劉學(xué)偉，趙學(xué)英，張喜莊，楊永軍，楊繼宏，張　慧

(華北石油管理局總醫(yī)院，河北 任丘 062552)

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高危型人乳頭瘤病毒感染女性及其配偶病毒檢測(cè)結(jié)果分析

劉學(xué)偉，趙學(xué)英，張喜莊，楊永軍，楊繼宏，張慧

(華北石油管理局總醫(yī)院，河北 任丘 062552)

[摘要]目的研究高危型人乳頭瘤病毒(HPV)感染女性及其配偶病毒感染狀況及HPV亞型分布，分析夫妻共患率。方法對(duì)120例經(jīng)宮頸分泌物檢測(cè)確診高危型HPV陽(yáng)性患者HPV亞型分布情況進(jìn)行分析，并采集患者配偶尿道口上皮細(xì)胞和分泌物進(jìn)行高危型HPV檢測(cè)并分型，將檢測(cè)結(jié)果與其妻子HPV檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行對(duì)照分析。結(jié)果120例女患者共檢測(cè)到高危型HPV亞型8種，常見(jiàn)亞型為16，58，18，52和33型。120例女患者配偶共檢測(cè)到高危型HPV感染52例(43.33%)，常見(jiàn)亞型為16，18，58，52和33亞型。夫妻HPV吻合率為15.83%(19/120)。結(jié)論高危型HPV感染女性的配偶也是病毒感染的高危人群。女性一旦檢測(cè)出高危型HPV感染陽(yáng)性，有必要對(duì)其配偶進(jìn)行HPV篩查，并將其納入HPV感染的管理、治療和跟蹤檢測(cè)范圍。

[關(guān)鍵詞]男性；人乳頭瘤病毒感染； 基因檢測(cè)

人乳頭瘤病毒 (human papilloma virus，HPV)是一種無(wú)包膜的小 DNA 病毒，有極強(qiáng)的嗜上皮細(xì)胞屬性，可引發(fā)皮膚及黏膜病變。研究發(fā)現(xiàn)，隨著宮頸病變的級(jí)別升高，HPV陽(yáng)性率呈上升趨勢(shì)，高危型HPV持續(xù)感染是導(dǎo)致宮頸癌的主要致病原因[1]。目前對(duì)成年女性進(jìn)行HPV篩查已成為篩查子宮頸癌及癌前病變的常規(guī)檢查項(xiàng)目。實(shí)際上男性也會(huì)感染HPV，高危型HPV感染女性的配偶也有可能是HPV的感染者。本研究采集高危型HPV感染女性配偶的尿道口上皮細(xì)胞和分泌物進(jìn)行高危型HPV亞型檢測(cè)，并將檢測(cè)結(jié)果與其妻子的感染亞型進(jìn)行比對(duì)，探討夫妻間HPV感染類(lèi)型的分布，為采取有效措施預(yù)防病毒傳播、促進(jìn)感染夫婦同期治療提供理論依據(jù)。

1臨床資料

1.1一般資料選擇2013年1月—2015年6月在華北石油管理局總醫(yī)院經(jīng)宮頸組織HPV檢測(cè)確定為高危型HPV陽(yáng)性并取得分型結(jié)果的120例女性患者及其配偶，夫妻雙方均自愿參加本研究。排除有尿道感染性疾病尚未治愈者、夫妻一方或雙方有婚外性生活史者、妻子已確診有宮頸糜爛及癌前病變等陽(yáng)性體征者。男性年齡26～55歲，平均37.6歲；女性年齡24～54歲，平均35.2歲。

1.2標(biāo)本采集女性標(biāo)本采集由婦科醫(yī)師進(jìn)行，避開(kāi)月經(jīng)期，檢查前3 d無(wú)陰道上藥、沖洗等陰道和宮頸操作。取材時(shí)用窺器打開(kāi)陰道，充分暴露宮頸，用無(wú)菌鹽水棉球或干棉球拭凈宮頸口處的分泌物，專(zhuān)用HPV取樣器插入子宮頸管按照同一方向旋轉(zhuǎn)3～5周，慢慢取出取樣器，放入含有保存液的容器中待檢。男性標(biāo)本采集由泌尿外科醫(yī)師進(jìn)行：上翻受檢者包皮并清洗，充分撐開(kāi)尿道口，將特制的無(wú)菌細(xì)濕棉簽置于尿道口內(nèi)1～2 cm處，稍加壓力順時(shí)針旋轉(zhuǎn)拭子5圈，以獲得足夠的尿道口上皮細(xì)胞和分泌物標(biāo)本，緩慢抽出棉簽，頭端迅速置于洗脫管中并旋緊管蓋。標(biāo)本在2 h內(nèi)進(jìn)行DNA抽提，或存入-20 ℃冰箱內(nèi)待測(cè)。

1.3檢測(cè)方法HPV檢測(cè)及分型步驟：①HPV-DNA提?。虎贖PV聚合酶鏈反應(yīng)(PCR擴(kuò)增)；③核酸分子快速導(dǎo)流雜交及分型。試劑盒由凱普生物科技股份有限公司提供，實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)室流程進(jìn)行，可一次性快速檢測(cè)16，18，31，33，35，39，45，51，52，56，58，59，68亞型13種HPV高危亞型，結(jié)果分析按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

2結(jié)果

2.1高危型HPV感染女性HPV亞型分布情況120例女性共檢測(cè)到高危型HPV亞型8種，分別為16，18，31，33，45，52，58，68亞型，未檢測(cè)到35，39，51，56，59亞型。單一亞型感染陽(yáng)性率為84.17%(101/120)，其余為多重感染。HPV亞型按出現(xiàn)的頻率依次為16，58，18，52，33，45，31和68亞型。見(jiàn)表1。

表1　高危型HPV感染女性HPV亞型分布情況

2.2高危型HPV感染女性配偶的HPV亞型分布情況120例男性共檢測(cè)到高危型HPV感染52例，總感染率為43.33%。高危型HPV亞型有6種，分別為16，18，33，52，58，59亞型，未檢測(cè)到31，35，39，45，51，56和68亞型。單一亞型感染陽(yáng)性率為94.23%(49/52)。HPV亞型按其出現(xiàn)的頻率依次為16，18，58，52，33和59亞型。見(jiàn)表2。

表2　高危型HPV感染女性配偶的HPV亞型分布情況

2.3夫妻配對(duì)亞型吻合情況配對(duì)后共檢出16例HPV亞型完全吻合，雙方均為單一亞型感染。另有3例亞型部分吻合，即一方為多重感染，其配偶為單一亞型感染且雙方均有同一亞型，判為符合。未發(fā)現(xiàn)感染女性與其配偶同為多重感染者。夫妻HPV吻合率為15.83%(19/120)，其余為感染亞型不同或單方檢測(cè)陽(yáng)性。見(jiàn)表3。

表3　高危型HPV感染女性與其配偶HPV亞型吻合

3討論

在成年女性惡性腫瘤中，子宮頸癌發(fā)病率位于僅次于乳腺癌的第2位[2]，占女性生殖系統(tǒng)惡性腫瘤的首位。據(jù)統(tǒng)計(jì)，我國(guó)每年新發(fā)子宮頸癌病例約為13.2萬(wàn)人，占全球?qū)m頸癌新發(fā)病例的28.8%[3]，嚴(yán)重威脅著成年女性的身心健康。從宮頸癌前病變發(fā)展成為浸潤(rùn)癌一般需要數(shù)年甚至10余年的時(shí)間，在此期間宮頸癌前病變?nèi)缒軌虻玫皆缙谠\斷、早期治療，就有可能防止宮頸癌的發(fā)生[4]。近年來(lái)，宮頸液基薄層細(xì)胞學(xué)檢查、HPV檢測(cè)、陰道鏡檢查及活檢、宮頸環(huán)形電切術(shù)等方法和技術(shù)在宮頸病變?cè)\治中的應(yīng)用為宮頸癌及癌前病變的防治起到了極大的促進(jìn)作用[5]。特別是高危型HPV的檢測(cè)具有取材方便、無(wú)創(chuàng)、可重復(fù)等特點(diǎn)，適宜大面積篩查，其結(jié)果能在一定程度上反映宮頸癌及癌前病變的發(fā)生、發(fā)展[6]，是現(xiàn)階段預(yù)防和控制子宮頸癌的主要手段之一。

HPV是感染泌尿生殖道黏膜的常見(jiàn)DNA病毒之一，根據(jù)其致癌危險(xiǎn)性又分為低危型和高危型。低危型HPV包括6，11，42，43，44， 53，61等亞型，可引起外生殖器及其周邊部位皮膚的感染性病變?nèi)缂怃J濕疣等，極少引發(fā)浸潤(rùn)癌。高危型HPV包括16，18，31，33，35，39，45，51，52，56，58，59，68等亞型，可引起女性子宮頸高度鱗狀上皮內(nèi)病變和誘發(fā)宮頸癌，在男性可導(dǎo)致陰莖癌、肛門(mén)癌等惡性腫瘤的發(fā)生，對(duì)兩性的生殖健康構(gòu)成嚴(yán)重威脅。HPV感染是非常常見(jiàn)的，大多數(shù)女性HPV感染為一過(guò)性，女性特有的陰道酸性環(huán)境，可通過(guò)自身免疫清除一部分HPV病毒。但在35歲以上的成年女性中，有10%～15%的人持續(xù)感染HPV，這些人患宮頸癌的風(fēng)險(xiǎn)相對(duì)較高[7]。而男性生殖器無(wú)自潔功能，陰莖頭、包皮、 尿道口均為男性的HPV易感部位，一旦感染病毒后多不能自行清除。男性感染后多不表現(xiàn)生殖器明顯病變，人群中存在大量的無(wú)癥狀病毒攜帶者。病毒很容易通過(guò)性生活傳染給女性，反之感染女性也可將病毒傳染給男性性伴侶，使之成為病毒感染者。性伴侶過(guò)多是HPV感染的高危因素，不僅可以導(dǎo)致個(gè)體接觸到HPV感染的概率增加，同時(shí)還會(huì)導(dǎo)致不同亞型感染使自身免疫力難以將之清除。性生活中男性使用避孕套是HPV感染發(fā)生的保護(hù)因素[8]。因此，在宮頸癌的防治工作中，特別是高危型HPV感染的防控工作中必須考慮到男性性行為、性衛(wèi)生知識(shí)認(rèn)知程度、性態(tài)度等因素的影響。本研究主要在夫妻間進(jìn)行，且將已有性生活的未婚女性及夫妻一方或雙方有婚外性生活史者排除在外，主要考慮HPV感染來(lái)源不確定，影響檢測(cè)結(jié)果在兩性間的配對(duì)分析。

HPV單一亞型的感染可使宮頸癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)增加19.9倍，而多重型別感染可使發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)增加31.8倍[9]。多重感染屬比較常見(jiàn)的感染類(lèi)型，具有病毒載量更大、出現(xiàn)持續(xù)感染的可能性更高、自身免疫清除更為困難、更易導(dǎo)致生殖器惡性病變的特點(diǎn)。從既往研究結(jié)果來(lái)看，女性HPV感染以單一亞型感染為主，多重感染約占1/4[10]。本研究結(jié)果顯示，高危型HPV在女性的分布主要以單一亞型感染為主占84.17%，常見(jiàn)16，58，18，52和33亞型感染。冉丹[11]對(duì)南陽(yáng)地區(qū)1 886例女性的HPV基因型分布狀況進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)?shù)嘏愿呶Ｐ虷PV感染率最高的依次是16，52，58，39等亞型。陳秀杰等[12]對(duì)82例女性健康體檢者宮頸高危型HPV基因型別分布檢測(cè)，其中HPV 16亞型的檢出率最高，其次為 HPV 58亞型和HPV 18亞型；單一亞型感染陽(yáng)性率為53.7%。這些研究的高危型HPV感染亞型大體一致，本研究單一亞型感染率比較高，多重感染率較低，考慮與本研究入組女性及其配偶均無(wú)婚外性生活史，接觸到多種HPV亞型的概率較小有關(guān)，其次是感染存在地域、環(huán)境和人群的差異。

本研究發(fā)現(xiàn)，高危型HPV感染女性配偶的HPV感染率為43.33%，雖然夫妻之間的感染亞型不盡相同，但感染優(yōu)勢(shì)亞型都是以16，18，58，52，33亞型為主；配對(duì)比較發(fā)現(xiàn)夫妻HPV感染亞型吻合率為15.83%(19/120)，多重感染女性其配偶多為單一亞型感染或無(wú)感染。劉北陸等[13]對(duì)57例HPV 16亞型，18亞型陽(yáng)性婦女及其男性伴侶進(jìn)行了檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)女性感染者的男性伴侶HPV 16亞型，18亞型陽(yáng)性率為35.1%，男性感染者的女性伴侶均為陽(yáng)性。本研究男性HPV感染陽(yáng)性率較高，與本次檢測(cè)的HPV亞型不僅限于16，18兩型有關(guān)。劉北陸等[13]研究和本研究雖檢測(cè)對(duì)象和檢測(cè)項(xiàng)目有所不同，但都表明高危型HPV感染女性的配偶受感染的機(jī)會(huì)較大。唐努爾·阿布力米提等[14]對(duì)新疆某地維吾爾族400例男性尿道分泌物及女性宮頸分泌物進(jìn)行HPV檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)HPV陽(yáng)性的男性中HPV 16亞型的構(gòu)成比高，與女性宮頸癌中HPV感染的亞型相符，在一定程度上說(shuō)明男性在維吾爾族婦女宮頸癌發(fā)生過(guò)程中起一定的作用。由于男女雙方在解剖生理、免疫功能和行為習(xí)慣等方面存在的差異，導(dǎo)致自身防御和清除病毒的能力不同，高危型HPV的感染率和感染亞型不盡相同。但在感染的優(yōu)勢(shì)亞型上雙方大體一致，說(shuō)明病毒可通過(guò)性生活在夫妻之間傳播，在一定程度上也說(shuō)明男性在HPV防治中的不可或缺性。

值得注意的是，近年來(lái)子宮頸癌的發(fā)病呈現(xiàn)出年輕化和上升的趨勢(shì)[15-16]。由于男性在性活動(dòng)中多起到主動(dòng)作用，盡可能阻斷男性HPV的傳播鏈，減少HPV在兩性間的傳播已成為降低子宮頸癌發(fā)病率的關(guān)鍵所在。筆者認(rèn)為，女性一旦檢測(cè)出HPV感染，就應(yīng)對(duì)女性的配偶進(jìn)行HPV檢測(cè)，如男性也檢出HPV，就應(yīng)對(duì)其行HPV管理和干預(yù)治療。在我國(guó)，超過(guò)95%的男性沒(méi)有行包皮環(huán)切術(shù)，與全球約30%男性包皮環(huán)切率相比，我國(guó)的包皮環(huán)切率很低(<5%)[17]。包皮環(huán)切術(shù)被譽(yù)為是兩性生殖健康的“外科疫苗”，可以使包皮腔內(nèi)多種危險(xiǎn)因素的作用減弱，是有效減少艾滋病毒、HPV和單純皰疹病毒通過(guò)性生活傳播的有效措施。包皮過(guò)長(zhǎng)、包莖男性感染和攜帶高危型HPV的可能性較大，應(yīng)盡早行包皮環(huán)切術(shù)，以減輕或避免高危型HPV對(duì)男性自身及其性伴侶構(gòu)成的威脅。

綜上所述，高危型HPV感染女性的配偶也是病毒感染的高危人群，女性一旦檢測(cè)出高危型HPV感染，對(duì)其配偶進(jìn)行HPV篩查就成為HPV相關(guān)癌癥預(yù)防中的重要一環(huán)。應(yīng)將高危型HPV感染女性的配偶納入HPV感染的管理、治療和跟蹤檢測(cè)范圍，在宮頸癌的一二級(jí)防治體系中給予更多的關(guān)注。

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Analysis of virus test results on 120 couples which wives infected with high-risk human papillomavirus

LIU Xuewei,ZHAO Xueying,ZHANG Xizhuang,YANG Yongjun，YANG Jihong,ZHANG Hui

(General Hospital of Huabei Petroleum Administration，Renqiu 062552，Hebei, China)

Abstract:Objective It is to study the infection status of high risk human papillomavirus (HR-HPV)and the distribution of HR-HPV subtypes in a man whose wife had been infected，and to analysis the concordance infection rate in couples. Methods Urethra epithelial cells and urethral secretions of 120 males whose wife infected with HR-HPV had been collected to detect 13 kinds of HPV subtypes.The result of HPV subtypes was been analysised with the results of his wife's. Results 8 kinds of HR-HPV subtypes from 120 cases of women's cervix swabs were detected.The common HR-HPV subtypes in women were：HPV16,58,18,52,33．52 cases had been infected HR-HPV in male,the infection rate was 43.33%.The common HR-HPV subtypes in men were：HPV16,18,58,52,33. The concordance infection rate in couples was 15.83%(19/120). Conclusion Male whose wife infected with HR-HPV is at high risk of infection. It is necessary to carry out HPV screening for her husband once womon have detected a HR-HPV infection. Male whose wife infected with HR-HPV should be included in the range of management,treatment and follow-detection of the HPV infection.

Key words:male; HPV infection;gene detection

[收稿日期]2015-10-09

[中圖分類(lèi)號(hào)]R711.7

[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]A

[文章編號(hào)]1008-8849(2016)08-0807-04

doi:10.3969/j.issn.1008-8849.2016.08.003

[基金項(xiàng)目]河北省醫(yī)學(xué)科研重點(diǎn)課題計(jì)劃項(xiàng)目(20150823)

[作者簡(jiǎn)介]劉學(xué)偉，女，副主任醫(yī)師，副教授，從事婦科感染的臨床研究。[通信作者]趙學(xué)英，E-mail：zhxy120@126.com