于淼琛，潘立陽，朱　鴻

(1.大連醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院 檢驗(yàn)科，遼寧 大連 116011；2.大連市疾病預(yù)防控制中心 傳染病地方病防治所，遼寧 大連 116011)

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羅氏e601電化學(xué)發(fā)光儀剩余試劑的再利用評(píng)價(jià)

于淼琛1，潘立陽2，朱鴻1

(1.大連醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院 檢驗(yàn)科，遼寧 大連 116011；2.大連市疾病預(yù)防控制中心 傳染病地方病防治所，遼寧 大連 116011)

目的對(duì)羅氏e601電化學(xué)發(fā)光儀剩余試劑再利用進(jìn)行評(píng)估。方法將HBsAb、HBcAb、HBeAg、HBeAb的混合剩余試劑，進(jìn)行精密度、正確度驗(yàn)證并與新試劑進(jìn)行比對(duì)及相關(guān)性分析。結(jié)果剩余混合試劑HBsAb、HBcAb、HBeAg、HBeAb水平1批內(nèi)精密度分別為3.43、3.88、2.04、1.22，水平2批內(nèi)精密度分別為1.22、2.40、1.09、1.66；HBsAb、HBcAb、HBeAg、HBeAb水平1批間精密度分別為5.17、4.55、3.70、3.74；水平2批間精密度分別為4.99、3.93、4.16、6.91；正確度本室測(cè)定結(jié)果與室間質(zhì)評(píng)回報(bào)結(jié)果均相符、HBsAb相關(guān)系數(shù)r為 0.999；HBcAb、HBeAg、HBeAb兩試劑盒的陽性符合率和陰性符合率均為100%。結(jié)論羅氏e601電化學(xué)發(fā)光儀剩余試劑可以混合使用，穩(wěn)定性良好，能保證檢測(cè)質(zhì)量。

羅氏e601；剩余試劑再利用；電化學(xué)發(fā)光

[引用本文]于淼琛，潘立陽，朱鴻.羅氏e601電化學(xué)發(fā)光儀剩余試劑的再利用評(píng)價(jià)[J].大連醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2016,38(5)：480-482.

羅氏e601全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀應(yīng)用于臨床以來，因重復(fù)性好，故障率低，結(jié)果可靠穩(wěn)定，逐步取代了傳統(tǒng)的ELISA方法。但是由于配套試劑均為進(jìn)口試劑，價(jià)格相對(duì)較高，試劑剩余量大，為了節(jié)約成本，本實(shí)驗(yàn)室將相同批號(hào)的剩余試劑混合，并對(duì)其性能進(jìn)行驗(yàn)證評(píng)價(jià)。

1　材料和方法

1.1標(biāo)本來源

標(biāo)本來源于大連醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院住院無溶血、無乳糜患者血清。

1.2儀器與試劑

羅氏e601全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀。將儀器顯示為“0”的剩余試劑瓶剩余試劑輕輕充分混勻，倒入另一瓶?jī)x器顯示為“0”的試劑瓶?jī)?nèi)，輕輕混勻，注意不要產(chǎn)生氣泡，成為一盒新的“混合”試劑(同一項(xiàng)目試劑均為同一批號(hào))。HBsAb、HBeAg、HBeAb需2盒剩余試劑，HBcAb需3盒剩余試劑。HBsAb試劑批號(hào)19026703、HBeAg試劑批號(hào)18813102、HBeAb試劑批號(hào)12375401、HBcAb試劑批號(hào)131753122。配套校準(zhǔn)品及質(zhì)控品。

1.3方法

1.3.1精密度驗(yàn)證：依據(jù)EP15-A2[1]，選取兩個(gè)水平的質(zhì)控，連續(xù)重復(fù)測(cè)定20次，計(jì)算批內(nèi)精密度，要求批內(nèi)精密度≤1/4允許總誤差(TEa)；將兩個(gè)濃度的質(zhì)控品每日檢測(cè)1次，連續(xù)檢測(cè)20 d，得到20個(gè)數(shù)據(jù)，計(jì)算批間精密度，要求批間精密度≤1/3允許總誤差(TEa)。

1.3.2正確度驗(yàn)證：用室間質(zhì)評(píng)的質(zhì)控物測(cè)定，判斷測(cè)定結(jié)果與室間質(zhì)評(píng)回報(bào)結(jié)果符合性。

1.3.3比對(duì)試驗(yàn)

定量項(xiàng)目：依據(jù)EP9-A2[2]，將新盒檢測(cè)HBsAb的標(biāo)本，用混合試劑再測(cè)，將新試劑盒的結(jié)果與混合試劑盒的結(jié)果作比較，實(shí)驗(yàn)周期≥5 d，至少做20份病人樣品(如每天至少做4份病人標(biāo)本)。比對(duì)試驗(yàn)盡量在2 h內(nèi)檢測(cè)完成，將樣品按1、2、3、4的順序排列先測(cè)一遍，然后將順序倒過來做第2次測(cè)定。計(jì)算Y=aX+b，驗(yàn)證線性范圍。要求：a值在1±0.03范圍內(nèi)，相關(guān)系數(shù)r≥0.975。

定性項(xiàng)目：選擇20份陰性標(biāo)本(其它標(biāo)志物陽性的8份)、20份陽性標(biāo)本(弱陽性14份、強(qiáng)陽性6份)，使用混合試劑盒和新試劑盒分別檢測(cè)HBeAg、HBeAb、HBcAb，計(jì)算兩試劑盒的符合率，評(píng)價(jià)比對(duì)結(jié)果的可接受性。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

依據(jù)EP9-A2文件的要求對(duì)方法間離群值進(jìn)行檢查; 用相關(guān)系數(shù)(r)對(duì)相關(guān)性作粗略評(píng)估，若r>0.975，則認(rèn)為X范圍合適，兩種試劑的相關(guān)性好，直線回歸統(tǒng)計(jì)的斜率和截距可靠計(jì)算線性回歸方程。

2　結(jié)　果

2.1精密度驗(yàn)證

HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb檢測(cè)，批內(nèi)精密度和批間精密度結(jié)果均合格，見表1。

表1　精密度驗(yàn)證結(jié)果

2.2正確度驗(yàn)證

測(cè)定結(jié)果與衛(wèi)生部臨檢中心2016年第一次室間質(zhì)評(píng)回報(bào)結(jié)果一致，判斷結(jié)果符合，見表2。

表2　正確度驗(yàn)證結(jié)果

2.3比對(duì)試驗(yàn)

2.3.1定量項(xiàng)目：HBsAb新試劑盒測(cè)定值的平均值為X，混合試劑盒測(cè)定值平均值為Y，回歸方程Y=0.9809X+0.996，相關(guān)系數(shù)r=0.999。見圖1。

圖1　HBsAb新舊試劑相關(guān)性Fig 1 Correlation of HBsAb between the two kits

2.3.2定性項(xiàng)目：HBeAg、HBeAb、HBcAb兩試劑盒的陽性及陰性符合率均為100%。見表3。

表3HBeAg，HBeAb，HBcAb的新舊試劑陰性、陽性符合率

Tab 3 The coincidence of HBeAg，HBeAb，HBcAb between the two kits

項(xiàng)目陽性符合率(%)陰性符合率(%)評(píng)價(jià)HBeAg100100可接受HBeAb100100可接受HBcAb100100可接受

3　討　論

羅氏e601全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀檢測(cè)試劑用完后，試劑瓶?jī)?nèi)雖有剩余試劑，但儀器不會(huì)再進(jìn)行檢測(cè)，但剩余試劑量卻超過了50%[3]。電化學(xué)發(fā)光儀器試劑價(jià)格昂貴，如將剩余試劑棄之不用，將造成極大的浪費(fèi)。混合剩余試劑的混合試劑經(jīng)本實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)證，重復(fù)性及準(zhǔn)確性均可靠。HBsAb新試劑盒和剩余試劑混合試劑盒的比對(duì)結(jié)果，回歸方程良好，相關(guān)系數(shù)r=0.999，說明兩試劑盒高度正相關(guān)，且相關(guān)性都良好[4]。由于檢測(cè)標(biāo)本量大，且兩臺(tái)羅氏e601全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀同時(shí)進(jìn)行，通常今日的剩余試劑，在工作結(jié)束后，由崗位人員負(fù)責(zé)把剩余試劑混合，且做好標(biāo)注，放入另一臺(tái)儀器明日備用。第2天質(zhì)控合格后，才能進(jìn)行正常標(biāo)本檢測(cè)。如當(dāng)日質(zhì)控失控，應(yīng)查找原因，重新復(fù)測(cè)質(zhì)控品，質(zhì)控合格方能進(jìn)行正常標(biāo)本檢測(cè)；如質(zhì)控還是失控，不能用此混合試劑檢測(cè)標(biāo)本，要棄去此混合試劑。

羅氏HBsAb、HBcAb、HBeAg、HBeAb試劑瓶蓋打開后上機(jī)穩(wěn)定期為8周，本科室4種試劑用量大，及時(shí)拼裝后立即使用，包被的抗原抗體性質(zhì)與效價(jià)未發(fā)生改變，不影響繼續(xù)使用，使用過程中嚴(yán)密監(jiān)控質(zhì)控結(jié)果，保證實(shí)驗(yàn)質(zhì)量[5]。經(jīng)本實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)證，在日常工作中，可將羅氏e601全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀上使用的HBsAb、HBcAb、HBeAg、HBeAb試劑剩余混合用于檢測(cè)，與新試劑的檢測(cè)結(jié)果具有可比性，在嚴(yán)格按說明書保存及規(guī)定有效期內(nèi)使用的前提下，既保證了檢驗(yàn)質(zhì)量, 又能有效節(jié)約成本, 值得推廣[6]。同時(shí)，應(yīng)在同類型的檢測(cè)儀器項(xiàng)目中推廣，科學(xué)實(shí)驗(yàn)，有效降低科室成本。

[1] Clinical and Laboratory Standards Institute.EP15-A2.Evaluation of precision performance of quantitative measurement methods[S].Wayne,PA,USA:CLSI,2000.

[2] National Committee for Clinieal Laboratory Standards. EP9-A2 Method Comparison and BiasEstimation Using patient Samples[S].Wayne,PA:NCCLS,2002.

[3] 劉振杰,鐘偉國(guó),曹永堅(jiān)，等.關(guān)于全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀HCV剩余試劑再利用的研究[J].職業(yè)與健康,2015,31(8):1114-1119.

[4] 于淼琛,李士軍,孫國(guó)華，等.生化部分常規(guī)項(xiàng)目干濕化學(xué)檢測(cè)結(jié)果一致性分析[J].大連醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2016, 38(2):172-176.

[5] 黃維綱,賈汝靜,張健，等.醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域能力驗(yàn)證計(jì)劃的比較[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2013,28(10):937-943.

[6] 彭德珍,林武洲. 應(yīng)用質(zhì)控品對(duì)羅氏混合回收試劑穩(wěn)定性的觀察[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床,2010,7(4):343-344.

Recycling value of remaining reagent by Roche e601 electrochemiluminescence analyzer

YU Miao-chen1,PAN Li-yang2,ZHU Hong1

(1.ClinicalLaboratory,theFirstAffiliatedHospitalofDalianMedicalUniversity,Dalian116011,China; 2.DepartmentofInfectiousDiseasesandEndemic,DalianCityCenterforDiseaseControlandPrevention,Dalian116011,China)

Objective To evaluate the recycling value of remaining reagent by Roche e601 electrochemiluminescence analyzer. Methods The precision, accuracy, comparison and correlation analysis were performed between original reagents and recycling reagents for HBsAb、HBcAb、HBeAg、and HBeAb. Results The intra batch precision results of level 1 were 3.43,3.88,2.04,1.22 respectively，the intra batch precision results of level 2 were 1.22,2.40,1.09,1.66 respectively；the inter batch precision results of level 1 were 5.17,4.55,3.70,3.74 respectively；the inter batch precision results of level 2 were 4.99,3.93,4.16,6.91 respectively. The accuracy result was consistent with the EQA result；the correlation coefficient of HBsAb was 0.999；the positive rate and negative coincidence rate(%)of HBcAb,HBeAg,HBeAb were 100%. Conclusion The remaining reagents can be combined and recycled by Roche e601, demonstrate good stability and ensure the quality of measurement.

Roche e601; recycling of remaining reagent; electrochemiluminescence

于淼琛(1982-)，女，遼寧大連人，主管技師。E-mail：ymc7788999@163.com

朱 鴻，主任技師。E-mail：zhuhong0411@126.com

??著

10.11724/jdmu.2016.05.16

R446.69

A

1671-7295(2016)05-0480-03

2016-06-20；

2016-09-11)