沈　菁,雷曉明,宋　洋,譚　杏,劉　琴,戴麗雯,李文慧,郁　潔*（.湖南中醫(yī)藥大學(xué)針灸推拿學(xué)院，湖南長(zhǎng)沙4008;.湖南中醫(yī)藥大學(xué)教務(wù)處，湖南長(zhǎng)沙4008）

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電針內(nèi)關(guān)、百會(huì)穴對(duì)腦缺血/再灌注大鼠GRP78和Caspase-12基因表達(dá)的影響

沈菁1,雷曉明2,宋洋1,譚杏1,劉琴1,戴麗雯1,李文慧1,郁潔1*
（1.湖南中醫(yī)藥大學(xué)針灸推拿學(xué)院，湖南長(zhǎng)沙410208;2.湖南中醫(yī)藥大學(xué)教務(wù)處，湖南長(zhǎng)沙410208）

〔摘要〕目的觀察電針內(nèi)關(guān)、百會(huì)穴對(duì)腦缺血/再灌注（Ischemia/Reperfusion，I/R）大鼠腦GRP78和Caspase-12基因表達(dá)的影響，探討針刺發(fā)揮腦保護(hù)作用是否與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激凋亡通路有關(guān)。方法100只大鼠隨機(jī)分為5組，每組20只，即正常組、假手術(shù)組、手術(shù)造模組、依達(dá)拉奉組和針刺干預(yù)組。采用線栓法建立大鼠大腦中動(dòng)脈阻塞（middle cerebral artery occlusion，MCAO）腦I/R模型。采用TUNEL染色法，檢測(cè)大鼠神經(jīng)細(xì)胞凋亡指數(shù)；采用實(shí)時(shí)定量多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（Real-Time polymerase chain reaction，RT-PCR），檢測(cè)GRP78、Caspase-12 mRNA表達(dá)。結(jié)果與正常組和假手術(shù)組相比，手術(shù)造模組、依達(dá)拉奉組和針刺干預(yù)組大鼠細(xì)胞凋亡指數(shù)升高，GRP78和Caspase-12 mRNA表達(dá)增多，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05或P＜0.01）；與手術(shù)造模組相比，依達(dá)拉奉組和針刺干預(yù)組大鼠細(xì)胞凋亡指數(shù)和Caspase-12 mRNA表達(dá)均明顯降低（P＜0.01），GRP78 mRNA表達(dá)明顯升高（P＜0.01）；與依達(dá)拉奉組相比，針刺干預(yù)組大鼠各項(xiàng)指標(biāo)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)論針刺內(nèi)關(guān)、百會(huì)穴可以有效抑制腦缺血神經(jīng)元細(xì)胞凋亡，其保護(hù)機(jī)制可能上調(diào)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激保護(hù)性GRP78表達(dá)，同時(shí)抑制促凋亡Caspase-12表達(dá)有關(guān)。

〔關(guān)鍵詞〕細(xì)胞凋亡;電針;腦缺血/再灌注損傷;百會(huì);內(nèi)關(guān);GRP78;Caspase-12

Effect of Electroacupuncture at Neiguan and Baihui Points on GRP78 and Caspase-12 Gene Expression in Rats with Ischemia-Reperfusion Injury

SHEN Jing1, LEI Xiaoming2, SONG Yang1, TAN Xing1, LIU Qin1, DAI Liwen1,
Li Wenhui1, YU Jie1*
（1. Acupuncture and Tuina Massage School, Hunan University of Chinese Medicine, Changsha, Hunan 410208, China；2. Academic Affairs Division, Hunan University of Chinese Medicine, Changsha, Hunan 410208, China）

〔Abstract〕Objective To observe the effects of electro-acupuncture（EA）at Neiguan and Baihui point on GRP78 and Caspase-12 gene expression in rats with ischemia/ reperfusion（IR）injury and investigate protective effects of acupuncture wheather related to endocytoplasmic reticulum（ER）stressapoptosis passage. Methods 100 rats were randomly assigned to five groups, 20 in each group: the normal group, sham-operation group, operation model group, edaravone group and EA group. The IR model of middle cerebral artery occlusion（MCAO）was established by suture embolic method. The apoptosis index of nerve cells in rats were measured by TUNEL staining method. The mRNA expression of GRP78 and Caspase-12 were measure by Real-time polymerase chain reaction（RT-PCR）. Results Compared with normal group and sham-operation group, the apoptosis indexes and mRNA expression of GRP78 and Caspase-12 in operation group, Edaravone group and EA group were increased, with statistical significance（P＜0.05 or P＜0.01）; Compared with operation model group, the apoptosis indexes and Caspase-12 mRNA expression in edaravone group and EA group were decreased（P＜0.01）, GRP78 mRNA expression were increased obviously（P＜0.01）; there were no significant difference between edaravone group and EA group on the above indexes（P＞0.05）. Conclusion Acupuncture at Neiguan and Baihui points could effectively suppress the nerve cell apoptosis in cerebral ischemia. The underlying mechanism might be related to upregulation of the ERS-protective GRP78 expression and inhibition of apoptosis-promotion Caspase-12 expression.

〔Keywords〕cell apoptosis, electroacupuncture, cerebral ischemia/reperfusion injury, Baihui point; Neiguan point; GRP78, Caspase-12

近年來(lái)有關(guān)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激介導(dǎo)凋亡通路的研究受到廣泛關(guān)注，已發(fā)現(xiàn)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激與許多疾病的發(fā)生發(fā)展有關(guān)，比如糖尿病、腫瘤等。在這種形勢(shì)下，明確內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激與腦缺血/再灌注（ischemia/reperfusion, I/R）損傷的關(guān)系顯得十分必要。本研究通過觀察電針對(duì)腦I/R大鼠GRP78和Caspase-12基因表達(dá)的影響,探討針刺腦保護(hù)作用與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激凋亡通路的關(guān)系，力求為臨床針刺治療中風(fēng)提供一定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。

1　材料與方法

1.1動(dòng)物分組

10～12周健康雄性清潔級(jí)SD大鼠100只，體質(zhì)量230～250 g（由湖南中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證號(hào)：湘醫(yī)動(dòng)字20-002）。所有大鼠隨機(jī)分為3組，即正常對(duì)照組（A組）20只、假手術(shù)組（B組）20只、造模組60只。造模組成功后的大鼠隨機(jī)分為手術(shù)造模組（C組）20只、依達(dá)拉奉組（D組）20只和針刺干預(yù)組（E組）20只。

1.2主要儀器與試劑

DK-8D型電熱恒溫水槽（上海森信實(shí)驗(yàn)儀器有限公司）；DYY-8型穩(wěn)壓穩(wěn)流電泳儀（上海琪特分析儀器有限公司）；H6-1微型電泳槽（上海精益有機(jī)玻璃制品儀器廠）；Rotor-Gene3000 Rea1timePCR儀、引物設(shè)計(jì)軟件Primer5.0、Rotor-gene6.0（CorbettReseareh）等。

TRIZOL試劑（上海生工生物工程有限公司）；逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)RT-PCR試劑盒（上海生工生物工程有限公司）；MMLV反轉(zhuǎn)錄酶、10×RT緩沖液（Epicentre）；2.5 mM dNTP混合液（HyTest Ltd）；Oligo（dT）18、瓊脂糖、溴化乙錠（EB）（上海生工生物工程有限公司）；DEPC（焦炭酸二乙基酯）、氯仿、異丙醇（上海化學(xué)試劑有限公司）等。

1.3模型制備

參考Longa等[1]報(bào)道的線栓法制備局灶性大腦中動(dòng)脈腦缺血（middle cerebral artery occlusion，MCAO）模型。動(dòng)物用10%水合氯醛（35 mg/kg）腹腔注射麻醉。仰臥位固定，依次分離左側(cè)頸總動(dòng)脈（CCA）、頸外動(dòng)脈（ECA）和頸內(nèi)動(dòng)脈（ICA）。在距ECA分叉部4 mm處剪一小口，將拴線插入深度約18 mm。手術(shù)后2 h將栓線拔出。手術(shù)過程中及術(shù)后大鼠蘇醒前予以燈照保暖。假手術(shù)組插入深度為8～10 mm，其余操作同手術(shù)組。根據(jù)神經(jīng)功能缺損評(píng)分法[2]，于針刺干預(yù)組大鼠蘇醒后即刻對(duì)所有大鼠進(jìn)行評(píng)分，滿分為11分，分?jǐn)?shù)越高，說明動(dòng)物行為障礙越嚴(yán)重。凡造模手術(shù)中動(dòng)物死亡、蛛網(wǎng)膜下腔出血或無(wú)對(duì)側(cè)偏癱體征均視為手術(shù)造模失敗。

1.4依達(dá)拉奉注射方法

取10 mg依達(dá)拉奉注射液（商品名：必存，批號(hào)：H20031342，規(guī)格：10 mg/5 mL）以5 mL生理鹽水稀釋，配制成l mg/mL的濃度。依達(dá)拉奉組大鼠在腦I/R即刻一次性予尾靜脈注射依達(dá)拉奉3 mg/kg。手術(shù)造模組在同一時(shí)刻給予注射等量生理鹽水。

1.5穴位定位與針刺方法

根據(jù)新世紀(jì)全國(guó)高等中醫(yī)藥院校規(guī)劃教材《實(shí)驗(yàn)針灸學(xué)》[3]大鼠針灸穴位定位方法及擬人比照法定位。內(nèi)關(guān)穴位于前肢內(nèi)側(cè)，距腕關(guān)節(jié)上3 mm左右的尺橈骨間，直刺2 mm；百會(huì)穴位于頂骨正中，向前沿皮斜刺2 mm。以醫(yī)用10 mm、28號(hào)毫針刺入穴位，于針柄處接華佗牌SDZ-Ⅱ型電針治療儀。疏密波（疏波10 Hz，密波50 Hz），第一對(duì)電極負(fù)極接左側(cè)內(nèi)關(guān)穴，第二對(duì)電極負(fù)極接百會(huì)穴，正極均接鼠尾。強(qiáng)度以鼠尾輕顫為度，刺激時(shí)間30 min。

1.6實(shí)驗(yàn)步驟

第1天：正常對(duì)照組大鼠捆綁約30 min；假手術(shù)組大鼠行假手術(shù)，待大鼠清醒并評(píng)分后注射生理鹽水；手術(shù)造模組大鼠造模，待大鼠清醒并評(píng)分后注射生理鹽水；依達(dá)拉奉組大鼠造模，待大鼠清醒并評(píng)分后注射依達(dá)拉奉；針刺干預(yù)組大鼠造模，待大鼠清醒并評(píng)分后予以針刺干預(yù)。第2～4天：針刺干預(yù)組大鼠針刺干預(yù)，其余各組捆綁約30 min。

處理完畢后，全部大鼠用10%水合氯醛進(jìn)行深度麻醉，每組取10只大鼠沿胸骨旁線剪開胸腹腔，剪開右心耳生理鹽水沖洗至肝臟變白、右心耳流出的液體清亮后灌注4%多聚甲醛約300 mL至大鼠四肢強(qiáng)直僵硬后停止灌注。剝離腦組織，取視交叉后2 mm腦組織，4%多聚甲醛固定過夜，制作腦組織蠟塊，4℃保存，以備檢測(cè)細(xì)胞凋亡指數(shù)（apoplosis index，AI）；每組另10只大鼠麻醉后斷頭取腦組織。切取缺血側(cè)頂葉大腦皮質(zhì)約100 mg（冠狀面距額極7～11 mm，扇形分出缺血半暗帶，即大腦縱裂到大腦外側(cè)溝皮層上1/3），迅速放入已編號(hào)的凍存管中，液氮中保存，以備RT-PCR檢測(cè)。

1.7觀察指標(biāo)及檢測(cè)方法

1.7.1細(xì)胞凋亡指數(shù)（AI）TUNEL染色法。具體步驟按試劑盒說明書進(jìn)行。

凋亡細(xì)胞核呈棕黃色或棕褐色。測(cè)定部位為頂葉缺血區(qū)周圍，每個(gè)標(biāo)本在高倍鏡（×400）下隨機(jī)觀察梗死灶周邊區(qū)域5個(gè)不重疊的視野，計(jì)算不同視野的凋亡陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)百分比，取平均值作統(tǒng)計(jì)。正常對(duì)照組和假手術(shù)組取腦相應(yīng)部位觀察。

1.7.2GRP78和Caspase-12基因表達(dá)RT-PCR檢測(cè)。

（1）引物設(shè)計(jì)：GRP78、Caspase-12引物由上海生工生物公司合成。各引物序列、產(chǎn)物長(zhǎng)度、PCR反應(yīng)的退火溫度見表1。

表1　引物序列

（2）結(jié)果與計(jì)算：各樣品的目的基因和管家基因分別進(jìn)行Realtime PCR反應(yīng)。根據(jù)繪制的梯度稀釋DNA標(biāo)準(zhǔn)曲線，各樣品目的基因和管家基因的濃度結(jié)果直接由機(jī)器生成。每個(gè)樣品的目的基因濃度除以其管家基因的濃度，即為此樣品此基因的校正后的相對(duì)含量。

1.8統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

所有數(shù)據(jù)使用SPSS17 for Windows軟件進(jìn)行處理。數(shù)據(jù)用“±s”表示，各指標(biāo)5組計(jì)量資料均采用單因素方差分析，細(xì)胞凋亡指數(shù)方差齊性檢驗(yàn)顯示方差不齊，兩兩比較采用Tamhane's T2法；GRP78和Caspase-12表達(dá)方差齊性檢驗(yàn)顯示方差齊，兩兩比較采用LSD法。

2　結(jié)果與分析

2.1電針百會(huì)、內(nèi)關(guān)穴對(duì)I/R大鼠腦神經(jīng)元AI的影響

與正常對(duì)照組比較，假手術(shù)組大鼠腦神經(jīng)元AI無(wú)明顯變化（P＞0.05）。與正常對(duì)照組和假手術(shù)組比較，手術(shù)造模組、依達(dá)拉奉組和針刺干預(yù)組大鼠AI明顯升高，差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。與手術(shù)造模組比較，依達(dá)拉奉組和針刺干預(yù)組大鼠AI明顯降低（P＜0.01）。針刺干預(yù)組與依達(dá)拉奉組比較差異不明顯（P＞0.05）。見表2。

圖1所示，藍(lán)色為正常細(xì)胞，紅色為凋亡細(xì)胞。正常對(duì)照組與假手術(shù)組可見少量凋亡細(xì)胞，手術(shù)造模組可見大量凋亡細(xì)胞，依達(dá)拉奉組與針刺干預(yù)組凋亡細(xì)胞數(shù)量較造模組減少。

表2　電針對(duì)I/R大鼠腦神經(jīng)元AI的影響　（±s）

表2　電針對(duì)I/R大鼠腦神經(jīng)元AI的影響?。ā纒）

注：與正常對(duì)照組相比，**P＜0.01；與假手術(shù)組相比，▲▲P＜0.01；與手術(shù)造模組相比，＃＃P＜0.01。

組別正常對(duì)照組假手術(shù)組手術(shù)造模組依達(dá)拉奉組針刺干預(yù)組F n 10 10 10 10 10 AI（%）6.12±0.93 5.88±1.48 41.79±4.99**▲▲30.08±2.93**▲▲＃＃32.78±4.07**▲▲＃＃253.535

A.正常對(duì)照組；B.假手術(shù)組；C.手術(shù)造模組；D.依達(dá)拉奉組；E.針刺干預(yù)組圖1　各組大鼠腦神經(jīng)元細(xì)胞凋亡光鏡觀察圖（×400）

2.2電針百會(huì)、內(nèi)關(guān)穴對(duì)I/R大鼠腦GRP78和Caspas-12基因表達(dá)的影響

與正常對(duì)照組比較，假手術(shù)組大鼠腦GRP78 和Caspase-12 mRNA表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。與正常對(duì)照組和假手術(shù)組比較，手術(shù)造模組、依達(dá)拉奉組和針刺干預(yù)組大鼠GRP78和Caspase-12 mRNA表達(dá)均明顯升高（P＜0.05或P＜0.01）。與手術(shù)造模組相比，依達(dá)拉奉組和針刺干預(yù)組大鼠GRP78 mRNA表達(dá)顯著增加（P＜0.01），同時(shí)Caspase-12 mRNA表達(dá)明顯減少（P＜0.01）。與依達(dá)拉奉組比較，針刺干預(yù)組大鼠GRP78和Caspase-12 mRNA表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表3。

表2　電針對(duì)I/R大鼠腦GRP78和Caspase-12基因表達(dá)的影響?。╪＝10，±s）

表2　電針對(duì)I/R大鼠腦GRP78和Caspase-12基因表達(dá)的影響?。╪＝10，±s）

注：與正常對(duì)照組相比，*P＜0.05，**P＜0.01；與假手術(shù)組相比，▲P＜0.05，▲▲P＜0.01；與手術(shù)造模組相比，＃＃P＜0.01。

組別正常對(duì)照組假手術(shù)組手術(shù)造模組依達(dá)拉奉組針刺干預(yù)組F GRP78 mRNA 10.697±1.613 10.881±1.447 13.471±1.657**▲▲17.472±1.663**▲▲＃＃16.780±1.698**▲▲＃＃38.758 Caspases-12 mRNA 0.263±0.075 0.278±0.072 0.623±0.104**▲▲0.356±0.055*▲＃＃0.384±0.087**▲▲＃＃32.449

3　討論

腦血管病屬于祖國(guó)醫(yī)學(xué)“中風(fēng)”病的范疇，臨床上以突然昏仆、半身不遂、口舌歪斜等為主癥的一種病證，與西醫(yī)所稱的腦血管病相似。缺血性中風(fēng)病急性期以標(biāo)實(shí)為主，而標(biāo)實(shí)又以血瘀為本。針刺治療中風(fēng)病是行之有效的治療方法之一[4-6]，故本實(shí)驗(yàn)以通經(jīng)絡(luò)、行氣血、開腦竅為其針刺大法，選取百會(huì)、內(nèi)關(guān)二穴。百會(huì)穴位于巔頂，屬于督脈，是督脈、足太陽(yáng)膀胱經(jīng)、手少陽(yáng)三焦經(jīng)、足少陽(yáng)膽經(jīng)、足厥陰肝經(jīng)的交會(huì)處，督脈由此入于腦，任、督、沖三脈同出一源，故針刺百會(huì)可調(diào)陰陽(yáng)、熄肝風(fēng)、填精補(bǔ)髓、益氣養(yǎng)血、醒神開竅。內(nèi)關(guān)為手厥陰心包經(jīng)絡(luò)穴，有寧心定志、調(diào)理三焦氣機(jī)之功，同時(shí)是八脈交會(huì)穴之一，通過陰維脈主一身之里，調(diào)節(jié)周身陰氣。二穴一主陽(yáng)，一主陰，共奏開竅醒神、活血去風(fēng)之功效，對(duì)中風(fēng)疾病具有較好的效果。

腦I/R損傷使腦神經(jīng)元內(nèi)外環(huán)境產(chǎn)生缺氧、缺血變化，引起內(nèi)質(zhì)網(wǎng)功能紊亂，產(chǎn)生內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激。一方面開啟自我保護(hù)性途徑，GRP78代償性增多。GRP78被認(rèn)為是內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激（ERS）的經(jīng)典標(biāo)志物，GRP78的上調(diào)表達(dá)對(duì)于ERS引起的神經(jīng)元細(xì)胞有保護(hù)作用[7]，又可以間接抑制Caspase-12表達(dá)，阻斷內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激凋亡。另一方面，過長(zhǎng)過久的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激，可以直接激活Caspase-12。Caspase-12是ERS導(dǎo)致凋亡的特異性介質(zhì)。Caspase-12缺陷鼠能抵抗ERS引起的凋亡，而與非ERS介導(dǎo)的凋亡無(wú)關(guān)[8]。有研究表明，局部腦缺血和全腦缺血均引起GRP78/ BIP表達(dá)的被上調(diào)[9-10]。Hayashi等[11]研究亦發(fā)現(xiàn)，缺血預(yù)處理可以誘導(dǎo)GRP78表達(dá)上調(diào)抑制神經(jīng)細(xì)胞的凋亡，從而起到腦細(xì)胞的保護(hù)作用。caspase-12其表達(dá)上調(diào)在腦I/R動(dòng)物模型中發(fā)現(xiàn)，而且，隨著缺血再灌注時(shí)間的延長(zhǎng)，保護(hù)性因子GRP78的活性被caspase-12抑制[12]。另外發(fā)現(xiàn)，caspase-12基因敲除的小鼠無(wú)明顯的發(fā)育或行為缺陷[13]，可明顯阻抑內(nèi)質(zhì)網(wǎng)氧化應(yīng)激引起的凋亡，說明通過caspase-12的阻斷來(lái)阻抑ERS介導(dǎo)的凋亡有效。

本實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)：模型組大鼠腦I/R損傷，啟動(dòng)ERS，一方面GRP78mRNA表達(dá)代償升高，進(jìn)行腦組織保護(hù)；同時(shí)Caspase-12mRNA表達(dá)顯著增加，啟動(dòng)促細(xì)胞凋亡途徑，AI明顯升高。針刺干預(yù)組在大鼠腦I/R損傷一開始，就進(jìn)行針刺百會(huì)穴和內(nèi)關(guān)穴干預(yù)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：與模型組相比，GRP78mRNA表達(dá)進(jìn)一步明顯增加；同時(shí)Caspase-12mRNA表達(dá)均顯著降低，AI明顯下降。

綜上所述，針刺內(nèi)關(guān)、百會(huì)穴可以有效抑制腦神經(jīng)元細(xì)胞凋亡，其途徑可能是通過激活ERS產(chǎn)生的。針刺發(fā)揮腦保護(hù)的內(nèi)在機(jī)制可能與一方面上調(diào)GRP78表達(dá)，另一方面抑制Caspase-12表達(dá)有關(guān)。

參考文獻(xiàn)：

[1] Longa EZ, Weinstein PR, Carlson S, et a1. Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats [J]. Srtoke, 1989,20（1）:84-91.

[2]孫敬芳主編.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物方法學(xué)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社, 2001: 11.

[3]李忠仁主編.實(shí)驗(yàn)針灸學(xué)[M].北京：中國(guó)中醫(yī)藥出版社, 2003：327-329.

[4]鄧凱文，賀福元，常小榮.針刺關(guān)元等穴配合補(bǔ)陽(yáng)還五湯治療中風(fēng)恢復(fù)期偏許療效觀察[J].湖南中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2011，31（11）：62-64.

[5]張金峰，王長(zhǎng)德，劉欣燕，等.頭穴針刺結(jié)合認(rèn)知訓(xùn)練治療中風(fēng)后輕度認(rèn)知功能障礙[J].長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2015，31（3）：541-544.

[6]白瑋婧，張春紅，張新亞，等.針刺與康復(fù)訓(xùn)練治療腦卒中后共濟(jì)失調(diào)[J].吉林中醫(yī)藥，2014，34（9）941-944.

[7] Uznetsov G, Chen LB, Nigam SK. Multiple molecular chaperones complex with misfolded large oligomeric glycoproteins in the endoplasmic reticulum[J]. Biol Chem,1997,272（5）:3 057-3 063.

[8]關(guān)麗英,許彩民,潘華珍.內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡[J].生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展,2007,34（11）:1 136-1 141.

[9] Shibata M, Hattofi H,Sasaki T, et al.Activation of caspase-1 2 by endoplasmic reticulum stress induced by transient middle cerebral artery occlusion in mice [J]. Neuroscience,2003,118（2）: 491-499.

[10] Ito D, Tanaka K, Suzuki S, et al. Up-regulation of the Ire 1 -mediated signaling molecule,Bip,in ischemic rat brain [J]. Neuroreport,2001,12（18）:4 023-4 028.

[11] Hayashi T, Saito A, Okuno S, et al. Induction of GRP78 by ischemic preeonditioning reticulum strss and prevents delayed neuronal cell deal[J]. Cereb Blood Flow Metab,2003,23（8）:949-961.

[12] Paschen W, Aufenberg C, Hotop S, et al. Transient cerebral ischemia activates processing of xbp1 messenger RNA indicative of endoplasmic reticulum stress [J]. Cereb Blood Flow Metab,2003,23（4）:449-461.

[13] Mehmet H. Caspases find a new place to hide [J]. Nature, 2000,403:29-30.

（本文編輯匡靜之）

〔通訊作者〕*郁潔，女，碩士研究生導(dǎo)師，副教授，E-mail：47060463@qq.com。

〔作者簡(jiǎn)介〕沈菁，女，醫(yī)學(xué)博士，講師，研究方向：針灸治病機(jī)制的研究。

〔基金項(xiàng)目〕國(guó)家自然科學(xué)基金青年項(xiàng)目（81202771）;教育部新教師類項(xiàng)目（20114323120005）;針灸推拿湖南省重點(diǎn)學(xué)科資助。

〔收稿日期〕2015-08-24

〔中圖分類號(hào)〕R245.3

〔文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼〕A

〔文章編號(hào)〕

doi:10.3969/j.issn.1674-070X.2016.02.015