（相當于處方量80%，100%，120%），精密稱定。用 pH=1．2鹽酸溶液（含1．0%SDS）溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過。取上述溶液各1 mL，置100 mL容量瓶中，用溶出介質(zhì)定容，在235 nm波長下測定吸光度，計算回收率。同法考察在其他3種溶出介質(zhì)中的回收率。結果在4種溶出介質(zhì)中的平均回收率均在98%～102%，RSD小于2．0%（n=9）。

2．5 參比制劑和自研制劑溶出曲線測定

2．5．1 不同溶出介質(zhì)中的溶出曲線

按槳法，于5，10，20，30，45 min時分別取樣，按擬訂方法制備供試品溶液，另取對照品溶液依法測定吸光度。按外標法以吸光度值分別計算出每片利福昔明在不同時間點的溶出度，并計算累積溶出量。2種制劑中利福昔明在不同溶出介質(zhì)中的溶出曲線見圖2。

2．5．2 溶出曲線評價

采用FDA《口服固體制劑溶出度試驗技術指導原則》推薦使用的相似因子（f2）法，選用5，10，30 min的時間點計算 f2因子，評價參比制劑與自研制劑的溶出度差異，計算公式為：

其中，Rt為 t時間參比制劑平均累積溶出量；Tt為 t時間自研制劑平均累積溶出量；n為取樣點個數(shù)（n=3～5，且 Rt＞85%的點不超過1個）。若50≤f2＜100，則表示自研制劑與參比制劑溶出行為相似。結果，利福昔明片在pH=1．2鹽酸溶液（含1．0% SDS）、pH=4．5醋酸-醋酸鈉緩沖液（含1．0%SDS）、pH=6．8磷酸鹽緩沖液（含 1．0%SDS）和水（含 1．0%SDS）中 f2分別為94．4，98．1，93．3，92．6（n=3），表明自研制劑和參比制劑的體外溶出行為具有相似性。

圖2 2種制劑在不同溶出介質(zhì)中的溶出曲線

3 討論

轉(zhuǎn)速選擇：50 r／min的攪拌速度被看作與中老年人體胃腸道蠕動強度相當[6]，但15 min時，同批樣品單個片劑的溶出具有較大的變化，變異較大，分析可能是轉(zhuǎn)速較低杯底粉末堆積所致，故考慮提高轉(zhuǎn)速為75 r／min。

溶劑選擇：利福昔明在水中幾乎不溶解，我國上市的0．1 g的樣品以0．3%的SDS溶液作為溶出介質(zhì)。由于本品規(guī)格為550 mg，0．3%的SDS溶液不能達到漏槽條件，故測定37℃時本品在不同濃度SDS溶液的飽和濃度。取利福昔明適量，置溶出杯中，分別加入不同濃度的 SDS溶液，37℃以溶出槳100 r／min的轉(zhuǎn)速攪拌 24 h，以0．45 μm濾膜過濾，取續(xù)濾液稀釋至合適濃度測定在235 nm波長處的吸光度，并與已知濃度對照品溶液的測定值進行計算。結果利福昔明在0．3%SDS溶液中溶解度為625 mg／L，在0．5%SDS溶液中溶解度為879 mg／L，在0．8%SDS溶液中溶解度為1 909 mg／L、在1．0%SDS溶液中溶解度為2 331 mg／L。可見，利福昔明的溶解度與SDS的濃度呈高度正相關。在1．0%的濃度下，方可達到漏槽條件，故選用1．0%的SDS溶液進行溶出度測定。

[1]劉洪艷．利福昔明的研究[J]．黑龍江醫(yī)藥，2013，26（3）：480-481．

[2]趙麗筠，王 煒，楊小麗．新藥利福昔明臨床研究[J]．海南醫(yī)學，2005，16（5）：108-110．

[3]何 麗，李小池．利福昔明膠囊的穩(wěn)定性考察[J]．中國藥業(yè)，2004，13（8）：33-34．

[4]Steffen R，Sack DA，Riopel I，et al．Therapy of travelers′diarrhea with rifaximin on various continents[J]．The American Journal of Gastroenterology，2003，98（5）：1 073-1 078．

[5]國家藥典委員會．中華人民共和國藥典（二部）[M]．北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：附錄ⅩC．

[6]謝沐風．如何科學、客觀地制訂溶出度試驗質(zhì)量標準[J]．中國醫(yī)藥工業(yè)雜志，2012，43（3）：A23-A32．

Comparison of Rifaximin Tablets In-vitro Dissolution Behavior in Different Dissolution Media

Tao Weibo，Leng Borong，Yan Xiangping
（Jiangsu Provincial Institute of Materia Medica，Nanjing，Jiangsu，China 210009）

Objective To investigate the similarity of the dissolution behavior of self-made rifaximin preparation and original rifaximin preparation in different dissolution media．Methods The paddle method was used to perform the dissolution experiment with abroad listed Rifaximin Tablets as the reference preparation．The dissolution media were pH=1．2 hydrochloric acid solution（containing 1．0%SDS），pH=4．5 acetic acid-sodium acetate buffer solution（containing 1．0%SDS），pH=6．8 phosphate buffer solution（containing 1．0%SDS）and water（containing 1．0%SDS）．The UV spectrophotometry was used to determine the rifaximin content．The similarity factor（f2）method was adopted to evaluate the similarity of dissolution curves．Results In different dissolution media，f2of rifaximin from the self-prepared preparation and the reference preparation were all more than 50．Conclusion The dissolution behaviors in vitro of the self-prepared preparation and the reference preparation are similar in different dissolution media．

Rifaximin Ttablet；dissolution curve；similarity factor

R927．11；R978．1

A

1006－4931(2015)04－0021－02

陶偉博（1962-），男，江蘇泰州人，藥師，主要從事藥物分析工作，（電子信箱）taoweibonj＠ sina．com；嚴相平（1974-），男，江蘇東臺人，副研究員，主要從事藥物分析工作，本文通訊作者，（電子信箱）yanxpsci001＠sina．com。

2013－12－31；

2014－07－19)