王文哲
凝血檢驗(yàn)項(xiàng)目的影響因素分析及對(duì)策
王文哲
目的 研究并探討各種因素對(duì)凝血檢驗(yàn)項(xiàng)目的影響, 并做出分析與對(duì)策, 使臨床檢驗(yàn)的準(zhǔn)確性大幅度的提高。方法 選取200例來本院參加體檢的學(xué)生, 抽取他們的血液作為血液檢測(cè)樣本, 在不同的放置時(shí)間和離心時(shí)間以及是否溶血等環(huán)境下進(jìn)行活化部分凝血活酶時(shí)間(APTT)、凝血酶時(shí)間(TT)、凝血酶原時(shí)間(PT)和纖維蛋白原(Fib)等的檢驗(yàn)。結(jié)果 APTT、Fib 及 TT值因標(biāo)本放置時(shí)間的不同而存在差異, PT值不受標(biāo)本放置時(shí)間的影響;PT、APTT 值在一定程度上受離心時(shí)間的影響, TT及Fib值不受離心時(shí)間的影響。結(jié)論 在臨床凝血檢驗(yàn)時(shí), 標(biāo)本放置的時(shí)間和離心時(shí)間影響檢驗(yàn)結(jié)果, 因此患者的血液標(biāo)本應(yīng)當(dāng)即采即檢, 并且在離心的過程中要把握好離心的時(shí)間與轉(zhuǎn)速, 防止出現(xiàn)溶血現(xiàn)象。
凝血檢驗(yàn);標(biāo)本;放置時(shí)間;影響因素
隨著現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)的發(fā)展, 尤其在醫(yī)學(xué)技術(shù)的發(fā)展上(如免疫學(xué)、生物學(xué)技術(shù)以及生物化學(xué)), 并且伴隨著各種精密儀器的使用(如高精度的凝血分析儀), 臨床應(yīng)用時(shí), 血液分析結(jié)果的準(zhǔn)確性與實(shí)際結(jié)果的符合程度對(duì)患者有著重要的意義, 并且作為一種輔助指標(biāo)被廣泛的應(yīng)用于臨床診斷中[1]。凝血檢驗(yàn)的項(xiàng)目逐年增多, 其中常見的項(xiàng)目有APTT、TT、PT、Fib等, 相應(yīng)的, 在臨床診斷時(shí), 對(duì)于這些項(xiàng)目的檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性與精確度有著更加嚴(yán)格的要求, 而且各方面的因素均會(huì)對(duì)PT、APTT、TT、Fib的結(jié)果產(chǎn)生影響[2]。在不同的影響因素下, 隨機(jī)抽取200例本院體檢人員的血液進(jìn)行凝血檢測(cè)實(shí)驗(yàn)和分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果, 并且對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果作如下報(bào)告。
1.1 一般資料 從2014年7~10月來本院抽血體檢學(xué)生的血液樣本中隨機(jī)抽取200例, 所有的血液樣本均是健康的血液樣本, 并且是在學(xué)生空腹且心情放松的狀態(tài)下抽取的靜脈血。學(xué)生的年齡19~22歲、性別不限、身高150~175 cm、體重35~65 kg。
1.2 方法
1.2. 1 檢測(cè)儀器 應(yīng)用Sysmex CA-1500全自動(dòng)血凝儀, 檢測(cè)試劑和質(zhì)控用品均應(yīng)用配套產(chǎn)品[3]。DT5-3型低速自動(dòng)平衡離心機(jī)(北京時(shí)代北利離心機(jī)公司)。
1.2. 2 檢測(cè)方法 應(yīng)使用一次性的真空采集管對(duì)血液進(jìn)行采集, 并且將血液標(biāo)本均分為每管2.7 ml, 與規(guī)格為0.109 mmol/L的枸櫞酸鈉抗凝劑混合(按照9:1的比例)[4], 按照影響因素的不同, 對(duì)標(biāo)本做出相應(yīng)的處理, 并且做好標(biāo)記, 然后進(jìn)行凝血檢驗(yàn)項(xiàng)目的檢測(cè)。PT的正常值為12~16 s, APTT的正常值為24~36 s, TT的正常值為11~18 s, Fib的正常值為2~4 g/L。
1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示, 采用t檢驗(yàn)。P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2.1 標(biāo)本放置的時(shí)間對(duì)凝血檢測(cè)項(xiàng)目的影響 APTT、Fib及 TT值因標(biāo)本放置時(shí)間的不同差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05), PT值不受標(biāo)本放置時(shí)間的影響, 差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1。
2.2 離心時(shí)間對(duì)凝血檢驗(yàn)項(xiàng)目的影響 用3000 r/min的離心機(jī)對(duì)標(biāo)本進(jìn)行離心, 離心5 min與離心10、20 min進(jìn)行比較, PT 與APTT值顯著增高, 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05), 但是對(duì)TT與Fib值沒有影響, 差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表2。
2.3 溶血現(xiàn)象對(duì)凝血檢驗(yàn)項(xiàng)目的影響 將標(biāo)本放在冷藏柜中-40℃保存30 min, 取出后速溶, 并且溶血的標(biāo)準(zhǔn)為血清中血紅蛋白濃度達(dá)4 g/L。將標(biāo)本溶血前后的數(shù)值進(jìn)行比較, 可得出溶血前PT、APTT、Fib的數(shù)值明顯低于溶血后, TT的值高于溶血后, 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表3。
表1 200例標(biāo)本放置時(shí)間的影響比較±s)
表1 200例標(biāo)本放置時(shí)間的影響比較±s)
注:不同放置時(shí)間APTT、Fib 及TT值比較, P<0.05
放置時(shí)間PT(s)APTT(s)TT(s)Fib(g/L) 1 h13.25±2.1927.32±1.2517.58±2.323.15±0.61 3 h14.20±2.0229.21±1.3015.88±2.192.78±0.83 5 h13.56±2.1831.45±1.7514.21±2.052.70±0.71
表2 200例標(biāo)本離心時(shí)間的影響比較±s)
表2 200例標(biāo)本離心時(shí)間的影響比較±s)
注:離心5 min與離心10、20 min比較,aP<0.05,bP>0.05
離心時(shí)間PT(s)APTT(s)TT(s)Fib(g/L) 5 min 13.45±1.7625.35±3.7513.87±2.683.88±1.12 10 min 15.19±2.25a26.62±4.21a15.25±2.52b3.52±1.72b20 min 14.32±2.32a28.56±4.66a15.15±2.74b3.48±1.35b
表3 200例標(biāo)本溶血現(xiàn)象的影響結(jié)果比較(±s)
表3 200例標(biāo)本溶血現(xiàn)象的影響結(jié)果比較(±s)
注:與溶血前比較,aP<0.05
溶血情況PT(s)APTT(s)TT(s)Fib(g/L)溶血前13.21±2.3525.23±1.6815.25±2.993.41±0.78溶血后 15.35±2.42a31.21±1.87a11.58±2.54a3.89±0.68a
本研究表明, 標(biāo)本放置時(shí)間、離心時(shí)間以及溶血現(xiàn)象對(duì)PT、APTT、TT、Fib 等凝血檢測(cè)項(xiàng)目都有不容忽視的影響。目前, 臨床上廣泛采用全自動(dòng)的血凝儀, 但是其檢測(cè)結(jié)果存在很大的差異。為保證臨床檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性, 排外檢驗(yàn)師的技術(shù)、患者的生理狀態(tài)等因素的影響, 結(jié)合本實(shí)驗(yàn)結(jié)果可從以下幾個(gè)方面入手。
3. 1 標(biāo)本的存放 血標(biāo)本最好是在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)采血, 嚴(yán)防劇烈震動(dòng)、日光直射和進(jìn)入異物。需在室溫下保存, 低溫會(huì)損傷血小板, 使Ⅴ、Ⅺ因子活化, 造成APTT和TT縮短。全血貯存在4~10℃ 不超過2 h, 最好在1 h內(nèi)分離血漿。
3. 2 標(biāo)本的離心 富含血小板血漿須在室溫20~25℃下, 以200~400 g離心10 min;我國(guó)采用800 r/min, 離心15 min。在室溫22~24℃ 下, 富含血小板血漿可存放2 h。大多數(shù)凝血試驗(yàn)采用缺乏血小板血漿應(yīng)以 1000 g以上離心 20 min;我國(guó)采用2000~2500 r/min, 離心30 min, 以去除全血中的血小板第3因子、血小板第4因子和某些凝血因子。缺乏血小板血漿在室溫22~24℃下可存放2 h, 在2~4℃可存放4 h, 在-20℃可存放2周, 在-70℃可存放6個(gè)月。
3. 3 溶血情況的預(yù)防 標(biāo)本采集與離心的過程中, 要避免出現(xiàn)溶血的情況。如果在檢測(cè)前發(fā)現(xiàn)標(biāo)本中出現(xiàn)溶血、血塊應(yīng)該停止檢測(cè), 重新采集血液標(biāo)本[5]。
本次的研究表明, 凝血檢驗(yàn)項(xiàng)目的影響因素很多, 作者通過實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)標(biāo)本放置的時(shí)間和離心時(shí)間對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果有明顯影響, 臨床中檢驗(yàn)人員嚴(yán)格把握相關(guān)時(shí)間的合適程度, 將極大地提高檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性, 進(jìn)而為臨床患者身體狀況提供更準(zhǔn)確的判斷。
[1] 閏朝春, 安仲武, 薄維波.氯化鈣對(duì)活化部分凝血活酶時(shí)間測(cè)定的影響.國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志, 2001, 32(16):1870-1872.
[2] 陳國(guó), 梁榮偉.對(duì)比實(shí)驗(yàn)分析凝血四項(xiàng)檢測(cè)的影響因素.國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志, 2012, 43(19):1033-1034.
[3] 林誠(chéng), 唐艷平, 劉漢欣, 等.凝血功能試驗(yàn)的全程質(zhì)量控制.中國(guó)熱帶醫(yī)學(xué), 2010, 10(12):1470-1471.
[4] 崔海, 崔紅花.血標(biāo)本的分析前質(zhì)量控制對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的影響因素.中國(guó)醫(yī)學(xué)創(chuàng)新, 2009, 6(34):413-414.
[5] 安翠, 王健.研究凝血檢驗(yàn)項(xiàng)目的影響因素及對(duì)策.中國(guó)繼續(xù)醫(yī)學(xué)教育, 2013, 5(1):25-26.
10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.34.028
2015-06-18]
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