陳立松，周芹

(阜寧縣溝墩醫(yī)院檢驗科，江蘇 阜寧 224433)

血液分析儀廣泛運用在各級醫(yī)院的臨床檢驗中，伴隨著工作量的增加，同一實驗室同時使用不同品牌或同一品牌不同型號的血液分析儀的現(xiàn)象已很普遍。由于不同型號的血液分析儀因檢測方法和檢測原理不盡相同，對同一標(biāo)本的測定結(jié)果必然存在著系統(tǒng)誤差[1]，所以關(guān)注檢驗結(jié)果的溯源性和可比性，提高血細(xì)胞分析系統(tǒng)的可比性非常重要[2]。我們自2008年以來試用新鮮抗凝全血在兩臺血液分析儀之間進(jìn)行結(jié)果比對，經(jīng)過幾年的改進(jìn)和完善，現(xiàn)已形成了一套較為規(guī)范的科內(nèi)血液分析儀比對操作程序，取得了較為滿意的臨床效果。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1 .1儀器與試劑 血液分析儀2臺，分別為Sysmex XS-800i(日本希森美康公司)和BC-5300(深圳邁瑞公司)。所用試劑均為儀器配套試劑。

1.1 .2校準(zhǔn)品和質(zhì)控物 儀器均使用各自配套的校準(zhǔn)品和質(zhì)控物。

1.1 .3比對物 EDTA-K2抗凝的新鮮全血。為了避免抗凝劑、溫度等各方面的影響[3，4]，每次所有標(biāo)本的檢測均在2h內(nèi)完成。

1.2 方法

1.2 .1比對前的儀器準(zhǔn)備 為保證結(jié)果的準(zhǔn)確性和重復(fù)性，要求室溫20～250C，濕度小于80%。試驗前每臺血液分析儀進(jìn)行日保養(yǎng)，以去除管道中殘留的血液、吸附的蛋白纖維等，確保管路通暢和清潔，然后做空白計數(shù)和攜帶污染率測定，本底和攜帶污染率必須符合要求。

1.2 .2精密度測定 取新鮮抗凝全血2份，分別在兩臺儀器上重復(fù)檢測11次，計算第2~11次結(jié)果的白細(xì)胞、紅細(xì)胞、血紅蛋白、平均紅細(xì)胞體積和血小板的均值(x)、標(biāo)準(zhǔn)差(s)及變異系數(shù)(CV%)。

1.2 .3參比儀器的確定與校準(zhǔn) 我們以多年參加室間質(zhì)評且成績優(yōu)秀的Sysmex XS-800i血液分析儀作為參比儀器，并用配套的校準(zhǔn)品進(jìn)行校準(zhǔn)。

1.2 .4比對方法 取5份新鮮抗凝全血標(biāo)本(低值1份，正常參考范圍內(nèi)2份，較高1份，高值1份)，按照儀器的操作規(guī)程在試驗儀器和參比儀器上平行測定，每份標(biāo)本測定兩次(順序1,2,3,4,5,5,4,3,2,1)，結(jié)果取兩次的均值，第二天以同樣的方式再測5份標(biāo)本，計算10份標(biāo)本在試驗儀器和參比儀器上各參數(shù)測定結(jié)果的平均相對偏差。相對偏差=(試驗儀器測定值-參比儀器測定值)/參比儀器測定值。

1.2 .5統(tǒng)計學(xué)處理 依據(jù)實驗結(jié)果求出回歸方程，分析試驗儀器和參比儀器的相關(guān)性。

1.2 .6評價標(biāo)準(zhǔn) 儀器精密度評價參照美國臨床實驗室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(CLSI)實驗室改進(jìn)修正案(CLIA’88)規(guī)定的室間質(zhì)量評價標(biāo)準(zhǔn)允許誤差的1/4作為判定規(guī)則，即CV值滿足：WBC≤3.75%、RBC≤1.5%、Hb≤1.75%、MCV≤1.5%、PLT≤6.25%；儀器比對的相關(guān)系數(shù)參照ICSH和NCCLS制定的標(biāo)準(zhǔn)作為判定規(guī)則：r>0.95；不同血液分析儀之間各指標(biāo)的評價依據(jù)CLIA，88規(guī)定的允許誤差的1/2作為判定規(guī)則：采用 WBC≤±7.5%、RBC≤±3.0%、Hb≤±3.5%、MCV≤±3.0%、PLT≤±12.5%。

1.2 .7試驗儀器的調(diào)整 如果試驗儀器和參比儀器參數(shù)的相關(guān)系數(shù)或平均相對偏差超過質(zhì)量控制范圍，需要對試驗儀器進(jìn)行校準(zhǔn)。(1)采集同一健康人新鮮抗凝血2份，分別在參比儀器和試驗儀器上連續(xù)測定11次，計算2~11次各參數(shù)測定結(jié)果的均值，并以參比儀器的結(jié)果作為試驗儀器各參數(shù)的靶值。(2)調(diào)整系數(shù)=靶值/測定值×原系數(shù)。如果靶值/測定值大于1.1或小于0.9，需工程師進(jìn)行儀器維護(hù)或維修。(3)系數(shù)調(diào)整后應(yīng)重新做比對試驗，保證質(zhì)量控制指標(biāo)在允許范圍之內(nèi)。

2 結(jié)果

2.1 兩臺儀器的精密度測定結(jié)果 見表1。

表1 儀器精密度測試的變異系數(shù)(CV%)

2.2 兩臺儀器相關(guān)性及平均相對偏差 見表2。

表2 實驗儀器與參比儀器相關(guān)性比較及平均相對偏差(%)

3 討論

血液分析儀比對結(jié)果的評價應(yīng)包括儀器的日保養(yǎng)、空白計數(shù)、攜帶污染率、準(zhǔn)確度和精密度、可測定范圍以及比對期間室內(nèi)質(zhì)量控制的監(jiān)測等，在保證儀器運行正常的情況下,綜合評價各儀器質(zhì)量控制指標(biāo)，對質(zhì)量指標(biāo)超過控制范圍,應(yīng)查找原因,必要時對儀器進(jìn)行檢修或校準(zhǔn)，特別是參比儀器應(yīng)溯源至國際標(biāo)準(zhǔn)或使用溯源至國際標(biāo)準(zhǔn)的二級標(biāo)準(zhǔn)檢測系統(tǒng)[5]。從表1可以看出,在儀器的本底及攜帶污染率均符合要求的前提下，兩臺儀器測定的WBC、RBC、Hb、HCT和PLT的精密度均在CLIA’88規(guī)定的1/4允許誤差的可接受范圍內(nèi),最大CV值為BC-5300的PLT 3.48%,各儀器測定結(jié)果的重復(fù)性好，具備儀器比對的前提條件。從儀器角度分析XS-800i的精密度稍好于BC-5300。

實驗方面，我們采用不同水平的全血標(biāo)本、連續(xù)兩天的均值作為靶值進(jìn)行比對，增加試驗的客觀性。表2的結(jié)果顯示，本次比對(2013.09.21-22)試驗儀器的各項參數(shù)與參比儀器具有良好的相關(guān)性，r值均>0.98,各參數(shù)與參比儀器的平均相對偏差均在CLIA’88規(guī)定允許誤差的1/2范圍內(nèi)，最高為PLT 3.60%。試驗儀器與參比儀器檢測結(jié)果的相對偏差在允許范圍內(nèi)，各參數(shù)的系數(shù)無需調(diào)整。綜合以上結(jié)果還可以發(fā)現(xiàn)，血小板計數(shù)結(jié)果在兩臺儀器上的差異較大,這是由于血小板在自動化分析過程中可能受多種因素的影響所致。日本臨床實驗室標(biāo)準(zhǔn)化委員會 (JCCLS)規(guī)定不同血液分析儀血小板測定的最大誤差為10%,這也從另一側(cè)面說明不同血液分析儀在保證血小板測定結(jié)果的一致性具有一定難度。隨著新技術(shù)原理的血液分析儀相繼問世，此問題會有良好的解決辦法。

血液分析儀檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性直接影響患者疾病的診斷和療效監(jiān)測，不同檢測系統(tǒng)對同一份標(biāo)本的同一項目的檢測結(jié)果應(yīng)具有溯源性和可比性[6]，而不同的血液分析儀不可避免的均存在系統(tǒng)誤差，因此，同一實驗室同時使用多臺血液分析儀，除了有完整的質(zhì)量控制體系，還應(yīng)定期用可溯源的血液檢測系統(tǒng)對其他儀器進(jìn)行比對，保證不同檢測系統(tǒng)間結(jié)果的準(zhǔn)確性和一致性[7]。新鮮抗凝全血為儀器間的比對提供了簡便可行的途徑，特別是小型實驗室更可以用周邊大型實驗室“定值”的新鮮抗凝全血校準(zhǔn)或比對儀器，既方便又經(jīng)濟(jì)，也有利于實現(xiàn)溯源標(biāo)準(zhǔn)的傳遞以及不同級別實驗室之間結(jié)果互認(rèn)。

[1]彭文紅,蘭曉梅,王海,等.不同血細(xì)胞分析儀多水平比對試驗方案的建立和應(yīng)用[J].軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院學(xué)報,2010,31(12):1224-1226.

[2]胡綠蔭,楊冀,吳文娟.兩種血細(xì)胞分析系統(tǒng)檢測結(jié)果的可比性研究[J].現(xiàn)代檢驗醫(yī)學(xué)雜志,2011,26(5):115-118.

[3]肖木洲,鄭惠紅,梁淑慧,等.靜脈血標(biāo)本靜置時間對血細(xì)胞分析儀測定結(jié)果的影響[J].實用醫(yī)學(xué)雜志,2006,22(15):1822-1823.

[4]陳黔,唐斌,沈毅,等.對BC-3000plus全自動血液分析儀測定結(jié)果的影響因素分析和對策[J].醫(yī)療衛(wèi)生裝備,2010,31(11):111-112.

[5]彭明婷,申子瑜.血細(xì)胞分析溯源體系的建立及有關(guān)問題的探討[J].中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志,2004,27(3):132-133.

[6]黃永富,曹興建.三個不同血細(xì)胞分析檢測系統(tǒng)間檢驗結(jié)果的偏差評估與比對性研究[J].現(xiàn)代檢驗醫(yī)學(xué)雜志,2012,27(6):86-94.

[7]武錦彪,陳曉玲,任春云,等.多臺血液分析儀檢測結(jié)果一致性比較[J].實驗與檢驗醫(yī)學(xué),2013,31(1):27-30.