張妮，賈連群，曲冬穎，呂美君，馬藝鑫，楊關(guān)林

(1遼寧中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)臟象理論及應(yīng)用教育部重點實驗室，沈陽110847；2中國人民解放軍第202醫(yī)院)

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妊娠高脂血癥患者血漿血脂水平及LDL亞類分布變化

張妮1，賈連群1，曲冬穎2，呂美君1，馬藝鑫1，楊關(guān)林1

(1遼寧中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)臟象理論及應(yīng)用教育部重點實驗室，沈陽110847；2中國人民解放軍第202醫(yī)院)

目的探討妊娠高脂血癥患者血漿血脂水平改變及低密度脂蛋白(LDL)亞類的分布特征。方法 采集60例妊娠高脂血癥患者(妊娠高脂血癥組)和60例正常孕婦(正常孕婦組)的血漿，利用Lipoprint脂蛋白亞類分析系統(tǒng)檢測血漿LDL亞類組成和含量。結(jié)果與正常孕婦組比較，妊娠高脂血癥組血漿TC、TG、LDL-C水平明顯高于正常孕婦組(P均<0.01)。在60例妊娠高脂血癥患者中，高甘油三酯血癥為61.67%，高膽固醇血癥為18.33%，混合型高脂血癥為20.00%。與正常孕婦組比較，妊娠高脂血癥組LDL 1、2濃度及LDL 1、2、3百分比低，LDL 4、5濃度及百分比高(P<0.01或<0.05)。結(jié)論 妊娠高脂血癥患者中血脂水平均升高，高甘油三酯血癥所占比例為最大，其血漿LDL亞類分布發(fā)生改變，即相對較大的顆粒濃度減少，相對較小的顆粒濃度升高。

妊娠高脂血癥；血脂水平；低密度脂蛋白亞類

高脂血癥、高血壓、糖尿病、吸煙、肥胖、不良妊娠結(jié)局是現(xiàn)在公認(rèn)的增加女性未來心血管疾病發(fā)生率的重要危險因素[1]。在妊娠期特殊生理狀態(tài)下，孕婦生理條件改變導(dǎo)致脂質(zhì)代謝紊亂，引發(fā)妊娠高脂血癥，促使部分產(chǎn)后婦女在未來生活中攜帶著高脂血癥危險因素[2，3]。妊娠高脂血癥患者血漿TC、TG、LDL-C及HDL-C水平多發(fā)生不同程度的改變[4]。相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，脂蛋白亞類分布特征改變與高脂血癥及動脈粥樣硬化等疾病的發(fā)生發(fā)展關(guān)系更為密切[5]。但妊娠高脂血癥LDL亞類分布特征研究尚未見報道，本文以LDL亞類為切入點，采用Lipoprint脂蛋白亞類分析系統(tǒng)檢測妊娠高脂血癥患者血漿LDL亞類組成和含量，初步闡明妊娠高脂血癥患者血漿LDL亞類分布特征，從血漿LDL亞類層面為臨床妊娠高脂血癥早期診斷、防治及預(yù)后判斷提供依據(jù)。

1　資料與方法

1.1臨床資料納入2015年8～11月就診于中國人民解放軍第202醫(yī)院產(chǎn)科門診的妊娠期高脂血癥產(chǎn)婦60例為妊娠高脂血癥組，均符合《中國成人血脂異常防治指南2007年版》和《中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則》2002年版診斷標(biāo)準(zhǔn)：成人空腹12 h血漿TC≥6.22 mmol/L或TG≥2.26 mmol/L。高甘油三酯血癥37例(61.67%)，高膽固醇血癥11例(18.33%)，混合型高脂血癥12例(20.00%)。正常妊娠婦女60例為正常孕婦組。兩組年齡25～35歲，均為初產(chǎn)婦，處于妊娠中晚期(28～40周)。妊娠前及妊娠期無肝腎功能異常、高血脂、高血壓、冠心病、糖尿病、胰腺炎、膽汁淤積、驚厥、子癇等疾??；妊娠期未服用激素及其他相關(guān)藥物。

1.2血漿血脂的檢測清晨空腹抽取靜脈血,裝入5 mL離心管內(nèi)，室溫靜置6 min后,離心3 500 r/min、

4 ℃、10 min，分離血漿，將其分裝到1.5 mL離心管內(nèi)，-80 ℃保存待用。全自動生化分析儀檢測血漿血脂(TC、TG、LDL-C、HDL-C)水平。

1.3血漿LDL亞類組成、含量檢測清晨空腹抽取靜脈血，離心分離血漿，采用Lipoprint脂蛋白分類儀檢測血漿LDL亞類組成、含量及分布特征。取出LDL亞組分析檢測試劑盒中的凝膠管，倒掉上面的緩沖液，吸干內(nèi)壁，擦干外表面，將凝膠管依次放入試管架上。將25 μL低溫(4 ℃)保存待測的血漿樣本加入含有凝膠的試管中，再加入200 μL Loading Gel，上下顛倒若干次與樣本混勻，放在照射燈下照射約30 min。將含有凝膠的試管插入電泳槽的孔隙內(nèi)，向電泳槽的下面倒入1 000 mL的電泳緩沖液，電泳槽的上面倒入200 mL的電泳緩沖液。將凝膠管內(nèi)的氣泡用挑針去除，設(shè)置電泳的電流輸出，每個凝膠管3 mA，當(dāng)條帶離凝膠管末端約1 cm時停止電泳。靜止放置30 min后將凝膠試管按順序依次放置于掃描儀內(nèi)的平板上進(jìn)行掃描，保存掃描圖像，進(jìn)行軟件分析，并計算小而密LDL濃度所占百分比。

2　結(jié)果

2.1兩組血漿TC、TG、LDL-C、HDL-C水平比較見表1。

表1　兩組血漿TC、TG、LDL-C、HDL-C水平比較

注：與正常孕婦組比較,*P<0.01。

2.2兩組血漿LDL亞類組分及含量比較見表2。

表2　兩組血漿LDL亞類組成及含量比較

注：與正常孕婦組比較,*P<0.05,**P<0.01。

2.3兩組血漿LDL亞類分布特征圖譜圖中LDL 1～7型隨著LDL 1到LDL 7顆粒大小呈逐漸減小的趨勢，正常孕婦組LDL 1～3型相對較大的顆粒明顯多于妊娠高脂血癥組，而妊娠高脂血癥組LDL 4～7型相對較小的顆粒明顯多于正常孕婦組。詳見圖1。

3　討論

妊娠高脂血癥是孕產(chǎn)婦經(jīng)常發(fā)生的生理性或病理性改變，部分產(chǎn)婦因產(chǎn)后體內(nèi)激素水平的自然調(diào)節(jié)作用可于產(chǎn)后數(shù)周內(nèi)血脂水平降至正常。有研究表明，對于正常健康孕產(chǎn)婦在產(chǎn)后8周時除LDL外其他脂蛋白均可降至妊娠前正常水平[4]。但亦有部分孕產(chǎn)婦由于妊娠期高脂血癥狀態(tài)而引發(fā)相應(yīng)的病理改變。Rideout等[6]研究證明，妊娠期子宮內(nèi)膜暴露于過多的TG時能增加胎兒血漿TG濃度，增加成年子女患上心血管疾病的風(fēng)險。Nakao等[7]研究發(fā)現(xiàn)，妊娠期高TG水平會誘發(fā)急性胰腺炎，即常見的妊娠高脂血癥合并急性胰腺炎的危險狀態(tài)。從中可以看出妊娠期高TG水平對孕產(chǎn)婦及其后代的健康具有不良影響。在本研究中，妊娠高脂血癥患者血漿TC、TG、LDL-C水平明顯高于正常孕婦，HDL-C水平低于正常孕婦。且我們利用有限的數(shù)據(jù)分析發(fā)現(xiàn),在60例妊娠高脂血癥患者中，高甘油三酯血癥患者為37例，所占比例最大，為61.67%。提示妊娠期高脂血癥患者中高甘油三酯血癥患者為最常見，當(dāng)然該結(jié)論仍有待進(jìn)一步的大數(shù)據(jù)支持。

注：1～7分別代表LDL不同大小顆粒類別，即LDL的不同亞類。

圖1兩組血漿LDL亞類分布特征圖譜

近十幾年來小顆粒LDL與缺血性心臟病的發(fā)病關(guān)系越來越引起研究者的廣泛關(guān)注。由于肝臟內(nèi)缺乏小顆粒LDL的親和性受體而停滯在血液中，在血管壁因其容易被氧自由基氧化成為氧化LDL，促使動脈硬化斑塊的形成。1998年Hubel 等[8]研究發(fā)現(xiàn)，粒子直徑<25.5 nm的LDL與缺血性心臟病的發(fā)病關(guān)系密切。本研究中LDL亞類分析結(jié)果顯示，妊娠高脂血癥患者血漿LDL各顆粒組分濃度及百分比均發(fā)生了明顯改變。其中，妊娠高脂血癥組LDL 1、2濃度明顯低于正常孕婦組，LDL 4、5濃度明顯高于正常孕婦組；在各顆粒所占百分比方面，妊娠高脂血癥組LDL 1、2、3百分比明顯低于正常孕婦組，LDL 4、5百分比明顯高于正常孕婦組。從結(jié)果可以看出妊娠高脂血癥組較正常孕婦組相比較大的顆粒(如LDL 1、2)濃度降低，相對較小的顆粒(如LDL 4、5)濃度升高。進(jìn)一步說明妊娠期高脂血癥患者較正常孕婦產(chǎn)后發(fā)生心血管疾病的概率增加。

Wakatsuki等[9]研究發(fā)現(xiàn)，LDL顆粒大小受血中TG濃度影響，當(dāng)血中TG濃度加大時會促使LDL顆粒變小。結(jié)合本實驗結(jié)果，妊娠期高TG水平在本研究所納入數(shù)據(jù)中占有重要的比例，加之妊娠高脂血癥LDL亞類分布特征的改變，可以看出妊娠期高TG水平與LDL亞類分布特征的改變關(guān)系密切。本研究所發(fā)現(xiàn)的妊娠高脂血癥患者血漿LDL亞類分布特征的變化規(guī)律，可為妊娠高脂血癥診斷、預(yù)防、治療及預(yù)后的判斷提供新的作用靶點。

[1] Mehta PK, Minissian M, Bairey Merz CN. Adverse pregnancy outcomes and cardiovascular risk factor management [J]. Semin Perinatol, 2015,39(4):268-275.

[2] Basaran A. Pregnancy-induced hyperlipoproteinemia: review of the literature [J]. Reprod Sci, 2009,16(5):431-437.

[3] Huissoud C, Robert JM, Bakrin N, et al. Severe gestational hypertriglyceridemia: related complications and management [J]. J Gynecol Obstet Biol Reprod, 2008,37(5):517-520.

[4] 劉希蘭,金仲品.妊娠高脂血癥的臨床特征及研究近況[J].中國煤炭工業(yè)醫(yī)學(xué)雜志,2002,5(7):641-642.

[5] 勾藍(lán)圖,傅明德,徐燕華,等. Ⅳ型高脂血癥患者血清高密度脂蛋白亞類組成及含量[J].中國動脈硬化雜志,2005,13(5):597-600.

[6] Rideout TC, Movsesian C, Tsai YT, et al. Mateernal phytosterol supplementation during pregnancy and lactation modulates lipid and lipoprotein response in offspring of apoE-deficient mice[J]. J Nutr, 2015,145(8):1728-1734.

[7] Nakao J, Ohba T, Takaishi K, et al. Omega-3 fatty acids for the treatment of hypertriglyceridemia during the second trimester[J]. Nutrition, 2015,31(2):409-412.

[8] Hubel CA, Luall F, Weissfeld L, et al. Small low-density lipoproteinsand vascular cell adhesion molecule-1are increased in association with hyperlipidemia in preeclampsia[J]. Metabolism, 1998,47(10):1281-1288.

[10] Wakatsuki A, Ikenoue N, Sagara Y. Estrogen-induced small low-density lipoprotein particles in postmenopausal women[J]. Obstet Gynecol, 1998,91(2):234-240.

Distribution characteristics of low density lipoprotein subclasses in blood plasma of pregnancy patients with hyperlipidemia

ZHANGNi1,JIALianqun,QUDongying,LYUMeijun,MAYixin,YANGGuanlin

(1LiaoningUniversityofTraditionalChineseMedicine,KeyLaboratoryofMinistryofEducationforTCMViscera-StateTheoryandApplications,Shenyang110847,China)

ObjectiveTo discuss the changes in levels of blood plasma lipid and distribution characteristics of low density lipoprotein (LDL) subclasses of pregnancy patients with hyperlipidemia. MethodsThe blood plasma was collected respectively from 60 pregnancy patients with hyperlipidemia (pregnancy hyperlipidemia group) and 60 healthy pregnant women (healthy pregnant woman group). We used the Lipoprotein subclasses analysis system to detect the composition and content of LDL subclasses in the blood plasma. ResultsThe levels of TC, TG and LDL-C in blood plasma were significantly higher in the pregnancy hyperlipidemia group than those of healthy pregnant woman group, and differences were statistical significance (P<0.01). In 60 pregnancy patients with hyperlipidemia, 61.67% of patients had hypertriglyceridemia, 18.33% had hypercholesterolemia and 20.00% had mixed hyperlipidemia. Compared with the healthy pregnant woman group, the concentrations of LDL 1 and LDL 2 were significantly lower, the concentrations of LDL 4 and LDL 5 were significantly higher in the pregnancy hyperlipidemia group, and differences were statistically significant (P<0.01 orP<0.05). Compared with the healthy pregnant woman group, the percentages of LDL 1, LDL 2 and LDL 3 were significantly lower, the percentages of LDL 4 and LDL 5 were significantly higher in the pregnancy hyperlipidemia group, and differences were statistically significant (P<0.01 orP<0.05). ConclusionsThe proportion of hypertriglyceridemia is higher than others in the pregnancy patients with hyperlipidemia, and the LDL subclasses distribution characteristics in the blood plasma has changed, that is the concentration of relatively large particle decreases and the relatively small particle concentration increases.

pregnancy hyperlipidemia; blood lipid level; low density lipoprotein subclasses

遼寧中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)臟象理論及應(yīng)用國家教育部重點實驗室開放基金項目(zyzx1506)；遼寧省高等學(xué)校優(yōu)秀人才支持計劃(LR2015041)；遼寧省自然科學(xué)基金項目(2015020394)。

張妮(1993-)，女，碩士研究生，研究方向為中西醫(yī)結(jié)合防治心血管病。E-mail： zhang_ni1993@163.com

簡介：賈連群(1975-)，男，中西醫(yī)結(jié)合博士后，教授，研究方向為中醫(yī)藥防治動脈粥樣硬化分子生物學(xué)機(jī)制。E-mail：jlq-8@163.com

10.3969/j.issn.1002-266X.2016.17.004

R714.2

A

1002-266X(2016)17-0013-03

2016-01-06)