徐力　劉晶

【摘 要】目的：探討血清高遷移率族蛋白1在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎治療監(jiān)測和對類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎相關(guān)性肺間質(zhì)病變早期診斷的臨床價值。方法：搜集已確診的類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者（緩解期25例，活動期56例）血液

標(biāo)本，測定血清高遷移率族蛋白1水平，并對紅細(xì)胞沉降率、C-反應(yīng)蛋白和類風(fēng)濕因子進(jìn)行同步檢測，同期健康體檢者25例作為正常對照組。結(jié)果：活動期患者各檢測指標(biāo)水平高于緩解期，緩解期高于正常對照組。類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者高遷移率族蛋白1水平與紅細(xì)胞沉降率、C-反應(yīng)蛋白、類風(fēng)濕因子呈正相關(guān)

（P < 0.01）?；顒悠诘膯渭冾愶L(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者與類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎相關(guān)性肺間質(zhì)病變患者高遷移率族蛋白1水平比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05）。結(jié)論：血清高遷移率族蛋白1在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者表達(dá)升高，并與病情活動度有一定相關(guān)性，在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎相關(guān)性肺間質(zhì)病變早期診斷方面具有臨床研究價值。

【關(guān)鍵詞】 關(guān)節(jié)炎，類風(fēng)濕；高遷移率族蛋白1；疾病活動度；肺間質(zhì)病變；血清

doi：10.3969/j.issn.2095-4174.2015.04.002

Significance of HMGB1 in the Evaluation of Disease Activity of Rheumatoid Arthritis

and Its Relationship with RA-ILD

XU Li，LIU Jing

【ABSTRACT】Objective：To investigate the clinical value of high mobility group box 1 protein in monitoring rheumatoid arthritis during treatment and the early diagnosis of rheumatoid arthritis-related interstitial lung disease.Methods：Blood samples of diagnosed patients with rheumatoid arthritis（25 cases of remission，

56 cases in active stage）were collected to determinate the level of high mobility group box 1 protein，C-reactive protein and rheumatoid factor.The healthy examinees 25 cases in the same period were treated as ones in the normal control group.Results：All the index levels in patients at active stage were higher than those in patients at the remission stage，and these levels in patients at the remission stage were higher than those in patients of the normal control group.The level of high mobility group box 1 protein in patients with rheumatoid arthritis had a positive correlation with erythrocyte sedimentation rate，C-reactive protein and rheumatoid factor（P < 0.01）.The difference of high mobility group box 1 protein between active-stage patients of rheumatoid arthritis and patients with interstitial lung disease associated with rheumatoid arthritis was statistically significant（P < 0.05）.Conclusion：The increase of high mobility group box 1 protein expression in patients with rheumatoid arthritis has a certain degree of correlation with disease activity，with clinical research value in the early diagnosis of interstitial lung disease.

【Keywords】 arthritis，rheumatoid；high mobility group box 1 protein；disease activity；interstitial lung disease；serum

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（rheumatoid arthritis，RA）是一種以多關(guān)節(jié)炎癥為主要表現(xiàn)的慢性系統(tǒng)性自身免疫性疾病，大量細(xì)胞因子在RA疾病進(jìn)展中發(fā)揮重要作用。高遷移率族蛋白1（high mobility group box 1 protein，HMGB1）是一種新型晚期炎癥因子，廣泛分布于各個組織器官，在RA發(fā)生、發(fā)展中的作用備受關(guān)注[1-3]。HMGB1在RA患者血清中的表達(dá)水平及其與疾病活動度的關(guān)系研究目前尚無統(tǒng)一結(jié)論。HMGB1在肺、腎等多種組織器官的纖維化中作用重大[4]。肺間質(zhì)病變（interstitial lung disease，ILD）是RA常見并發(fā)癥，其引起的呼吸衰竭成為患者直接或間接死因，目前尚缺乏便捷、有效的早期診斷血清學(xué)指標(biāo)。本研究通過探討血清HMGB1在RA患者表達(dá)水平及其與C-反應(yīng)蛋白（CRP）、紅細(xì)胞沉降率（ESR）和類風(fēng)濕因子（RF）的相關(guān)性，以評估血清HMGB1在RA治療監(jiān)測以及RA-ILD早期診斷的臨床價值。

1 臨床資料

1.1 一般資料 選取2013年1月至2014年7月在本院就診的RA患者81例作為觀察組，根據(jù)RA疾病活動度評分（DAS28）將81例患者分為活動期組56例和緩解期組25例。活動期組男18例，女

38例；年齡22～74歲，平均（49.1±8.7）歲；病程3～90個月，平均（24.2±13.7）個月；DAS28評分3.5～7.1分，平均（5.7±1.1）分；單純RA患者41例，RA-ILD患者15例。緩解期組男7例，女18例；年齡23～68歲，平均（47.8±15.2）歲；

病程6～84個月，平均（28.7±18.6）個月；DAS28評分0.5～3.1分，平均（1.9±1.2）分。另選取無自身免疫性疾病史的健康體檢者25例作為正常對照組，男8例，女17例；年齡21～71歲，平均（41.3±13.2）歲。各組在性別、年齡等方面比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P > 0.05），具有可比性。

1.2 診斷標(biāo)準(zhǔn) 參照2009年美國風(fēng)濕病學(xué)會（ACR）修訂的RA診斷標(biāo)準(zhǔn)。RA-ILD患者診斷參照2000年美國胸科協(xié)會/歐洲呼吸協(xié)會（ATS/ERS）提出的特發(fā)性肺纖維化（idiopathic pulmonary fibrosis，IPF）診斷標(biāo)準(zhǔn)。

1.3 納入標(biāo)準(zhǔn) ①符合上述診斷標(biāo)準(zhǔn)；②年齡18～75歲；③患者知情并簽署同意書。

1.4 排除標(biāo)準(zhǔn) ①肺結(jié)核或結(jié)核感染者；②有慢性支氣管炎、肺氣腫、支氣管哮喘、支氣管擴(kuò)張等呼吸系統(tǒng)疾病者；③有結(jié)節(jié)病、肺部腫瘤患者；

④藥物、遺傳、感染因素引起的肺間質(zhì)病變者。

2 方 法

2.1 實驗室檢查方法 使用酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）檢測血清HMGB1水平，速率散射免疫比濁法檢測血清CRP和RF，并用自動血沉儀檢測ESR。

2.2 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析。計量資料以表示，兩組比較采用獨(dú)立樣本t檢驗，相關(guān)性使用Pearson直線相關(guān)分析。以P < 0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

3 結(jié) 果

活動期組患者血清HMGB1水平高于正常對照組，較緩解期組患者明顯升高，組間比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.01），見表1。

RA患者血清HMGB1水平與CRP、RF、ESR等指標(biāo)呈正相關(guān)（分別為0.3732、0.2506、0.3335，

P < 0.01）。進(jìn)一步分析56例活動期組患者，其中15例RA-ILD患者血清HMGB1水平為（309.64±41.28） ng·mL-1，明顯高于41例單純RA患者（201.1±52.65） ng·mL-1和正常對照組（48.06±8.64） ng·mL-1（P < 0.01）?；顒悠诮MRA-ILD患者HMGB1水平與單純RA患者比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05）。

4 討 論

HMGB1是廣泛存在于真核細(xì)胞中的一種非組DNA結(jié)合蛋白，因其分子量小且在凝膠電泳時泳動遷移率很高而得名。胞內(nèi)的HMGB1參與了DNA的轉(zhuǎn)錄、復(fù)制、修復(fù)等重大生命活動[5]。胞外的HMGB1則發(fā)揮了強(qiáng)大的致炎作用，其不僅可由激活的固有免疫細(xì)胞主動分泌，也可由壞死細(xì)胞被動釋放。HMGB1本身還可誘導(dǎo)分泌炎癥介質(zhì)，從而加強(qiáng)自身分泌效應(yīng)，形成一個復(fù)雜的細(xì)胞因子分泌網(wǎng)絡(luò)。同時，胞外的HMGB1能夠通過與靶細(xì)胞表面的受體結(jié)合，活化細(xì)胞內(nèi)的信號傳導(dǎo)途徑，為免疫細(xì)胞提供損傷或壞死信號，介導(dǎo)細(xì)胞遷移分化與機(jī)體免疫反應(yīng)[6-7]。

RA是一種以滑膜炎和關(guān)節(jié)結(jié)構(gòu)破壞為主的自身免疫性疾病，組織病理學(xué)上多表現(xiàn)為炎癥細(xì)胞滲出、滑膜增生等。隨著研究的深入，HMGB1被證實為RA中有效的促炎介質(zhì)[2]。體外實驗表明，腫瘤壞死因子-α（TNF-α）和白細(xì)胞介素-1（IL-1）

等炎癥因子能刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞、單核/巨噬細(xì)胞釋放HMGB1。反之，這些細(xì)胞在HMGB1的刺激下也能釋放TNF-α等，從而維持慢性炎癥反應(yīng)。HMGB1較TNF-α和IL-1的作用窗口期更長[8]。目前，HMGB1在RA患者滑膜液中的高水平表達(dá)國內(nèi)外學(xué)者研究結(jié)果較為一致，而針對RA患者血清中該因子的含量及其與疾病活動度的關(guān)系尚存在爭議。本研究結(jié)果顯示，活動期組患者血清HMGB1水平均高于緩解期組和正常對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.01）。這與Goldstein等[8]研究報道RA患者血清HMGB1水平高于正常對照組一致。提示HMGB1在RA的發(fā)生和發(fā)展過程中發(fā)揮重要作用。RA疾病活動期常伴有ESR、CRP升高，因此，ESR、CRP通常用于對RA疾病活動的評估和判斷。同時作為傳統(tǒng)指標(biāo)，RF目前仍在RA診斷治療過程中普遍使用。因此，本研究將RA患者血清HMGB1水平與ESR、CRP、RF進(jìn)行了相關(guān)性分析，發(fā)現(xiàn)RA患者血清HMGB1水平與CRP、RF、ESR呈正相關(guān)。提示血清HMGB1與疾病活動度相關(guān)，有望成為RA治療監(jiān)測的新指標(biāo)。

雖然RA基本病理改變?yōu)榛さ难装Y反應(yīng)，但病變并非局限于關(guān)節(jié)，?？衫奂岸鄠€器官。肺有豐富的結(jié)締組織和血液供應(yīng)，是常見的受累臟器之一，可有ILD、類風(fēng)濕結(jié)節(jié)等表現(xiàn)[9]。RA患者中ILD的發(fā)病率約為10%[10]，嚴(yán)重影響RA患者的預(yù)后。有研究報道，RA患者診斷肺間質(zhì)病變后的中位生存期只有2.6年，死亡率與正常人相比提高了近13%[11]。早診斷、早治療對提高患者生存質(zhì)量，改善預(yù)后意義重大。目前，RA繼發(fā)ILD的發(fā)病機(jī)制尚不清楚，眾多細(xì)胞因子可能參與其中?，F(xiàn)有的針對IPF的研究中均發(fā)現(xiàn)了HMGB1的蹤跡[12]。研究發(fā)現(xiàn)，在IPF急性加劇后，HMGB1的表達(dá)量顯著增加[13]。作為鏈接反復(fù)炎癥損傷和異常修復(fù)閉式環(huán)路間的關(guān)鍵因子，HMGB1不僅是炎癥反應(yīng)的結(jié)果，還促成了慢性炎癥的進(jìn)一步遷徙，其可能參與了RA繼發(fā)ILD的過程。本研究對56例活

動期RA患者血清HMGB1水平進(jìn)行了分析，其中15例RA-ILD患者血清HMGB1水平明顯高于41例單純RA患者和25例正常對照者。HMGB1在RA-ILD患者的高水平表達(dá)可以推測，該因子在RA-ILD的發(fā)病機(jī)制中發(fā)揮重要作用，其在RA-ILD的早期診斷方面具有重要臨床研究價值。但由于本研究樣本量較少，還需進(jìn)一步加大研究樣本例數(shù)，以提供更加可靠詳實的實驗依據(jù)。

由于目前臨床常用的RA檢測指標(biāo)缺乏特異性，給臨床診斷特別是病程監(jiān)測帶來困難。HMGB1于炎癥反應(yīng)晚期出現(xiàn)，且在炎癥反應(yīng)中持續(xù)時間長，能夠延長治療疾病的窗口期。因此，HMGB1有望成為RA診斷和治療過程中方便、實用的血清學(xué)指標(biāo)及潛在的有效治療靶點[14]。并且，HMGB1的血清學(xué)檢測可為RA-ILD的早期診斷及臨床研究提供新思路，開辟新前景。

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收稿日期：2014-12-30；修回日期：2015-02-15