徐晶

(南昌市血站輸血研究室，江西 南昌330025)

我站輸血研究室血型血清學(xué)實(shí)驗(yàn)室自2003-2013年來參加上海血液中心主辦的全國血型血清學(xué)室間質(zhì)量評價活動以來，通過11年的不斷學(xué)習(xí)和實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)的積累，掌握了一定的血型鑒定技能，對特殊血型和抗體鑒定能夠在最短的時間內(nèi)設(shè)計出行之有效的實(shí)驗(yàn)思路，達(dá)到預(yù)期的實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹Ｍㄟ^外部質(zhì)量評價活動，大大驗(yàn)證了實(shí)驗(yàn)室血型血清學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)水平和理論分析判斷能力。

1 材料與方法

1.1 檢測標(biāo)本 每次質(zhì)控樣品共9份，3份受血者紅細(xì)胞懸液和3份對應(yīng)的血清，3份獻(xiàn)血者紅細(xì)胞懸液，常溫航空運(yùn)輸。

1.2 試劑 抗-A、抗-B、 抗-AB(單克隆抗體)、抗-A1、抗H等定型試劑均為上海血液生物醫(yī)藥有限公司提供。Rh(D)血型定型試劑 抗-D(IgM/IgG)、抗-D(IgG)、抗-D(IgM)均為上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司提供?？谷饲虻鞍自噭?單抗、多抗)、抗體篩選細(xì)胞和譜細(xì)胞、ABO反定型標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞均為上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司提供。凝聚胺試劑盒為安徽晨光天一生物技術(shù)研究所提供。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法 ABO血型和Rh(D)血型定型使用試管法，抗體篩選和交叉配血實(shí)驗(yàn)采用鹽水、聚凝胺、間接抗人球蛋白3種介質(zhì)實(shí)驗(yàn)方法。必要時，可用酶處理紅細(xì)胞或使用卡(抗人球蛋白卡由廣州血液中心輸血研究所提供)。將檢測樣品帶入日常工作中進(jìn)行檢測，在接收標(biāo)本核對后10天內(nèi)完成實(shí)驗(yàn)，雙人核對填寫實(shí)驗(yàn)原始記錄，并在規(guī)定的時間內(nèi)上報實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

1.4 質(zhì)控品及評價標(biāo)準(zhǔn) 上海血液中心主辦的全國血型血清學(xué)室間質(zhì)量評價活動是與美國AABB室間質(zhì)量評價活動的判分標(biāo)準(zhǔn)一致，均為獲得性給分。血型鑒定錯誤得150分；抗體鑒定錯誤得100分；交叉配血試驗(yàn)錯誤得100分。因此，成績?yōu)?分是最好的?？荚u頻次為每年2次。試驗(yàn)共分6大項(xiàng)23小項(xiàng)，包括：ABO血型鑒定、RhD血型鑒定、不規(guī)則抗體篩選、抗體鑒定、直接抗人球蛋白試驗(yàn)以及交叉配血試驗(yàn)。

2 結(jié)果

23個檢測項(xiàng)目均為定性實(shí)驗(yàn)，其中2008年及2010年分別有一例A亞型及A亞型B。檢測結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)結(jié)果對比連續(xù)11年未見血型、抗體篩選及鑒定、配血實(shí)驗(yàn)錯判現(xiàn)象。實(shí)驗(yàn)室|Z|值≤2(滿意)，舉辦方根據(jù)每次參加實(shí)驗(yàn)室的數(shù)量及檢測情況計算出Z值，用以判斷實(shí)驗(yàn)室的檢測水平。我實(shí)驗(yàn)室連續(xù)11年成績均為0分(無罰分)， 見表1。

表1 2003年至2013年室間質(zhì)評結(jié)果匯總

3 討論

血型血清學(xué)室間質(zhì)量評價是我站質(zhì)量控制體系的一個重要組成部分，室間質(zhì)評既是對日常工作的考核，也是一種促進(jìn)[1]。通過對外部質(zhì)控品的測定，對實(shí)驗(yàn)室在試驗(yàn)前、中、后全過程進(jìn)行監(jiān)控，發(fā)現(xiàn)可能影響檢測質(zhì)量的問題，如：樣品、試劑、儀器設(shè)備、檢測方法、操作過程及結(jié)果判斷等。應(yīng)注意：(1)建立實(shí)驗(yàn)室樣品接收程序，對送檢的樣品先確認(rèn)符合標(biāo)本質(zhì)量要求再進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。在11年的室間質(zhì)評檢測工作中，我們發(fā)現(xiàn)5次紅細(xì)胞溶血現(xiàn)象，3次樣品封裝不嚴(yán)密出現(xiàn)的滲漏現(xiàn)象，經(jīng)協(xié)商，由主辦方更換標(biāo)本后再行檢測。因此，符合質(zhì)量要求的標(biāo)本才是獲得可靠實(shí)驗(yàn)結(jié)果的保障[2]。(2)反定型用標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞，抗體篩選細(xì)胞和譜細(xì)胞[3]，有效期短，在快接近有效期時，有些弱反應(yīng)往往不好判斷或漏檢，需用酶處理細(xì)胞后，再進(jìn)行判讀[4]。因此，本實(shí)驗(yàn)嚴(yán)格按照試劑管理要求，定期對試劑做質(zhì)控，以杜絕抗原減弱的細(xì)胞投入使用。(3)血型血清學(xué)主要采用冰箱、水浴箱、臺式離心機(jī)、顯微鏡等實(shí)驗(yàn)儀器，儀器設(shè)備相對簡單，我實(shí)驗(yàn)室將儀器列入關(guān)鍵設(shè)備進(jìn)行質(zhì)量管理，定期檢查和校準(zhǔn)，保證其在良好的狀態(tài)下工作。(4)血型血清學(xué)實(shí)驗(yàn)基本為手工人眼判讀結(jié)果，我實(shí)驗(yàn)室的4名工作人員，均接受過超過3個月的血型血清學(xué)操作技能與理論的培訓(xùn)，且都具有臨床檢驗(yàn)技能。對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的判讀，特別是一些弱反應(yīng)結(jié)果有一定的實(shí)驗(yàn)室操作經(jīng)驗(yàn)和理論水平，不輕易忽視可疑的陽性結(jié)果。

實(shí)驗(yàn)應(yīng)注意的問題：(1)血清標(biāo)本僅夠2次實(shí)驗(yàn)用，所以要合理設(shè)計檢測思路，節(jié)省血清，特別是用于抗體鑒定的的血清，往往只夠1次實(shí)驗(yàn)用，因此，在做到抗體篩選陽性時，就應(yīng)從篩選細(xì)胞譜中判斷出大致的抗體類型及相應(yīng)的抗體。(2)日常鑒定ABO血型時[5,6]，需正反定型結(jié)果確認(rèn)一致才可判斷血型，而質(zhì)控品中獻(xiàn)血者標(biāo)本只有紅細(xì)胞，所以鑒定血型不確切。特別有些亞型的確認(rèn)，無法通過唾液等其他實(shí)驗(yàn)方法加以驗(yàn)證。(3)在實(shí)際工作中對質(zhì)控品我們會采取雙人雙核對重復(fù)檢測，對可疑標(biāo)本甚至?xí)M(jìn)行反復(fù)檢測，而日常工作則不會如此操作。(4)交叉配血實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，會直接關(guān)系到輸血安全，應(yīng)給予高度重視，提高專業(yè)人員的技術(shù)水平，完善儀器和試劑配備，以保證臨床輸血安全有效。(5)為避免人為的實(shí)驗(yàn)誤差，應(yīng)采用先進(jìn)的自動化檢驗(yàn)設(shè)備與方法來提高檢測的準(zhǔn)確性，如采用分子生物學(xué)方法和實(shí)驗(yàn)技術(shù)，對疑難血型開展室內(nèi)質(zhì)控和復(fù)核檢測[7]。對實(shí)驗(yàn)室的錯誤行為進(jìn)行調(diào)查并追蹤改正結(jié)果，做好評估。

綜上所述，積極參加血型參比實(shí)驗(yàn)室室間質(zhì)量評價活動，有助于發(fā)現(xiàn)在臨床輸血前的檢驗(yàn)中容易忽視的問題，使工作規(guī)范化和標(biāo)準(zhǔn)化，使臨床輸血更加安全、有效。

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