張文娟

作者單位：473000 河南省南陽醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)部生化教研室

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靈桿菌多糖對小鼠免疫調(diào)節(jié)功能的影響

張文娟

作者單位：473000 河南省南陽醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)部生化教研室

【摘要】目的 研究靈桿菌多糖對荷瘤小鼠免疫調(diào)節(jié)功能的影響。方法 建立免疫抑制S180荷瘤小鼠模型，觀察腹腔注射靈桿菌多糖對小鼠白細(xì)胞數(shù)、瘤體質(zhì)量及免疫器官指數(shù)的影響。結(jié)果 靈桿菌多糖提高荷瘤小鼠脾臟指數(shù)，對免疫低下小鼠白細(xì)胞計(jì)數(shù)下降具有對抗作用。結(jié)論靈桿菌多糖對腫瘤生長具有抑制作用，且可提高免疫抑制小鼠的免疫功能。

【關(guān)鍵詞】靈桿菌多糖；腫瘤；免疫調(diào)節(jié)

靈桿菌多糖是存在于靈桿菌細(xì)胞壁中的一種細(xì)菌脂多糖，具有一定的生物活性，且毒性反應(yīng)較低，抗腫瘤能力強(qiáng)，對免疫功能低下者具有良好的免疫調(diào)節(jié)作用［1］，目前臨床中多應(yīng)用于各種原因引起的急慢性感染及白細(xì)胞減少癥的輔助治療［2］。有研究表明，靈桿菌多糖具有良好的免疫刺激活性和抗內(nèi)毒素作用，對內(nèi)毒素造成的器官損傷具有一定的保護(hù)作用［3］；本文將進(jìn)一步探討靈桿菌多糖對荷瘤小鼠及免疫抑制小鼠的免疫調(diào)節(jié)作用，為臨床提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

（1）健康SPF級昆明小鼠，雌雄兼用，體重（20±2）g，由南陽醫(yī)專實(shí)驗(yàn)動物中心提供。（2）小鼠S180肉瘤細(xì)胞，由南陽醫(yī)專生物化學(xué)試驗(yàn)部保存。（3）注射用靈桿菌多糖：由哈爾濱龍和藥業(yè)有限公司產(chǎn)品，批號為20130403；注射用環(huán)磷酰胺：由山西仟源制藥有限公司生產(chǎn)，批號為20141107。（4）主要儀器：AB-120型電子分析天平，美國生產(chǎn)；倒置顯微鏡，日本生產(chǎn)。

1.2 方法

1.2.1 動物模型建立及分組 在無菌條件下將S180肉瘤細(xì)胞接種到實(shí)驗(yàn)小鼠左后腿腹股溝皮下［4］，取40只接種成功小鼠隨機(jī)分成4組，每組10只，分別為生理鹽水對照組、環(huán)磷酰胺組、靈桿菌多糖組、環(huán)磷酰胺+靈桿菌多糖組。

1.2.2 給藥方法 給予環(huán)磷酰胺組小鼠腹腔注射環(huán)磷酰胺0.01 ml/g.b.w誘發(fā)小鼠免疫抑制；給予靈桿菌多糖組小鼠腹腔注射靈桿菌多糖40 U/kg；環(huán)磷酰胺+靈桿菌多糖組小鼠同時腹腔注射環(huán)磷酰胺0.01 ml/g.b.w和靈桿菌多糖40 U/kg；所有組每天給藥1次，連續(xù)給藥8 d。生理鹽水組小鼠為腹腔注射與其他組等劑量的生理鹽水。

1.2.3 樣本采集 在第9 d，剪斷小鼠尾部取血測定外周血白細(xì)胞數(shù)，然后處死小鼠，分離腫瘤、胸腺、脾臟稱重，按組織質(zhì)量0.1 mg/g.b.w，分別計(jì)算胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)。

1.2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 運(yùn)用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件包對所收集數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，各實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以（±s）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

環(huán)磷酰胺組小鼠瘤體最小，白細(xì)胞計(jì)數(shù)、脾臟胸腺指數(shù)均最低；靈桿菌多糖組小鼠瘤體得到一定抑制，效果較弱，胸腺指數(shù)影響不大；環(huán)磷酰胺+靈桿菌多糖組小鼠瘤體得到抑制，且免疫功能得到保護(hù)，見表1。

表1 靈桿菌多糖對小鼠S180瘤體生長、免疫器官質(zhì)量及對環(huán)磷酰胺免疫抑制作用影響（n=10）

3 討論

現(xiàn)在臨床常用的抗腫瘤藥物對腫瘤細(xì)胞具有較強(qiáng)的抑制作用，在殺死腫瘤細(xì)胞的同時，對機(jī)體免疫系統(tǒng)功能也造成一定損傷，如何既能達(dá)到治療疾病作用，又能保護(hù)機(jī)體免疫功能，使其始終保持良好免疫保護(hù)作用，是臨床不斷研究的課題。靈桿菌多糖是利用生物技術(shù)從非致病性革蘭氏陰性菌中提取精制而得的細(xì)菌脂多糖，它具有廣泛生物活性的含脂類多糖，同時毒性反應(yīng)較低，是一種安全有效的免疫促進(jìn)劑［5］。

脾臟是機(jī)體重要的免疫器官之一，其臟器指數(shù)是衡量機(jī)體免疫功能的有效指標(biāo)［6］。白細(xì)胞能夠吞噬異體并產(chǎn)生抗體，對機(jī)體抵御外來病原體侵入、傷口愈合及維持免疫功能等發(fā)揮著重要作用［7］，通過檢測外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)，能夠間接判斷機(jī)體的免疫狀態(tài)。通過本次實(shí)驗(yàn)我們看到，環(huán)磷酰胺對小鼠S180實(shí)體瘤質(zhì)量、脾臟和胸腺指數(shù)均有一定抑制作用，小鼠外周血白細(xì)胞數(shù)大幅下降；靈桿菌多糖可抑制S180實(shí)體瘤生長，并可提高脾臟指數(shù)，對胸腺指數(shù)影響不大；環(huán)磷酰胺和靈桿菌多糖同時應(yīng)用，在抑制腫瘤生長的同時對小鼠外周血白細(xì)胞數(shù)、脾臟指數(shù)和胸腺指數(shù)影響不大，能夠提高小鼠免疫能力。

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Effect of Bacillus Polysaccharide on Immune Function in Mice

ZHANG Wenjuan Classroom of Biochemistry，Department of Basic Medicine in Nanyang Medical College，Nanyang 473000，China

【Abstract】

Objective Study on the effect of bacillus polysaccharide on immune function of tumor bearing mice. Methods To establish an immune suppressive S180 tumor bearing mice model，and to observe the effect of intraperitoneal injection of lactobacillus on the number of white blood cells，tumor mass and immune organ index of mice. Results The spleen index of tumor bearing mice was significantly increased，and the white blood cell count of the mice was significantly decreased. Conclusion The effect of bacillus polysaccharide on tumor growth was inhibited，and the immune function of the immune suppression mice was increased.

【Key words】Bacillus polysaccharide，Tumor，Immune regulation

【中圖分類號】R3

【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A

【文章編號】1674-9316（2016）03-0190-02

doi:10.3969/j.issn.1674-9316.2016.03.139