逯小萌

?

RP-HPLC法測定西咪替丁注射液的含量

逯小萌

河南省濮陽市食品藥品檢驗所(濮陽 457000)

摘要：目的建立西咪替丁注射液含量的反相高效液相色譜法。方法色譜柱為Thermo-C18(4.6mm×250mm，5μm),流動相：甲醇：0.1%三乙胺溶液(磷酸調(diào)節(jié)pH值至5. 8±0.1)(24:76),流速為1.0ml/min,柱溫為30℃,檢測波長為219nm。結(jié)果西咪替丁進(jìn)樣量在0.1508～1.5075μg范圍內(nèi)與峰面積呈良好線性關(guān)系，r=0.9997，平均回收率為99.72%，RSD=0.33%(n=9)。結(jié)論該方法準(zhǔn)確度、靈敏度及重復(fù)性均較好，可作為西咪替丁注射液的含量測定。

關(guān)鍵詞：西咪替丁注射液；反相高效液相色譜法；含量測定

本品的主要成分為西咪替丁,輔料為鹽酸與注射用水, 主要作用于壁細(xì)胞上H2受體，起競爭性抑制組胺作用，抑制基礎(chǔ)胃酸分泌，也抑制由食物、紐胺胃泌素、咖啡因及胰島素等刺激所引起的胃酸分泌，臨床適應(yīng)癥為消化道潰瘍。收載于《國家藥品標(biāo)準(zhǔn)化學(xué)藥品地方標(biāo)準(zhǔn)上升國家標(biāo)準(zhǔn)第四冊》，標(biāo)準(zhǔn)中含量測定項使用了紫外分光光度分析方法進(jìn)行測定.本人建立反相高效液相色譜法測定西咪替丁注射液的含量,試驗結(jié)果表明本法簡便準(zhǔn)確、專屬性強(qiáng)、重現(xiàn)性好。

1　儀器和試藥

Agilent 1200型高效液相色譜儀(美國安捷倫公司)；G1314B型Agilent 1200可變波長檢測器(美國安捷倫公司)；H4033A型色譜工作站(美國安捷倫公司)；Precisa 92SM-202A型電子天平(瑞士普利賽斯公司)；UVIKON XL型雙光束掃描紫外/可見分光光度計(法國賽克曼公司)；0.45μm微孔濾膜(天津市津騰實驗設(shè)備有限公司)；西咪替丁對照品(中國食品藥品檢定研究院，批號：100158-201406，供含量測定用)；西咪替丁注射液(山東方明藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司：批號1412143；上?，F(xiàn)代哈森(商丘)藥業(yè)有限公司：批號14061212；海南制藥廠有限公司：批號150104。規(guī)格均為2ml：0.2 g)；甲醇為色譜純；水為純化水；其他試劑均為分析純。

2　方法與結(jié)果

2.1色譜條件色譜柱：Thermo-C18(4.6mm×250mm，5μm)；流動相：甲醇：0.1%三乙胺溶液(磷酸調(diào)節(jié)pH值至5.8±0.1)(24:76)；流速：1.0ml/min；柱溫：30℃；檢測波長：219nm；進(jìn)樣量：20μl。理論板數(shù)不低于10000。按此色譜條件進(jìn)樣測定，色譜圖見圖1。

2.2溶液的制備精密量取本品1ml(約相當(dāng)于西咪替丁0.1 g)，置100ml容量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，精密量取1ml于100ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液；精密稱取西咪替丁對照品10.05mg，用流動相稀釋至濃度為10μg/ml的溶液，作為對照品溶液；按供試品溶液制備方法制備不含西咪替丁的溶液，即得陰性對照溶液。

2.3方法學(xué)考察

2.3.1專屬性試驗分別精密吸取對照品溶液、供試品溶液和陰性對照溶液各20μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。由圖1可見，供試品溶液色譜中，在與對照品溶液色譜相應(yīng)位置上有相同保留時間的色譜峰，陰性對照溶液無干擾，證明方法可行。

2.3.2線性關(guān)系考察精密吸取對照品溶液3、5、10、15、20、25、30μl注入液相色譜儀，以對照品進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)，以峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，回歸方程：Y=46.724X-7.1259 r=0.9998 (n=7)。結(jié)果表明，西咪替丁在0.1508～1.5075μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

圖1　高效液相色譜圖

2.3.3精密度試驗精密吸取同一供試品溶液20μl，注入高效液相色譜儀，重復(fù)6次。結(jié)果峰面積平均值為935.78，RSD=0.22%(n=6)，表明儀器精密度良好。

2.3.4穩(wěn)定性試驗精密吸取同一供試品溶液，分別于0、2、4、6、8、10、12、24h進(jìn)樣20μl，結(jié)果峰面積的平均值為941.67，RSD= 0.31% (n=8)。表明供試品溶液在24h內(nèi)基本穩(wěn)定。

2.3.5重復(fù)性試驗取同一批樣品，按擬定方法平行制備6份供試品溶液，分別進(jìn)行測定。結(jié)果得RSD=0.25%(n=6)表明該方法重復(fù)性良好。

2.3.6加樣回收率試驗精密量取已知含量的同一批號的樣品(山東方明藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司，批號1412143，規(guī)格：2ml:0.2 g)9份各1ml,分別置100ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液1ml，分別加入0.8ml、1.0ml、1.2ml的濃度為1.0406mg/ml的對照品溶液，用流動相定容至200ml，配成高(120%)、中(100%)、低(80%)3個量級的樣品溶液，過0.45μm微孔濾膜,按2.1條件進(jìn)行測定，計算回收率和RSD值，結(jié)果見表1。

表1　西咪替丁加樣回收實驗結(jié)果

注：n=9

2.4樣品含量測定

分別精密量取3批樣品適量，依法制備供試品溶液并進(jìn)樣測定，用外標(biāo)法計算西咪替丁注射液的含量。結(jié)果見表2。

表2　樣品含量測定結(jié)果

注：n=3

3　討論

在試驗波長的選擇上，取對照品溶液在UVIKON XL型雙光束掃描紫外/可見分光光度計200～300nm波長范圍內(nèi)進(jìn)行掃描，測得在219nm的波長處有最大吸收，故選擇219nm為檢測波長。在流動相的選擇上分別選擇了甲醇：水(24:76)、甲醇：水(240:760)(每1000ml溶液中含0.3ml磷酸和己烷磺酸鈉0.94)、乙腈：水(24:76)與甲醇：0.1%三乙胺溶液(磷酸調(diào)節(jié)pH值至5.8±0.1)(24:76)等進(jìn)行試驗，結(jié)果顯示甲醇：0.1%三乙胺溶液(磷酸調(diào)節(jié)pH值至5.8±0.1)(24:76)作為流動相無論是保留時間還是峰型均達(dá)到理想效果，故選擇為流動相作為試驗條件。本方法結(jié)果表明樣品主成分峰與相鄰溶劑及雜質(zhì)峰達(dá)到基線分離，并且陰性對照溶液峰對其無干擾，分離效果滿意。此外方法學(xué)考察的內(nèi)容均達(dá)到了相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)要求，說明該方法準(zhǔn)確、專屬性強(qiáng)，受客觀因素的影響較少，故此法可作為西咪替丁注射液含量的測定。

參考文獻(xiàn)

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(二部)[M].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：257-258.

[2]國家藥典委員會. 國家藥品標(biāo)準(zhǔn)化學(xué)藥品地方標(biāo)準(zhǔn)上升國家標(biāo)準(zhǔn)第四冊[S].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2002：88.

[3]邵超.HPLC法測定西咪替丁膠囊的含量[J].江西醫(yī)藥，2011，46(7):605-606.

[4]劉洪海，魏巍，李宇.高效液相色譜法測定西咪替丁片的含量[J].中國藥業(yè),2006,15(12):15-16.

[5]邵雪力，閆韶華.高效液相色譜法測定西咪替丁注射液的含量[J].數(shù)理醫(yī)藥學(xué)雜志，2010，23(5)：586-588.

[6]陳國友，陳立柱.HPLC法測定西咪替丁片的含量 [J].齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2007，28(17)：2101-2102.

doi:10.3969/j.issn.1003-8914.2016.04.022

文章編號：1003-8914(2016)-04-0500-02

收稿日期：(本文校對：王世清2015-06-15)

Content Determination of the Cimetidine Injection by RP-HPLC

LU Xiaomeng

(Puyang Institute for Food and Drug Control, Henan, Puyang 457000, China)

Abstract：ObjectiveTo establish a RP-HPLC method for content Cimetidine injection. MethodThe column was Thermo-C18 (4.6mm×250mm, 5 m). The mobile phase: methanol: 0.1% three triethylamine solution (phosphoric acid to adjust the pH value to 5.8±0.1) (24:76). The flow rate was 1.0ml/min, column temperature 30℃, and detection wavelength was 219nm. ResultCimetidine in 0.1508～1.5075μg range and peak area showed a good linear relationship, r=0.9997. The average recovery rate was 99.72%, RSD=0.33% (n=9). ConclusionThe method has good accuracy, sensitivity and repeatability, and can be used for content determination of Cimetidine injection.

Key words：Cimetidine injection; RP-HPLC; Content determination