萬軍，石磊，吉慶偉，施瑩，劉伶，陸政德，馮穎，葉晶，林英忠

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Th22型免疫反應(yīng)在動(dòng)脈粥樣硬化疾病中的動(dòng)態(tài)變化

萬軍，石磊，吉慶偉，施瑩，劉伶，陸政德，馮穎，葉晶，林英忠

摘要

目的：探討Th22型免疫反應(yīng)與動(dòng)脈粥樣硬化（AS）之間的關(guān)系，為治療AS提供新的理論依據(jù)。

方法：8周齡C57BL/6J背景的載脂蛋白E缺陷型（ApoE-/-）小鼠為實(shí)驗(yàn)組（n=24），同齡C57BL/6J小鼠為對(duì)照組（n=24），兩組小鼠均給予高脂飲食，分別于0周、4周、8周、12周處死，并采用油紅O染色檢測(cè)不同時(shí)間點(diǎn)主動(dòng)脈根部斑塊的進(jìn)展，流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)Th22細(xì)胞在兩組小鼠脾臟中比例變化，實(shí)時(shí)熒光定量反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（RT-PCR）檢測(cè)主動(dòng)脈中白細(xì)胞介素-22（IL-22）、白細(xì)胞介素-22受體1（IL-22R1）及其轉(zhuǎn)錄因子芳香烴受體（AhR）、T盒21轉(zhuǎn)錄因子（T-bet）的信使核糖核酸（mRNA）表達(dá)量變化，酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法（ELISA）檢測(cè)血清中的IL-22含量變化。

結(jié)果：實(shí)驗(yàn)組小鼠主動(dòng)脈根部粥樣斑塊面積［主動(dòng)脈根部斑塊面積/主動(dòng)脈管腔面積（%）］、Th22細(xì)胞［CD4+IL-22+/ CD4+（%）］數(shù)量、IL-22、IL-22R1、AhR、T-bet的 mRNA在主動(dòng)脈中的表達(dá)量以及IL-22在血清中的含量均高于同時(shí)間點(diǎn)對(duì)照組小鼠，且各時(shí)間點(diǎn)（0周除外）差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。實(shí)驗(yàn)組組內(nèi)前后兩時(shí)間點(diǎn)對(duì)比，主動(dòng)脈粥樣斑塊面積及AhR、T-bet的 mRNA表達(dá)量：4周與0周、8周與4周、12周與8周比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；Th22細(xì)胞數(shù)量：4周與0周、8周與4周比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，12周與8周比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；IL-22、IL-22R1的 mRNA表達(dá)量及血清中IL-22含量：4周與0周比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，8周與4周、12周與8周比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié)論：亢進(jìn)的Th22型免疫反應(yīng)具有促進(jìn)AS進(jìn)程的作用，其機(jī)制有待進(jìn)一步探討。

關(guān)鍵詞動(dòng)脈粥樣硬化；Th22細(xì)胞；白細(xì)胞介素-22

作者單位：430000湖北省武漢市，武漢大學(xué)人民醫(yī)院心血管內(nèi)科（萬軍、石磊、馮穎、葉晶）；廣西壯族自治區(qū)人民醫(yī)院心血管內(nèi)科（吉慶偉、施瑩、劉伶、陸政德、林英忠）

（Chinese Circulation Journal，2016，31：454.）

動(dòng)脈粥樣硬化（AS）是一種多因素的動(dòng)脈血管壁的慢性炎癥性疾病，大量研究表明，其與先天性免疫和獲得性免疫密切相關(guān)［1］。研究發(fā)現(xiàn)，在AS 進(jìn)展的各個(gè)時(shí)期，斑塊處都發(fā)現(xiàn)有T 淋巴細(xì)胞的浸潤［2］，且主要為是CD4+ T 淋巴細(xì)胞浸潤［3，4］。Th22 是一種新型 CD4+ T 細(xì)胞，其生物學(xué)效應(yīng)由白細(xì)胞介素（IL）-22實(shí)現(xiàn)。IL-22屬于IL-10 家族，其受體是由IL-22受體1（IL-22R1）和IL-10受體2（IL-10R2）組成。IL-10R2廣泛分布于機(jī)體組織上，IL-22R1則主要表達(dá)于腸道、呼吸道的上皮細(xì)胞，皮膚角質(zhì)細(xì)胞以及肝臟細(xì)胞等。IL-22功能的實(shí)現(xiàn)主要通過作用于IL-22R1來實(shí)現(xiàn)。芳香烴受體（AhR）和T盒21轉(zhuǎn)錄因子（T-bet）是Th22 的特征性轉(zhuǎn)錄因子，在誘導(dǎo)Th22分化及IL-22的生成中起著重要作用。 Th22被認(rèn)為主要參與皮膚的自穩(wěn)和病理過程，其在牛皮癬及類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎等慢性炎性病變過程中發(fā)揮著重要的促炎癥作用［5，6］。相關(guān)研究表明，冠心病患者外周血Th22比例、AhR表達(dá)、IL-22含量顯著高于對(duì)照組，這提示Th22 可能通過分泌功能因子IL-22 參與AS 進(jìn)程［7］。本實(shí)驗(yàn)擬采用載脂蛋白E缺陷型（ApoE-/-）小鼠建立AS模型，檢測(cè)疾病進(jìn)展過程中Th22細(xì)胞數(shù)量，IL-22含量，IL-22、IL-22R1、AhR、T-bet的 mRNA的動(dòng)態(tài)變化，初步探討Th22型免疫反應(yīng)是否參與AS進(jìn)程。

1 材料與方法

主要試劑：異硫氰酸熒光素（FITC）標(biāo)記的CD4熒光抗體、藻紅素（PE）標(biāo)記的IL-22熒光抗體及其同型抗體、細(xì)胞刺激劑（含蛋白阻滯劑）、IL-22酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法（ ELISA）試劑盒（Ebioscience ，美國），逆轉(zhuǎn)錄試劑盒、核酸染料SYBR Green RTPCR一步法試劑盒（Takara Biotechnology ，日本）。

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組及處理：C57BL/6J背景的ApoE-/-雄性小鼠為實(shí)驗(yàn)組（n=24）； C57BL/6J雄性小鼠為對(duì)照組（n=24）；兩組小鼠均為8周齡，體重20～25 g，高脂飼料飼養(yǎng)0周、4周、8周、12周后分別處死作如下檢測(cè)（小鼠與飼料均購自北京華阜康生物科技股份有限公司）。

組織準(zhǔn)備：3% 戊巴比妥鈉（10 μl/g）麻醉小鼠，摘除眼球取血，剪取心臟、脾臟，取、分離主動(dòng)脈，均-80℃低溫保存。

兩組小鼠AS斑塊面積的測(cè)定：將主動(dòng)脈竇進(jìn)行OCT包埋，低溫冰凍，連續(xù)8 μm切片，取相隔100 μm的5片切片組織用4%的福爾馬林固定后進(jìn)行油紅O染色，用圖像軟件（Image-Pro Plus 6.0）分析斑塊面積。

流式細(xì)胞術(shù)（FACS）檢測(cè)脾臟中Th22細(xì)胞數(shù)量［CD4+IL-22+/CD4+（%）］：新鮮脾臟在預(yù)冷的磷酸鹽緩沖液（PBS）［0.1%NaN3+0.5%牛血清蛋白（BSA）+2 mmol/L乙二胺四乙酸（EDTA），pH 7.2］中充分研磨，用100目的鋼絲網(wǎng)過濾，加等體積淋巴細(xì)胞分離液降速離心，分離出中間層淋巴細(xì)胞；PBS清洗2遍，再用PBS 100 μl重懸，得到淋巴細(xì)胞懸液（細(xì)胞數(shù)量105～106），細(xì)胞根據(jù)計(jì)數(shù)等分為測(cè)定管和同型對(duì)照管。按說明書加入FITC標(biāo)記的CD4熒光抗體4℃避光孵育30 min，清洗2遍，用RPMI-1640培養(yǎng)基和10%滅活的胎牛血清重懸，轉(zhuǎn)移到24孔板中（1 ml/孔），加入細(xì)胞刺激劑（2 μl/孔），充分混合，在37℃ 5% CO2環(huán)境中孵育6 h，轉(zhuǎn)移至5 ml 的EP管中，清洗2遍，固定和破膜后進(jìn)行胞內(nèi)細(xì)胞因子染色，測(cè)定管按說明書要求加入PE標(biāo)記的IL-22熒光抗體，對(duì)照管加入相應(yīng)的同型對(duì)照抗體，4℃避光孵育30 min，清洗2遍，重懸，上機(jī)檢測(cè)Th22細(xì)胞數(shù)量。使用FlowJo 7.6流式軟件進(jìn)行分析。

RT-PCR檢測(cè)IL-22、IL-22R1、AhR和T-bet 的mRNA表達(dá)水平：用組織剪將分離的主動(dòng)脈剪碎，Trizol研磨至組織完全溶解，按說明書提取總RNA。以提取的總RNA 為模板，按照逆轉(zhuǎn)錄試劑盒說明書進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)，合成cDNA 第一鏈，-20℃保存。在NCBI 數(shù)據(jù)庫中查詢?chǔ)?肌動(dòng)蛋白（β-actin）、IL-22、IL-22R1、AhR、T-bet 基因序列，應(yīng)用primer 5.0設(shè)計(jì)引物與探針（表1），交由上海英駿生物技術(shù)有限公司合成。以制備的cDNA 為模板，根據(jù)核酸染料SYBR Green RT-PCR一步法試劑盒說明書分別擴(kuò)增β-actin、IL-22、IL-22R1、AhR、T-bet，并得出熒光曲線和相應(yīng)的△Ct值。以4周齡的C57BL/6J小鼠中各值為參照，采用2-△△Ct法分析目標(biāo)基因的相對(duì)表達(dá)量。每個(gè)樣品設(shè)置3 個(gè)復(fù)孔。RT-PCR 反應(yīng)在Bio-Rad CFX Manager 2.1系統(tǒng)上進(jìn)行，重復(fù)3 次。

表1　引物序列

ELISA 法檢測(cè)小鼠血清中IL-22含量：取已制備好的血清，按ELISA 試劑盒說明書操作，即刻測(cè)量標(biāo)本A450值，根據(jù)說明書繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線查找其對(duì)應(yīng)的濃度范圍。每組樣品點(diǎn)3孔。

統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：采用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)分析軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，結(jié)果以±s表示，多組間比較采用單因素方差分析，組內(nèi)兩兩比較采用Newman-Keuls檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

兩組小鼠AS斑塊面積進(jìn)展變化的比較：隨著高脂飼養(yǎng)時(shí)間的延長，實(shí)驗(yàn)組小鼠AS斑塊面積不斷增加，0周、4周、8周、12周時(shí)AS斑塊面積的前后時(shí)間點(diǎn)對(duì)比差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05，圖1）。而對(duì)照組小鼠并無AS斑塊形成。除0周外，其它3個(gè)時(shí)間點(diǎn)實(shí)驗(yàn)組小鼠的AS斑塊面積均顯著高于同期對(duì)照組小鼠，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05，表2）。

圖1　實(shí)驗(yàn)組小鼠主動(dòng)脈根部粥樣斑塊油紅O染色及斑塊面積進(jìn)展變化圖（×10）

表2　兩組小鼠各項(xiàng)指標(biāo)組間及組內(nèi)對(duì)比（n=24，±s）

表2　兩組小鼠各項(xiàng)指標(biāo)組間及組內(nèi)對(duì)比（n=24，±s）

注：AS：動(dòng)脈粥樣硬化；IL-22：白細(xì)胞介素-22；IL-22R1：白細(xì)胞介素-22受體1；T-bet：T盒21轉(zhuǎn)錄因子；AhR：芳香烴受體。與對(duì)照組相比*P＜0.05**P＜0.01 ；實(shí)驗(yàn)組組內(nèi)前后時(shí)間點(diǎn)比較△P＜0.05△△P＜0.01

組別　AS 斑塊面積 （%）Th22細(xì)胞數(shù)量 （%）IL-22 mRNA （倍）IL-22R1 mRNA （倍）T-bet mRNA （倍）AhR mRNA （倍）IL-22 （pg/ml）0周對(duì)照組　0　1.10±0.42　1.03±0.34　1.05±0.28　1.01±0.16　1.04±0.23　9.29±1.38實(shí)驗(yàn)組　1.12±0.64　1.53±0.63　1.69±0.74　1.63±0.24　1.36±0.23　1.16±0.18　12.92±2.74 4周對(duì)照組　0　1.10±0.36　1.21±0.25　0.99±0.19　1.04±0.17　0.98±0.12　11.37±2.94實(shí)驗(yàn)組　12.37±4.63**△△　2.82±0.33**△△　6.03±1.17**△△　3.14±1.12**△△　2.47±0.49*△　1.39±0.05**△△　28.28±7.51**△△8周對(duì)照組　0　1.26±0.36　1.05±0.42　1.03±0.19　1.08±0.18　1.06±0.11　11.44±3.12實(shí)驗(yàn)組　22.78±4.38**△△　3.98±0.68**△△　6.48±1.96**　3.91±0.42**　3.91±0.86**△　1.46±0.06**△△　29.86±5.51**12周對(duì)照組　0　1.09±0.27　1.18±0.33　1.08±0.19　1.04±0.21　1.01±0.22　9.85±2.45實(shí)驗(yàn)組　30.19±6.64**△△　3.43±0.90**　5.05±1.58**　3.63±0.60**　2.80±0.69**△　1.67±0.10**△△　24.61±5.27**

兩組小鼠Th22細(xì)胞數(shù)量在AS中的動(dòng)態(tài)變化的比較（圖2、表2）：除0周外，實(shí)驗(yàn)組小鼠Th22細(xì)胞數(shù)量在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)均顯著高于對(duì)照組小鼠；本組內(nèi)8周較4周升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

圖2　兩組大鼠流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)脾臟中Th22細(xì)胞［CD4+IL-22+/CD4+T（%）］數(shù)量變化對(duì)比圖

IL-22、IL-22R1、AhR和T-bet的 mRNA在主動(dòng)脈中表達(dá)水平的動(dòng)態(tài)變化（表2）：實(shí)驗(yàn)組小鼠與對(duì)照組比較，0周時(shí)，IL-22、IL-22R1、AhR和T-bet 的mRNA在主動(dòng)脈中表達(dá)水平差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；經(jīng)高脂飲食后4、8、12周，觀察各項(xiàng)指標(biāo)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。在變化趨勢(shì)上，實(shí)驗(yàn)組IL-22、IL-22R1和T-bet的 mRNA均在8周時(shí)達(dá)到最大值；實(shí)驗(yàn)組IL-22及IL-22R1的mRNA在主動(dòng)脈中表達(dá)水平在4周時(shí)即達(dá)到較高值，且組內(nèi)前后兩時(shí)間點(diǎn)對(duì)比：8周與4周、12周與8周比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。T-bet的 mRNA在0～8周呈持續(xù)上升趨勢(shì)，12周時(shí)有所下降，同8周時(shí)相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。實(shí)驗(yàn)組小鼠AhR 的 mRNA在0～12周的高脂飲食過程中呈現(xiàn)持續(xù)上升趨勢(shì)，4周時(shí)與0周時(shí)相比，差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），至12周時(shí)，較前均有明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

兩組小鼠IL-22在血清中含量的動(dòng)態(tài)變化（表2）：實(shí)驗(yàn)組血清中IL-22含量在各時(shí)間點(diǎn)均高于同期對(duì)照組，且4周、8周、12周時(shí)差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。實(shí)驗(yàn)組小鼠血清中IL-22含量于8周達(dá)到最大值，組內(nèi)前后兩時(shí)間點(diǎn)對(duì)比，4周與0周比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，8周與4周、12周與8周比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

3 討論

目前已有大量關(guān)于AS與CD4+T細(xì)胞各細(xì)胞亞群之間關(guān)系的研究。Th1、Th17細(xì)胞已被證實(shí)有促進(jìn)AS的作用，而Treg則可預(yù)防AS的發(fā)生，Th2 的特征因子IL-4具有促AS 作用，但Th2 另兩種細(xì)胞因子IL-5和IL-33已證實(shí)具有顯著地抑制AS進(jìn)程的作用，因此Th2 型免疫反應(yīng)在AS的進(jìn)程中所起的總體作用仍有待明確［8-10］。

Th22 是2009 年在人體發(fā)現(xiàn)的獨(dú)立于Th1、Th2 和Th17 的一種新型效應(yīng)性T 細(xì)胞［11］。AhR在誘導(dǎo)Th22分化及IL-22的生成中起著主要作用，而這一作用的發(fā)揮需要的T-bet的協(xié)同作用，二者相互補(bǔ)充，共同實(shí)現(xiàn)Th22分化及IL-22的生成的最佳效應(yīng)，當(dāng)AhR高度表達(dá)時(shí)，T-bet可對(duì)以上效應(yīng)起主要調(diào)節(jié)作用［12］。本實(shí)驗(yàn)中二者在實(shí)驗(yàn)組小鼠中的表達(dá)水平均高于同條件下對(duì)照組小鼠，二者呈現(xiàn)出的動(dòng)態(tài)變化在一定程度上互補(bǔ)，12周Th22及IL-22稍有下降趨勢(shì)（差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義），很可能是由于T-bet的調(diào)節(jié)作用主導(dǎo)。Basu 發(fā)現(xiàn)，在炎癥的早期，IL-22 主要由淋巴組織誘導(dǎo)細(xì)胞分泌，在炎癥的中晚期則主要由Th22 細(xì)胞分泌，提示Th22 可能在慢性炎癥性疾病中扮演了重要的角色。IL-22 的靶細(xì)胞為非免疫細(xì)胞，主要是上皮細(xì)胞，也作用于內(nèi)皮細(xì)胞［13］和平滑肌細(xì)胞［14］等組織細(xì)胞。

研究發(fā)現(xiàn)，Th22 細(xì)胞通過分泌IL-22 作用于不同的靶細(xì)胞，誘導(dǎo)細(xì)胞生長因子及炎性因子產(chǎn)生，并發(fā)揮其多種生物效應(yīng)。IL-22可以促進(jìn)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者滑膜成纖維細(xì)胞增殖和生成單核細(xì)胞趨化蛋白（MCP-1）［15］；在牛皮癬疾病中，IL-22可促進(jìn)角化細(xì)胞的分化和遷移并上調(diào)多種促炎因子的表達(dá)［16］。此外，多項(xiàng)研究表明IL-22下游信號(hào)是由JAK-STAT通路和絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）通路介導(dǎo)。而JAK-STAT已明確證實(shí)與AS 進(jìn)程中氧化應(yīng)激、細(xì)胞損傷與凋亡有關(guān)，并參與凋亡因子Fas、IL-8和IL-6的基因調(diào)控，而MAPK 更是與血管平滑肌細(xì)胞的表型轉(zhuǎn)換、遷移和增殖密切相關(guān)，并參與不少炎癥因子的基因調(diào)控。由此我們推測(cè)Th22可能通過其細(xì)胞因子IL-22激活JAK-STAT 通路和MAPK 通路，誘導(dǎo)細(xì)胞生長因子及炎性因子產(chǎn)生，參與機(jī)體的病理性免疫應(yīng)答反應(yīng)，從而加劇AS進(jìn)程。

Th22作為一種最新發(fā)現(xiàn)的新型CD4+T細(xì)胞，其在AS中的作用及機(jī)制研究尚處在初級(jí)階段。相關(guān)免疫組化證實(shí)IL-22存在于AS患者粥樣斑塊中，且有癥狀患者斑塊中IL-22含量約為無癥狀患者的7.5倍［17］。而我們一項(xiàng)臨床研究發(fā)現(xiàn)急性心肌梗死、不穩(wěn)定性心絞痛患者外周血中Th22細(xì)胞、IL-22因子含量及轉(zhuǎn)錄因子AhR的 mRNA表達(dá)量均明顯高于穩(wěn)定性心絞痛患者和正常對(duì)照組。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示實(shí)驗(yàn)組小鼠中Th22細(xì)胞的數(shù)量、IL-22、IL-22R1、AhR、T-bet的mRNA在主動(dòng)脈中表達(dá)水平顯著高于同條件下的對(duì)照組小鼠，這表明，Th22型免疫反應(yīng)可能在AS的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮著重要作用，具有促進(jìn)AS進(jìn)程的作用。

本實(shí)驗(yàn)初步證實(shí)Th22型免疫反應(yīng)存在于AS進(jìn)程中，且很可能發(fā)揮著促進(jìn)AS的作用，為進(jìn)一步探索其病理機(jī)制提供了理論依據(jù)。對(duì)Th22型免疫反應(yīng)在冠心病中作用的認(rèn)識(shí)，進(jìn)一步證實(shí)和完善了AS 發(fā)病的炎癥學(xué)說和Th 細(xì)胞亞群功能失衡理論，加深我們對(duì)AS 這一免疫介導(dǎo)的慢性炎癥性疾病的病理生理機(jī)制的理解，有望成為急性冠狀動(dòng)脈綜合征炎癥干預(yù)的新靶點(diǎn)。

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（編輯：曹洪紅）

臨床研究

Dynamic Changes of Type Th22 Cell Immunological Response During Atherosclerosis Process in Experimental Mice

WAN Jun，SHI Lei，JI Qing-wei，SHI Ying，LIU Ling，LU Zheng-de，F(xiàn)ENG Ying，YE Jing，LIN Ying-zhong.
Department of Cardiology，Wuhan University People’s Hospital，Wuhan （430000），Hubei，China

Abstract

Objective：To study the dynamic changes of type Th22 cell immunological response during atherosclerosis process in experimental mice in order to provide a new theoretical basis for atherosclerosis therapy.

Methods：8 weeks C57BL/6J mice were divided into 2 groups：Experiment group，n=24 ApoE-/-mice and Control group，n=24 normal mice.All animals received high fat diet and the following indexes were compared between 2 groups at 0，4，8，12 weeks after treatment：aortic atherosclerotic lesions were defined by Oil red O staining，dynamic changes of Th22 cells in spleen were measured by flow cytometry，mRNA expressions of interleukin-22 （IL-22），IL-22R1，AhR and T-bet in aorta were examined by RT-PCR，blood levels of IL-22 was detected by ELISA.

Results：Compared with Control group，Experiment group had the increased area of aortic atherosclerosis （the ratio of plaque area/lumen area） and Th22 cell （CD4+IL-22+/CD4+T cell） amount，elevated mRNA expressions of IL-22，IL-22R1，AHR，T-bet in aorta and higher blood levels of IL-22 at all time points，the differences between each time point （except 0 week）had the statistic meaning，P＜0.05.In Experiment group，the differences between 2 adjacent time points，for the area of aortic atherosclerosis and mRNA expressions of AHR，T-bet：4 weeks vs 0 week，8 weeks vs 4 weeks，12 weeks vs 8 weeks all had statistic meaning； for Th22 cell amount：4 weeks vs 0 week，8 weeks vs 4 weeks had statistic meaning and 12 weeks vs 8 weeks had no real distinction； for mRNA expressions of IL-22，IL-22R1 and blood levels of IL-22：4 weeks vs 0 week had statistic meaning and 8 weeks vs 4 weeks，12 weeks vs 8 weeks had no real distinctions.

Conclusion：Hyperactive immunological response of Th22 cells might be involved in atherosclerosis process，the relevant mechanism should be further studied.

Key wordsAtherosclerosis； Th22 cells； Interleukin-22

基金項(xiàng)目：國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目（81360055，81460061和81560085），廣西醫(yī)療衛(wèi)生重點(diǎn)科研課題（重2011119），廣西自然科學(xué)基金項(xiàng)目（2013GXNSFAA019265）

作者簡(jiǎn)介：萬軍主任醫(yī)師博士主要從事心肌病和心律失常的基礎(chǔ)與臨床研究Email：wanjun1963@126.com通訊作者：林英忠Email：yingzhonglin@126.com

中圖分類號(hào)：R541

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1000-3614（2016）05-0454-05

doi：10.3969/j.issn.1000-3614.2016.05.009

Corresponding Author：LIN Ying-zhong，Email：yingzhonglin@126.com

收稿日期：（2015-09-22）