賀洪軍+王黎明+鄭小玲
摘要:目的 回顧本實(shí)驗(yàn)室開(kāi)展抗核抗體(antinuclear antibody、ANA)和抗核抗體譜檢測(cè)技術(shù)的情況,探討該項(xiàng)技術(shù)在安岳地區(qū)的實(shí)用性,并分析其臨床應(yīng)用價(jià)值。方法 間接熒光法檢測(cè)ANA,免疫印跡法檢測(cè)ANA譜。結(jié)果 1330例臨床標(biāo)本中,ANA陽(yáng)性的標(biāo)本數(shù)為503例,陽(yáng)性率為37.8%(503/1330),熒光模式主要以顆粒型、均質(zhì)型、核仁型為主,同時(shí)對(duì)503例ANA陽(yáng)性標(biāo)本行抗核抗體譜檢測(cè),其陽(yáng)性標(biāo)本數(shù)為241例,陽(yáng)性率為47.9%(241/503),ANA譜在自身免疫性疾病(AID)中陽(yáng)性率高,多數(shù)為抗體一項(xiàng)或兩項(xiàng)共同出現(xiàn)陽(yáng)性,陽(yáng)性抗體較多的是抗SS-A、抗Sm、抗Nucleosomes、抗U1-SnRNP、抗SS-B等,聯(lián)合檢測(cè)對(duì)自身免疫性疾病(AID)診斷具有重要意義。結(jié)論 抗核抗體與抗核抗體譜聯(lián)合檢測(cè)有利于自身免疫性疾?。ˋID)的篩查和鑒別診斷,該檢測(cè)技術(shù)實(shí)用性強(qiáng),值得推廣應(yīng)用。
關(guān)鍵詞:抗核抗體;抗核抗體譜;自身免疫性疾病
近年來(lái),隨著臨床對(duì)自身免疫性疾病的不斷深入研究,抗核抗體和抗核抗體譜的檢測(cè)越來(lái)越受到臨床重視,自身免疫性疾病是抗體的自身免疫應(yīng)答失控,免疫功能紊亂,反應(yīng)過(guò)度造成機(jī)體的正常結(jié)構(gòu)被相應(yīng)的抗體作用后引起多系統(tǒng)器質(zhì)性疾病及功能障礙??购丝贵w(ANA)是一組針對(duì)細(xì)胞核內(nèi)的DNA、RNA、蛋白或這些物質(zhì)的分子復(fù)合物的自身抗體,是以真核細(xì)胞的核成分為靶抗原的自身抗體的總稱(chēng),可用于多種自身免疫性疾病的篩查,隨著免疫學(xué)的發(fā)展,抗核抗體(ANA)和抗核抗體譜的檢測(cè)也應(yīng)用于臨床,成為了自身免疫性疾病的診斷與療效觀(guān)察必不可少的實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)[1],本文對(duì)科室開(kāi)展此項(xiàng)檢測(cè)技術(shù)的1330例標(biāo)本進(jìn)行回顧性分析,并探討聯(lián)合檢測(cè)抗核抗體(ANA)和抗核抗體(ANA)譜技術(shù)在該地區(qū)開(kāi)展的意義,并分析其臨床應(yīng)用價(jià)值。
1 資料與方法
1.1一般資料 1330病例來(lái)自我院2013年1月~2014年7月門(mén)診及住院患者(其中自身免疫性疾病外院及本院確診者153例,系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)49例,干燥綜合征(SS)27例,肌炎/皮肌炎(PM/DM)12例,混合性結(jié)締組織?。∕CTD)8例,系統(tǒng)性硬皮?。≒SS)5例,類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(RA)42例,強(qiáng)直性脊柱炎(AS)3例,過(guò)敏性紫癜(AP)7例),所有患者均空腹采血3ml,2h內(nèi)分離血清備用。
1.2方法 抗核抗體(ANA)檢測(cè)試劑由德國(guó)歐蒙公司提供,抗核抗體(ANA)譜檢測(cè)試劑由深圳亞輝龍生物科技有限公司提供,抗核抗體(ANA)譜的項(xiàng)目包括:抗雙鏈DNA抗體(ds-DNA)、抗核小體抗體(Nucleosome)、抗組蛋白抗體(Histone)、抗史密斯抗體(Sm)、抗核糖體P蛋白抗體(Ribosomalp)、抗干燥綜合征抗原A抗體(SS-A/R)、抗干燥綜合征抗原B抗體(SS-B)、抗著絲點(diǎn)B蛋白抗體(CENP B)、抗硬皮病70抗體(SCL-70)、抗核糖體蛋白抗體(U1-SnRNP)、抗組氨酰tRNA合成酶抗體(J0-1)。抗核抗體(ANA)和抗雙鏈DNA抗體(ds-DNA)采用間接免疫熒光(IIF)法、抗核抗體(ANA)以抗體滴度大于1:100為陽(yáng)性;抗核抗體(ANA)譜采用免疫印跡法,熒光顯微鏡為重慶江南光學(xué)儀器設(shè)備廠(chǎng)的XSZ-HS7。
2 結(jié)果
2.11330例標(biāo)本中,抗核抗體(ANA)陽(yáng)性數(shù)為503例,陽(yáng)性率為37.8%(503/1330),在該類(lèi)標(biāo)本中熒光模型最多的是顆粒型、其次是均質(zhì)型,見(jiàn)表1。
2.2503例抗核抗體(ANA)陽(yáng)性中,抗核抗體(ANA)譜陽(yáng)性數(shù)為241例,陽(yáng)性率為47.9%(241/503),在該類(lèi)標(biāo)本中,抗體陽(yáng)性多呈現(xiàn)一聯(lián)或二聯(lián)為主,與之相應(yīng)的熒光核型結(jié)果分布情況,見(jiàn)表2。
2.3在自身免疫性疾病中,抗核抗體(ANA)陽(yáng)性率與熒光核型分布情況,見(jiàn)表3,在該類(lèi)疾病中,抗核抗體(ANA)陽(yáng)性率高。
3 討論
抗核抗體(ANA)是以哺乳動(dòng)物的細(xì)胞核成分為靶抗原的自身抗體總稱(chēng),是自身免疫性疾病重要的血清學(xué)指標(biāo)[2],不同的自身免疫性疾病可產(chǎn)生不同的ANA抗體譜。在本文實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,研究結(jié)果顯示,ANA陽(yáng)性率為37.8%(503/1330),與文獻(xiàn)報(bào)道的39.9%相近[3],表明用間接熒光法開(kāi)展ANA的檢測(cè)對(duì)該地區(qū)的自身免疫性疾病有重要篩查意義。
本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示出不同熒光核型的ANA與ANA譜抗體之間的關(guān)系有各自的特點(diǎn),241例ANA譜陽(yáng)性標(biāo)本中56.8%是顆粒型,主要與抗SS-A/R0、抗Sm、抗Nucleosomes、抗U1-SnRNP有關(guān);25.7%是均質(zhì)型,主要與抗ds-DNA、抗J0-1、抗SS-A/R0、抗Sm有關(guān);12.0%是核仁型,主要與抗SS-A/R0、抗U1-SnRNP有關(guān);混合型/其它無(wú)顯著的差別。雖然ANA和ANA譜抗體之間有一定的關(guān)系,但從表2中不難發(fā)現(xiàn),不同的自身抗體可以呈現(xiàn)相同的熒光核型,同一種自身抗體可出現(xiàn)不同的熒光模型,它們之間沒(méi)有絕對(duì)的規(guī)律可循,不能簡(jiǎn)單地通過(guò)熒光核型來(lái)分析判斷相應(yīng)的抗體類(lèi)型,必須用間接熒光法篩查ANA,并聯(lián)合ANA譜,才能大致確定ANA靶抗原的類(lèi)型,從而有效提高對(duì)相應(yīng)疾病的診斷與鑒別診斷。
在確診的153例自身免疫性疾病中,ANA陽(yáng)性率較高,反之,如果ANA或ANA譜出現(xiàn)陽(yáng)性,從表3中顯示,應(yīng)該高度疑似自身免疫性疾病。ANA或ANA譜檢測(cè)技術(shù)目前已在大醫(yī)院廣泛用于自身免疫性疾病的診斷和療效觀(guān)察。ANA無(wú)種屬和器官特異性,在不同的自身免疫性疾?。ˋID)中可出現(xiàn)不同的組合,因此,ANA檢測(cè)在臨床診斷與鑒別診斷中極為重要的實(shí)驗(yàn),它對(duì)明確自身免疫性疾?。ˋID)診斷、臨床分型、病情觀(guān)察、治療評(píng)價(jià)都具有重要意義[3]。
ANA或ANA譜檢測(cè)技術(shù)在安岳地區(qū)的開(kāi)展,有力地為臨床提供了實(shí)驗(yàn)室依據(jù),填補(bǔ)了該地區(qū)自身免疫性疾病實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)的空白,首次該地區(qū)自身免疫性疾病的診斷提供了特異性的檢測(cè)方法,使臨床上許多疑難癥得以明確。自身免疫性疾病患者能夠得到及時(shí)的診斷和治療,為他們帶來(lái)福音,同時(shí)還大大推動(dòng)了該地區(qū)風(fēng)濕病事業(yè)的發(fā)展,使該地區(qū)自身免疫性疾病的診治水平躍上一個(gè)新的臺(tái)階與國(guó)內(nèi)接軌。更重要的是,為進(jìn)一步攻克自身免疫性疾病的診治奠定了堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ),也標(biāo)志著我院風(fēng)濕病的診治水平又上新臺(tái)階。實(shí)踐了衛(wèi)計(jì)委的"小病不出村、大病不出縣、疑難病才上大醫(yī)院"的醫(yī)政方針,同時(shí)為病員節(jié)約了費(fèi)用,減輕了經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。該技術(shù)設(shè)備簡(jiǎn)單、故障率低、操作技術(shù)難度不太強(qiáng)。目前,在縣級(jí)醫(yī)院開(kāi)展的科室不多,希望通過(guò)本文的研究,能為基層醫(yī)院領(lǐng)導(dǎo)或同行提供借鑒,共同把該項(xiàng)技術(shù)開(kāi)展起來(lái),踐行我們衛(wèi)生系統(tǒng)的"三好一滿(mǎn)意"。
綜上所述,開(kāi)展ANA或ANA譜聯(lián)合檢測(cè)技術(shù),不但利于患者,更加有利于臨床診斷,而且對(duì)疾病的分型、療效評(píng)估上具有較高的應(yīng)用價(jià)值,值得推廣。
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編輯/成森