黃　山，許　暢，鄒旭輝，朱　明(綜述)，嵇承棟※(審校)

(　1.上海市楊浦區(qū)中心醫(yī)院 a.人才發(fā)展與培訓(xùn)中心, b.科研管理部, c.麻醉科,上海 200090;

2.上海理工大學(xué)醫(yī)療器械?？茖W(xué)校，上海 200090)

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實(shí)驗(yàn)動物倫理研究進(jìn)展

黃山1a，許暢1b，鄒旭輝2，朱明1c(綜述)，嵇承棟1a※(審校)

(1.上海市楊浦區(qū)中心醫(yī)院 a.人才發(fā)展與培訓(xùn)中心, b.科研管理部, c.麻醉科,上海 200090;

2.上海理工大學(xué)醫(yī)療器械?？茖W(xué)校，上海 200090)

摘要：近年來，人們開始加深對實(shí)驗(yàn)動物的倫理問題展開研究，與過去從不關(guān)心實(shí)驗(yàn)動物相比，如今人們對動物實(shí)驗(yàn)制定了一系列的原則、措施和法律法規(guī)，這說明目前對實(shí)驗(yàn)動物倫理的研究取得了長足的進(jìn)步。該文首先敘述了近年來研究者們對于動物實(shí)驗(yàn)倫理的總體認(rèn)識，然后從動物實(shí)驗(yàn)的爭論出發(fā)，總結(jié)了目前對于實(shí)驗(yàn)動物倫理的審查工作及其進(jìn)展，最后在此基礎(chǔ)上提出“三個加大”的展望，希望可以為今后實(shí)驗(yàn)動物倫理工作的發(fā)展提供幫助。

關(guān)鍵詞：動物，實(shí)驗(yàn)；倫理學(xué)研究；動物福利

在當(dāng)今的生命科學(xué)研究中，動物實(shí)驗(yàn)為一種不可或缺的手段，其對于人類醫(yī)學(xué)發(fā)展的幫助愈加明顯。隨著實(shí)驗(yàn)動物的廣泛應(yīng)用，關(guān)于動物實(shí)驗(yàn)的倫理問題也逐漸凸顯出來。眾所周知，用于實(shí)驗(yàn)的動物大多擁有生命體征，具有自主意識。因此，動物實(shí)驗(yàn)的操作人員必須對一切生物擁有愛心，樹立愛護(hù)生命的觀念，并用人道主義精神對待實(shí)驗(yàn)動物，也只有這樣，才能人道、妥善地保護(hù)動物，使實(shí)驗(yàn)動物為人類做出更好的貢獻(xiàn)。

1動物實(shí)驗(yàn)倫理的概念

1.1動物實(shí)驗(yàn)概念動物實(shí)驗(yàn)是指在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)，使用一定的儀器或者方法來獲得有關(guān)生物學(xué)、醫(yī)學(xué)等方面的新知識或進(jìn)行科學(xué)研究的科研活動的過程。動物實(shí)驗(yàn)必須由經(jīng)過培訓(xùn)的、具備研究經(jīng)驗(yàn)的以及專業(yè)技術(shù)能力的人員實(shí)施，或在其指導(dǎo)下開展。動物實(shí)驗(yàn)是生命科學(xué)的重要組成部分，不可或缺，其已經(jīng)成為科學(xué)研究中的一個標(biāo)桿[1]。

1.2實(shí)驗(yàn)動物范疇實(shí)驗(yàn)動物是指經(jīng)由人工飼養(yǎng)培育、其攜帶的微生物及遺傳背景明確、用于生命科學(xué)實(shí)驗(yàn)的特殊動物。分為無脊椎動物和脊椎動物兩大類。無脊椎動物包括蚯蚓、甲蟲、水母等。脊椎動物中哺乳類動物使用最為廣泛，例如鼠、兔、豬等。脊椎動物中魚類較為低等，例如斑馬魚；靈長類最為高級，例如猴類[2]。

1.3實(shí)驗(yàn)動物的福利動物福利由兩個方面組成：康樂(well-being)和福利(welfare)。前者是指動物在生活中所享受的愉悅、健康的狀態(tài)；后者是指人類為動物保持康樂所使用的措施和方法。實(shí)驗(yàn)動物的福利是人們所給予動物康樂生活的權(quán)利，具體體現(xiàn)在人們對與實(shí)驗(yàn)動物生活環(huán)境的福利，如：光照、溫度、濕度、墊料、飼料、密度等。對于運(yùn)輸過程中的福利，則主要體現(xiàn)在：運(yùn)輸?shù)陌b箱、動物的體檢、防止顛簸暈車、船、飛機(jī)等[3]。

1.4實(shí)驗(yàn)動物的倫理含義實(shí)驗(yàn)動物倫理含義的提出是出于對人道主義的關(guān)注，以生命倫理準(zhǔn)則來規(guī)范動物實(shí)驗(yàn)，使人類能夠遵循相關(guān)倫理制度，減少動物實(shí)驗(yàn)對動物所造成的傷害。實(shí)驗(yàn)動物倫理的主要內(nèi)容是實(shí)驗(yàn)過程中人類對動物的管理、關(guān)懷的措施或者行為準(zhǔn)則的落實(shí)。

2動物實(shí)驗(yàn)觀點(diǎn)現(xiàn)狀

2.1支持動物實(shí)驗(yàn)支持動物實(shí)驗(yàn)的科學(xué)家大都是以人類利益為出發(fā)點(diǎn)，他們認(rèn)為實(shí)驗(yàn)動物沒有道德判斷的能力。人類是運(yùn)用動物來進(jìn)行對生命以及未來的探索，從而緩解人類疾病的痛苦，這就像是人類食用動物一樣，是為了生存，沒有必要反對。動物實(shí)驗(yàn)與動物福利并不是相悖的，而是兩件不同是事情。一些學(xué)者從人道主義出發(fā)，提出動物實(shí)驗(yàn)的本質(zhì)是為了提高人類的壽命，是對生命的探究而不是去殺害動物，繼而指出，在保證人類的利益下，是可以運(yùn)用倫理規(guī)則規(guī)定動物實(shí)驗(yàn)的[4]。另一些學(xué)者則是從后果出發(fā)，他們認(rèn)為如果沒有動物實(shí)驗(yàn)，只能使用人體做活體實(shí)驗(yàn)，這嚴(yán)重違反了人類道德的準(zhǔn)則，會帶來比使用實(shí)驗(yàn)動物更加嚴(yán)重的傷害，但同時，他們雖然同意動物實(shí)驗(yàn)，卻并不認(rèn)為做動物實(shí)驗(yàn)可以為所欲為，他們強(qiáng)調(diào)在做動物實(shí)驗(yàn)中也應(yīng)該遵守一般的倫理準(zhǔn)則，將動物的痛苦降到最低[5-6]。

2.2反對動物實(shí)驗(yàn)著名功利主義哲學(xué)家彼得[7]在《動物解放》一書中提到，動物應(yīng)該具有生存權(quán)、個體自由權(quán)和免受折磨權(quán)這三項(xiàng)基本權(quán)利。動物既然擁有生命，可以感知痛苦，就應(yīng)該與人享有相同的權(quán)利，不能采用動物實(shí)驗(yàn)的方法來促進(jìn)人類健康的發(fā)展。這些從動物實(shí)驗(yàn)中反映的知識不一定必須從實(shí)驗(yàn)中學(xué)習(xí)，完全可以從別的方法中獲得。例如：將剛出生的小猴與母猴分離，讓小猴缺乏母愛，觀察小猴的反應(yīng)和精神疾病的特征。Peter[8]認(rèn)為這種實(shí)驗(yàn)可以孤兒院的孤兒作為研究對象，沒有必要將已知道實(shí)驗(yàn)結(jié)果的實(shí)驗(yàn)重復(fù)在實(shí)驗(yàn)動物身上實(shí)施。

3一些基本原則在實(shí)驗(yàn)動物中的應(yīng)用

3.13R原則的應(yīng)用3R原則是在動物實(shí)驗(yàn)中采用減少(Reduction)、替代(Replacement)和優(yōu)化(Refinement)原則來解決實(shí)驗(yàn)動物的倫理問題[9]。

減少原則是指在動物實(shí)驗(yàn)過程中，減少對動物的使用量或利用一定量的動物獲得多組數(shù)據(jù)或多個新知識的原則。

替代原則是指在動物實(shí)驗(yàn)中使用低等生物來替代高等生物，甚至不使用動物來做實(shí)驗(yàn)從而達(dá)到相同目的的原則。

優(yōu)化原則是指在動物實(shí)驗(yàn)中，通過對手術(shù)手法的優(yōu)化來減輕動物的痛苦和疼痛或者優(yōu)化實(shí)驗(yàn)技術(shù)使動物能循環(huán)利用，加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)科學(xué)性的原則。

3R原則在動物實(shí)驗(yàn)中的流程如圖1所示。在動物實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備階段，主要遵循減少和替代原則。準(zhǔn)備中應(yīng)該注重實(shí)驗(yàn)計劃、崗前培訓(xùn)、麻醉準(zhǔn)備以及倫理審查的質(zhì)量，尤其是要做好預(yù)實(shí)驗(yàn)的工作。在預(yù)備工作中，盡量使用無脊椎動物替代高等生物，甚至使用高分子材料來代替動物。在實(shí)驗(yàn)過程和實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，主要遵循優(yōu)化原則，例如：在為大鼠尾部靜脈注射麻醉藥物時，推送時間需要嚴(yán)格把握，不得為了節(jié)約實(shí)驗(yàn)時間，過快注射導(dǎo)致動物不必要的痛苦。并且在注射時，應(yīng)輕撫大鼠背部使大鼠鎮(zhèn)定，緩解動物的痛楚[10]。

圖1　3R原則在動物實(shí)驗(yàn)流程中的體現(xiàn)

3.25F原則的應(yīng)用5F是指：①免受饑餓的自由；②生活舒適的自由；③免受痛苦的自由；④免受焦慮的自由；⑤表達(dá)天性的自由。實(shí)驗(yàn)者在進(jìn)行動物實(shí)驗(yàn)時必須遵從5F倫理原則，以保證動物實(shí)驗(yàn)的科學(xué)性。5F在動物實(shí)驗(yàn)的具體應(yīng)用中體現(xiàn)在：在動物飼養(yǎng)環(huán)境上必須做到免受饑餓的自由，每天要給予充分的飼料使其生長，這是實(shí)驗(yàn)動物所擁有的權(quán)利。在籠中，必須給予動物翻轉(zhuǎn)、舔梳、站立、臥下和伸腿的空間來保證動物舒適的生活[11]。在實(shí)驗(yàn)過程中，要盡量避免實(shí)驗(yàn)動物的痛苦，做輕撫等動作來安定動物。更不能在實(shí)驗(yàn)動物面前宰殺其他動物，引起動物不安、焦慮的情緒，以至在抓實(shí)驗(yàn)動物時，動物會嚙咬實(shí)驗(yàn)者，造成不必要的麻煩[12]。

4保證動物實(shí)驗(yàn)實(shí)現(xiàn)的幾個基本措施

4.1嚴(yán)格崗前培訓(xùn)崗前培訓(xùn)是一個容易被實(shí)驗(yàn)者忽略的問題，崗前培訓(xùn)制度是書本上理論知識與實(shí)驗(yàn)室實(shí)踐操作之間的橋梁，嚴(yán)格崗前培訓(xùn)有利于學(xué)員更好地遵守實(shí)驗(yàn)動物的倫理原則。培訓(xùn)老師必須詳細(xì)介紹實(shí)驗(yàn)室的規(guī)章制度和動物倫理問題。動物實(shí)驗(yàn)室作為生命科學(xué)探索和研究的一個重要場所，對人體或者所攜帶的器械有著嚴(yán)格的微生物數(shù)量控制，所以必須遵守實(shí)驗(yàn)室規(guī)章制度，穿戴合適的服裝進(jìn)行消毒工作等。進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室后，也應(yīng)該遵循動物的倫理原則。不得做出隨意喂食實(shí)驗(yàn)動物等影響科學(xué)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和最終結(jié)果的行為[13]。

4.2預(yù)實(shí)驗(yàn)措施預(yù)實(shí)驗(yàn)措施是指在正式實(shí)驗(yàn)之前，利用小批量的動物測試，或者使用低等生物替代原本做實(shí)驗(yàn)的高等動物，查看最終實(shí)驗(yàn)結(jié)果的方法。預(yù)實(shí)驗(yàn)措施往往能節(jié)省動物的使用量，更合理地利用一定量的動物，而得到更多的數(shù)據(jù)。如若在預(yù)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)結(jié)果與理論不符，則說明理論出現(xiàn)了偏差，便可以暫停實(shí)驗(yàn)，避免不必要地動物死亡。

4.3倫理審查的落實(shí)一旦確定需要做動物實(shí)驗(yàn)，不能直接魯莽地進(jìn)一批實(shí)驗(yàn)動物就開始做動物實(shí)驗(yàn)。必須做一份實(shí)驗(yàn)計劃書給倫理委員會，由委員會中經(jīng)驗(yàn)豐富的老師審查，包括對動物的選擇、動物的數(shù)量、該科研項(xiàng)目是否有必要做動物實(shí)驗(yàn)等進(jìn)行全方位的倫理審查。如若批準(zhǔn)才能進(jìn)行動物實(shí)驗(yàn)，否則屬于違規(guī)操作[14]。

4.4動物安樂死對于動物安樂死問題，實(shí)驗(yàn)操作者必須與獸醫(yī)溝通，獲得獸醫(yī)的意見來判定動物是否需要安樂死。若實(shí)驗(yàn)完畢，動物將受到長期疾病折磨的痛苦，表現(xiàn)為動物自殘、腫瘤增大、白細(xì)胞計數(shù)升高時，理應(yīng)人道主義地實(shí)施安樂死[15]。目前主流安樂死方法為2種：麻醉過度破壞中樞神經(jīng)法和二氧化碳窒息法。一些物理方法違反了動物的倫理準(zhǔn)則，大多已經(jīng)禁止使用，包括頸部脫臼、斷頭、電擊、放血等。根據(jù)條件，大批量動物安樂死可使用二氧化碳窒息法，該方法實(shí)施起來更為方便、輕松，還能節(jié)約經(jīng)費(fèi)。而小批量動物安樂死使用過度麻醉法即可，不需要大型儀器。因此,合理的安樂死應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況而靈活運(yùn)用[16]。

5實(shí)驗(yàn)動物倫理審查質(zhì)量控制

5.1實(shí)驗(yàn)動物審查的相關(guān)法規(guī)我國相繼在1988、2006和2007年制訂了《實(shí)驗(yàn)動物管理?xiàng)l例》[17]《關(guān)于善待實(shí)驗(yàn)動物的指導(dǎo)性意見》[18]和《涉及人的生物醫(yī)學(xué)研究倫理審查辦法(試行)的通知》[19]。特別是《涉及人的生物醫(yī)學(xué)研究倫理審查辦法(試行)的通知》中第二章第五條規(guī)定了必須“設(shè)定倫理委員會來審查倫理審查申請表”，以監(jiān)督該動物實(shí)驗(yàn)“研究者的資格、科學(xué)倫理性要求和受風(fēng)險的程度”。第三章第十條中提出，若沒有通過倫理審查，倫理委員會可提出3個要求，“要求知情同意書、要求修改方案和要求終止”。第四章第二十九條中明確指出，“擅自違反倫理審查的可追究法律責(zé)任，移至司法機(jī)構(gòu)”。這些法規(guī)條例表明，倫理審查是有法可依的，任何動物實(shí)驗(yàn)都是必須得到法律認(rèn)可。

5.2實(shí)驗(yàn)動物審查的體系實(shí)驗(yàn)動物審查需要建設(shè)一個體系。由于各地體系不同，因此每個地方倫理審查的方式也不盡相同。但是，總的來看，實(shí)驗(yàn)動物倫理審查可按時間順序分為準(zhǔn)備、審查、結(jié)束3個階段，各階段大致包含的內(nèi)容如圖2所示。倫理審查必須要提交倫理審查表以及實(shí)驗(yàn)操作方案，以便讓審查者全面地了解實(shí)驗(yàn)者以及其實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目相關(guān)內(nèi)容，加快審查的速度，并且做好報表，方便管理。倫理審查主要是對實(shí)驗(yàn)者資歷的審查，查看研究者及其專業(yè)性是否符合動物實(shí)驗(yàn)的要求。其次，要對實(shí)驗(yàn)動物權(quán)益和福利進(jìn)行審查。審查動物的飼養(yǎng)環(huán)境、運(yùn)輸過程是否科學(xué)。審查過程中最為關(guān)鍵的是審查動物實(shí)驗(yàn)的方案。審查動物實(shí)驗(yàn)的方案時，必須對實(shí)驗(yàn)動物數(shù)量進(jìn)行嚴(yán)格的篩查，控制合理的數(shù)目。再者審查是否可以使用低等動物或者無生命物質(zhì)代替實(shí)驗(yàn)動物進(jìn)行動物實(shí)驗(yàn)，或?qū)?shí)驗(yàn)的操作事項(xiàng)如麻醉方案、實(shí)驗(yàn)手法、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容和安樂死方法等進(jìn)行檢測。若審查通過，且無爭議，便可以進(jìn)行動物實(shí)驗(yàn)。這里需要注意的是，如果在實(shí)驗(yàn)過程中修改了實(shí)驗(yàn)方案，需要報告知會倫理審查委員會，讓委員會對新的方案重新進(jìn)行審查。若修改且無重新審查則是違反法律行為，倫理審查委員會可以依法提起訴訟，移交司法部門[20-21]。

圖2　實(shí)驗(yàn)動物倫理審查體系

5.3實(shí)驗(yàn)動物審查的質(zhì)量實(shí)驗(yàn)動物的倫理審查質(zhì)量必須要加強(qiáng)。目前主流是由多人進(jìn)行審查，在審查過程中進(jìn)行互檢，以提高審查的質(zhì)量。我國出臺了對倫理審查制度的法規(guī)，對審查的各個過程進(jìn)行了框定，因此審查者必須嚴(yán)格遵循法律。并且要加強(qiáng)對倫理學(xué)、法律和操作過程的了解，時常進(jìn)行對倫理審查的探討才有助于增加倫理審查的質(zhì)量[22]。

6實(shí)驗(yàn)動物倫理展望

6.1加大獸醫(yī)在動物實(shí)驗(yàn)中的參與目前，在我國的動物實(shí)驗(yàn)中很少有獸醫(yī)的參與。獸醫(yī)的參與對實(shí)驗(yàn)動物選種的決策、實(shí)驗(yàn)動物日常管理、實(shí)驗(yàn)動物病菌的測定等都有莫大幫助。在手術(shù)期間，獸醫(yī)觀察實(shí)驗(yàn)動物的肢體語言、叫聲或是表情來判斷動物的痛苦程度，從而降低實(shí)驗(yàn)動物的疼痛。美國早在1915年便開始有獸醫(yī)參與動物實(shí)驗(yàn)，加大獸醫(yī)在動物實(shí)驗(yàn)中的參與，正成為一個趨勢[23]。

6.2加大對實(shí)驗(yàn)動物環(huán)境的投入為了保證實(shí)驗(yàn)動物的福利，需要加大對實(shí)驗(yàn)動物環(huán)境的改善。再安裝一些大型控制設(shè)備，例如空氣濕度監(jiān)測裝置、恒溫控制系統(tǒng)、凈化消毒裝置等。從大體環(huán)境上改善動物生活質(zhì)量的同時，提高實(shí)驗(yàn)動物的健康快樂程度，例如在籠子中增設(shè)玩樂裝置、給予實(shí)驗(yàn)動物優(yōu)良的飼料和墊料等。這些做法雖然增加了設(shè)備的投入，但是能營造一個現(xiàn)代化、高科技的實(shí)驗(yàn)動物培養(yǎng)區(qū)，增加了動物實(shí)驗(yàn)的科學(xué)性和倫理性[24]。

6.3加大人性化教育一些實(shí)習(xí)的臨床工作者，對于動物實(shí)驗(yàn)有著強(qiáng)烈的好奇心，常常會對實(shí)驗(yàn)動物進(jìn)行探究而給實(shí)驗(yàn)動物帶來不必要的痛苦。因此，應(yīng)加大實(shí)驗(yàn)前的倫理學(xué)習(xí)并在實(shí)驗(yàn)中嚴(yán)格貫徹執(zhí)行，最好加強(qiáng)對“換位思考”理念的教育[25]，想想動物的感受，盡量減少不必要的行為。如果實(shí)驗(yàn)動物不必安樂死，必須幫助實(shí)驗(yàn)動物盡早從傷病中康復(fù)[26]。

7結(jié)語

通過對實(shí)驗(yàn)動物的倫理研究發(fā)現(xiàn)，我國實(shí)驗(yàn)動物倫理研究水平正在一步一步地提高，人們對動物福利的理解表現(xiàn)為使實(shí)驗(yàn)動物更舒適，同時人們得出的數(shù)據(jù)也更趨向科學(xué)性。對于倫理審查，國家也出臺了相應(yīng)的法律法規(guī)，做到了有法可依，違法必究。但是，當(dāng)前全國各個地區(qū)的操作尚未統(tǒng)一，特別是關(guān)于實(shí)驗(yàn)動物在麻醉中的倫理探究，目前仍沒有文獻(xiàn)提及，說明對于動物麻醉倫理問題的研究尚屬空白，有待進(jìn)一步加強(qiáng)。

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Ethics Research Progress of Laboratory Animal

HUANGShan1a,XUChang1b,ZOUXu-Hui2,ZHUMing1c,JICheng-dong1a.

(1a.TalentDevelopmentandTrainingCenter, 1b.DepartmentofScientificResearchManagement, 1c.DepartmentofAnesthesiology,ShanghaiYangpuDistrictCentralHospital,Shanghai200090,China; 2.ShanghaiMedicalInstrumentationCollege,UniversityofShanghaiforScienceandTechnology,Shanghai200090,China)

Abstract：In recent years,people began to unfold the study in ethical problems of experimental animals.In the past,people were never concerned with experimental animals,but now it has formulated a series of principles,measures,laws and regulations of animal experiment,which shows that the current research on experimental animal ethics has made considerable progress.Here is to make a review of general understanding of animal ethics and animal experiments,the current examination work and its progress,and the prospect of ″three increase″ to help the future development of the experimental animal ethics work.

Key words：Animal,laboratory; Ethics research; Animal welfare

收稿日期:2013-11-04修回日期:2014-06-25編輯:孫洪芳

基金項(xiàng)目：上海市衛(wèi)生局科研基金(2012088)

doi：10.3969/j.issn.1006-2084.2015.01.026

中圖分類號：R-1； R-332

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

文章編號：1006-2084(2015)01-0066-03