魏國(guó)華，高志安（遼寧醫(yī)學(xué)院病理學(xué)教研室，遼寧錦州121000）

特異AT序列結(jié)合蛋白1和P504s在前列腺癌中的表達(dá)及臨床意義

魏國(guó)華，高志安
（遼寧醫(yī)學(xué)院病理學(xué)教研室，遼寧錦州121000）

摘要：目的探討P504s及特異AT序列結(jié)合蛋白1（SATB1）基因在前列腺癌的表達(dá)，及其在前列腺癌發(fā)生、發(fā)展中的作用。方法應(yīng)用免疫組織化學(xué)染色檢測(cè)P504s及SATB1蛋白在60例前列腺癌和30例前列腺增生癥組織中的表達(dá)。結(jié)果SATB1在前列腺癌組織中的表達(dá)陽(yáng)性率（78.3%）較前列腺增生組織（0.0%）明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），SATB1的表達(dá)隨著Gleason評(píng)分增加而升高（P<0.05）。P504s在前列腺癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)率（95.0%）遠(yuǎn)高于前列腺增生癥組（0.0%）（P<0.05），但其在前列腺癌中的表達(dá)不會(huì)隨著Gleason評(píng)分增加而升高（P>0.05）。結(jié)論P(yáng)504s和SATB1在前列腺癌中的高表達(dá)，結(jié)合形態(tài)學(xué)綜合分析，可能有助于提高前列腺癌的診斷及鑒別診斷，而SATB1蛋白在前列腺癌組織中的異常表達(dá)，提示可能與前列腺癌的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)。

關(guān)鍵詞：前列腺癌；特異AT序列結(jié)合蛋白1；P504s；免疫組織化學(xué)法

前列腺癌是困擾老年男性的一種常見(jiàn)惡性腫瘤，在歐美一些發(fā)達(dá)國(guó)家較為常見(jiàn)。近年來(lái)，在一些發(fā)展中國(guó)家，尤其是中國(guó)，前列腺癌的發(fā)病率和死亡率也呈上升趨勢(shì)，故早期診斷和治療顯得尤為重要。前列腺癌發(fā)病機(jī)制也是醫(yī)學(xué)界研究的熱點(diǎn)之一，特異AT序列結(jié)合蛋白1（special AT rich sequence binding protein，SATB1）是一種具有核染色質(zhì)組織者功能的核因子，能夠調(diào)節(jié)染色質(zhì)的結(jié)構(gòu)和基因的表達(dá)，并經(jīng)研究證實(shí)在多種惡性腫瘤中異常表達(dá)[1-3]。P504s是目前臨床上用來(lái)標(biāo)記前列腺癌的一種特異性腫瘤標(biāo)記物，在側(cè)鏈脂肪酸的氧化過(guò)程中起重要作用。本研究運(yùn)用免疫組織化學(xué)染色法分析前列腺腺癌及前列腺增生組織中SATB1和P504s的表達(dá)，探討兩者在前列腺癌發(fā)生、發(fā)展中的意義。

1　資料與方法

1.1一般資料

60例前列腺腺癌和30例前列腺增生癥標(biāo)本選取2010年1月-2014年12月遼寧醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院病理科經(jīng)尿道電切的前列腺組織塊和前列腺摘除標(biāo)本的存檔蠟塊。所有患者經(jīng)病理醫(yī)師重新評(píng)價(jià)并確診，4μm切片供免疫組織化學(xué)染色?；颊吣挲g50～89歲，中位數(shù)年齡65歲，其中前列腺腺癌按世界衛(wèi)生組織（world health organization，WHO）規(guī)定的Gleason評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)分為3組：2～4分9例；5～7分30例；8～10分21例。30例前列腺增生癥作為對(duì)照組。

1.2方法

取經(jīng)甲醛固定、石蠟包埋的存檔蠟塊，4μm厚連續(xù)切片，45℃烤2 h經(jīng)二甲苯脫蠟、梯度酒精水化后，采用免疫組織化學(xué)SP法染色，嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，用PBS代替一抗作為陰性對(duì)照組，用已知陽(yáng)性切片作為陽(yáng)性對(duì)照組。SATB1一抗購(gòu)自Abcam公司，P504s及其余試劑盒購(gòu)自北京中杉金橋公司。

結(jié)果判定：通過(guò)3位有經(jīng)驗(yàn)的病理醫(yī)師獨(dú)立閱片后取其平均值，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)≤10%為1分，10%～50%為2分，50%～75%為3分，>75%為4分。按照陽(yáng)性細(xì)胞染色深淺評(píng)分：陰性為0分，淡黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分。兩者分值乘積>3分為免疫組織化學(xué)反應(yīng)陽(yáng)性。SATB1主要定位于細(xì)胞核，出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽(yáng)性；P504s主要定位于胞漿，同樣以出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽(yáng)性。同時(shí)采用MIAS-300型圖像分析儀對(duì)SATB1的結(jié)果進(jìn)行分析，顯微鏡放大400倍，將圖像輸入高分辨率圖像監(jiān)視器，每張切片取視野共7個(gè)。分析統(tǒng)計(jì)每個(gè)視野內(nèi)SATB1陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)，將細(xì)胞數(shù)最多和最少的2個(gè)視野剔除，選擇余下5個(gè)視野，統(tǒng)計(jì)陽(yáng)性細(xì)胞所占百分比，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)>30%為陽(yáng)性。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料用構(gòu)成比表示，陽(yáng)性表達(dá)率用χ2檢驗(yàn)，必要時(shí)進(jìn)行Fisher’s精確概率法計(jì)算，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1SATB1蛋白的表達(dá)

前列腺癌組的SATB1蛋白陽(yáng)性表達(dá)率（78.3%）顯著高于前列腺增生癥組（0.0%）（P<0.05）；各組前列腺腺癌的Gleason評(píng)分比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)附圖和附表。

2.2P504s蛋白的表達(dá)

前列腺癌組的P504s蛋白陽(yáng)性表達(dá)率（95.0%）顯著高于前列腺增生癥組（0.0%）（P<0.05）；各組前列腺癌的Gleason評(píng)分比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P> 0.05）。見(jiàn)附圖和附表。

附圖　前列腺癌及前列腺增生癥組織中SATB1 和P504s的表達(dá)（×200）

附表　各組SATB1及P504蛋白陽(yáng)性表達(dá)率比較　例（%）

3　討論

SATB1作為一種重要的核基質(zhì)結(jié)合蛋白，1992年以核染色質(zhì)組織者功能蛋白被發(fā)現(xiàn)和克隆出來(lái)，位于3號(hào)染色體3p23區(qū)，全長(zhǎng)763個(gè)氨基酸殘基，含有PDZ結(jié)構(gòu)域、MARs結(jié)合區(qū)域等多個(gè)功能結(jié)構(gòu)域，通過(guò)這些結(jié)構(gòu)域促進(jìn)基因重組和染色質(zhì)重建，并通過(guò)調(diào)節(jié)組蛋白乙?；图谆絹?lái)調(diào)控基因的表達(dá)[4]。SATB1在生理狀態(tài)下，除胸腺、睪丸組織中表達(dá)外，其他組織中幾乎檢查測(cè)不到其存在。近年來(lái)，研究證實(shí)SATB1在多種腫瘤中有不正常表達(dá)，并且還有研究證實(shí)其對(duì)腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移有重要意義[5-6]。目前，眾多國(guó)家都面臨老齡化的問(wèn)題，作為老年男性好發(fā)的前列腺癌已引起眾多學(xué)者的關(guān)注，研究顯示其雖然與雄激素有關(guān)，但其確切發(fā)病機(jī)制仍在研究。本研究通過(guò)免疫組織化學(xué)染色對(duì)前列腺癌及前列腺增生癥組織中SATB1蛋白的表達(dá)進(jìn)行研究，結(jié)果顯示，前列腺癌中SATB1陽(yáng)性表達(dá)率為78.3%，而前列腺增生癥組無(wú)1例表達(dá)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；各組Gleason評(píng)分的陽(yáng)性率比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。研究結(jié)果表明，SATB1在前列腺癌中高表達(dá)，其陽(yáng)性表達(dá)率隨著Gleason評(píng)分的升高而升高，可能與前列腺癌的發(fā)生、發(fā)展有密切的關(guān)系。MAO等[7]通過(guò)對(duì)前列腺癌組織及細(xì)胞株SATB1的表達(dá)研究，得出和本研究一致的結(jié)果。有學(xué)者的研究結(jié)果表明，SATB1可以促進(jìn)前列腺癌的浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移[7-9]，但其機(jī)制仍不明確，這也將成為進(jìn)一步研究的重要內(nèi)容之一。

P504S是一種胞質(zhì)蛋白，其所編碼的蛋白是a甲?；o酶A消旋酶，而該酶是支鏈脂肪酸及衍生物β氧化過(guò)程中的重要催化酶。自從P504s免疫組織化學(xué)法引入前列腺癌的臨床病理診斷以來(lái)，其應(yīng)用最為廣泛，大多數(shù)研究都認(rèn)為其是前列腺癌特異性強(qiáng)、敏感性高的陽(yáng)性標(biāo)記物，但與Gleason評(píng)分或預(yù)后無(wú)明確相關(guān)[10]。本研究結(jié)果顯示，前列腺癌中P504s陽(yáng)性率高達(dá)95.0%，且隨著Gleason評(píng)分升高，染色強(qiáng)度也有所增強(qiáng)，但是其表達(dá)的陽(yáng)性率與Gleason評(píng)分差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，這與大部分學(xué)者的研究結(jié)果是一致的。張世革等[11]研究表明，在前列腺癌組織中，P504s的陽(yáng)性表達(dá)率與Gleason評(píng)分相關(guān)，究其原因可能與病例數(shù)量較少有關(guān)，需要繼續(xù)擴(kuò)大樣本量來(lái)進(jìn)一步明確兩者的關(guān)系。

臨床上廣泛應(yīng)用P504s對(duì)前列腺癌進(jìn)行鑒別診斷，也不斷有研究證實(shí)SATB1與前列腺癌的發(fā)生、發(fā)展有密切的關(guān)系，因此通過(guò)P504s和SATB1蛋白表達(dá)的檢測(cè)，可能會(huì)對(duì)前列腺癌患者的臨床診斷和治療提供新的診斷依據(jù)及治療思路。

參考文獻(xiàn)：

[1] CHU SH, MA YB, FENG DF, et al. Upregulation of SATB1 is associated with the development and progression of glioma [J]. Transl Med, 2012, 10(1): 149-161.

[2] MENG WJ, YAN H, ZHOU B, et al. Correlation of SATB1 overexpression with the progression of human rectal cancer[J]. Int Colorectal Dis, 2012, 27(2): 143-150.

[3] CHEN HX, TAKAHARA M, OBA J, et al. Clinicopathologic and prognostic significanceof SATB1incutaneous malignant melanoma[J]. Dermatol Sci, 2011, 64(1): 39-44.

[4] NOTANI D, RAMANUJAM PL, PUVVULA PK, et al. N-terminal PDZ-like domain of chromatin organizer SATB1 contributes towards its function as transcription regulator[J]. Biosci, 2011, 36 (3): 461-469.

[5] SHEN ZH, ZENG YM, GUO JL, et al. Over-expression of the special AT rich sequence binding protein 1(SATB1) promotes the progression of nasopharyngeal carcinoma: association with EBV LMP-1 expression[J]. Transl Med, 2013, 11(1): 217-228.

[6]高超,朱艷卿,劉穎,等. SATB1基因在結(jié)直腸癌中的表達(dá)及其臨床意義[J].腫瘤防治研究, 2013, 40(2): 159-163.

[7] MAO LJ, YANG CH, WANG JQ, et al. SATB1 is overexpressed in metastatic prostate cancer and promotesprostate cancer cell growth and invasion[J]. Transl Med, 2013, 11(1): 111-120.

[8] SHUKLA S, SHARMA H, ABBAS A, et al. Upregulation of SATB1 is associated with prostate cancer aggressiveness and disease progression[J]. PLoS One, 2013, 8(1): DOI:10.1371/Journal. pone.0053527.

[9] BARBORO P, REPACI E, DARRIGO C, et al. The role of nuclear matrix proteins binding to matrix attachment regions (Mars) in prostate cancer cell differentiation[J]. PLoS One, 2012, 7(7): DOI:10.1371/journal.pone.0040617.

[10]馮小蘭,黃喜健,農(nóng)勤高,等.前列腺癌術(shù)后Gleason分級(jí)與PSA、P504s、Ki-67蛋白表達(dá)相關(guān)性分析[J]. 2014, 22(8): 1907-1909.

[11]張世革,邱雁,邱梁,等. P504S、EZH2和pim-1在前列腺癌組織中的表達(dá)和意義[J].現(xiàn)代泌尿生殖腫瘤雜志, 2010, 2(6): 354-356.

（申海菊編輯）

Expressions of special AT-rich sequence-binding protein 1 and P504s in hunman prostatic carcinoma and their significance

Guo-hua WEI，Zhi-an GAO
(Department of Pathology, Liaoning Medical University, Jinzhou, Liaoning 121000, P.R. China)

Abstract:【Objective】To investigate the expressions of special AT-rich sequence-binding protein 1 (SATB1) and P504s in human prostatic carcinoma tissue and their clinical significance.【Methods】Expressions of SATB1 and P504s protein were assessed by immunohistochemistry in 60 cases of prostatic carcinoma ( group PC) and 30 cases of benign prostatic hyperplasia (group BPH).【Results】The expression of SATB 1 in the group PC (78.3%) was significant higher than that in the group BPH (0.0%), the difference was significant (P< 0.05). The expression of P504s was also much higher in the group PC (95.0%) than that in the group BPH (0.0%) with a significant difference (P< 0.05). And the expression of SATB 1 was increased with the increase of Gleason score. but the expression of P504s did not increase as the grade of Gleason score increased (P> 0.05).【Conclusions】Combined with meta-analysis, the high expressions of SATB1 and P504s in the PC tissue will contribute to improve pathological diagnosis and differential diagnosis for prostatic carcinoma. Over-expression of SATB1 might be involved in the pathogenesis and development of prostatic carcinoma.

Key words:prostatic carcinoma; special AT-rich sequence-binding protein 1; P504s; immunohistoche mistry

[通信作者]高志安，E-mail：gaozhiangao55@yahoo.com.cn；Tel：0416-4197281

收稿日期：2014-10-29

文章編號(hào)：1005-8982（2015）23-0032-03

中圖分類號(hào)：R737.25

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A