1.廣西桂林市中醫(yī)醫(yī)院放射科2.廣西壯族自治區(qū)第二人民醫(yī)院放射科 (廣西 541002)

唐 勇1 曹林德2 楊 鴻2陳衛(wèi)平2 楊 文2

CT引導(dǎo)下肺門病變細(xì)針穿刺針吸活檢與DNA倍體檢測聯(lián)合應(yīng)用的價值分析＊

1.廣西桂林市中醫(yī)醫(yī)院放射科2.廣西壯族自治區(qū)第二人民醫(yī)院放射科 (廣西 541002)

唐 勇1曹林德2楊 鴻2陳衛(wèi)平2楊 文2

目的研究CT引導(dǎo)下穿刺針吸活檢聯(lián)合DNA倍體檢測應(yīng)用于肺門病變的臨床診斷價值。方法選取肺門部病變68例，行CT引導(dǎo)下穿刺針吸活檢聯(lián)合DNA倍體檢測、CT引導(dǎo)下穿刺針吸活檢、DNA倍體檢測。以手術(shù)結(jié)果(組織病理檢查)為標(biāo)準(zhǔn)對比三種方法診斷準(zhǔn)確率。結(jié)果CT引導(dǎo)下穿刺針吸活檢、DNA倍體檢測、CT引導(dǎo)下穿刺針吸活檢聯(lián)合DNA倍體檢測診斷正確率分別為89.71%、88.24%、97.06%，與前兩者比較，后者診斷正確率最高，P＜0.05。結(jié)論CT引導(dǎo)下穿刺針吸活檢聯(lián)合DNA倍體檢測彌補(bǔ)了單獨(dú)使用CT引導(dǎo)下穿刺針吸活檢或DNA倍體檢測的不足，顯著提高診斷正確率，為肺門病變治療方案提供重要依據(jù)，值得推廣和應(yīng)用。

DNA倍體檢測；CT定位；穿刺針吸活檢

肺部是炎癥、腫瘤的好發(fā)部位，臨床上常使用臨床體征及癥狀、影像學(xué)、實(shí)驗室檢查等非入侵性的手段進(jìn)行診斷，隨著科技發(fā)展，這些肺部疾病傳統(tǒng)檢查手段已經(jīng)難以滿足臨床需要。穿刺針吸活檢(fine needle aspiration cytology，F(xiàn)NAC)、DNA倍體檢測術(shù)是目前臨床中肺部疾病主要診斷方法。臨床上常在CT引導(dǎo)下進(jìn)行各種疾病微創(chuàng)治療和診斷，CT引導(dǎo)下細(xì)針穿刺針吸活檢術(shù)在肺周圍占位疾病診斷中有重要價值，而使用流式細(xì)胞儀（FCM）進(jìn)行人體腫瘤DNA異倍體測量為惡性腫瘤診斷的重要方法之一[1]。筆者選取68例肺門病變患者作為研究對象，將CT引導(dǎo)下FNAC和DNA倍體檢測用于肺門病變的診斷，觀察二者合用在肺門病變診斷中的價值，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取2011年5月～2014年9月廣西壯族自治區(qū)第二人民醫(yī)院高度懷疑為中心型肺癌肺段支氣管病變的68例，男性48例，女性20例，年齡43～81歲平均(58.74±10.27)歲。臨床癥狀：咳嗽53例，咳痰37例，氣促8例，胸痛4例，聲嘶2例。全部患者穿刺前經(jīng)胸部CT、支氣管造影和MRI檢查證實(shí)為肺門區(qū)病變，但經(jīng)纖維支氣管鏡檢查、痰細(xì)胞學(xué)檢查、腫瘤標(biāo)志物和輔助影像學(xué)技術(shù)均不能明確病變組織的病理學(xué)特性，CT引導(dǎo)下穿刺前完善血常規(guī)、心電圖、凝血功能等檢查；排除肺部血管畸形、肺動脈瘤、肺大皰、凝血功能異常、嚴(yán)重心肺功能不全等穿刺針吸活檢術(shù)禁忌證者。

1.2 方法

1.2.1 CT定位下細(xì)針穿刺吸活檢方法：采用Siemens Somatom Definition AS+64排128層螺旋CT，穿刺前向患者詳細(xì)講解穿刺過程，并進(jìn)行深呼吸、屏氣等訓(xùn)練，避免穿刺術(shù)后咳嗽、胸悶等并發(fā)癥的發(fā)生?；颊呷∨P位，常規(guī)消毒穿刺部位，以2%利多卡因局部麻醉，根據(jù)胸部CT下觀察的腫瘤大小選擇合適的穿刺針，根據(jù)體表標(biāo)記選擇合適的進(jìn)針深度和進(jìn)針方向，穿刺針進(jìn)胸壁后囑咐患者屏氣，同時迅速進(jìn)針至預(yù)定深度，經(jīng)胸部CT檢查針尖位置，確保針尖處于病變組織中，取材時針筒保持負(fù)壓，并在病變范圍內(nèi)做上下提插、旋轉(zhuǎn)針體，針吸活檢病灶標(biāo)本，所采集標(biāo)本涂片行細(xì)胞病理學(xué)檢查,部分植入細(xì)胞保存液，用于DNA倍體檢查及石蠟包埋切片組織學(xué)檢查，同時在CT監(jiān)視下觀察患者是否發(fā)生滲血、氣胸等并發(fā)癥，避免劇烈咳嗽，根據(jù)患者具體情況采用鎮(zhèn)咳、止血等藥物治療，嚴(yán)密監(jiān)測血壓、脈搏和呼吸等生命體征。

1.2.2 DNA倍體檢查：將吸活檢保留的組織進(jìn)行PBS沖洗，制成肉泥并放置在200目網(wǎng)上，PBS過濾后取細(xì)胞懸液，5min離心(1200r/min)，去上清液，加2ml的PBS重懸細(xì)胞，離心(同上述方法，以下離心方法不變)，去上清液，重懸細(xì)胞；再將3ml并乙醇(70%)加入，低溫保存24h；離心后去上清液，加入PBS(2ml)，重懸細(xì)胞，離心，去上清液后重懸細(xì)胞；之后行顯微鏡下計數(shù)、細(xì)胞懸液染色、避光反應(yīng)、過濾[2-3]。使用流式細(xì)胞術(shù)分析法。

1.3 統(tǒng)計學(xué)分析數(shù)據(jù)錄入SPSS14.0軟件行統(tǒng)計學(xué)處理，采用χ2/t檢驗，檢驗結(jié)果以P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 病理結(jié)果68例患者均順利完成穿刺，一次穿刺成功率為100%(68/68)，均可采集滿意的組織活檢標(biāo)本。68例患者行CT引導(dǎo)下FNAC、DNA倍體檢測、CT下FNAC聯(lián)合DNA倍體檢測，其中CT引導(dǎo)下FNAC檢查結(jié)果：鱗癌23例(圖1)、腺癌19例、小細(xì)胞癌8例、炎癥細(xì)胞6例、結(jié)核3例、轉(zhuǎn)移瘤2例；DNA倍體檢查結(jié)果：鱗癌23例、腺癌18例、小細(xì)胞癌8例、炎癥細(xì)胞6例、結(jié)核3例、轉(zhuǎn)移瘤2例；CT引導(dǎo)下FNAC聯(lián)合DNA倍體檢查結(jié)果：鱗癌24例、腺癌22例、小細(xì)胞癌8例、炎癥細(xì)胞7例、結(jié)核3例、轉(zhuǎn)移瘤2例。CT引導(dǎo)下FNAC、DNA倍體檢、CT引導(dǎo)下FNAC聯(lián)合DNA倍體檢查診斷正確率見表1。

表1 三種檢測方法診斷正確率對比（n；%）

2.2 并發(fā)癥發(fā)生情況本組68 例患者中，21例(30.88%)發(fā)生針道滲血(圖2)，其中18例針道少量滲血，給予局部壓迫包扎后滲血停止；3 例穿刺術(shù)后給予止血藥物治療后癥狀明顯緩解。7例(10.29%)發(fā)生少量氣胸(圖3)，其中2例采用穿刺抽氣治療后痊愈，5例采用吸氧治療后痊愈。

圖1 男，65歲，左肺門腫塊，CT引導(dǎo)下針吸活檢病理及DNA倍體檢查結(jié)果為低分化鱗癌。圖2 男，58歲，左肺門腫塊，CT引導(dǎo)下針吸活檢病理及DNA倍體檢查結(jié)果為未分化小細(xì)胞癌，沿穿刺針道出現(xiàn)少量滲血。圖3 男，63歲，右下肺腫塊， CT引導(dǎo)下針吸活檢病理及DNA倍體檢查結(jié)果為低分化腺癌，穿刺后出現(xiàn)少量氣胸。

3 討 論

臨床上常通過纖維支氣管鏡檢查、穿刺針吸活檢、痰脫落細(xì)胞學(xué)、胸部開放性手術(shù)和胸腔鏡手術(shù)獲取肺部病變的病理組織學(xué)標(biāo)本，肺門支氣管腔內(nèi)病變可以通過支氣管纖維鏡取得活檢，而肺門支氣管腔外病變的明確診斷在非手術(shù)情況下較難以實(shí)現(xiàn)，在確定治療方法之前獲得明確診斷意義重大[4-5]。由于多層螺旋CT具有掃描速度快、采集數(shù)據(jù)量大、圖像后處理

功能強(qiáng)大等功能，能快速地進(jìn)行二維、三維圖像的重建，為肺穿刺活檢提供了全方位立體、準(zhǔn)確、方便的影像引導(dǎo)方式，同時還可以隨時觀測穿刺針的位置、進(jìn)針方向與途徑，引導(dǎo)操作者精確穿刺病灶，提高肺穿刺活檢的成功率和定性診斷的正確率。近年來，我們應(yīng)用CT導(dǎo)引下細(xì)針穿刺對肺門病變進(jìn)行針吸活檢，同時檢查組織學(xué)、細(xì)胞學(xué)和DNA倍體，有效實(shí)現(xiàn)了肺門病變的定性診斷，為臨床醫(yī)生提供有價值的診斷信息。

本研究應(yīng)用CT引導(dǎo)下FNAC聯(lián)合DNA倍體檢測肺門病變?nèi)〉昧己眯Ч?。使用DNA倍體檢測肺門病變共漏診8例，診斷正確率為88.24%，由于漏診病例主要為腺癌，可能與腺癌的生物學(xué)行為有關(guān)，且腺癌細(xì)胞常常聚集成團(tuán)，由于DNA倍體分析技術(shù)方面的限制，對于成團(tuán)的細(xì)胞難以識別，因此可能會出現(xiàn)漏診的情況。漏診原因主要是由于異倍體腫瘤細(xì)胞極少，DNA的組方圖中腫瘤細(xì)胞異倍體峰值被間皮細(xì)胞、白細(xì)胞等正常的二倍體細(xì)胞遮擋[6-7]；部分丟失染色體細(xì)胞的腫瘤可以在復(fù)制時恢復(fù)平衡，致使腫瘤細(xì)胞的DNA凈含量在DNA及核型定量分析中無異常[8-9]；DNA的組方圖分析及標(biāo)本制備過程均能影響DNA的含量分析準(zhǔn)確性。而當(dāng)其與FNAC聯(lián)合應(yīng)用，則彌補(bǔ)了上述不足，有效提高診斷正確率(P＜0.05)，診斷正確率為97.06%。單獨(dú)使用 CT引導(dǎo)下FNAC誤診因素是由于術(shù)者操作經(jīng)驗不足，或患者呼吸不均、屏氣不佳，肺部活動較大導(dǎo)致CT定位不夠精準(zhǔn)；纖維化肉芽腫處取材或病變壞死出血區(qū)取材均可引起假陰性；病理診斷水平局限或標(biāo)本處理不當(dāng)。而本次研究發(fā)現(xiàn)單獨(dú)細(xì)針吸活檢診斷肺門病變正確率為89.71%，明顯低于CT下FNAC聯(lián)合DNA倍體檢測(97.06%)。

關(guān)于DNA的含量和臨床分期的關(guān)系方面的研究仍在進(jìn)行中，國內(nèi)外學(xué)者們在這一點(diǎn)上并未形成統(tǒng)一認(rèn)識，但大多數(shù)學(xué)者認(rèn)為這二者間存在密切關(guān)系，認(rèn)為二倍體腫瘤多在分化較好的肺癌Ⅰ期及Ⅱ期患者中，而Ⅲ、Ⅳ期肺癌患者則是異倍體分布的主要對象。此外，王斌[10]等學(xué)者發(fā)現(xiàn)肺癌周邊組織內(nèi)的異倍體和肺癌分期淋巴轉(zhuǎn)移關(guān)系密切，肺癌轉(zhuǎn)移以后，癌細(xì)胞為活躍期，此時增值較快，異倍體肺癌周邊細(xì)胞癌變可能性較大，可能關(guān)系到癌灶切除后復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移，因此肺癌及癌周邊組織細(xì)胞內(nèi)DNA倍體可以用來預(yù)測肺癌進(jìn)展及轉(zhuǎn)移。

CT引導(dǎo)下FNAC常見并發(fā)癥為氣胸，但目前并未在并發(fā)氣胸率上形成統(tǒng)一認(rèn)識，有研究者報道肺部穿刺活檢并發(fā)氣胸不到5.00%[11]。本次研究發(fā)現(xiàn)使用細(xì)針穿刺吸活檢并發(fā)氣胸7例，氣胸并發(fā)率為10.29%。氣胸發(fā)生原因是由于病灶較小，活檢技術(shù)要求高，操作時間長，反復(fù)調(diào)整針尖位置導(dǎo)致較大創(chuàng)傷[12]；較深病灶進(jìn)針方向不易把握，需反復(fù)調(diào)整方向，導(dǎo)致穿刺次數(shù)增多，氣胸發(fā)生率較高；而老年患者因肺功能減退，穿刺經(jīng)過肺氣腫處肺組織容易引起氣胸。術(shù)前除仔細(xì)閱片，避免穿刺中出現(xiàn)肺大皰、避開較粗的血管外，還要根據(jù)病灶大小及深度選擇合適的穿刺針，定位準(zhǔn)確后進(jìn)行穿刺，以減少不必要的反復(fù)穿刺所致胸膜損傷。

綜上所述，CT定位下細(xì)針吸活檢聯(lián)合DNA倍體檢測彌補(bǔ)了單獨(dú)使用細(xì)針吸活檢或DNA倍體檢查的不足，有效提高肺門病變診斷正確率，安全性較高，值得應(yīng)用和推廣。

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(本文編輯: 汪兵)

Value Analysis on Combined Application of CT guided Lung Lesions Fine Needle Puncture Needle Biopsy and DNA Ploidy Determination*

TANG Yong1, CAO Lin-de2, YANGH Hong2, et al．,1 Department of Radiology, Guilin Hospital of Traditional Chinese Medicine, Guilin 541002, China; 2 Department of Radiology, the Second People's Hospital of Guangxi, Guilin 541002, China

ObjectiveThis paper is to investigate clinically diagnostic value of suction biopsy needle under CT in combination with DNA ploidy determination applied to lung door lesions．MethodsSixty eight patients with hilus pulmonis lesions undergoing needle biopsy aspiration combining ploidy DNA determination under CT, needle aspiration biopsy under CT, DNA ploidy determination． Diagnostic accuracy of three methods were compared as surgical results (histopathologic examination) as criterions．ResultsThe diagnostic accuracies of puncture needle biopsy under CT, DNA ploidy determination, needle aspiration biopsy under CT in combination with DNA ploidy determination hit 89．71%, 88．24% and 97．06% respectively, and the diagnostic accuracy of the later one is higher when compared to that of the former one (P ＜ 0．05)．ConclusionThe puncture needle biopsy under CT in combination with DNA ploidy determination make up for the insufficiency of single application of puncture needle biopsy under CT or DNA ploidy under CT, significantly improving diagnostic accuracy, providing important basis for the lung lesions treatment, and being worthy of popularization and application．

DNA Ploidy Determination; CT Positioning; Puncture Needle Aspiration Biopsy

10.3969/j.issn.1672-5131.2015.07.012

R322.3+5

A

桂林市科學(xué)研究與技術(shù)開發(fā)計劃資助項目(20120121-4-2)

2015-05-29

曹林德