郝瑜+劉曉雯+董竟+崔彬+焦玉蓮+周隆善+種宗雷+趙躍然

[摘要] 目的 探討FK506結(jié)合蛋白51（FKBP51）在腦膠質(zhì)細(xì)胞瘤組織中的表達及其臨床意義。 方法 選取本院2013年1月～2015年1月的223例腦膠質(zhì)瘤患者作為研究對象，選取同期來自于顱腦損傷手術(shù)患者的23例正常腦組織進行對照研究。采用免疫組織化學(xué)法檢測FKBP51的表達水平，分析其表達水平與腦膠質(zhì)瘤病理組織類型和病理分級的關(guān)系。 結(jié)果 腦膠質(zhì)瘤的FKBP51陽性率顯著高于正常腦組織，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。不同病理類型腦膠質(zhì)瘤組織的FKBP51陽性率比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。惡性的膠質(zhì)母細(xì)胞瘤FKBP51的表達水平顯著高于良性的星形細(xì)胞瘤，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。FKBP51的表達水平與腦膠質(zhì)瘤分級呈正相關(guān)（r=0.30，P<0.05）。 結(jié)論 FKBP51表達與腦膠質(zhì)瘤的病理類型和臨床病理分級具有相關(guān)性，有可能作為腦膠質(zhì)瘤標(biāo)志物用于臨床病理特征分析和預(yù)后判斷。

[關(guān)鍵詞] FK506結(jié)合蛋白51；表達；腦膠質(zhì)瘤；病理分級

[中圖分類號] R739.41 [文獻標(biāo)識碼] A [文章編號] 1674-4721（2016）03（b）-0012-03

[Abstract] Objective To explore the expression and clinical significance of FK506 binding protein 51 （FKBP51） in brain glioma tissue. Methods 223 cases of brain glioma from January 2013 to January 2015 in our hospital were selected as the research group，23 cases of normal brain tissues from patients with brain injury was selected as the control group.The expression level of FKBP51 was tested by using immunohistochemical method，and the relationship between its expression level and gliomas histopathologic types and pathology grade was analyzed. Results The positive rate of FKBP51 in glioma tissue was higher than that in normal brain tissue，with significant difference （P<0.05）.There were significant difference in the positive rate of FKBP51 in different pathological types of brain glioma tissues （P<0.05）.The expression level of FKBP51 in malignant glioblastomas was higher than that in benign astrocytoma，with significant difference （P<0.05）.The expression level of FKBP51 had positive relationship with pathology grade （r=0.30，P<0.05）. Conclusion The expression of FKBP51 is related to histopathologic types and pathology grade of glioma，it may be as glioma markers for analysis clinicopathologic feature and judgement prognosis.

[Key words] FK506 binding protein 51；Expression；Brain glioma；Pathology grade腦膠質(zhì)瘤是發(fā)病率、病死率最高的中樞神經(jīng)系統(tǒng)原發(fā)性腫瘤，惡性程度高，生存率低。不同病理組織類型和分級與腦膠質(zhì)瘤的預(yù)后密切相關(guān)，如星形細(xì)胞瘤的生存期為5～10年，間變性星形細(xì)胞瘤的生存期為2～3年，膠質(zhì)母細(xì)胞瘤的生存期僅為12～15個月，但相同病理類型的腦膠質(zhì)瘤預(yù)后也有較大差異，目前尚缺乏判斷其預(yù)后的標(biāo)志物。FK506結(jié)合蛋白51（FK506 binding protein 51，F(xiàn)KBP51）屬于親免素家族，廣泛表達于多種腫瘤組織。作為致癌或抑癌基因，其參與腫瘤發(fā)生發(fā)展和化療敏感性的調(diào)節(jié)[1]。目前，有關(guān)FKBP51表達與腦膠質(zhì)瘤病理分級關(guān)系的研究較少。本研究采用免疫組織化學(xué)法檢測FKBP51在腦膠質(zhì)瘤組織中的表達，探討其表達水平與腦膠質(zhì)瘤病理組織分型和分級的關(guān)系，旨在為臨床診斷和治療提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取本院2013年1月～2015年1月的223例腦膠質(zhì)瘤患者作為研究對象，男性117例，女性106例；年齡5～75歲，平均（44.0±6.9）歲；病理組織分型：膠質(zhì)母細(xì)胞瘤62例，星形細(xì)胞瘤134例，少突星形/膠質(zhì)細(xì)胞瘤16例，室管膜瘤/間變室管膜瘤11例；病理組織分級：Ⅰ/Ⅱ級133例，Ⅲ/Ⅳ級90例。選取同期來自于顱腦損傷手術(shù)患者的23例正常腦組織進行對照研究，男性11例，女性12例；年齡8～72歲，平均（45.0±7.5）歲。

1.2 材料

腦膠質(zhì)瘤及正常腦組織組合芯片由西安艾麗娜生物科技有限公司提供；抗體人FKBP51抗體[FKBP51（D-4）：sc-27154]購自Santa公司；即用型免疫組化EliVisionTM plus試劑盒（KIT-9902）和DAB顯色系統(tǒng)（液體DAB酶底物顯色試劑盒，DAB-0031/1031）均購自福州邁新生物技術(shù)有限公司。

1.3 實驗方法

采用免疫組化（IHC）的EliVisionTM法檢測FKBP51抗體在腦膠質(zhì)瘤及正常腦組織組合芯片中的表達情況。實驗中對組織芯片依次行常規(guī)脫蠟水化、抗原修復(fù)、3%H2O2-甲醇封閉內(nèi)源性過氧化物酶、滴加FKBP51（1∶25）、DAB顯色、蘇木素復(fù)染、常規(guī)脫水封片等處理。另外，實驗設(shè)檢測片和陰性對照，陰性對照片與檢測片操作方法相同，一抗改用同種的IgG，其余條件均相同。

1.4 FKBP51陽性的判定標(biāo)準(zhǔn)

根據(jù)芯片染色強度進行FKBP51陽性的判定：不著色為陰性（-），著淺棕色為弱陽性（+），著棕色為陽性（++），著棕褐色為強陽性（+++）。

1.5 統(tǒng)計學(xué)處理

采用SPSS 22.0統(tǒng)計學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進行分析，計量資料以x±s表示，采用t檢驗，計數(shù)資料采用χ2檢驗或Ridit分析，相關(guān)性采用Spearman相關(guān)分析，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1 兩組FKBP51陽性率的比較

腦膠質(zhì)瘤的FKBP51陽性率顯著高于正常腦組織，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P=0.045）（表1、圖1）。

2.2 不同病理類型腦膠質(zhì)瘤組織FKBP51陽性率的比較

不同病理類型腦膠質(zhì)瘤組織FKBP51的陽性率比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=21.84，P<0.05）。惡性的膠質(zhì)母細(xì)胞瘤FKBP51的表達水平顯著高于良性的星形細(xì)胞瘤，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）（表2）。

與星形細(xì)胞瘤組比較，*P<0.05

2.3 FKBP51表達水平與腦膠質(zhì)瘤病理分級的相關(guān)性分析

Spearman等級相關(guān)分析顯示，F(xiàn)KBP51的表達水平與腦膠質(zhì)瘤分級成正相關(guān)（r=0.30，P<0.05）（表3）。

3 討論

腦膠質(zhì)瘤是最常見的成人顱內(nèi)腫瘤，惡性程度高，占原發(fā)性顱內(nèi)腫瘤的50%～60%，多見于30～40歲的成人[2]。研究顯示[3]，近年來其發(fā)病率呈上升趨勢。雖然關(guān)于本病的診療技術(shù)在不斷進步，但由于其浸潤性生長[4]以及對放化療不敏感等惡性生物學(xué)特征，腦膠質(zhì)瘤的生存率和預(yù)后仍未得到明顯改善[5]。盡管發(fā)現(xiàn)多種分子如p53、表皮生長因子受體（epidermal growth factor receptor，EGFR）和Ki-67等參與腦膠質(zhì)瘤的發(fā)生、發(fā)展[6-7]，但其發(fā)病機制尚不清楚，尤其是缺乏與腦膠質(zhì)瘤惡性生物學(xué)行為相關(guān)的特異性標(biāo)志物[8]。

FKBP51屬于大分子親免素家族，表達于多種組織細(xì)胞和腫瘤[9]。FKBP51作為分子伴侶參與類固醇接受體復(fù)合物的形成，調(diào)節(jié)組織細(xì)胞對類固醇激素的應(yīng)答；調(diào)節(jié)絲/蘇氨酸蛋白激酶（AKT）和核因子（NF）-κB信號通路的活性，參與細(xì)胞增殖和凋亡的調(diào)控；促進微管相關(guān)蛋白去磷酸化，增加微管系統(tǒng)的穩(wěn)定性[10]。新近研究顯示[11]，F(xiàn)KBP51可能參與腫瘤細(xì)胞發(fā)生、發(fā)展和放化療敏感性的調(diào)控。FKBP51在前列腺癌、淋巴瘤、頭頸部腫瘤、黑素瘤中的表達水平高于相應(yīng)的正常組織，而在胰腺癌、結(jié)腸癌、睪丸癌中的表達則明顯下調(diào)。上調(diào)FKBP51表達能抑制胰腺癌細(xì)胞生長，增加化療敏感性[12]。推測在不同組織類型的腫瘤中，高表達或低表達的FKBP51可通過不同的信號通路促進或抑制腫瘤的生長，其有可能作為預(yù)測腫瘤化療敏感性的預(yù)后生物標(biāo)志物和腫瘤治療的新靶點[13]。本研究結(jié)果顯示，F(xiàn)KBP51在腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞中的表達水平明顯高于正常腦組織（P=0.045），且惡性的膠質(zhì)母細(xì)胞瘤表達水平明顯高于良性的星形細(xì)胞瘤（P=0.002），提示FKBP51可能參與腦膠質(zhì)瘤的發(fā)生、發(fā)展，并與其惡性生物學(xué)行為相關(guān)。病理分級是反映腦膠質(zhì)瘤分化程度和預(yù)后的重要指標(biāo)[14-16]，本研究結(jié)果顯示，F(xiàn)KBP51表達水平與腦膠質(zhì)瘤的病理分級呈正相關(guān)，即FKBP51表達水平越高，腦膠質(zhì)瘤的分級越高，進一步證實了FKBP51可能參與腦膠質(zhì)瘤增殖和侵襲等惡性生物學(xué)行為的調(diào)控。

綜上所述，F(xiàn)KBP51在腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞的表達上調(diào)，且與腫瘤臨床病理分級相關(guān)，提示有可能作為其預(yù)后判斷的生物學(xué)標(biāo)志物和治療靶點，但FKBP51作為分子伴侶調(diào)控機體類固醇激素應(yīng)答、細(xì)胞增殖凋亡等多種信號通路活化和微管系統(tǒng)穩(wěn)定，參與機體多種生理病理過程及腦膠質(zhì)瘤增殖凋亡和侵襲轉(zhuǎn)移的病理機制尚需進一步探討。

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