趙婷婷　刑鵬　李繼光

·論著·

結直腸癌中SCC-S2的表達及意義

趙婷婷刑鵬李繼光

【摘要】目的SCC-S2是近期發(fā)現(xiàn)的一種在多種癌癥中過表達，并且與癌細胞的惡性生物學行為關系密切的物質。但是在結直腸癌中，SCC-S2的表達和生物學作用未見報道。本研究目的是探索SCC-S2在結直腸癌及其癌旁正常組織中的表達水平，探討SCC-S2與結直腸癌患者臨床病理特征的關系。方法本研究應用免疫組化分析了SCC-S2在136例結直腸癌組織中的表達情況，使用SPSS 18.0軟件進行統(tǒng)計分析。結果67例(49.26%)結直腸癌標本SCC-S2過表達。SCC-S2的過表達與結直腸癌的TNM分期顯著相關(P<0.01)；與淋巴結轉移顯著相關(P<0.05)；與細胞增殖指數(shù)顯著相關(P>0.01)。結論SCC-S2在結直腸癌中表達升高，并與結直腸癌侵襲和淋巴結轉移密切相關。SCC-S2在結直腸癌的發(fā)生發(fā)展中可能發(fā)揮著重要作用。

【關鍵詞】結直腸腫瘤；免疫組織化學；SCC-S2

作者單位：110000沈陽，中國醫(yī)科大學腫瘤研究所

在發(fā)達國家，結直腸癌病死率已位居惡性腫瘤第一位[1]。目前，手術切除結合術后輔助放化療仍然是結直腸癌治愈的唯一途徑，但這種方法對于進展期或者已經(jīng)發(fā)生轉移的直結腸癌來說并不理想。為了突破傳統(tǒng)治療方法的限制，使發(fā)生轉移的直結腸癌患者達到長期生存，我們仍需要發(fā)現(xiàn)新的治療策略。在這方面，基因治療已經(jīng)被證明能增加細胞毒性藥物在癌癥治療的效率。因此，探索能作為腫瘤標記物預測直結腸癌進展風險的靶基因是非常重要的。

SCC-S2(基因名TNFAIP8)最早是通過比較來源于同一患者的原發(fā)頭頸部鱗狀細胞癌(HNSCC)與相對應的轉移的頭頸部鱗癌細胞系而發(fā)現(xiàn)的[2]。SCC-S2核酸序列結構中開放閱讀框架氨基末端包含著與調控細胞死亡蛋白FLIP(fas-associated death domain-like interleukin-1-β-converting enzyme-inhibitory protein)中死亡效應結構域II(death effector domain II，DEDII)高度同源的序列，其表達可誘導TNF-α和轉錄激活NF-κB，并在人體的多種腫瘤組織中都有表達[2-4]。有研究表明，SCC-S2在糖皮質激素介導的胸腺細胞凋亡過程中發(fā)揮關鍵作用[5]。Kumar等[6]認為SCC-S2作為抗凋亡分子，其過表達可促進乳腺癌細胞增生和遷移能力。Dong等提出SCC-S2在非小細胞癌中過表達，并與其惡性程度和淋巴結轉移密切相關，提示SCC-S2是非小細胞癌的一個重要的癌基因[7]。

盡管SCC-S2與腫瘤的發(fā)生發(fā)展關系密切，但其對人直結腸癌的作用尚未明確。該研究旨在闡明SCC-S2在直結腸癌中的表達情況及其與臨床病理特點的關系，為今后直結腸癌治療提供新的靶點。

資料與方法

一、一般資料

收集2006年至2008年中國醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院136例原發(fā)性結腸癌手術切除標本。所有患者術前均未行放、化療。組織學分類和分化程度根據(jù)WHO分類標準進行判定。所有136例結腸癌患者根據(jù)WHO組織學分類標準劃分：Ⅰ級31例，Ⅱ級49例，Ⅲ級44例，Ⅳ級12例。臨床分期根據(jù)第七版直結腸癌TNM分期標準劃分。

二、方法

采用免疫組化SP法進行染色，按SP試劑盒(福州邁新公司)方法操作。外科切除標本經(jīng)10%中性福爾馬林固定、石蠟包埋。將石蠟組織塊4μm厚切片，經(jīng)二甲苯脫蠟，再于梯度酒精水化。經(jīng)PBS漂洗后，在0.01M檸檬酸鹽緩沖液(PH 6.0)里高壓2分鐘進行抗原修復。然后在PBS中冷卻至室溫。PBS漂洗，加入一滴內源性過氧化物酶阻斷劑，室溫下放置10min。PBS漂洗，用含10%山羊血清的PBS液室溫下封閉20min。加兔SCC-S2的多克隆抗體(1：200，Abcam公司，美國)和Ki-67鼠單克隆抗體(1：500稀釋，Abcam，美國)4℃過夜。經(jīng)PBS沖洗后加二抗在室溫下孵育10min，PBS沖洗后加鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化酶1滴，室溫靜置10 min，然后行DAB染色3~10 min，蘇木素染色3~5 min，1%鹽酸乙醇脫色3sec，梯度脫水脫乙醇后用中性樹膠封片，固定后于顯微鏡下觀察結果。實驗中，用兔IG作為陰性對照。

兩位病理專家隨機雙盲觀察染色結果，于顯微鏡下隨機取5個不同的視野，每個視野計數(shù)100個細胞，計算陽性染色細胞所占得比例。按細胞質著色的百分比分為0-4個級別：0級為無染色；1級為1~25%；2級為26~50%；3級為51~75%；4級為≥76%。同時判定染色強度：0級為無染色；1級為中度染色；2級為強染色。著色細胞數(shù)得分乘以著色強度得分為SCC-S2得分。計算統(tǒng)計結果，<4分為陰性，≥4分為陽性。

Ki-67免疫組化染色結果基于陽性染色細胞比例，陽性染色細胞比例≥40%為Ki-67陽性表達，<40%為Ki-67陰性表達。

三、統(tǒng)計學分析

以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

結　　果

采用免疫組化SP法檢測SCC-S2蛋白在136例結腸癌及其癌旁正常結腸組織中的表達。SCC-S2在正常結腸組織中均未著色，表現(xiàn)為陰性。136例結腸癌組織中SCC-S2陽性率為49.26%(67例)，陽性信號主要定位于腫瘤細胞的胞質中(圖1)。

對臨床病理因素進行分析發(fā)現(xiàn)，SCC-S2陽性與患者年齡、性別、分化、腫瘤位置、T分期無明顯相關(P>0.05)，但與TNM分期(P<0.01)、淋巴結轉移(P<0.05)及Ki-67表達(P<0.01)明顯相關(表1)。與SCC-S2陰性表達患者相比，SCC-S2陽性表達的患者，其TNM分期更晚，淋巴結轉移和Ki-67陽性的概率明顯增加。

注：a圖為SCC-S2在腫瘤組織中免疫組織化學染色陰性表達圖像；b圖為SCC-S2在腫瘤組織中免疫組織化學染色陽性表達圖像圖1　SCC-S2在腫瘤組織中免疫組織化學染色表達圖像

討　　論

目前，SCC-S2已經(jīng)被證實在人的多種腫瘤組織存在過表達，并且其與腫瘤的增生和侵襲密切相關。該蛋白自首次發(fā)現(xiàn)以來，已相繼被研究發(fā)現(xiàn)在卵巢癌、乳腺癌、前列腺癌、肺癌等組織惡性腫瘤高表達。然而SCC-S2在結腸癌中的表達及其與臨床病理因素的關系未見報道。

在本研究中，我們選擇了136例手術切除的結腸癌患者，對SCC-S2的表達與臨床病理因素的關系進行探討，發(fā)現(xiàn)SCC-S2在癌旁的正常結腸組織中均為陰性，而在結腸癌中SCC-S2陽性率為49.26%，提示SCC-S2可能與直結腸癌的發(fā)生發(fā)展密切相關。進而，我們分析了SCC-S2的表達與臨床病理資料的關系，結果發(fā)現(xiàn)SCC-S2的表達上調與結腸癌的TNM分期、淋巴結轉移以及Ki-67表達明顯相關。這些結果與SCC-S2在其他腫瘤中的表達情況相一致，說明SCC-S2在結腸癌的增殖和侵襲中也發(fā)揮著重要作用。這個結果也提示了SCC-S2可能是治療直結腸癌的一個新的靶點。

表1　SCC-S2的表達與結腸癌的臨床病理因素關系情況表

參考文獻

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[2]Kumar D，Whiteside TL，KasidU.Identification of a novel tumor necrosis factor-alpha-inducible gene，SCC-S2，containing the consensus sequence of a death effector domain of fas-associated death domain-like interleukin-1beta-converting enzyme-inhibitory protein.J BiolChem，2000，275：2973-2978.

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[6]Kumar D，Gokhale P，Broustas C，et al.Expression of SCC-S2，an antiapoptotic molecule，correlates with enhanced proliferation and tumorigenicity of MDA-MB 435 cells.Oncogene，2004，23：,612-616.

[7]Dong QZ，Zhao Y，Liu Y，et al.Overexpression of SCC-S2 correlates with lymph node metastasis and poor prognosis in patients with non-small-cell lung cancer.Cancer Sci，2010，101：1562-1569.

(本文編輯：馬天翼)

趙婷婷，刑鵬，李繼光.結直腸癌中SCC-S2的表達及意義[J/CD].中華結直腸疾病電子雜志，2015，4(1)：54-57.

Expression and the significance of SCC-S2 in colorectal cancer

ZHAOTing-ting，XINGPeng，LIJi-guang

.TumorResearchInstituteofChinaMedicalUniversity，Shenyang110013，China.

Correspondingauthor：LIJi-guang，Email：13898829926@163.com.

【Abstract】ObjectiveSCC-S2 was recently reported to be overexpressed in various cancers and associated with the malignant behavior of cancer cells.However，the expression of SCCS2 and its biological roles in colorectal cancers have not been reported.The aim of this study is to investigate the expression and clinical significance of SCC-S2 in colorectal cancers.MethodsThe expression pattern of SCC-S2 in 136 colorectal cancer tissues was analyzed by immunohistochemistry.The statistic analysis was performed by SPSS 18.0.ResultsSCC-S2 was overexpressed in 67(49.26 %)of 136 colon cancer specimens.There was a significant association between SCC-S2 overexpression and TNM stage(P<0.01)，lymph node metastasis(P<0.05)，and proliferation index(P<0.01).ConclusionsSCC-S2 is overexpressed in colorectal cancers and contributes to invasion and lymph node metastasis.SCC-S2 may play an important role as tumor-promoting factor in colorectal cancer.

【Key words】Colorectal neoplasms；Immunohistochemistry；SCC-S2

(收稿日期：2015-01-15)

通訊作者：李繼光，Email：13898829926@163.com

基金項目:國家自然科學基金(81272718)

DOI：10.3877/cma.j.issn.2095-3224.2015.01.12