景　明　郭　佳　賈延濤　張　竣　袁長春　林家猛

云南省玉溪市中醫(yī)醫(yī)院，云南　玉溪　653100

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彝藥“金基痹痛舒”合劑的抗炎鎮(zhèn)痛作用及急性毒性研究

景明郭佳賈延濤張竣袁長春林家猛

云南省玉溪市中醫(yī)醫(yī)院，云南玉溪653100

【摘要】目的：觀察彝藥“金基痹痛舒”合劑的抗炎、鎮(zhèn)痛作用及急性毒性。方法：采用大鼠足跖注射雞蛋清導(dǎo)致炎癥腫脹模型評價“金基痹痛舒”合劑的抗炎作用；采用小鼠腹腔注射冰醋酸導(dǎo)致扭體反應(yīng)方法考察“金基痹痛舒”的鎮(zhèn)痛作用；對小鼠經(jīng)口給藥的“金基痹痛舒”合劑的急性毒性進(jìn)行檢測。結(jié)果：彝藥“金基痹痛舒”合劑30g生藥/kg和10g生藥/kg組均能夠明顯抑制大鼠足趾注射10%雞蛋清導(dǎo)致的炎癥腫脹；“金基痹痛舒”合劑 75g生藥/kg和25g生藥/kg組對醋酸致小鼠扭體反應(yīng)均有明顯的緩解作用；急性毒性研究結(jié)果表明，“金基痹痛舒”合劑經(jīng)口給藥的小鼠最大給藥量為202.5g生藥/kg體重，按成人常用量計算，相當(dāng)于成人常用量的150倍。結(jié)論：彝藥“金基痹痛舒”合劑具有顯著的抗炎鎮(zhèn)痛作用，在常規(guī)劑量下使用是安全的。

【關(guān)鍵詞】彝藥; “金基痹痛舒”合劑; 抗炎; 鎮(zhèn)痛; 急性毒性

發(fā)源于少數(shù)民族地區(qū)的民族醫(yī)藥是中國傳統(tǒng)醫(yī)藥的重要組成部分，其中彝藥因其鮮明的地域性、民族傳統(tǒng)和獨特的醫(yī)藥理論更是備受矚目。“金基痹痛舒”合劑為筆者根據(jù)在云南彝族聚居地區(qū)行醫(yī)多年的臨床用藥經(jīng)驗，總結(jié)歸納得到的用于治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、腰痛等疾病取得顯著療效的彝藥方劑，本研究對該合劑的抗炎鎮(zhèn)痛作用及急性毒性進(jìn)行了考察，現(xiàn)將結(jié)果報道如下。

1材料與方法

1.1實驗動物及飼養(yǎng)條件SD大鼠，體重180～220g，雄性(由成都達(dá)碩生物科技有限公司提供，許可證：SCXK(川)2013-24，批號：0018491)；昆明種雄性小鼠，18～22g，共70只(購于北京華阜生物科技股份有限公司，合格證號為SCXK(京)2014-0004，批號為11401300027997)。所有動物飼養(yǎng)于云南中醫(yī)學(xué)院實驗動物觀察室，室內(nèi)光照為自然晝夜交替，溫度為15～25℃，相對濕度為45%～65%，通風(fēng)良好，環(huán)境相對安靜。飼料為實驗鼠配合飼料，自由攝食及飲水。

1.2藥品、試劑及儀器“金基痹痛舒”合劑，由云南省玉溪市中醫(yī)院藥劑科提供；阿司匹林腸溶片：湖南新匯制藥股份有限公司，批號：150208；冰乙酸：天津致遠(yuǎn)化學(xué)試劑有限公司，生產(chǎn)許可證:XK13-201-00121，批號：20121008；生理鹽水：昆明南疆制藥有限公司，批號：A150604E2；足趾容積測量儀：山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院設(shè)備站，YLS-7A,出廠編號：005090071；分析天平：北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司，ISO9001，0.0001g。

1.3受試樣品制備“金基痹痛舒”合劑：臨床成人日劑量為每次87.6ml，一日三次，每毫升藥液相當(dāng)于生藥0.36g(按70kg/人，即1.35g/kg體重)。取4050ml藥液，濃縮至5.06g生藥/ml濃度(506.25g生藥/100ml)的濃縮液288ml，臨用前用蒸餾水稀釋至所需給藥濃度。

1.4分組及給藥劑量

1.4.1“金基痹痛舒”合劑對蛋清液致大鼠足趾腫脹[1]的影響取40只雄性SD大鼠依照隨機(jī)數(shù)字表隨機(jī)分為模型組(0.9%生理鹽水)，陽性對照組(0.2g/kg)，金基痹痛舒高劑量組(30g生藥/kg)和低劑量組(10g生藥/kg)。各組大鼠按上述分組連續(xù)灌胃給予相應(yīng)受試物10天，末次給藥1h后于大鼠右后足掌心向踝關(guān)節(jié)方向皮下注射10%鮮蛋清0.lml，在注射蛋清致炎前、注射蛋清致炎后的30min、1h、2h、3h、4h、5h分別測量足趾容積，將致炎后的足趾容積減去致炎前足趾容積即為足跖腫脹度，并計算足趾腫脹抑制率。

足趾腫脹抑制率(%)=(模型組足趾腫脹率-給藥組足趾腫脹率)/模型組足趾腫脹率×100%

1.4.2“金基痹痛舒”合劑對腹腔注射冰醋酸致小鼠扭體反應(yīng)[2]的影響取昆明種雄性小鼠48只，于實驗前一天隨機(jī)分為4組，每組12只，分別為模型組(0.9%生理鹽水)、陽性對照組(阿司匹林，0.2g/kg)、“金基痹痛舒”高劑量組(75g生藥/kg，下稱“金高”)、金基痹痛舒低劑量組(25g生藥/kg下稱“金低”)，按0.2ml/10g體重連續(xù)灌胃給藥7天，末次給藥后1h，腹腔注射0.6%冰醋酸，0.1ml/10g體重，分別記錄給冰醋酸后0～5min，6～20min內(nèi)各組小鼠扭體次數(shù)，比較各給藥組與陰性對照組小鼠扭體次數(shù)的差異。1.4.3“金基痹痛舒”合劑小鼠經(jīng)口給藥的急性毒性經(jīng)預(yù)試驗，“金基痹痛舒“合劑濃縮液在最大濃度、最大灌胃體積下灌胃給予小鼠，動物無死亡，故進(jìn)行最大給藥量的測定。取合格昆明種小鼠40只，雌雄各半，按體重隨機(jī)分為給藥組和陰性對照組，每組20只。試驗前禁食不禁水12小時，給藥組灌胃給藥劑量為202.5g生藥/kg體重，給藥體積為0.4ml/10g體重，陰性對照組給予等體積的生理鹽水。給藥后連續(xù)觀察14天，每天觀察各組動物的外觀、行為和毒性反應(yīng)，記錄動物第1、3、5、7、9、11、13、14天的體重，結(jié)果見表3；記錄動物第3、7、11天的進(jìn)食量，結(jié)果見表4。試驗第14天處死、解剖小鼠，肉眼觀察其主要臟器的外觀。

2結(jié)果

2.1“金基痹痛舒”合劑對蛋清液致大鼠足趾腫脹的影響本研究結(jié)果顯示，與模型組比較，致炎后30min、1h、2h、3h、4h、5h，陽性對照藥阿司匹林后對皮下注射雞蛋清所致大鼠足趾腫脹度均有顯著的抑制作用，與模型組相比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)；“金高”在致炎后30min、2h、4h、5h對該模型大鼠足跖腫脹度均有顯著的抑制作用，與模型組相比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01 或P<0.05)；“金低”在致炎后30min、1h、2h、3h、4h和3h對該模型大鼠足跖腫脹度均有顯著的抑制作用，與模型組相比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01或P<0.05)，詳見表1。

表1　“金基痹痛舒”合劑對蛋清液致大鼠足趾腫脹的影響　±s，n=10)

注：給藥組與模型組比較，*P<0.05，**P<0.01。

2.2“金基痹痛舒”合劑對腹腔注射冰醋酸致小鼠扭體反應(yīng)的影響本研究結(jié)果顯示，“金基痹痛舒”合劑對腹腔注射0.6%冰醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)具有明顯的對抗作用，見表2。

表2“金基痹痛舒”合劑對腹腔注射冰醋酸致小鼠

扭體反應(yīng)的影響

組別劑量/g/kg扭體次數(shù)/次抑制率/%陰性對照組-50.2±8.3-陽性對照組0.224.2±12.5**51.6金高組7519.7±11.4**60.6金低組2522.5±9.2**55.0

注：與陰性對照組相比，*P<0.05,**P<0.01。

2.3“金基痹痛舒”合劑小鼠經(jīng)口給藥的急性毒性實驗結(jié)果顯示，給藥后4h內(nèi)各給藥組偶見動物出現(xiàn)昏睡，易被警醒而恢復(fù)正?；顒?，但未見死亡。給藥后14日內(nèi)，動物未見死亡，一般狀況良好，飲食、二便正常，且外觀、皮毛、行為、呼吸均正常，鼻、眼、口腔無異常分泌物，未見其它明顯異常反應(yīng)。給藥組與對照組的體重增長變化趨勢基本一致，給藥后進(jìn)食量基本穩(wěn)定。實驗結(jié)束后大體解剖觀察主要臟器，各組小鼠的心、肝、脾、肺、腎均無明顯異常。金基痹痛舒合劑濃縮液的最大給藥量為202.5g生藥/kg，按成人(70kg體重)臨床用量每天94.6g計算，金基痹痛舒的小鼠最大給藥量為成人臨床用量的150倍。見表3、4。

表3　“金基痹痛舒”合劑最大給藥量灌胃前、后小鼠體重變化　±s，g,n=20)

表4　“金基痹痛舒”合劑最大給藥量灌胃后

3討論

由于歷史等原因，彝族人民大多生活在高寒山區(qū)，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎是彝族民間常見疾病，彝醫(yī)在與類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎作斗爭的過程中，總結(jié)了很多行之有效的藥方?！敖鸹酝词妗焙蟿楣P者根據(jù)在云南彝族聚居地區(qū)行醫(yī)多年的臨床用藥經(jīng)驗，總結(jié)歸納得到的彝族藥方，其在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的治療中具有顯著的消腫止痛作用，臨床療效確切，但其功效尚缺乏實驗室研究數(shù)據(jù)的支撐，為了更科學(xué)、合理并安全的將“金基痹痛舒”合劑用于臨床，本實驗對其抗炎、鎮(zhèn)痛作用及小鼠經(jīng)口給藥的急性毒性情況進(jìn)行了研究，結(jié)果顯示，“金基痹痛舒”合劑對皮下注射雞蛋清所致大鼠足趾腫脹具有顯著的抑制作用，表明其具有較強(qiáng)的抗炎作用；由于該合劑臨床主要用于治療炎癥性疼痛，因此，本實驗采用醋酸腹腔注射致小鼠扭體反應(yīng)的方法對其進(jìn)行了鎮(zhèn)痛作用研究，結(jié)果表明，“金基痹痛舒”合劑具有顯著減輕炎癥性疼痛作用；“金基痹痛舒”合劑小鼠經(jīng)口給藥的急性毒性研究結(jié)果顯示，“金基痹痛舒”合劑202.5g生藥/kg體重(相當(dāng)于臨床用量的150倍)時未見明顯毒性，提示，該藥在常規(guī)劑量下使用是安全的。對于“金基痹痛舒”合劑的抗炎作用機(jī)制還有待進(jìn)一步深入的研究。

參考文獻(xiàn)

[1]白蓉，郭延偉.獨一味中苯乙醇苷提取物的鎮(zhèn)痛抗炎作用及毒性研究[J].華西藥學(xué)雜志，2015，30(3)：384-385.

[2]陳奇.中藥藥理研究方法學(xué)[M].2版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2006.

基金項目：云南省應(yīng)用基礎(chǔ)研究計劃項目，項目編號：2013FZ094。

作者簡介：景明，男，49歲，主任醫(yī)師，主要從事針灸推拿治療脊柱相關(guān)疾病臨床及研究，E-mail:j_m126@126.com

【中圖分類號】R29

【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】A

【文章編號】1007-8517(2016)09-0020-02

(收稿日期：2016.03.20)