張艷麗

（河南省漯河市中心血站，河南 漯河 462001）

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干式化學法與速率法檢測在無償獻血ALT篩查中的應(yīng)用分析

張艷麗

（河南省漯河市中心血站，河南 漯河 462001）

【摘要】目的 比較干式化學法和速率法檢測獻血者谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）的結(jié)果，以探討干式化學法對獻血前ALT初篩的適用性。方法 選取2013年9月至2013年10月于本站采集的500例無償獻血者標本為研究對象，分別采用干式化學法和速率法檢測ALT，對兩種檢測方法的結(jié)果進行對比分析；同時取兩種定值質(zhì)控血清，分別采用干式化學法和速率法檢測ALT，比較兩種方法的檢測精密度。結(jié)果 干式化學法和速率法檢測結(jié)果具有良好的相關(guān)性，干式化學法檢測500例獻血者ALT的總符合率為98.60%（790/500）；干式化學法和速率法檢測兩種定值質(zhì)控血清均具有良好的精密度，批內(nèi)變異系數(shù)（CV）值均＜試劑盒規(guī)定的15%標準，但干式化學法的精密度稍差于速率法。結(jié)論 干式化學法具有操作簡便、快速準確，可用于采血車和采血屋獻血者獻血前ALT的初篩，值得臨床推廣。

【關(guān)鍵詞】干式化學法；速率法；獻血者；丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶

血液丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶（ALT）是我國血站獻血者獻血前初篩的重要內(nèi)容和實驗室檢測的必檢項目，然而獻血者ALT不合格也是造成血站血液報廢的重要原因[1]。目前國內(nèi)多數(shù)血站采用干式化學法對獻血者獻血前進行ALT初篩，以盡量減少因ALT不合格而造成血液報廢，但是，筆者在實際操作過程中常碰到初篩合格的血液經(jīng)實驗室復(fù)檢仍有部分因ALT異常而報廢。為更好的了解本站所采用的干式化學法初篩ALT的檢測效果，我們將干式化學法和速率法兩種檢測方法進行對比觀察，現(xiàn)將結(jié)果報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料：選取2013年9月至2013年10月于本站采集的500例無償獻血者標本為研究對象，其中男性獻血者247例，女性253例，年齡18～55歲，平均（34.26±7.15）歲，所有獻血者獻血前體格檢查均符合《獻血者健康檢查要求》（2011版）[2]。

1.2 檢測設(shè)備和試劑：干式化學法采用杭州艾康生物技術(shù)有限公司MissionC100干式生化分析儀和配套的ALT測試條；速率法采用日立7100全自動生化分析儀，試劑盒由上?？迫A生物技術(shù)有限公司提供。ALT質(zhì)控品為RANDOX，檢測試劑及質(zhì)控品均在有效期內(nèi)實用，并嚴格按試劑盒說明書操作。

1.3 檢測方法。干式化學法：獻血前用毛細吸管定量吸取手指末梢全血30 μL，滴加至測試條加樣區(qū)中央位置，將測試條置入MissionC100，機器自動檢測和顯示結(jié)果；實驗室復(fù)檢速率法：取獻血者EDTAK2抗凝全血5 mL，充分混勻后離心后分離血漿，于日立7100全自動生化分析檢測ALT并記錄結(jié)果。兩種檢測方法結(jié)果以ALT＜40 U/L為合格。精密度檢測：取杭州艾康生物技術(shù)有限公司提供的病理值質(zhì)控血清[ALT靶值為（125.7±28.3）U/L]和正常值質(zhì)控血清[ALT靶值為（34.0 ±7.7）U/L]，分別在干式生化分析儀和全自動生化分析儀上連續(xù)重復(fù)測定20次，計算兩種檢測方法的平均值和批內(nèi)變異系數(shù)（CV），以CV＜15%為符合要求。

1.4 統(tǒng)計學方法：采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件對檢測數(shù)據(jù)進行分析、處理，ALT均值以均數(shù)±標準差（±s）表示，數(shù)據(jù)呈正態(tài)分布時兩組間比較用t檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié) 果

2.1 兩種設(shè)備檢測結(jié)果比較：在500例獻血者標本中，獻血前MissionC100干式化學法初篩ALT后經(jīng)日立7100生化分析儀速率法復(fù)檢，共有493例兩種檢測方法結(jié)果相符，干式化學法檢測結(jié)果與速率法總符合率為98.60%（493/500），見表1。

表1 兩種檢測設(shè)備不同方法結(jié)果比較

2.2 兩種方法檢測精密度比較：ALT質(zhì)控血清分別采用干式化學法和速率法檢測，正常值和病理值質(zhì)控血清兩種檢測方法ALT結(jié)果比較差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；兩種檢測方法的批內(nèi)CV值均＜15%，速率法檢測兩種質(zhì)控血清的精密度均高于干式化學法，但均無明顯差異（P＞0.05），表2。

表2 兩種檢測方法精密度比較

3 討 論

丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶（ALT）是臨床判定肝功能異常與否的重要指標，也是依照《獻血者健康檢查要求》血站血液檢測的必檢項目之一，同時獻血者ALT檢測不合格也是導(dǎo)致血站血液資源報廢的最主要原因[2]。目前，各級血站采血多在街頭流動采血車和獻血點進行，由于人員擁擠及環(huán)境條件所限，選擇合適的檢測方法對減少因ALT不合格導(dǎo)致血液資源的報廢及獻血員的流失尤為重要。以往本站也采用半自動生化分析儀對獻血者獻血前進行ALT的初篩，但存在檢測時間較長、操作繁瑣及設(shè)備不易攜帶等缺陷而限制了其應(yīng)用。近年來，我們采用干式化學法對獻血者ALT進行初篩，但筆者在實際操作過程中常碰到初篩合格的血液經(jīng)實驗室復(fù)檢仍有部分因ALT異常而報廢，為探討兩種檢測方法的差異，筆者對兩種檢測方法進行對比分析，為更好的做好獻血者ALT的篩查提供依據(jù)。

干式化學法采用丙酮酸氧化酶法檢測ALT，待檢樣本滴加至測試條加樣區(qū)后可自動均勻擴散至反應(yīng)區(qū)，測試條上顯色劑和反應(yīng)物質(zhì)在樣本ALT的作用下發(fā)生化學反應(yīng)，于640 nm波長下檢測并讀取結(jié)果[3]，其對獻血者ALT初篩具有以下優(yōu)勢：①設(shè)備體積小，攜帶方便；②檢測速度快，可節(jié)省獻血流程時間；③操作簡便，檢測過程無需對標本進行處理，血清、血漿及全血均可用于檢測；④與速率法比較，試驗所需樣本量少。本文研究結(jié)果顯示，500例獻血者獻血前采用干式化學法檢測與復(fù)檢速率法結(jié)果總符合率為98.60%（493/500）。在500例獻血者中有7例兩種檢測方法結(jié)果不相符，分析可能與以下因素相關(guān)：①兩種檢測模式存在方法學、設(shè)計及原理等差異；②干式化學法測試條反應(yīng)后呈現(xiàn)為藍綠色，當采集的標本發(fā)生溶血時，血紅蛋白可降低測試條反應(yīng)的藍綠色，導(dǎo)致檢測結(jié)果偏低；③檢測中樣本加樣量也可影響ALT的結(jié)果，加樣量少，致生物反應(yīng)少，檢測結(jié)果偏低，加樣量增多可致結(jié)果偏高，但當加樣量增至標準加樣量的1.5倍時，檢測結(jié)果反而降低；④實驗人員操作不規(guī)范也可使檢測結(jié)果出現(xiàn)偏差；⑤測試條加樣完成后未及時放入儀器中檢測也可導(dǎo)致結(jié)果偏低[4]。正常值和病理值質(zhì)控血清分別采用兩種方法檢測后，ALT結(jié)果比較差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；此外，兩種檢測方法的批內(nèi)CV值均＜15%，速率法檢測兩種質(zhì)控血清的精密度均高于干式化學法，但均無明顯差異（P＞0.05）。馮健亮[5]等研究顯示，干式化學法初篩ALT的檢測誤差對實際工作影響較小，反而可提高獻血者獻血后ALT檢測的合格率，有效減少血站血液采集后因ALT不合格導(dǎo)致血液資源的報廢，且可節(jié)約后續(xù)檢測、分離、運輸?shù)雀髁鞒汰h(huán)節(jié)的成本。

同時，筆者認為在ALT初篩中還應(yīng)注意以下幾個方面：①由于ALT受保存時間及溫度影響，因此標本于（4.0±2.0） ℃條件下保存于并及時進行檢測；②干式生化分析儀是利用光反射原理進行ALT的檢測，因而檢測過程應(yīng)避免強烈陽光照射，以免影響檢測結(jié)果；③由于干式生化法初篩ALT應(yīng)用的是手指血，穿刺后應(yīng)使血液自然流出，避免用力擠壓[5]；④干式生化分析儀開機后應(yīng)在初始化后及自檢完成后方可進行ALT檢測，以免影響檢測結(jié)果準確度。

綜上所述，干式化學法初篩ALT具有操作簡便、快捷及結(jié)果可靠等優(yōu)勢，又能解決血站因ALT高而報廢的問題，適于血站街頭對無償獻血者ALT的初篩，值得臨床推廣。

參考文獻

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[2] 李天君,趙鋒,張文學,等.采供血機構(gòu)不同檢測系統(tǒng)對ALT檢測結(jié)果比對研究[J].中國輸血雜志,2012,25(9):849-851.

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[6] 門守山,高發(fā)奎,任愛莉.有效控制街頭采血ALT報廢率的探討[J].臨床血液學雜志,2014,27(6):454-456.

中圖分類號：R446

文獻標識碼：B

文章編號：1671-8194（2016）06-0040-02