劉慧吉++劉艷輝++李改娟++祖岫杰

摘要 研究了培氟沙星對(duì)白鰱和鳙魚的急性毒性，在室內(nèi)水簇箱，水溫控制在（22±1）℃，以平均體重（2±0.1）g白鰱和平均體重（2±0.1）g鳙魚為試驗(yàn)對(duì)象，采用改進(jìn)寇氏法計(jì)算試驗(yàn)白鰱和鳙魚的半數(shù)致死濃度（LC50）和安全濃度（SC）。結(jié)果表明：培氟沙星對(duì)白鰱48 h的LC50為384.6 mg/L，SC為98.3 mg/L，對(duì)鳙魚48 h的LC50為436.5 mg/L，SC為114.1 mg/L。該研究為培氟沙星在水產(chǎn)養(yǎng)殖上的應(yīng)用提供了理論依據(jù)。

關(guān)鍵詞 培氟沙星；白鰱；鳙魚；急性毒性；半致死濃度；安全濃度

中圖分類號(hào) S941.91 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 1007-5739（2015）18-0268-02

作為第3代喹諾酮類藥物，培氟沙星高效、低毒，不易產(chǎn)生耐藥性，比第一、二代喹諾酮類的抗菌譜廣，抗菌活性明顯增強(qiáng)，是當(dāng)今唯一能抑制細(xì)菌DNA 促旋酶的藥物[1-2]。培氟沙星吸收良好，半衰期長(zhǎng)，生物利用度高，可進(jìn)入如心肌、腦脊液及骨組織，又稱長(zhǎng)效沙星[1，3]。魚類急性毒性試驗(yàn)一般是測(cè)定24、48、96 h的LC50值。但是由于培氟沙星對(duì)鰱、鳙魚的毒性研究未見報(bào)道，對(duì)其進(jìn)行急性毒性初步研究很有必要。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 試驗(yàn)用魚。試驗(yàn)用鰱、鳙魚選自前郭縣庫(kù)里漁場(chǎng)，鰱魚苗平均體重1.3 g，體長(zhǎng)4.0～4.5 cm，魚苗規(guī)格整齊，魚體健康，鱗片完整，游動(dòng)活潑，無畸形。魚苗室內(nèi)水簇箱暫養(yǎng)1周備用。暫養(yǎng)期間準(zhǔn)確記錄魚苗死亡情況，死亡率小于5%，符合急性試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)[4]后進(jìn)行預(yù)備性試驗(yàn)和正式試驗(yàn)。

1.1.2 供試藥物。試驗(yàn)藥物為甲黃酸培氟沙星，純度99.9%，批號(hào)20120812。試驗(yàn)前將試驗(yàn)藥物配成一定濃度的母液，正式試驗(yàn)時(shí)按適當(dāng)比例稀釋為所需濃度，試驗(yàn)魚苗從低濃度向高濃度逐漸放入[1]。

1.1.3 試驗(yàn)條件。試驗(yàn)用水為經(jīng)過濾消毒后充氧24 h以上的自來水，試驗(yàn)期間水溫為（22±1）℃，DO>5 mg/L，pH值7.2。試驗(yàn)容器為長(zhǎng)方體玻璃水簇箱，容積為20 L，加試驗(yàn)液15 L。

1.2 試驗(yàn)方法

試驗(yàn)前先進(jìn)行24 h的預(yù)試驗(yàn)，確定0～100%死亡的藥物濃度范圍[5-6]。正式試驗(yàn)按照改良寇氏法進(jìn)行，設(shè)置6個(gè)濃度梯度（218.8、275.4、346.7、436.5、549.5、691.8 mg/L），以空白作對(duì)照（CK），每個(gè)濃度設(shè)2個(gè)平行組，取平均值。試驗(yàn)開始后連續(xù)觀察中毒癥狀、死亡時(shí)間、數(shù)量，并及時(shí)用吸管撈出死魚，記錄24、48 h各濃度魚苗的存活和死亡情況。試驗(yàn)期間不投餌，每24 h更換1次試驗(yàn)液，換水量100%[1]。死魚的判斷標(biāo)準(zhǔn)：鰓蓋完全停止活動(dòng)，用玻璃棒輕輕刺激魚體5 min無反應(yīng)[7-8]。

根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果，采用改良寇氏法計(jì)算得出培氟沙星對(duì)鰱、鳙魚24、48 h的半數(shù)致死濃度（LC50）[9]和安全濃度（SC）[7]，計(jì)算公式如下：

LC50=log-1[Xm-d（∑p-0.5）]

SC=48 h LC50×0.3/（24 h LC50/48 h LC50）2

式中，Xm為最大死亡率組劑量對(duì)數(shù)；d為組間距（相鄰2組劑量對(duì)數(shù)值之差）；p為各組死亡率，∑p為各組死亡率總和[1]。

2 結(jié)果與分析

急性毒性試驗(yàn)結(jié)果表明（表1），白鰱、鳙魚對(duì)培氟沙星均較不敏感，但因魚的種類不同其敏感程度也有一定差異。白鰱在藥物濃度275.4 mg/L時(shí)即發(fā)生死亡，藥物濃度691.8 mg/L時(shí)死亡率為100%；而鳙魚在藥物濃度346.7 mg/L時(shí)才開始死亡，藥物濃度691.8 mg/L時(shí)全部死亡。雖然全部死亡的濃度相同，但鳙魚開始死亡的藥物濃度遠(yuǎn)大于白鰱，說明鳙魚對(duì)培氟沙星的耐受性比白鰱強(qiáng)。白鰱、鳙魚的24 h和48 h半數(shù)致死濃度（LC50）分別為416.7、467.7 mg/L和384.6、436.5 mg/L，安全濃度分別為98.3、114.1 mg/L。

3 結(jié)論與討論

培氟沙星除具有廣譜、高效、低毒、吸收快等特點(diǎn)外，對(duì)致病菌嗜水氣單胞菌和溫和氣單胞菌的抑制和殺滅效果較好，對(duì)這2種菌的最小抑菌濃度、最小殺菌濃度分別為0.009、0.018 μg/mL[11-12]。培氟沙星的抑菌和殺菌效果分別是氟苯尼考、左氧氟沙星、慶大霉素的1 000倍以上、100倍以上、近300倍[10]。該試驗(yàn)結(jié)果表明：培氟沙星對(duì)白鰱48 h的LC50為384.6 mg/L，SC為98.3 mg/L，對(duì)鳙魚48 h的LC50為436.5 mg/L，SC為114.1 mg/L。因此，培氟沙星防治魚類細(xì)菌性疾病可以放心使用[13-14]。

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