孫磊 陳晟 蔡穎 安輝 敖琳 楊桓 陶成玉 劉晉祎 曹佳

目的評(píng)價(jià)不同救治方案對(duì)密閉艙室煙霧吸入性肺損傷的救治效果。方法將78只清潔級(jí)雄性SD大鼠完全隨機(jī)分為13組,每組6只,分別為正常對(duì)照組(A組)、損傷對(duì)照組(B組)及救治組(C～M組),其中B～M分別進(jìn)行煙霧吸入染毒10 min,C～E組分別行30%、60%、100%濃度常壓氧吸入；F和G組分別給予10 U/mL和50 U/mL肝素鈉霧化吸入；H和I組為5 mg/kg 地塞米松(Dex)預(yù)處理及染毒后治療；J和K組為1 000 mg/kg 維生素C預(yù)處理及染毒后治療；L和M組為200 mg/kg N-乙酰半胱氨酸(NAC)預(yù)處理及染毒后治療。觀察煙霧吸入后24 h,各組大鼠的動(dòng)脈血?dú)夥治鯷酸堿度(pH)、動(dòng)脈血氧分壓(PaO2)和動(dòng)脈血二氧化碳分壓(PaCO2)]、靜脈血碳氧血紅蛋白(COHb)及其清除率(CCR)、肺組織病理改變及評(píng)分、肺濕干重比值(W/D)、肺泡灌洗液(BALF)和血清總蛋白濃度、肺通透性指數(shù)(PPI)、肺組織谷胱甘肽-過氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量及血清一氧化氮(NO)含量等指標(biāo)的改變,綜合評(píng)價(jià)各種措施的救治效果。結(jié)果煙霧吸入后24 h,與B組比較,D、E、G、H組PaO2顯著升高[(117.0±1.0) mmHg,(119.2±3.1) mmHg,(115.0±5.7) mmHg,(101.8±3.3) mmHg vs (89.1±1.5) mmHg,P<0.05],J組大鼠PaO2顯著降低[(69.4±2.8) mmHg vs (89.1±1.5) mmHg,P<0.05]；與B組比較,C、D和E組CCR顯著升高[(23.1±4.2)%/h,(24.0±4.9)%/h,(26.3±4.5)%/h vs (19.3±2.2)%/h,P<0.05]；與B組比較,G、H、L和M組大鼠的肺損傷總評(píng)分均顯著低于B組[(2.9±1.0),(5.0±0.4),(4.4±1.5),(5.9±1.4) vs (9.4±1.2),P<0.05]；與B組比較,C、G、H和I組大鼠肺W/D均顯著降低[(4.63±0.10),(4.62±0.06),(4.65±0.05),(4.57±0.12) vs (4.88±0.21),P<0.05]；與B組比較,H組肺PPI指數(shù)顯著下降[(2.42±0.38) vs (7.02±1.05),P<0.01]；與B組比較,J、L和M組大鼠肺組織GSH-Px和SOD活性均顯著升高(P<0.05)、肺組織MDA和NO含量均顯著降低(P<0.05)。結(jié)論分別使用100%常壓氧吸入、高劑量肝素鈉霧化吸入、地塞米松預(yù)處理及NAC預(yù)處理,均能對(duì)密閉艙室火災(zāi)煙霧吸入性肺損傷有較明顯的治療效果。

密閉艙室； 煙霧吸入； 吸入性肺損傷

研究發(fā)現(xiàn),動(dòng)物煙霧吸入后主要發(fā)生了急性肺損傷,表現(xiàn)為肺組織氧化和抗氧化系統(tǒng)失衡及肺通透性顯著增加,且以煙霧吸入后24 h的損傷最為嚴(yán)重[1-2]。近年來,人們針對(duì)煙霧吸入性急性肺損傷的各個(gè)病理生理過程提出了一系列的救治措施[3-6]。但由于煙霧發(fā)生材料及動(dòng)物模型的差異,救治措施的效果也不盡相同,且傳統(tǒng)的救治措施是否適用于特殊條件下的密閉艙室煙霧吸入性損傷還需進(jìn)一步研究。本研究針對(duì)密閉艙室火災(zāi)煙霧吸入致急性肺損傷過程中的缺氧、氣道阻塞、炎癥反應(yīng)及氧化-抗氧化平衡等病理改變,用第三軍醫(yī)大學(xué)毒理學(xué)研究所建立的密閉艙室煙霧動(dòng)物染毒損傷模型驗(yàn)證和評(píng)價(jià)各種救治措施的治療效果,為進(jìn)一步綜合治療研究提供基礎(chǔ)。

資料與方法

一、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與資料

1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：健康清潔級(jí)雄性SD大鼠78只,7～9周齡,體重(231±22)g；由第三軍醫(yī)大學(xué)第三附屬醫(yī)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供[動(dòng)物使用合格證號(hào)：SCXK(渝)20020003],常規(guī)飼養(yǎng)于第三軍醫(yī)大學(xué)預(yù)防醫(yī)學(xué)院毒理學(xué)研究所動(dòng)物房。將78只SD大鼠普通基礎(chǔ)飼料適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后,按隨機(jī)數(shù)字表法分為13組,每組6只,進(jìn)行隨機(jī)對(duì)照實(shí)驗(yàn)。

2.主要試劑：Bradford蛋白濃度定量試劑盒(上海生工生物工程有限公司)、谷胱甘肽-過氧化物酶(GSH-Px)測(cè)試盒、超氧化物歧化酶(SOD)測(cè)試盒、一氧化氮(NO)測(cè)試盒、丙二醛(MDA)測(cè)試盒(南京建成生物工程研究所)、地塞米松磷酸鈉(dexamethasone sodium phosphate,Dex)注射液(湖北天藥股份有限公司,生產(chǎn)批號(hào)：國(guó)藥準(zhǔn)字H42020019)、維生素C(vitamin C,Vit C)注射液(西南藥業(yè)股份有限公司,生產(chǎn)批號(hào)：國(guó)藥準(zhǔn)字H50021469)及N-乙酰半胱氨酸(N-acetyl cysteine,NAC,碧云天生物技術(shù)研究所)。

3.主要實(shí)驗(yàn)儀器：BX60熒光顯微鏡(日本Olympus公司)、7 000型全自動(dòng)生化分析儀(美國(guó)Backman公司)、血?dú)鉁y(cè)定儀(美國(guó)Bayer公司)、Spectra Max M2/M2e酶標(biāo)儀(美國(guó)Molecular device公司)。密閉艙室煙霧吸入染毒模擬裝置為本室自行設(shè)計(jì)和研制,發(fā)煙材料的處理及煙霧的發(fā)生方法見相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道[7],常壓吸氧裝置由氧氣瓶(山東省建設(shè)高壓容器有限公司)、YX-A型浮標(biāo)式氧氣吸入器(浙江慈溪精藝閥門廠)和治療箱連接而成,霧化吸入裝置由402AI型霧化器(上海魚躍醫(yī)療設(shè)備有限公司)和治療箱連接而成。

二、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物建模方法

根據(jù)參考文獻(xiàn)[7-8],將坦克艙室主要非金屬材料按照一定的用量比例剪成10 mm×10 mm小塊,置于自制的燃燒箱內(nèi),用液化氣爐點(diǎn)燃非金屬材料發(fā)煙3 min后,將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物放入與燃燒箱相連的染毒箱內(nèi)吸入染毒10 min,染毒結(jié)束后將動(dòng)物取出放回飼養(yǎng)籠中,置于開放環(huán)境中呼吸新鮮空氣,自由飲食和飲水。動(dòng)物分組與治療方法具體如下：

1.正常對(duì)照組(A組)：自由呼吸新鮮空氣。

2.損傷組(B組)：于染毒箱中持續(xù)吸煙10 min。

3.常壓氧吸入組(C、D、E組)：持續(xù)吸煙后,3組大鼠于治療箱中分別吸入30%、60%和100%濃度的常壓氧1 h,中間間隔20 min,2次/d,共1 d。

4.肝素鈉霧化吸入組(F、G組)：持續(xù)吸煙10 min后,2組大鼠于治療箱中分別給予10 U/mL和50 U/mL肝素鈉霧化吸入20 min,2次/d,共1 d。

5.地塞米松組(H、I組)：2組大鼠分別在煙霧染毒前30 min(預(yù)處理)和染毒結(jié)束后20 min內(nèi)(治療處理)經(jīng)尾靜脈注射Dex(5 mg/kg)。

6.Vit C組(J 、K組)：2組大鼠分別在煙霧染毒前30 min(預(yù)處理)和染毒結(jié)束后20 min內(nèi)(治療處理)經(jīng)尾靜脈注射Vit C(1 000 mg/kg)。

7.NAC組(L、M 組)：2組大鼠分別在煙霧染毒前30 min(預(yù)處理)和染毒結(jié)束后20 min內(nèi)(治療處理)經(jīng)尾靜脈注射NAC(200 mg/kg)。

本實(shí)驗(yàn)獲第三軍醫(yī)大學(xué)醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn),動(dòng)物處置方法符合動(dòng)物倫理學(xué)標(biāo)準(zhǔn)。

三、觀察指標(biāo)

1.動(dòng)脈血血?dú)鉁y(cè)定：各組大鼠分別于染毒后24 h,經(jīng)頸動(dòng)脈取血0.1 mL,檢測(cè)動(dòng)脈血氧分壓(arterial partial pressure of oxygen,PaO2)、動(dòng)脈血二氧化碳分壓(arterial partial pressure of carbon dioxide,PaCO2)和酸堿度(pH)。

2.靜脈血 碳氧血紅蛋白(carbon oxygen hemoglobin,COHb)及碳氧血紅蛋白清除率(COHb clearence rate,CCR)：大鼠染毒后20 min和80 min 時(shí)分別取尾靜脈血10 μL,參照文獻(xiàn)[9]檢測(cè)血中COHb,結(jié)果用COHb%表示,計(jì)算1 h內(nèi)CCR=COHb%20 min-COHb%80 min。

3.肺組織病理改變及評(píng)分：取各組大鼠右肺上葉組織,常規(guī)進(jìn)行病理切片和蘇木精-伊紅(hematoxylin- eosin,HE)染色。熒光顯微鏡觀察肺組織變化,并根據(jù)參考文獻(xiàn)[10]對(duì)肺水腫、肺泡及間質(zhì)炎癥、肺泡及間質(zhì)出血分別進(jìn)行0～4分半定量評(píng)分。無損傷為0分；病變范圍< 25%為1分；病變范圍占25%～50%為2分；病變范圍占50%～75%為3分；病變范圍>75%為4分,總肺損傷評(píng)分為上述各項(xiàng)之和。每只大鼠觀察10個(gè)高倍視野,取其平均值。

4.肺水含量：取各組大鼠右肺中葉,吸水紙吸干表面水分及血液,稱重。然后置于80℃烤箱72 h 后稱量肺干重,計(jì)算濕/干重比(wet and dry weight ratio,W/D)[11]。

5.肺通透指數(shù)(pulmonary permeability index,PPI)：經(jīng)股動(dòng)脈收集血液于10 mL無抗凝管中,4℃下2 500 r/min離心10 min,分離血清檢測(cè)蛋白含量。開胸取出肺臟,尋找氣管分叉,分離氣管,結(jié)扎右側(cè)主支氣管,用冰生理鹽水進(jìn)行左肺肺泡灌洗,4 mL×3次,回收率>85%；收集全部肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF),測(cè)量并記錄總體積,4℃下離心(1 000 r/min,10 min),留取上清,按Bradford法[12]測(cè)蛋白含量。計(jì)算PPI=BALF蛋白含量×103/血漿蛋白含量[13]。

6.肺組織GSH-Px、SOD活性及MDA含量：取右肺間葉肺組織,制成原始濃度為10%的組織勻漿。4 ℃低溫下3 000 r/min離心15 min,留取上清,嚴(yán)格按照南京建成蛋白及酶活性測(cè)定試劑盒操作步驟分別進(jìn)行肺組織中蛋白的濃度、GSH-Px、SOD的活力及MDA含量測(cè)定。

7.血清NO含量測(cè)定：取分離得到的血清樣本100 uL,按試劑盒操作步驟進(jìn)行,測(cè)定血清樣本中NO含量。

四、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

結(jié) 果

一、動(dòng)脈血血?dú)鉁y(cè)定

煙霧吸入后24 h,B組大鼠動(dòng)脈血pH與A組的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),J組大鼠動(dòng)脈血pH顯著低于B組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；B組大鼠PaCO2與A組的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),E組大鼠PaCO2顯著低于B組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),余治療組與B組大鼠間PaCO2的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；煙霧吸入后24 h,B組大鼠動(dòng)脈血PaO2與A組比較顯著降低(P<0.01),D、E、G、H組大鼠與B組比較顯著升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(D、E組均P<0.01,G、H均P<0.05),而J組大鼠PaO2較B組顯著降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),余治療組PaO2與B組的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見圖1。

二、COHb水平及其清除率測(cè)定

煙霧吸入后20 min,B組大鼠靜脈血COHb%與A組比較顯著降低(P<0.01),而各治療組(C～M組)與B組比較,差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。煙霧吸入后80 min 各組大鼠靜脈血COHb%均大幅降低,且與B組比較,C、D、E組大鼠靜脈血COHb%顯著降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(C、D組均P<0.05,E組P<0.01),余治療組與B組大鼠間靜脈血COHb%的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與B組比較,C、D、E組大鼠CCR顯著升高(C、D組均P<0.05,E組P<0.01),余治療組與B組大鼠間靜脈血CCR的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見圖2。

三、肺組織病理改變及評(píng)分

煙霧吸入后24 h,B組大鼠肺損傷總評(píng)分與A組比較顯著增加(P<0.01)。與B組比較, G、H、L和M組大鼠肺損傷總評(píng)分均顯著低于B組,且G組降低最為顯著,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(G、H組均P<0.01,L、M組P<0.05)；G、H和L組大鼠肺間質(zhì)出血、水腫及炎癥3項(xiàng)的單項(xiàng)評(píng)分均分別低于B組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(G、H組均P<0.01,L組P<0.05)。此外, F、L和M組肺間質(zhì)出血單項(xiàng)評(píng)分低于B組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.01)；F、I、K和M組肺水腫單項(xiàng)評(píng)分低于B組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F、M組均P<0.01,I、K組P<0.05)；C組肺組織炎癥單項(xiàng)評(píng)分低于B組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見圖3。

四、肺水含量測(cè)定

煙霧吸入后B組大鼠模型的肺濕重增高,高于A組；不同治療措施處置后大鼠的肺濕重均出現(xiàn)一定的變化,其中H組大鼠肺濕重與B組比較顯著降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),余治療組與B組間的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。C、G、H和I組大鼠肺W/D均低于B組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)。見圖4。

五、BALF及血清中總蛋白含量和PPI測(cè)定

煙霧吸入后24 h,B組大鼠BALF中總蛋白含量及肺PPI與A組比較顯著增加(P<0.01)。與B組比較,煙霧吸入后24 h H組大鼠BALF中總蛋白含量及肺PPI顯著降低(P<0.05,P<0.01),其他治療組與B組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。煙霧吸入后24 h,各組大鼠血清總蛋白含量與B組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見表1。

注：PaO2為動(dòng)脈血氧分壓,PaCO2為動(dòng)脈血二氧化碳分壓；A組為正常對(duì)照組,B組為損傷組,C組為30%濃度常壓氧吸入組,D組為60%濃度常壓氧吸入組,E組為100%濃度常壓氧吸入組,F組為10 U/mL肝素鈉霧化吸入組,G組為50 U/mL肝素鈉霧化吸入組,H組為5 mg/kg地塞米松預(yù)處理組,I組為5 mg/kg地塞米松治療組,J組為1 000 mg/kg Vit C預(yù)處理組,K組為1 000 mg/kg Vit C治療組,L組為200 mg/kg NAC預(yù)處理組,M組為200 mg/kg NAC治療組；與B組比較：aP<0.05,bP<0.01；1 mmHg=0.133 kPa

圖1不同救治措施處理煙霧吸入后24h大鼠動(dòng)脈血?dú)夥治鼋Y(jié)果

注：COHb為碳氧血紅蛋白,CCR為碳氧血紅蛋白清除率；A組為正常對(duì)照組,B組為損傷組,C組為30%濃度常壓氧吸入組,D組為60%濃度常壓氧吸入組,E組為100%濃度常壓氧吸入組,F組為10 U/mL肝素鈉霧化吸入組,G組為50 U/mL肝素鈉霧化吸入組,H組為5 mg/kg地塞米松預(yù)處理組,I組為5 mg/kg地塞米松治療組,J組為1 000 mg/kg Vit C預(yù)處理組,K組為1 000 mg/kg Vit C治療組,L組為200 mg/kg NAC預(yù)處理組,M組為200 mg/kg NAC治療組；與B組比較：aP<0.05,bP<0.01

圖2不同救治措施處理煙霧吸入后20 min、80 min時(shí)大鼠靜脈血COHb%及其CCR比較

注：A組為正常對(duì)照組,B組為損傷組,C組為30%濃度常壓氧吸入組,D組為60%濃度常壓氧吸入組,E組為100%濃度常壓氧吸入組,F組為10 U/mL肝素鈉霧化吸入組,G組為50 U/mL肝素鈉霧化吸入組,H組為5 mg/kg地塞米松預(yù)處理組,I組為5 mg/kg地塞米松治療組,J組為1 000 mg/kg Vit C預(yù)處理組,K組為1 000 mg/kg Vit C治療組,L組為200 mg/kg NAC預(yù)處理組,M組為200 mg/kg NAC治療組；與B組比較：aP<0.05,bP<0.01

圖3不同救治措施處理煙霧吸入后24 h大鼠肺組織損傷評(píng)分比較

注：W/D為肺組織濕干重比值；A組為正常對(duì)照組,B組為損傷組,C組為30%濃度常壓氧吸入組,D組為60%濃度常壓氧吸入組,E組為100%濃度常壓氧吸入組,F組為10 U/mL肝素鈉霧化吸入組,G組為50 U/mL肝素鈉霧化吸入組,H組為5 mg/kg地塞米松預(yù)處理組,I組為5 mg/kg地塞米松治療組,J組為1 000 mg/kg Vit C預(yù)處理組,K組為1 000 mg/kg Vit C治療組,L組為200 mg/kg NAC預(yù)處理組,M組為200 mg/kg NAC治療組；與B組比較：aP<0.05

圖4不同救治措施處理煙霧吸入后24h大鼠肺水含量比較

表1 不同救治措施組大鼠煙霧吸入后24 h BALF及血清中總蛋白濃度的變化

注：BALF為肺泡灌洗液,PPI為肺通透指數(shù)；A組為正常對(duì)照組,B組為損傷組,C組為30%濃度常壓氧吸入組,D組為60%濃度常壓氧吸入組,E組為100%濃度常壓氧吸入組,F組為10 U/mL肝素鈉霧化吸入組,G組為50 U/mL肝素鈉霧化吸入組,H組為5 mg/kg地塞米松預(yù)處理組,I組為5 mg/kg地塞米松治療組,J組為1 000 mg/kg Vit C預(yù)處理組,K組為1 000 mg/kg Vit C治療組,L組為200 mg/kg NAC預(yù)處理組,M組為200 mg/kg NAC治療組；1P為各組大鼠BALF總蛋白含量與B組比較的P值；2P為各組大鼠血清總蛋白含量與B組比較的P值；3P為各組大鼠PPI與B組比較的P值

六、肺組織GSH-Px、SOD活力及MDA含量的測(cè)定

煙霧吸入后24 h,B組大鼠肺組織GSH-Px活性與A組比較顯著降低(P<0.01),D、J、L和M組大鼠肺組織GSH-Px活性高于B組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(D組P<0.05,J、L和M組P<0.01),E組GSH-Px活性低于B組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),其他治療組變化無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；煙霧吸入后24 h,B組大鼠肺組織SOD活性與A組比較顯著降低(P<0.01),除H和I組的余治療組大鼠肺組織SOD活性均高于B組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F組P<0.05,C、D、E、G、J、K、L和M組均P<0.01)。煙霧吸入后24 h,B組大鼠肺組織MDA含量與A組比較顯著增加(P<0.01),D組與B組比較肺組織MDA含量顯著增加(P<0.05),J、K、L和M組與B組比較,肺組織MDA含量顯著降低(K組P<0.05,J、L和M組均P<0.01),余治療組與B組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見圖5。

注：GSH-Px為谷胱甘肽過氧化物酶,SOD為超氧化物歧化酶,MDA為丙二醛；A組為正常對(duì)照組,B組為損傷組,C組為30%濃度常壓氧吸入組,D組為60%濃度常壓氧吸入組,E組為100%濃度常壓氧吸入組,F組為10 U/mL肝素鈉霧化吸入組,G組為50 U/mL肝素鈉霧化吸入組,H組為5 mg/kg地塞米松預(yù)處理組,I組為5 mg/kg地塞米松治療組,J組為1 000 mg/kg Vit C預(yù)處理組,K組為1 000 mg/kg Vit C治療組,L組為200 mg/kg NAC預(yù)處理組,M組為200 mg/kg NAC治療組；與B組比較,：aP<0.05,bP<0.01

圖5不同救治措施組大鼠煙霧吸入后24h 肺組織GSH- Px、SOD活性級(jí)血清MDA含量的變化

七、血清NO含量測(cè)定

煙霧吸入后24 h,B組大鼠血清NO含量與A組比較顯著增加(P<0.01)。D、E、F、H、I、J、L和M組大鼠血清NO含量低于B組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(D、E、J、L和M組均P<0.05,F、H和I組均P<0.01),余治療組的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見圖6。

注：NO為一氧化氮；A組為正常對(duì)照組,B組為損傷組,C組為30%濃度常壓氧吸入組,D組為60%濃度常壓氧吸入組,E組為100%濃度常壓氧吸入組,F組為10 U/mL肝素鈉霧化吸入組,G組為50 U/mL肝素鈉霧化吸入組,H組為5 mg/kg地塞米松預(yù)處理組,I組為5 mg/kg地塞米松治療組,J組為1 000 mg/kg Vit C預(yù)處理組,K組為1 000 mg/kg Vit C治療組,L組為200 mg/kg NAC預(yù)處理組,M組為200 mg/kg NAC治療組；與B組比較：aP<0.05,bP<0.01

圖6不同救治措施處理煙霧吸入后24 h大鼠血清NO含量變化

討 論

隨著對(duì)吸入性肺損傷的病理生理學(xué)機(jī)制研究的不斷深入[1-2,14],糖皮質(zhì)激素、預(yù)防性抗生素、抗氧化劑、抗凝劑、外源性表面活性劑和維生素等措施的聯(lián)合療法,被認(rèn)為對(duì)煙霧吸入性肺損傷具有較好的治療前景[15-16]。但由于不同研究中發(fā)煙材料和動(dòng)物模型的差異,不同干預(yù)措施的治療效果也不一致；且以上治療措施是否適用于密閉艙室火災(zāi)特殊背景條件下的煙霧吸入所致急性肺損傷,還有待進(jìn)一步研究證實(shí)。第三軍醫(yī)大學(xué)毒理學(xué)研究所前期研究發(fā)現(xiàn)[17],動(dòng)物在煙霧吸入后會(huì)發(fā)生中度一氧化碳中毒。迅速進(jìn)行高壓氧治療被認(rèn)為是改善缺氧癥狀、糾正一氧化碳中毒的首選方案。而考慮到戰(zhàn)場(chǎng)環(huán)境下的救護(hù)條件和為避免氧中毒,筆者采用不同濃度常壓氧吸入治療。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,與低、中濃度相比,常壓純氧吸入能夠更顯著增強(qiáng)肺泡換氣功能,明顯糾正低氧血癥,顯著緩解一氧化碳中毒損傷效應(yīng)；且肺組織SOD活性及血清NO含量的檢測(cè)結(jié)果示,常壓氧吸入不但未增加氧化損傷,反而有利于激活組織的抗氧化能力,緩解組織損傷。

煙霧吸入患者凝血功能異常造成的纖維蛋白增多是加重肺損傷的一個(gè)重要因素[18-19],肝素鈉霧化吸入不僅能夠減少氣道阻塞物的形成,還因其具有一定的抗炎作用而達(dá)到減輕炎癥反應(yīng)損傷的效果[10]。本研究實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,高劑量肝素鈉霧化吸入顯著改善肺組織損傷,同時(shí)還具有一定改善氧合和增強(qiáng)組織抗氧化水平的能力；而低劑量肝素鈉霧化吸入的上述作用不明顯。且預(yù)實(shí)驗(yàn)中,大鼠剪尾實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：與正常組比較,高劑量的肝素鈉霧化吸入均未明顯延長(zhǎng)凝血時(shí)間。本研究中所選擇的肝素鈉霧化吸入劑量可在不影響機(jī)體的凝血功能的前提下,能顯著改善肺組織損傷和氧合狀態(tài)、增強(qiáng)組織抗氧化能力。

糖皮質(zhì)激素通過多種信號(hào)途徑產(chǎn)生抗炎作用,減輕肺水腫、降低煙霧吸入動(dòng)物的死亡率[20-22],但也有類似的研究得出了完全相反的結(jié)論[23-24],這可能與用藥方式及給藥劑量有關(guān)。本研究分別于染毒前靜脈注射5 mg/kg(相當(dāng)于人的大劑量)Dex進(jìn)行預(yù)處理,可顯著減緩肺毛細(xì)血管損傷、減輕肺水腫程度和機(jī)體炎癥反應(yīng),具有一定改善氧合水平的能力。

近年來,Vit C由于其有效的抗氧化作用而成為一個(gè)備受重視的煙霧吸入性肺損傷治療策略[25-26]。本研究分別于染毒前及染毒后給予大鼠1 000 mg/kg Vit C(相當(dāng)于人的大劑量)靜脈注射,結(jié)果顯示,Vit C可增加肺組織SOD的活性,同時(shí)減少M(fèi)DA的生成,從而表現(xiàn)出一定的抗氧化作用。但Vit C預(yù)處理組還使動(dòng)脈血pH降低,且降低PaO2、升高PaCO2,使肺泡換氣功能惡化,有增加二氧化碳儲(chǔ)留、引起呼吸性酸中毒的可能。

NAC為谷胱甘肽的合成提供半胱氨酸,在體外實(shí)驗(yàn)中被證明具有較強(qiáng)的抗氧化作用。本研究分別于染毒前及染毒后給予大鼠200 mg/kg NAC(在大量動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究中采用的有效劑量[27-28])靜脈注射,結(jié)果顯示,NAC處理均能顯著增強(qiáng)肺組織SOD活性,減少肺組織MDA和血清NO含量。此外,NAC預(yù)處理還能顯著增強(qiáng)肺組織GSH-Px活性,并明顯減輕肺組織損傷評(píng)分。因此,與NAC治療組相比,NAC預(yù)處理組更適用于本實(shí)驗(yàn)中煙霧吸入性肺損傷的救治研究。

綜上所述,通過本實(shí)驗(yàn)研究可初步認(rèn)為：100%常壓氧吸入、高劑量肝素鈉霧化吸入、地塞米松預(yù)處理及NAC預(yù)處理對(duì)密閉艙室火災(zāi)煙霧吸入性肺損傷有較好的治療效果。聯(lián)合使用上述救治措施對(duì)密閉艙室火災(zāi)煙霧吸入引起的急性肺損傷可能具有較好的綜合治療效果,值得進(jìn)一步進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)。

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