劉　欣，?；勖簦摺?，焦榮紅，張海霞

(1. 河北省人民醫(yī)院，河北 石家莊 050051；2. 解放軍260醫(yī)院，河北 石家莊 050041)

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莪術(shù)油對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化大鼠血脂和炎性因子的影響

劉欣1，?；勖?，高潔1，焦榮紅1，張海霞2

(1. 河北省人民醫(yī)院，河北 石家莊 050051；2. 解放軍260醫(yī)院，河北 石家莊 050041)

[摘要]目的觀察莪術(shù)油對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化大鼠血脂指標(biāo)及炎性因子白細(xì)胞介素-2(IL-2)、高敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)的影響。方法應(yīng)用高脂喂養(yǎng)法建立Wistar大鼠動(dòng)脈粥樣硬化模型。將造模成功大鼠隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組，每組25只。實(shí)驗(yàn)組給予莪術(shù)油葡萄糖注射液40 mg/kg腹腔注射，對(duì)照組給予等量5%葡萄糖注射液腹腔注射，均1次/d，共2周。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后處死大鼠，檢測(cè)2組大鼠血脂及炎性因子水平。結(jié)果實(shí)驗(yàn)組大鼠血TC、TG、LDL-C及IL-2、hs-CRP、TNF-α水平均明顯低于對(duì)照組(P均<0.05)，而HDL-C水平明顯高于對(duì)照組(P<0.05)。結(jié)論莪術(shù)油可改善動(dòng)脈硬化大鼠血脂水平，并能降低血清炎癥因子水平，為用于動(dòng)脈粥樣硬化的治療提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

[關(guān)鍵詞]動(dòng)脈粥樣硬化；動(dòng)物模型；莪術(shù)油；血脂指標(biāo)；炎性因子

動(dòng)脈粥樣硬化是許多疾病的病理基礎(chǔ)，可導(dǎo)致冠心病、動(dòng)脈硬化閉塞等多種疾病。近年來(lái)隨著社會(huì)進(jìn)步和人民生活水平的不斷提高，動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生率也逐漸升高。目前認(rèn)為有效改善動(dòng)脈粥樣硬化是治療多種疾病的基礎(chǔ)，相關(guān)藥物的研究應(yīng)用是該領(lǐng)域的熱點(diǎn)，并已取得許多成果。但迄今為止對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化的治療效果還有待進(jìn)一步提高。植物類(lèi)藥物由于其作用溫和、不良反應(yīng)少而受到關(guān)注。莪術(shù)油是多年生草本植物莪術(shù)的提取物，具有消炎、抗病毒、抑制腫瘤、修復(fù)血管損傷等功效[1-2]，但該藥是否對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化有效報(bào)道少見(jiàn)。故本研究觀察了莪術(shù)油對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化大鼠模型血脂及相關(guān)炎性因子的影響，旨在為其用于動(dòng)脈粥樣硬化的治療提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1實(shí)驗(yàn)資料

1.1動(dòng)物雄性Wistar大鼠55只，體質(zhì)量180～200(192±24.36)g。動(dòng)物購(gòu)自河北醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物中心，生產(chǎn)許可證號(hào):SCXK(冀)2003-1-003。大鼠在本院動(dòng)物室進(jìn)行飼養(yǎng)，飼養(yǎng)過(guò)程中注意保持籠具及環(huán)境衛(wèi)生，每天更換水、飼料及墊料，每周消毒2次，注意保持室內(nèi)濕度大于40%。

1.2主要藥物、試劑莪術(shù)油葡萄糖注射液(商品名：杜迪，黑龍江科倫制藥有限公司,國(guó)藥準(zhǔn)字H23020037)；TC、TG、LDL-C、HDL-C檢測(cè)試劑為日本和光純堯工業(yè)株式會(huì)社生產(chǎn); 高敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)試劑由DiaSys Diagnostic Systems GmbH提供，批號(hào)：60094955；白細(xì)胞介素-2(IL-2)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)ELISA檢測(cè)試劑盒為美國(guó)Sigma公司生產(chǎn)。

1.3實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1Wistar大鼠動(dòng)脈粥樣硬化模型的建立所有Wistar大鼠在常規(guī)條件下飼養(yǎng)，按文獻(xiàn)[3]方法給予動(dòng)物高脂飼料建立動(dòng)脈硬化模型。高脂飼料成分：3%膽固醇、0.5%膽酸鈉、0.2%丙硫氧嘧啶、5%白糖、10%豬油、81.3%基礎(chǔ)飼料。基礎(chǔ)飼料購(gòu)自河北醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物中心，高脂飼料由本課題組配制。在造模開(kāi)始時(shí)一次性腹腔注射維生素D 360萬(wàn)IU/kg。飼養(yǎng)8周后隨機(jī)處死5只大鼠用于證實(shí)動(dòng)脈粥樣硬化模型是否制備成功。

1.3.2動(dòng)物分組及給藥方法將剩余50只建模成功后的Wistar大鼠隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組，每組25只。實(shí)驗(yàn)組給予莪術(shù)油葡萄糖注射液40 mg/kg腹腔注射，對(duì)照組給予等量5%葡萄糖注射液腹腔注射，均1次/d，共2周。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后普通飲食喂養(yǎng)3 d后檢測(cè)相應(yīng)指標(biāo)。

1.3.3血脂水平檢測(cè)留取大鼠血清2 mL，采用7600-020全自動(dòng)生化分析儀(日本日立公司)檢測(cè)TC、TG 、LDL-C、HDL-C水平。

1.3.4血清hs-CRP水平檢測(cè)留取大鼠血清2 mL，用AU680全自動(dòng)生化分析儀(美國(guó)Beckman公司)測(cè)定hs-CRP水平，檢測(cè)范圍為0～350 mg/L。

1.3.5血清IL-2、TNF-α水平檢測(cè)留取大鼠血清2 mL，應(yīng)用ELISA法檢測(cè)IL-2、TNF-α水平，實(shí)驗(yàn)操作步驟嚴(yán)格按試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行，在美國(guó)寶特Multiskan FC全自動(dòng)酶免分析儀450 nm處測(cè)吸光值。IL-2檢測(cè)范圍為100～1 800 ng/L，批內(nèi)差異<9%，批間差異<15%。TNF-α檢測(cè)范圍為10～360 ng/L，批內(nèi)差異及批間差異均<10%。

2結(jié)果

2.1大鼠動(dòng)脈粥樣硬化模型鏡下表現(xiàn)飼養(yǎng)8周后，應(yīng)用掃描電鏡及MOVAT染色觀察發(fā)現(xiàn)大鼠動(dòng)脈壁均出現(xiàn)硬化，腔內(nèi)有脂質(zhì)斑塊沉積，證實(shí)造模成功。見(jiàn)圖1及圖2。

圖1　動(dòng)脈粥樣硬化大鼠動(dòng)脈掃描電鏡表現(xiàn)(×4 000)

2.22組血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平比較實(shí)驗(yàn)組大鼠血清TC、TG、LDL-C水平均明顯低于對(duì)照組(P均<0.05)，血清HDL-C水平明顯高于對(duì)照組(P<0.05)。見(jiàn)表1。

圖2　動(dòng)脈粥樣硬化大鼠動(dòng)脈MOVAT染色表現(xiàn)(×400)表1　2組血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平比較

組別nTCTGLDL-CHDL-C實(shí)驗(yàn)組252.97±0.640.35±0.101.69±0.411.21±0.38對(duì)照組254.03±0.980.97±0.192.74±0.660.86±0.17t-4.528-14.438-6.7574.204P<0.001<0.001<0.001<0.001

2.32組血清IL-2、hs-CRP、TNF-α水平比較實(shí)驗(yàn)組血清IL-2、hs-CRP、TNF-α水平均明顯低于對(duì)照組(P均<0.05)。見(jiàn)表2。

表2　2組血清IL-2、hs-CRP、TNF-α水平比較

3討論

近年來(lái)我國(guó)冠心病、頸動(dòng)脈狹窄、腦梗死等疾病的發(fā)生率不斷上升，嚴(yán)重威脅著人們健康。這些疾病的共同病理基礎(chǔ)為動(dòng)脈粥樣硬化，如能減輕動(dòng)脈粥樣硬化，則可緩解上述疾病病情。目前研究發(fā)現(xiàn)，動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生與高血脂癥、炎癥反應(yīng)密切相關(guān)[4-5]。因此，降脂和抗炎對(duì)減輕動(dòng)脈粥樣硬化有重要作用。

TC指血液中所有脂蛋白所含膽固醇的總和，包括游離膽固醇和膽固醇酯，在動(dòng)脈粥樣硬化時(shí)TC水平明顯升高[6]。TG是3分子長(zhǎng)鏈脂肪酸和甘油形成的脂肪分子，作為血液中的一種脂肪類(lèi)物質(zhì)，大部分是從飲食中獲得，該指標(biāo)在動(dòng)脈粥樣硬化時(shí)也明顯升高[7]。LDL-C是富含膽固醇的脂蛋白，其膽固醇主要來(lái)自高密度脂蛋白中的膽固醇，其升高也是反映動(dòng)脈粥樣硬化的重要指標(biāo)之一[8]。HDL-C為血清蛋白之一，富含磷脂質(zhì)，在生理上起著將肝外組織的膽固醇運(yùn)送到肝臟的運(yùn)載工具作用，因而可以防止游離膽固醇在肝外組織細(xì)胞上的沉積，該指標(biāo)在冠心病等疾病時(shí)水平降低[9]。

IL-2是白細(xì)胞介素家族研究最為深入的成員，主要由T細(xì)胞產(chǎn)生，以自分泌和旁分泌方式發(fā)揮效應(yīng)，其能夠活化T細(xì)胞，刺激NK細(xì)胞增殖，增強(qiáng)NK細(xì)胞殺傷活性及產(chǎn)生細(xì)胞因子。在炎性反應(yīng)時(shí)，IL-2水平明顯升高[10]。hs-CRP與傳統(tǒng)的CRP相比具有更高的靈敏度，可以更為準(zhǔn)確地反映機(jī)體的應(yīng)激情況[11]。TNF-α由巨噬細(xì)胞產(chǎn)生，對(duì)機(jī)體免疫功能具有調(diào)節(jié)作用，可促進(jìn)T細(xì)胞及其他殺傷細(xì)胞的功能，在應(yīng)激狀態(tài)下也明顯升高[12]。

莪術(shù)為姜科姜黃屬多年生宿根草本植物，該藥味辛、苦、溫，歸肝、脾經(jīng)，具有行氣止痛、積散結(jié)、破血祛瘀等作用。莪術(shù)油是莪術(shù)中的提取物，具有消炎、抗病毒、抗氧化、抑制腫瘤、修復(fù)血管損傷、治療肝纖維化、活血化瘀等多種作用，已在多種疾病的治療中取得了顯著效果[13-14]。但關(guān)于莪術(shù)油對(duì)血脂和炎性因子的影響報(bào)道尚不多見(jiàn)。

本研究結(jié)果顯示，實(shí)驗(yàn)組大鼠血清TC、TG、LDL-C及IL-2、hs-CRP、TNF-α水平均明顯低于對(duì)照組，而HDL-C水平則明顯高于對(duì)照組。說(shuō)明莪術(shù)油可調(diào)節(jié)血脂水平，有可能減輕硬化動(dòng)脈壁上脂質(zhì)沉積的程度；可減輕動(dòng)脈粥樣硬化的炎癥反應(yīng)，對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化的綜合治療有益。

綜上所述，莪術(shù)油可調(diào)節(jié)動(dòng)脈粥樣硬化大鼠血脂及炎性因子水平，但本研究?jī)?nèi)容較為簡(jiǎn)單，僅就莪術(shù)油對(duì)血清指標(biāo)的影響進(jìn)行了分析，距全面闡明莪術(shù)油對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化的效果及機(jī)制仍有較大距離，尚需進(jìn)一步對(duì)莪術(shù)油的作用進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)，最終確定莪術(shù)油能否作為動(dòng)脈粥樣硬化治療的新藥物應(yīng)用于臨床。

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Effect of Zedoray Turmeric Oil on serum lipid and inflammatory factors in rats with atherosclerosis

LIU Xin1, NIU Huimin1, GAO Jie1, QIAO Ronghong1, ZHANG Haixia2

(1. Hebei General Hospital，Shijiazhuang 050051，Hebei，China; 2. The 260th Hospital of PLA, Shijiazhuang 050041，Hebei, China)

Abstract:Objective It is to observe the effect of Zedoray Turmeric Oil on serum lipids(TC, TG, LDL-C, HDL-C) and inflammatory factors(IL-2, hs-CRP, TNF-α) in rats with atherosclerosis. Methods The models of rats with atherosclerosis were established with high-fat diet. The models were divided into experimental group and control group randomly, and there were 25 rats in each group. The rats in experimental group were given Zedoary Turmeric Oil and Glucose Injection(40 mg/kg) by intraperitoneal injection once per day and treated for 2 weeks, and the ones in control group were treated with the same dosage of 5% glucose injection. At the end of experiment, the rats were executed to detect serum lipids(TC, TG, LDL-C, HDL-C) and inflammatory factors(IL-2, hs-CRP, TNF-α) in both groups. Results The levels of serum TC, TG, LDL-C, IL-2, hs-CRP, TNF-α were all lower, whereas the level of serum HDL-C was higher in experimental group than those in control group (P<0.05). Conclusion Zedoray Turmeric Oil could improve the serum lipids and decrease inflammatory factors in rats with atherosclerosis effectively, which provided some experimental evidences for the treatment of atherosclerosis.

Key words:atherosclerosis; animal model; Zedoray Turmeric Oil; serum lipids; inflammatory factors

[作者簡(jiǎn)介]劉欣，男，副主任醫(yī)師，主要從事動(dòng)脈粥樣硬化性疾病的影像學(xué)診斷及研究。 [通信作者]張海霞，E-mail:765894882@qq.com

doi:10.3969/j.issn.1008-8849.2016.20.006

[中圖分類(lèi)號(hào)]R-332

[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]A

[文章編號(hào)]1008-8849(2016)20-2183-03

[收稿日期]2016-01-05