郭春艷

（招遠(yuǎn)市畢郭畜牧獸醫(yī)站，山東招遠(yuǎn) 265412）

鉛中毒肉牛血鉛含量的測(cè)定與分析

郭春艷

（招遠(yuǎn)市畢郭畜牧獸醫(yī)站，山東招遠(yuǎn) 265412）

鉛中毒是動(dòng)物最常見的一種重金屬或礦物質(zhì)中毒病。判定鉛中毒最常用和最有效的方法是檢測(cè)血鉛，血鉛水平能準(zhǔn)確地反映出機(jī)體近期鉛中毒程度。本次實(shí)驗(yàn)利用火焰原子吸收光譜法（FAAS），測(cè)定了甘肅張掖某養(yǎng)牛場(chǎng)4頭鉛中毒的肉牛的血鉛含量，為其提供鉛中毒實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)指標(biāo)。

1 材料與方法

1.1 材料

取自甘肅張掖某養(yǎng)牛場(chǎng)鉛中毒西門塔爾改良肉牛頸靜脈血樣4份。

1.2 主要實(shí)驗(yàn)儀器

美國熱電公司生產(chǎn)的熱電S4型原子吸收光譜儀、德國產(chǎn)賽多利斯（SARTORIAS）BP221S型電子天平、pb空心陰極燈、微量移液管、調(diào)溫電爐、容量瓶（50 ml、100 ml、1 000 ml）、燒杯（50 ml）。原子吸收光譜檢測(cè)方法的工作條件詳見表1。1.3 主要試劑

表1 原子吸收光譜法測(cè)定Pb元素的工作條件

鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液、肝素鈉溶液（5g/L），硝酸（GB626），高氯酸（GB623）、混合酸消化液：硝酸與高氯酸比為 4∶1、試驗(yàn)用水為去離子水。

1.4 實(shí)驗(yàn)原理

血樣經(jīng)濕消化處理后，導(dǎo)入到S4型原子吸收光譜儀中，經(jīng)火焰原子化后。將血液置于228.8 nm的共振線下測(cè)定鉛。鉛元素的吸收值與其含量成正比，與標(biāo)準(zhǔn)系列比較可定量得出Pb的含量[1]。

2 方法與步驟

2.1 實(shí)驗(yàn)器材的前處理

實(shí)驗(yàn)所用的器皿（燒杯、玻璃棒、容量瓶等）均使用硝酸溶液（3%）浸泡24 h后用去離子水沖洗，晾干備用。

2.2 標(biāo)準(zhǔn)液的配制

鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液：略。此硝酸鉛溶液濃度為1 000 μg/ml。

鉛的標(biāo)準(zhǔn)使用液：準(zhǔn)確吸取鉛標(biāo)準(zhǔn)液（1 000 μg/ml）10.0 ml，置于盛有少量0.5 mol/ml硝酸溶液的100 ml的容量瓶中。加入0.5 mol/L的硝酸稀釋至刻度，此溶液的濃度為100 μg/ml。

鉛的標(biāo)準(zhǔn)校正液：準(zhǔn)確吸取鉛標(biāo)準(zhǔn)使用液1、3、5 ml，用0.5mol/L的硝酸溶液稀釋至各100 ml，使鉛的標(biāo)準(zhǔn)稀釋液濃度為：1.0、3.0、5.0μg/ml[2]。

2.3 樣品采集

分別隨機(jī)采取鉛中毒肉牛1號(hào)、中毒肉牛2號(hào)、中毒肉牛3號(hào)、4號(hào)的頸靜脈血各5 ml，分別加入提前加有100μl的5 g/L肝素鈉溶液的1、2、3、4編號(hào)真空采血管中，充分震蕩，置于4 ℃冰箱內(nèi)保存。使用前放至室溫。

2.4 樣品的處理

吸取0.5 ml血樣到50 ml燒杯中，加入10 ml HNO3-HClO4（3∶1）混合酸小心搖勻，勿使樣品黏附于瓶壁上。靜置24 h，然后在電爐上加熱揮發(fā)多余的酸，消化至冒白煙，消化液為無色透明或淡黃色為止。冷卻后，過濾到50ml容量瓶中，并用去離子水洗滌消化燒杯3次以上，并定容至50 ml，即得樣品溶液[3]。

同時(shí)，取與消化血樣相同量的混合酸消化液，按上述操作做試劑空白實(shí)驗(yàn)測(cè)定。

2.5 儀器操作條件

將波長(zhǎng)、狹縫、燈電流、燃燒器類型、空氣流量、乙炔燃?xì)饬髁俊⒏鞒绦驕囟?、時(shí)間，按表1原子吸收光譜法測(cè)定Pb元素的工作條件和儀器說明書，調(diào)至最佳狀態(tài)或需要的狀態(tài)。

2.6 測(cè)定

用校正液做出標(biāo)準(zhǔn)曲線，然后將消化好的血樣、空白液和Pb標(biāo)準(zhǔn)濃度系列分別導(dǎo)入S4型原子吸收光譜儀進(jìn)行測(cè)定，并記錄下來。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

本次實(shí)驗(yàn)經(jīng)測(cè)定得到張掖某養(yǎng)殖場(chǎng)鉛中毒肉牛的血鉛含量，詳見表2。

表2 張掖某養(yǎng)殖場(chǎng)隨機(jī)抽取的四頭鉛中毒肉牛血鉛含量

4 分析與討論

4.1 分析

實(shí)驗(yàn)室常用血鉛含量參考值是0.05～0.25 mg/kg，超過0.30 mg/ kg就被認(rèn)為是鉛中毒[4]。單位換算之后，血鉛含量參考值可看為0.30 mg/L。經(jīng)實(shí)驗(yàn)測(cè)得四頭病牛體內(nèi)血鉛含量分別是血鉛標(biāo)準(zhǔn)的48倍、83倍、13倍、27倍，均屬于鉛中毒。

對(duì)照組試樣中未檢測(cè)出鉛含量，排除了容器和試劑鉛污染的可能性。

4.2 討論

（1）鉛是一種對(duì)機(jī)體多個(gè)系統(tǒng)和器官均具有毒性的重金屬元素，在體內(nèi)無任何生理功能，理想血液中鉛的水平應(yīng)為零[6]。肉牛意外或蓄意采食含鉛的物質(zhì)可導(dǎo)致鉛中毒[7]。本實(shí)驗(yàn)中的鉛中毒肉牛是由于采食了鉛含量嚴(yán)重超標(biāo)的飼料而導(dǎo)致的鉛中毒。鉛對(duì)牛的急性致死量為600～800 mg/kg。牛的慢性中毒量為每6～7 mg/kg的鉛攝入量（相當(dāng)于飼料中100～200 μg/g）[8]。

（2）發(fā)病機(jī)理。鉛在消化道內(nèi)形成不溶性鉛復(fù)合物而吸收不良，但在攝食大劑量或長(zhǎng)期小劑量攝食鉛之后，均可引起急性或慢性蓄積性鉛中毒。鉛毒主要抑制細(xì)胞內(nèi)含巰基（-SH）的酶，而使機(jī)體的生化和生理功能發(fā)生障礙，引起小動(dòng)脈痙攣，損傷毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞，影響能量代謝而導(dǎo)致卟啉代謝紊亂，阻礙高鐵血紅蛋白的合成，改變紅細(xì)胞及其膜的正常功能，阻抑肌肉內(nèi)磷酸肌酸的再合成等，從而出現(xiàn)一系列病理變化。

（3）血鉛（PbB）：鉛進(jìn)入機(jī)體后，吸收入血，其中95%以上的鉛是與紅細(xì)胞結(jié)合的形式存在，血漿中只占5%[9]。血鉛（PbB）測(cè)定可反映機(jī)體近期內(nèi)的鉛負(fù)荷，是一項(xiàng)敏感性較好的早期檢測(cè)指標(biāo)。

5 結(jié)論

本次實(shí)驗(yàn)利用火焰原子吸收光譜法（FAAS），測(cè)定了4頭鉛中毒的西門塔爾改良肉牛的血鉛含量，結(jié)果表明，4頭被測(cè)肉牛的血鉛含量均嚴(yán)重超過了肉牛的正常血鉛含量。測(cè)定的結(jié)果對(duì)于其鉛中毒的最終確診具有重要意義。