陜西省核工業(yè)二一五醫(yī)院(咸陽712000)

吳宏培△ 李俊海 魯 鳴 劉娟妮 閆 妍△ 王健生△▲

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·臨床病理·

Snail在胃癌組織中的表達及其與胃癌預(yù)后的關(guān)系*

陜西省核工業(yè)二一五醫(yī)院(咸陽712000)

吳宏培△李俊海魯 鳴劉娟妮閆 妍△王健生△▲

目的：探討Snail在胃癌中的表達及其表達與胃癌患者預(yù)后的關(guān)系。方法：對60例胃癌患者手術(shù)切除組織，采用免疫組化方法分別檢測Snail在胃癌組織和癌旁組織中的表達，并分析其表達與臨床病理資料和患者預(yù)后的相關(guān)性。結(jié)果：Snail在癌旁組織中有19例強表達，強表達率為31.7%；在癌組織中，有47例強表達，表達率為78.3%，明顯高于癌旁組織(P<0.05)。Snail在胃癌組織中的表達與胃癌的分化程度、TNM分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)(P<0.05)，而與患者性別、年齡、腫瘤大小、遠處轉(zhuǎn)移等指標(biāo)之間未見明顯相關(guān)性(P>0.05)。并且Snail在胃癌組織中的表達與胃癌預(yù)后相關(guān)(P<0.05)。結(jié)論：Snail在胃癌組織中高表達，其表達與胃癌的分化程度、TNM分期、淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移及預(yù)后相關(guān)，Snail在胃癌中的表達情況可以作為判斷胃癌預(yù)后的參考指標(biāo)。

Snail是一種鋅指結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)錄抑制因子,在胚胎發(fā)育中的上皮間質(zhì)化(EMT)過程起到重要的作用,與中胚層和神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育密切相關(guān)[1-2]。過表達Snail的上皮細胞獲得遷移和浸潤的潛能,與鈣粘附蛋白E(E-cadherin)的下調(diào)有關(guān)[3-4]。由于這種促進細胞遷移和浸潤潛能的特性，Snail在腫瘤中的表達和作用越來越受到人們的關(guān)注。本研究通過免疫組化方法測定Snail在胃癌組織中的表達,并分析其表達與臨床病理特征與疾病預(yù)后的關(guān)系。

材料與方法

1 材 料 收集陜西省核工業(yè)二一五醫(yī)院和西安交通大學(xué)第一附屬醫(yī)院2009年1月至2012年1月的胃癌手術(shù)患者60例,術(shù)后病理診斷均為胃腺癌。其中男38例,女22例；年齡45～68歲。位于胃上中下部分的患者分別為20例,14例,26例；腫瘤組織高分化者10例,中分化37例,低分化13例；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者37例；TNM分期：I～II期24例,III～IV期36例。60例病人均以電話或門診的方式隨訪至2015年1月,臨床病理資料完整。取距癌組織邊緣5 cm以上的癌旁組織作為對照組。

2 免疫組化染色 組織石蠟包埋，4 μm厚連續(xù)切片。切片脫蠟后，按試劑盒(中國中杉金橋公司)說明書行兩步法免疫組化染色。兔抗人Snail抗體bs-1371R購自英國Abcom公司。用已知的陽性切片作為陽性對照。用PBS代替一抗作為陰性對照。

3 結(jié)果判定 以胞核內(nèi)出現(xiàn)明顯黃色或棕黃色為陽性細胞。每張切片在顯微鏡下5個隨機視野(×200)中計數(shù)陽性細胞，細胞計數(shù)總數(shù)不少于1000。①計數(shù)評分：無陽性細胞,記0分；陽性細胞百分比<25%，記 1分；陽性細胞百分比25%～49%，記1分；陽性細胞百分比50%～74%，記3分；陽性細胞百分比>74%，記4分。②著色評分：無著色或基本無著色,記0分；著色為淡黃色,記1分；著色為棕黃色,記2分；著色為棕褐色；記3分?？傇u分為兩項評分相乘,總分≤3分記為弱表達,>3分記為強表達。

4 統(tǒng)計學(xué)方法 使用SPSS 16.0統(tǒng)計軟件包進行統(tǒng)計分析。用χ2檢驗分析Snail表達與臨床病理資料的相關(guān)性，用Kaplan-Meier法進行生存分析，以Log-rank檢驗進行組間比較。當(dāng)P<0.05時，認(rèn)為結(jié)果具有統(tǒng)計學(xué)意義。

結(jié) 果

1 Snail在胃癌中的表達 見圖1。Snail主要在胞核中表達，在60癌組織中，有47例強表達，強表達率為78.3%。60例癌旁組織中，有19例強表達，強表達率為31.7%。癌組織中強表達率高于癌旁組織(P<0.05)。

A: 腫瘤組織; B: 癌旁組織

2 Snail表達與臨床病理特征的關(guān)系 見附表。Snail的表達與胃癌組織分化程度、TNM分期及淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移相關(guān)(P<0.05)。

3 Snail表達與胃癌患者預(yù)后的關(guān)系 見圖2。Kaplan-Meier分析發(fā)現(xiàn)，胃癌患者中Snail的表達水平與患者預(yù)后相關(guān)(P<0.01)。Snail強表達者生存期為33.23個月, 弱表達者生存期為49.46個月,表明Snail強表達的胃癌患者預(yù)后較差。

圖2 Snail表達情況與胃癌患者預(yù)后Kaplan-Meier生存曲線

附表 Snail表達與臨床病理指標(biāo)的相關(guān)性

討 論

Snail屬于鋅指轉(zhuǎn)錄因子大家族,早期研究認(rèn)為Snail通過上皮間質(zhì)化在胚胎中胚層及神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育過程中起重要作用[5-6]。隨著上皮間質(zhì)化在腫瘤發(fā)生過程中的重要作用被證實,Snail也逐漸成為腫瘤研究的熱點之一，但其表達與腫瘤患者生存時間的關(guān)系研究目前較少[7]。

本實驗通過免疫組化技術(shù)檢測60例胃癌手術(shù)標(biāo)本中Snail在胃癌組織和癌旁組織中的表達情況及其與臨床病理特點和胃癌患者預(yù)后之間的關(guān)系。Snail主要在細胞核中表達,在60例標(biāo)本中,癌組織中Snail的表達明顯高于癌旁組織，并且Snail的表達與腫瘤組織分化程度、TNM分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移明顯相關(guān)(P<0.05)，與性別、年齡、腫瘤大小等臨床病理指標(biāo)無明顯相關(guān)性。與此同時，通過Kaplan-Meier分析Snail的表達與60例胃癌患者預(yù)后之間的關(guān)系發(fā)現(xiàn)，胃癌患者中Snail的表達水平與患者預(yù)后相關(guān)(P<0.01)。

綜上所述,Snail的強表達與胃癌不良預(yù)后明顯相關(guān),在腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程中起到重要作用，可以作為胃癌預(yù)后的參考指標(biāo),但其相關(guān)分子機制尚不明確,需要對其具體調(diào)控機制行進一步研究。

[1] Larue L,Bellacosa A. Epithelial-mesenchymal transition in development and cancer: role of phosphatidylinositol 3' kinase/AKT pathways[J]. Oncogene,2005,24(50)：7443-7454.

[2] Huber MA,Kraut N,Nand H.Molecular requirements for epithelial-mesenchymal transition during tumor progression[J]. Curr Opin Cell Biol,2015,17(5)：548-558.

[3] Nieto MA.The snail superfamily of zinc-finger transcription factors[J]. Nat Rev Mol Cell Biol,2012，3(3)：155-166.

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[6] 蔡鳳林,章佳新.Twist 和 Snail 在乳腺癌中的表達及其與血管生成的關(guān)系[J].現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué),2013,21(2):298-301.

[7] 唐志鋒,蘇曉娟.RhoA 和Snail的表達與胃癌生物學(xué)行為的關(guān)系[J].中國普外基礎(chǔ)與臨床雜志,2013,20(8)：884-889.

(收稿：2016-02-28)

High expression of Snail in gastric cancer, associated with poor prognosis

No.215 Hospital of Shaanxi Nuclear Industry(Xianyang 712000)

Wu HongpeiLi Junhai Lu Minget al

Objective: This study assessed the expression of Snail in gastric cancercorrelated with clinicopathological features, and demonstratedcorrelations between the expression and prognosis. Methods:Immunohistochemistry was used to estimate the expressions of Snailin 60 surgical specimens of gastric cancer.Clinicopathological featuresand immunohistochemical resultsof each section were scored by two experienced pathologists respectively.Results:Snail usually expressed in nucleus. In gastric cancer , the positive rate of Snail was 78.3%,which was significantly higher than that in para-carcinoma tissue(31.7%). The expression of Snailis related todegree of tumor differentiation and invasion, lymph metastasisandclinical stage(P<0.05),whereas there was no correlation with age, sex, size, location, and distant metastasis(P>0.05).Moreover, a negative correlation was found between expression of Snail and clinical outcomes in gastric cancer (P<0.05). Conclusions: As a high expression of Snail in gastriccancer predicted a poor clinical outcome, Snail plays an important role in gastric cancer development. Snail can be used as a prognostic biomarker to predict outcomes of gastric cancer.

Stomach neoplasms Immunohistochemistry Prognosis @Snail

*陜西省科技攻關(guān)項目(2009K01-85)

△西安交通大學(xué)第一附屬醫(yī)院

▲通訊作者

胃腫瘤 免疫組織化學(xué) 預(yù)后 @Snail

R735.2

A

10.3969/j.issn.1000-7377.2016.10.057