民族醫(yī)藥

藏藥松生等的質(zhì)量控制研究

巴桑卓嘎阿萍

西藏自治區(qū)食品藥品檢驗(yàn)所，西藏拉薩850000

【摘要】目的：建立藏藥材松生等的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。方法：采用顯微鑒別、薄層鑒別，并參照2010年版《中國(guó)藥典》附錄對(duì)松生等藥材的水分、灰分、酸不溶性灰分及醇溶性浸出物進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果：不同產(chǎn)地的藏藥材松生等顯微特征一致，薄層色譜重現(xiàn)性好、專屬性強(qiáng)，水份為5.05%～7.55%，總灰分為1.05%～7.77%，酸不溶性灰分為0.08%～0.61%，醇溶性浸出物的結(jié)果為5.41%～17.21%。結(jié)論：該方法可作為控制傳統(tǒng)藏藥材松生等的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

【關(guān)鍵詞】松生等；藏藥；山柰素；顯微鑒別；薄層鑒別

基金項(xiàng)目：國(guó)家藥典委員會(huì)2011-2012年度“國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)提高”項(xiàng)目(NO：733)。

作者簡(jiǎn)介：巴桑卓嘎(1980-)，女，主任藥師，E-mail：12149375@qq.com

【中圖分類號(hào)】R291.408

【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】A

【文章編號(hào)】1007-8517(2015)22-0001-03

Abstract:Objective In order to establish the quality standards of Tibetan medicine Lignum rhamnellae．Methods Microscope was used to observe the plant organization structure and microscopic characteristics of powder; TLC was applied to identify the effective components qualitatively; The tests of water content，ash and ethanol- soluble extractives of Lignum rhamnellae were carried out according to the methods recordedin appendix of Chinese Pharmacopeia (2010 edition,volume 1).Results The microscopic and TLC identification methods were specific and well repeatable. The moistures in Lignum rhamnellae was 5.05%～7.55%, with the total ash within 1.05%～7.77%, the ethanol extract was 5.41%～17.21% by hot soak. Conclusion The methods could be used for the quality control of Tibetan medicine Lignum rhamnellae.

Keywords:Lignum rhamnellae; Tibetan Medicine; Kaempferide; The Microscopic Identification; TLC

收稿日期：(2015.08.01)

Study on the Quality Standard of Tibetan MedicineLignumrhamnellae

BASangzhuogaA Ping

Tibet Institute for Food and Drug Control, Lhasa 850000, China

松生等為鼠李科植物西藏貓乳RhamnellagilgiticaMansf. et Melch. 或小葉鼠李RhamnusparvifoliaBunge的干燥木材，為藏醫(yī)藥習(xí)用藥材，其標(biāo)準(zhǔn)收載于1995版部頒《藥品標(biāo)準(zhǔn)·藏藥》第一冊(cè)[1]。傳統(tǒng)藏醫(yī)藥理論認(rèn)為松生等具有涼血消腫的功效，臨床用于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，黃水病，高山多血病[2-6]。目前，松生等藥材的現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)簡(jiǎn)單，只有性狀和顯微鑒別，研究采用顯微鑒別、薄層色譜鑒別，并進(jìn)行水分、總灰分和酸不溶性灰分的檢查、醇溶性浸出物的測(cè)定，對(duì)10批不同產(chǎn)地的松生等藥材樣品進(jìn)行了檢測(cè)，為松生等藥材及其成方制劑的質(zhì)量控制提供了依據(jù)。

1儀器與材料

1.1儀器OLYMPUS BX51型光學(xué)顯微鏡；KQ-250B型超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)；AB204-S電子天平(梅特勒-托利多(上海)儀器公司)；HH系列恒溫水浴鍋(江蘇金壇中大儀器廠)；ZF-2型三用紫外儀(上海市安亭電子儀器廠)；DHG-9240A型電熱鼓風(fēng)干燥箱(上海一恒科技儀器有限公司)；SX5-12型箱式電阻爐(黃驊市卸甲綜合電器廠)。

1.2材料山柰素對(duì)照品(批號(hào)：110861-200808，中國(guó)藥品生物檢定研究院)提供。10批松生等藥材均來自西藏林芝、昌都及云南迪慶州，并經(jīng)西藏自治區(qū)藏醫(yī)學(xué)院專家鑒定均為藏醫(yī)習(xí)用松生等藥材(見表1)。薄層硅膠G板(青島海洋化工廠分廠)。水為超純水，試劑均為分析純。

表1　松生等樣品收集信息

2方法和結(jié)果

2.1　性狀鑒別 [1-5]

2.1.1西藏貓乳本品呈圓柱形或不規(guī)則的條塊狀，長(zhǎng)60～70cm，寬2～5cm。表面棕黃色，間有黑褐色，有順直紋理及刀削痕跡。質(zhì)堅(jiān)硬，橫切面可見年輪，有時(shí)可見深棕色髓部。氣微，味淡。如圖1所示。

圖1　西藏貓乳藥材圖

2.1.2小葉鼠李本品呈圓柱形或分叉狀，長(zhǎng)10～15cm，寬1.5～3cm，表面黃褐色至褐色，具縱皺紋，其間分布較多黃棕色橫長(zhǎng)皮孔和類圓形實(shí)起的枝痕個(gè)，并著生有黑棕色枝刺。質(zhì)堅(jiān)硬，不易折斷，橫斷面年輪明顯，皮部薄，淡黃棕色至紅棕色，木部黃白色至黃棕色，縱切面纖維性極強(qiáng)，氣微，味淡。如圖2所示。

圖2　小葉鼠李藥材圖

2.2　顯微鑒別

2.2.1西藏貓乳粉末粉末紅棕色。纖維眾多成束，主為纖維管胞，胞腔內(nèi)含草酸鈣方晶。含晶細(xì)胞位于纖維旁，數(shù)個(gè)縱向相接，形成晶纖維。草酸鈣方晶較多，直徑9～18μm。多面形、扁類方形等。偏光鏡下明亮可見。石細(xì)胞少見，單個(gè)散在，呈類方形、類圓形，直徑18～62μm，長(zhǎng)徑37～83μm ，孔溝明顯，層紋影見，內(nèi)含棕色物質(zhì)。具緣紋孔導(dǎo)管多見，直徑25～63μm。樹脂團(tuán)塊黃棕色，呈不規(guī)則狀。如圖3所示。

圖3　西藏貓乳粉末圖

2.2.2小葉鼠李粉末粉末灰黃色。纖維眾多，且碎斷，主為纖維管胞，大多成束，有時(shí)與導(dǎo)管、射線細(xì)胞毗鄰。纖維胞腔大，完整者呈長(zhǎng)棱形，直徑12～19μm，壁呈念珠狀增厚。薄壁細(xì)胞表面觀呈類方形、多角形，直徑10～32μm，長(zhǎng)25～29μm，壁呈念珠狀增厚，多呈皺縮狀，細(xì)胞內(nèi)含淡黃色至淡棕色顆粒物。具緣紋孔導(dǎo)管多見，直徑25～63μm。射線細(xì)胞類方形或長(zhǎng)方形，壁厚4～7μm，木化，內(nèi)腔類圓形。樹脂團(tuán)塊黃棕色，呈不規(guī)則狀。如圖4所示。

圖4　小葉鼠李粉末圖

2.2.3西藏貓乳橫切面顯微特本品射線由2～3列徑向延長(zhǎng)的細(xì)胞組成，細(xì)胞內(nèi)含棕紅色樹脂狀物質(zhì)。導(dǎo)管類圓形，單個(gè)散在，偶有2～3個(gè)聯(lián)合，直徑10～50μm。木纖維與纖維管胞無明顯區(qū)別。木薄壁細(xì)胞單個(gè)散在或者數(shù)個(gè)聯(lián)結(jié)，有的含草酸鈣方晶。如圖5所示。

圖5　西藏貓乳橫切面(10×20倍)

2.2.4小葉鼠李橫切面顯微特本品射線由1～2列徑向延長(zhǎng)的細(xì)胞組成，細(xì)胞內(nèi)無樹脂狀物質(zhì)。導(dǎo)管類圓形，單個(gè)散在，偶有2～3個(gè)聯(lián)合，直徑10～40μm。木纖維與纖維管胞無明顯區(qū)別。木薄壁細(xì)胞單個(gè)散在或者數(shù)個(gè)聯(lián)結(jié)，有的含草酸鈣方晶。如圖6所示。

圖6　小葉鼠李橫切面(10×20倍)

2.3　薄層鑒別 [7-8]

2.3.1山柰素薄層鑒別取本品粉末1g，置于錐形瓶中，加入甲醇10ml，超聲處理30min，濾過，濾液蒸干，加2ml甲醇溶解，作為供試品溶液。取山柰素對(duì)照品加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。按2010年版《中國(guó)藥典》一部附錄Ⅵ B的薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(60～90℃)-乙酸乙酯-甲酸(10∶11∶0.5)為展開劑，展開，取出，晾干。噴以3%三氯化鋁乙醇溶液，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。如圖7所示。

圖7　山柰素薄層鑒別

2.3.2松生等薄層鑒別取本品粉末1g，置于錐形瓶中，加入甲醇10ml，超聲處理30min，濾過，蒸干，加2ml甲醇溶解，作為供試品溶液。取松生等對(duì)照藥材1g，同供試品溶液的方法制成對(duì)照藥材溶液。按2010年版《中國(guó)藥典》一部附錄Ⅵ B的薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(60～90℃)-乙酸乙酯-甲酸(10∶11∶0.5)為展開劑，展開，取出，晾干。噴以10%硫酸乙醇溶液，日光下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。如圖8所示。

圖8　松生等薄層鑒別

2.4　檢查

2.4.1水分的測(cè)定取各產(chǎn)地松生等細(xì)粉約3g(過2號(hào)篩)，精密稱定，按2010 年版《中國(guó)藥典》一部附錄Ⅸ H 水分測(cè)定法第一法進(jìn)行測(cè)定。每批平行測(cè)定2 份，結(jié)果見表2。

2.4.2總灰分、酸不溶性灰分的測(cè)定取各產(chǎn)地松生等細(xì)粉約3g(過2 號(hào)篩)，精密稱定，按2010 年版《中國(guó)藥典》一部附錄Ⅸ K 總灰分測(cè)定法測(cè)定。每批平行測(cè)定2份，結(jié)果見表2。

2.4.3浸出物的測(cè)定取各產(chǎn)地松生等細(xì)粉約2g(過2號(hào)篩)，精密稱定，以稀乙醇為溶劑，按2010 年版《中國(guó)藥典》一部附錄X A 醇溶性浸出物測(cè)定法項(xiàng)下的熱浸法測(cè)定。每批平行測(cè)定2 份，結(jié)果見表2。

3討論

3.1顯微鑒別通過對(duì)10批不同產(chǎn)地的松生等藥材部分橫切面的顯微特征對(duì)比，發(fā)現(xiàn)其顯微特征基本一致。

3.2薄層色譜鑒別實(shí)驗(yàn)考察了不同展開劑，石油醚(60～90℃)-乙酸乙酯-甲酸(10∶11∶0.5)和環(huán)己烷-醋酸-甲酸(8∶4∶0.4)展開劑，結(jié)果石油醚(60～90℃)-乙酸乙酯-甲酸(10∶11∶0.5)為展開劑時(shí)主斑點(diǎn)清晰，分離度較好。耐用性試驗(yàn)考察了點(diǎn)樣方式(點(diǎn)狀點(diǎn)樣和帶狀點(diǎn)樣)，展開溫度(4～25℃)，展開濕度(10%～50%)，及不同廠家生產(chǎn)的薄層板，結(jié)果點(diǎn)狀點(diǎn)樣斑點(diǎn)清晰，分離度較好，展開溫度、濕度及不同廠家薄層板對(duì)結(jié)果影響不大，表明本薄層實(shí)驗(yàn)的耐用性較好。其次，通過上述的兩個(gè)薄層鑒別方法可知，西藏貓乳和小葉鼠李兩個(gè)種在化學(xué)成分上差異不大，在薄層色譜上呈現(xiàn)的斑點(diǎn)基本一致，而斑點(diǎn)的大小差異大，可能是與藥材的產(chǎn)地、生長(zhǎng)環(huán)境以及采收的季節(jié)和時(shí)間段等有關(guān)。

表2　10批松生等水分、總灰分、酸不溶性灰分和浸出物測(cè)定結(jié)果　/%

3. 3浸出物的測(cè)定實(shí)驗(yàn)考察了浸出物的測(cè)定方法(冷浸法和熱浸法)，結(jié)果冷浸法和熱浸法浸出物的含量差別不明顯，考慮到省時(shí)及節(jié)省溶劑的原則，故選用熱浸法。由于松生等中所含的有效成分主要為黃酮和皂苷類，因此選用95%、75%乙醇和稀乙醇作為提取溶劑考察浸出物的含量，結(jié)果以稀乙醇作為提取溶劑時(shí)，醇溶性浸出物的含量最高，故選稀乙醇作為提取溶劑。另外，松生等在藏藥中常以浸膏入藥，是通過加水煨泡煎煮的方法提取。因此該方法適于松生等的質(zhì)量控制。

3.4限量標(biāo)準(zhǔn)制定建議本實(shí)驗(yàn)收集了不同產(chǎn)地的松生等共10批，樣品有一定的代表性，根據(jù)不同收集地松生等的測(cè)定結(jié)果，建議規(guī)定松生等的含水量不得多于8.0%，總灰分不得多于8.0%，酸不溶性灰分不得多于1.0%，以干燥品計(jì)算醇溶性浸出物不得少于5.0%。

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