崔玲玉，閔偉紅*，劉 威，毛 晶，苗欣宇，劉景圣

（小麥和玉米深加工國家工程實驗室，吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院，吉林 長春 130118）

長白山核桃楸分離蛋白緩解小鼠體力疲勞的作用

崔玲玉，閔偉紅*，劉 威，毛 晶，苗欣宇，劉景圣

（小麥和玉米深加工國家工程實驗室，吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院，吉林 長春 130118）

為探究長白山核桃楸分離蛋白（Juglans mandshurica Maxim kernel protein isolate，JMKP）緩解體力疲勞的作用，通過小鼠負(fù)重游泳實驗，以游泳時間為疲勞指標(biāo)，并測定血乳酸（blood lactic acid，BLA）、肝糖原（hepatic glycogen，GLU）和丙二醛（malondialdehyde，MDA）含量及谷胱甘肽過氧化物酶（glutathione peroxidase，GSH-Px）、過氧化氫酶（catalase，CAT）和超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）活力等生化指標(biāo)。結(jié)果表明：2 周后，JMKP高劑量組小鼠的游泳時間比對照組增加了38.66%，4 周后，JMKP低、中、高劑量組小鼠的游泳時間比對照組分別延長了24.10%、42.17%和64.46%；2 周后，JMKP高劑量組小鼠的血乳酸含量與對照組相比下降了21.44%，4 周后，JMKP中、高劑量組小鼠的血乳酸含量與對照組相比分別下降了13.02%和23.48%；2 周和4 周后，JMKP中、高劑量組小鼠的肝糖原含量與對照組相比分別升高了15.41%～16.29%和18.35%～20.81%；2 周和4 周后，JMKP高劑量組小鼠血清中的MDA含量與對照組相比分別下降了20.41%和28.59%；JMKP能夠提高小鼠體內(nèi)GSH-Px、CAT和SOD活力，特別是在灌胃高劑量的JMKP 4 周后，與對照組相比均有極顯著差異（P＜0.01）。實驗結(jié)果表明JMKP具有顯著緩解小鼠疲勞的作用。

長白山核桃楸；分離蛋白；體內(nèi)實驗；緩解疲勞；抗氧化性

隨著現(xiàn)代社會工作生活節(jié)奏的日益加快，人們體力勞動和腦力勞動強度不斷增強，越來越多的人感覺到疲勞每日伴隨，一旦疲勞產(chǎn)生，人的工作效率就會下降，甚至?xí)：θ梭w正常生理機能，進而導(dǎo)致疾病，隨著健康生活意識的增強，人們越來越期望找到能夠延緩疲勞的新型食品。

長白山核桃（Juglans mandshurica Maxim）又名核桃楸，系胡桃科（Juglandaceae）核桃屬植物，落葉闊葉喬木樹種，東北地區(qū)三大珍貴闊葉樹種之一，主要分布于小興安嶺、完達(dá)山脈、長白山區(qū)及遼寧東部［1］。核桃楸是重要的藥食同源植物，種仁富含對人體有益的不飽和脂肪酸、蛋白質(zhì)、碳水化合物、維生素、微量元素，還有少量酚酸和黃酮等，具有補氣養(yǎng)血、烏發(fā)健腦等功能［2-3］。核桃仁營養(yǎng)美味，是一種深受人們喜愛的堅果類食品，核桃蛋白作為眾所周知的優(yōu)質(zhì)植物源蛋白，是一種具有經(jīng)濟、食用及開發(fā)價值的植物蛋白，目前以核桃仁為原料的加工產(chǎn)品主要為核桃油，副產(chǎn)物核桃粕卻未能很好的利用，而核桃粕中蛋白質(zhì)含量高達(dá)45.30%［4］，富含18 種氨基酸，如能對核桃粕中的蛋白質(zhì)進一步開發(fā)利用，不僅提高了核桃的經(jīng)濟價值，并且可為其他油料作物的綜合利用提供借鑒［5-6］。有研究表明，西洋參分離蛋白具有顯著的緩解小鼠體力疲勞的作用［7］，因此本實驗擬通過負(fù)重游泳實驗建立小鼠體力疲勞模型，并對小鼠灌胃長白山核桃楸分離蛋白（Juglans mandshurica Maxim kernel protein isolate，JMKP），以力竭游泳時間為主要指標(biāo)，測定小鼠血液中血乳酸（blood lactic acid，BLA）、肝糖原（hepatic glycogen，HG）、丙二醛（malondialdehyde，MDA）含量及谷胱甘肽過氧化物酶（glutathione peroxidase，GSH-Px）、過氧化氫酶（catalase，CAT）和超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）活力等生化指標(biāo)，研究JMKP是否也具有緩解小鼠體力疲勞的作用。

1 材料與方法

1.1 動物、材料與試劑

180 只4～6 周齡清潔級昆明雄性小鼠，體質(zhì)量（20±2） g，購自長春生物制品研究所有限責(zé)任公司，許可證號SCXK（吉）2011-0003。小鼠生長和實驗符合《中國食品藥品檢定研究院實驗動物福利倫理審查指導(dǎo)原則（試行）》［8］。實驗小鼠于動物飼養(yǎng)室中5 d進行環(huán)境適應(yīng)。小鼠飼養(yǎng)條件：室溫22～25 ℃，相對濕度55%～70%，食物和水可隨意獲得。

BLA檢測試劑盒、HG檢測試劑盒、MDA檢測試劑盒、GSH-Px檢測試劑盒、CAT檢測試劑盒、SOD檢測試劑盒 南京建成生物工程研究所；其他試劑均為國產(chǎn)分析純。

1.2 方法

1.2.1 JMKP的制備

采用堿溶酸沉法制備JMKP［9-10］：脫脂核桃楸種仁與蒸餾水以1∶14（m/V）比例混合，用1 mol/L NaOH溶液調(diào)pH值至9.0，60 ℃水浴90 min，5 000 r/min離心10 min，用1 mol/L鹽酸調(diào)上清液pH值至4.9，酸沉30 min，5 000 r/min離心，水洗3 次，調(diào)pH值至7.0，冷凍干燥。

1.2.2 JMKP蛋白質(zhì)含量測定及十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳（sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis，SDS-PAGE）分析

JMKP的蛋白質(zhì)含量依據(jù)GB 5009.5—2010《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中蛋白質(zhì)的測定》［11］測定，換算系數(shù)為6.25。在Kasran［12］和Tan［13］等方法的基礎(chǔ)上稍作修改：樣品溶解在100 μL磷酸鹽緩沖液（50 mmol/L、pH 7.5）中，離心取80 μL上清液，加入20 μL 5×SDS蛋白電泳上樣緩沖液混勻，100 ℃金屬浴10 min，冷卻離心，每孔取20 μL上清液上樣，進行SDS-PAGE分析。

1.2.3 動物分組及處理

將180 只昆明雄性小鼠按體質(zhì)量隨機分成4 組，其中對照組60 只，JMKP低劑量組（PrL組）、JMKP低劑量組（PrM組）和JMKP高劑量組（PrH組）各40 只。將JMKP凍干粉溶于去離子水，分別對PrL組、PrM組、PrH組的小鼠按照200、400、800 mg/（kg·d）的劑量進行灌胃，對照組小鼠灌胃等量的去離子水。各組小鼠均自由攝取飼料及水；每日定時稱量小鼠體質(zhì)量并補充飼料飲水。在第0周（即實驗開始，未對小鼠進行處理）時從對照組隨機取20 只小鼠均分為兩組各用于負(fù)重游泳實驗和生化指標(biāo)測定；分別在第2、4周時，再分別從每組隨機取20 只小鼠，其中10 只用于負(fù)重游泳實驗，另外10 只用于生化指標(biāo)測定，記錄并整理測定結(jié)果。

1.2.4 小鼠負(fù)重游泳實驗

負(fù)重游泳實驗在Uthayathas等［14］方法的基礎(chǔ)上做一定修改：飼養(yǎng)一定時間后，從各組均取10 只小鼠進行負(fù)重游泳實驗。在末次灌胃30 min后，給小鼠尾部負(fù)重其體質(zhì)量5%的鉛絲，在恒溫水槽中（50 cm×140 cm×40 cm）進行游泳，水溫控制在（30±2）℃。在實驗過程中，使每只小鼠四肢保持運動，如果小鼠漂浮在水面四肢不動，用玻璃棒在其附近攪動，使其運動。記錄從小鼠開始進入水中游泳至頭部全部沒入水中后10 s無法浮出水面的時間，即為游泳力竭時間，泳池水每次實驗結(jié)束后進行更換。

1.2.5 小鼠血液生化指標(biāo)測定

灌胃JMKP 30 min后，將小鼠放在恒溫水槽中游泳30 min，游泳結(jié)束后眼眶取血，將全血3 000 r/min離心15 min，吸出上清液即為血清，置于-20 ℃冰箱中保存。用試劑盒測定血清中BLA、MDA含量以及SOD、GSH-Px和CAT活力，并取小鼠肝臟測定其HG含量。

1.3 數(shù)據(jù)分析

2 結(jié)果與分析

2.1 JMKP的蛋白質(zhì)含量和SDS-PAGE分析

根據(jù)1.2.2節(jié)方法測得核桃楸分離蛋白的純度可高達(dá)90.85%。由圖1可知，核桃分離蛋白分子質(zhì)量主要集中在18～24 ku和30～40 ku。

2.2 JMKP對小鼠力竭游泳實驗的影響

力竭游泳實驗是評價物質(zhì)緩解動物體力疲勞功效的一種最有效實驗［15］。由圖2可知，灌胃JMKP 2 周和4 周后，PrH組小鼠的負(fù)重游泳時間均極顯著延長（P＜0.01），并且這種效果會隨灌胃時間的延長而增加。2 周后，隨著JMKP劑量的增加，小鼠負(fù)重游泳時間也在延長，與對照組相比，PrH組小鼠負(fù)重游泳時間增加了38.66%。4 周后，隨著JMKP劑量的增加，小鼠負(fù)重游泳時間同樣在延長，JMKP各劑量組小鼠負(fù)重游泳時間均極顯著高于對照組（P＜0.01），與對照組相比，PrL、PrM和PrH組小鼠負(fù)重游泳時間分別增加了24.10%、42.17%和64.46%。以上結(jié)果說明JMKP中可能存在能緩解小鼠體力疲勞的物質(zhì)，并表現(xiàn)出明顯的時間與劑量效應(yīng)。

2.3 JMKP對小鼠血乳酸含量的影響

乳酸是機體在缺氧條件下糖酵解的產(chǎn)物，是劇烈運動時機體的主要供能方式。因此，血液中的乳酸含量是判斷機體疲勞程度的重要指標(biāo)之一［16-17］。乳酸本身不會引起疲勞，但乳酸分子中的氫離子解離出后引起了pH值的變化，從而導(dǎo)致身體機能下降，進而使機體產(chǎn)生了疲勞感［18］。如果某種物質(zhì)能夠抑制乳酸的積累或促進乳酸的清除，就會有緩解疲勞的作用。如圖3所示，在小鼠負(fù)重游泳實驗后，測定小鼠血液中乳酸的含量，結(jié)果表明在灌胃JMKP 2 周后，PrH組小鼠血液中的乳酸含量與對照組相比下降了21.44%；在灌胃JMKP 4 周后，PrM和PrH組小鼠血液中的乳酸含量與對照組相比分別下降了13.02%和23.48%。

2.4 JMKP對小鼠肝糖原含量的影響

血糖是穩(wěn)定機體運行唯一能量來源，血糖濃度的維持主要依靠食物和肝臟糖原的分解，因此肝糖原是機體運動過程中的重要能量來源，當(dāng)體內(nèi)肝糖原不足時，便會產(chǎn)生疲勞感，所以說肝糖原是評定疲勞水平的一個敏感指標(biāo)［19］。如圖4所示，在灌胃JMKP 2 周和4 周后，與對照組相比，PrM組與PrH組小鼠的肝糖原含量均顯著或極顯著升高（P＜0.05或P＜0.01），分別比對照組升高了15.41%～16.29%和18.35%～20.81%，而PrL組與對照組相比無明顯差異（P＞0.05），以上結(jié)果說明中、高劑量的JMKP能夠起到維持小鼠肝糖原水平的作用。

2.5 JMKP對小鼠血清中丙二醛含量的影響

丙二醛是機體細(xì)胞質(zhì)膜氧化后的產(chǎn)物，它在某種意義上代表了細(xì)胞的受損程度，正常情況下，體內(nèi)氧化系統(tǒng)與抗氧化系統(tǒng)間呈現(xiàn)動態(tài)平衡［20］。當(dāng)劇烈運動時，運動所需要的供氧量突然增加，一方面氧化-抗氧化系統(tǒng)間動態(tài)平衡遭到破壞，自由基產(chǎn)生增多，另一方面，局部氧氣供應(yīng)不足會損傷線粒體的氧化功能，引發(fā)自由基損傷［16］。在以有氧代謝為主的長時間力竭運動過程中，MDA 水平的高低反映了積累的自由基對組織細(xì)胞的損傷程度。由圖5可知，在灌胃JMKP 2 周和4 周后，PrH組小鼠血清中的MDA含量與對照組相比分別下降了20.41%和28.59%，這說明高劑量的JMKP對于降低小鼠體內(nèi)MDA含量具有顯著影響。

2.6 JMKP對小鼠SOD、GSH-Px和CAT活力的影響

機體在劇烈或長時間運動后會產(chǎn)生疲勞感，這是因為當(dāng)劇烈或長時間運動時，體內(nèi)腺苷三磷酸（adenosine triphosphate，ATP）迅速被消耗，需氧量急劇增加，氧氣不能及時抵達(dá)各個細(xì)胞組織時，機體內(nèi)的糖類則不能徹底氧化分解，產(chǎn)生不完全分解產(chǎn)物——乳酸，乳酸的產(chǎn)生導(dǎo)致體內(nèi)環(huán)境pH值發(fā)生變化，各類酶活性受到影響，進而使機體產(chǎn)生疲勞感［21］。疲勞與氧化之間有密切關(guān)系，當(dāng)機體劇烈運動后，體內(nèi)的氧化作用大幅度增加，劇烈運動肌肉群耗氧量增加，機體代謝副產(chǎn)物也相應(yīng)增加，而體內(nèi)抗氧化酶的數(shù)量一定，不能及時被分解或排出的代謝副產(chǎn)物必然對機體造成傷害，產(chǎn)生過多自由基，攻擊生物膜上不飽和脂肪酸，引起脂質(zhì)過氧化，使生物膜通透性增加，導(dǎo)致肌纖維興奮收縮偶聯(lián)，鈣離子進入肌質(zhì)網(wǎng)的速率減慢，線粒體功能紊亂，呼吸機能減弱，ATP生成量減少，機體能量供應(yīng)不足，引發(fā)疲勞，因此體內(nèi)的抗氧化酶活性在一定程度上反映了緩解疲勞的能力［22］。

SOD是生物體內(nèi)重要的抗氧化酶，SOD在生物體內(nèi)活性的高低是細(xì)胞衰老與死亡的直觀指標(biāo)，它可對抗與阻斷氧自由基對細(xì)胞造成的損害［23-24］，并及時修復(fù)受損細(xì)胞，修復(fù)自由基造成的傷害。由表1可知，在灌胃JMKP 2 周和4 周后，與對照組相比，PrH組小鼠體內(nèi)的SOD活力均極顯著升高（P＜0.01）；4 周后，隨著JMKP灌胃劑量的增加，小鼠體內(nèi)的SOD活力也逐漸升高，這表明JMKP能夠提高小鼠體內(nèi)的SOD活力，對于抗衰老具有潛在的功效。

GSH-Px是體內(nèi)廣泛存在的一種過氧化物分解酶，它特異地催化還原型谷胱甘肽（glutathione，GSH）對氫過氧化物的還原反應(yīng)。一般認(rèn)為GSH-Px在細(xì)胞內(nèi)可清除有害的過氧化物代謝產(chǎn)物，阻斷脂質(zhì)過氧化物連鎖反應(yīng)，從而起到保護細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能完整的作用。由表1可知，在灌胃JMKP 2 周和4 周后，與對照組相比，PrM組小鼠體內(nèi)的GSH-Px活力顯著增加（P＜0.05），而PrH組小鼠體內(nèi)的GSH-Px活力極顯著增加（P＜0.01），這說明在2 周時，隨著JMKP灌胃劑量的增大，小鼠體內(nèi)的GSH-Px活力增加不顯著；而在灌胃高劑量JMKP的條件下，隨著灌胃時間的延長，GSH-Px活力明顯增強。

羥自由基（·OH）是化學(xué)性質(zhì)活潑的活性氧，它幾乎與細(xì)胞內(nèi)的每一類有機物如糖、氨基酸、磷脂、核苷酸和有機酸都能反應(yīng)，并且有非常高的速率常數(shù)，因此它的破壞性極強。但·OH可以被CAT分解，保護機體細(xì)胞穩(wěn)定的內(nèi)環(huán)境及正常狀態(tài)，因此測定CAT活力的高低有重要意義［25］。由表1可知，PrL、PrM組小鼠體內(nèi)CAT活性與對照組均無顯著差異；在灌胃JMKP 2 周后，PrH組小鼠血清中的CAT活力與對照組相比顯著升高（P＜0.05），而到4 周時則達(dá)到極顯著水平（P＜0.01），這說明JMKP可以提高小鼠體內(nèi)的CAT活力，但只有在長時間灌胃高劑量JMKP的情況下效果明顯。

3 結(jié) 論

本研究初步證實了JMKP能使小鼠負(fù)重游泳時間明顯延長，并且隨著灌胃劑量的增加和時間的延長，小鼠負(fù)重游泳時間增加較為明顯。JMKP能夠降低小鼠體內(nèi)肝糖原的消耗和MDA的生成，同時，JMKP還能夠提高小鼠體內(nèi)GSH-Px、CAT和SOD的活力，特別是在灌胃高劑量的JMKP 4 周后，小鼠體內(nèi)以上3 種抗氧化酶的活力與對照組相比均極顯著升高（P＜0.01）。本實驗結(jié)果表明，JMKP能夠起到緩解小鼠體力疲勞和提高機體抗氧化能力的作用，這為研發(fā)緩解疲勞的新型食品提供了一定理論基礎(chǔ)，為進一步開發(fā)核桃楸提供了參考依據(jù)。

［1］ 張麗鵬， 楊雨春， 趙珊珊， 等. 環(huán)境因子對長白山區(qū)天然核桃楸林生長的影響［J］. 中國農(nóng)學(xué)通報， 2014， 30（4）： 34-41.

［2］ 李敏， 劉媛， 孫翠， 等. 核桃營養(yǎng)價值研究進展［J］. 中國糧油學(xué)報，2009， 24（6）： 166-170.

［3］ 王曉飛， 閔偉紅， 朱運明， 等. 長白山核桃球蛋白的提取， 分離純化及其功能性質(zhì)研究［J］. 現(xiàn)代食品科技， 2015， 31（4）： 234-241. DOI：10.13982/j.mfst.1673-9078.2015.4.038.

［4］ 孫琳琳. 長白山核桃楸種仁蛋白功能性質(zhì)及其酶解產(chǎn)物的抗氧化活性研究［D］. 長春： 吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)， 2014： 17.

［5］ 劉艷萍， 翟光喜， 臧恒昌. 核桃楸化學(xué)成分及藥理活性研究進展［J］. 齊魯藥事， 2010， 29（1）： 33-38. DOI：10.3969/ j.issn.1672-7738.2010.01.018.

［6］ SZE-TAO K W C， SATHE S K. Walnuts （Juglans regia L.）： proximate composition， protein solubility， protein amino acid composition and protein in vitro digestibility［J］. Journal of the Science of Food and Agriculture， 2000， 80（9）： 1393-1401. DOI：10.1002/1097-0010（200007）80：9<1393：：AID-JSFA653>3.0.CO；2-F.

［7］ QI B， LIU L， ZHANG H， et al. Anti-fatigue effects of proteins isolated from Panax quinquefolium［J］. Journal of Ethnopharmacology， 2014，153（2）： 430-434. DOI：10.1016/j.jep.2014.02.045.

［8］ 中國食品藥品檢定研究院. 中國食品藥品檢定研究院實驗動物福利倫理審查指導(dǎo)原則（試行）［EB/OL］. （2011-05-24） ［2015-05-08］. http：//www.nicpbp.org.cn/directory/web/WS07/CL0238/2741.html.

［9］ ZHANG T， JIANG B， MU W， et al. Emulsifying properties of chickpea protein isolates： influence of pH and NaCl［J］. Food Hydrocolloids，2009， 23（1）： 146-152. DOI：10.1016/j.foodhyd.2007.12.005.

［10］ LIU Y， ZHAO G， REN J， et al. Effect of denaturation during extraction on the conformational and functional properties of peanut protein isolate［J］. Innovative Food Science & Emerging Technologies， 2011，12（3）： 375-380. DOI：10.1016/j.ifset.2011.01.012.

［11］ 中華人民共和國衛(wèi)生部. GB 5009.5—2010 食品中蛋白質(zhì)的測定［M］.北京： 中國標(biāo)準(zhǔn)出版社， 2010.

［12］ KASRAN M， CUI S W， GOFF H D. Emulsifying properties of soy whey protein isolate-fenugreek gum conjugates in oil-in-water emulsion model system［J］. Food Hydrocolloids， 2013， 30（2）： 691-697. DOI：10.1016/j.foodhyd.2012.09.002.

［13］ TAN S H， MAILER R J， BLANCHARD C L， et al. Extraction and characterization of protein fractions from Australian canola meals［J］. Food Research International， 2011， 44（4）： 1075-1082. DOI：10.1016/ j.foodres.2011.03.023.

［14］ UTHAYATHAS S， KARUPPAGOUNDER S S， TAMER S I， et al. Evaluation of neuroprotective and anti-fatigue effects of sildenafil［J］. Life Sciences， 2007， 81（12）： 988-992. DOI：10.1016/j.lfs.2007.07.018.

［15］ TANG W， ZHANG Y， GAO J， et al. The anti-fatigue effect of 20（R）-ginsenoside Rg3 in mice by intranasally administration［J］. Biological and Pharmaceutical Bulletin， 2008， 31（11）： 2024-2027. DOI：10.1248/ bpb.31.2024.

［16］ DING J F， LI Y Y， XU J J， et al. Study on effect of jellyfish collagen hydrolysate on anti-fatigue and anti-oxidation［J］. Food Hydrocolloids，2011， 25（5）： 1350-1353. DOI：10.1016/j.foodhyd.2010.12.013.

［17］ YOU L， ZHAO M， REGENSTEIN J M， et al. In vitro antioxidant activity and in vivo anti-fatigue effect of loach （Misgurnus anguillicaudatus） peptides prepared by papain digestion［J］. Food Chemistry， 2011， 124（1）： 188-194. DOI：10.1016/ j.foodchem.2010.06.007.

［18］ WANG L， ZHANG H L， LU R， et al. The decapeptide CMS001 enhances swimming endurance in mice［J］. Peptides， 2008， 29（7）：1176-1182. DOI：10.1016/j.peptides.2008.03.004.

［19］ JUNG K， KIM I H， HAN D. Effect of medicinal plant extracts on forced swimming capacity in mice［J］. Journal of Ethnopharmacology，2004， 93（1）： 75-81. DOI：10.1016/j.jep.2004.03.022.

［20］ 樊永波， 陶興無， 馬琳， 等. 核桃餅粕對大鼠學(xué)習(xí)， 記憶和抗氧化功能的影響［J］. 食品科學(xué)， 2013， 34（17）： 323-326. DOI：10.7506/ spkx1002-6630-201317068.

［21］ 李永超. 肉蓯蓉有效部位抗疲勞作用機制研究［D］. 北京： 北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院， 2007： 14-16.

［22］ S?ZMEN E Y， S?ZMEN B， GIRGIN F K， et al. Antioxidant enzymes and paraoxonase show a co-activity in preserving low-density lipoprotein from oxidation［J］. Clinical and Experimental Medicine，2001， 1（4）： 195-199. DOI：10.1007/s102380100003.

［23］ 馬振華， 楊紅強， 楊瓊. 超氧化物歧化酶（SOD）的功能及應(yīng)用［J］. 新學(xué)術(shù)， 2008（4）： 316-319.

［24］ 田景花， 王紅霞， 張志華， 等. 低溫逆境對不同核桃品種抗氧化系統(tǒng)及超微結(jié)構(gòu)的影響［J］. 應(yīng)用生態(tài)學(xué)報， 2015， 26（5）： 1320-1326.

［25］ 劉靈芝， 鐘廣蓉， 熊蓮， 等. 過氧化氫酶的研究與應(yīng)用新進展［J］. 化學(xué)與生物工程， 2009， 26（3）： 15-18. DOI：10.3969/ j.issn.1672-5425.2009.03.004.

Effect of Juglans mandshurica Maxim Kernel Protein Isolate on Alleviating Physical Fatigue in Mice

CUI Lingyu， MIN Weihong*， LIU Wei， MAO Jing， MIAO Xinyu， LIU Jingsheng
（National Engineering Laboratory on Wheat and Corn Further Processing， College of Food Science and Engineering，Jilin Agricultural University， Changchun 130118， China）

To explore the anti-fatigue effect of Juglans mandshurica Maxim kernel protein isolate （JMKP）， weight-loaded swimming test of mice was carried out and exhaustive swimming time as an indicator of fatigue， blood lactate （BLA）content， hepatic glycogen （HG） content， malondialdehyde （MDA） content， and the activities of glutathione peroxidase（GSH-Px）， catalase （CAT） and superoxide dismutase （SOD） were determined. The results showed the exhaustive swimming time of mice gavaged for 2 weeks with JMKP at high dose increased by 38.66% compared with controls， and 4-week administration at low， medium and high doses resulted in a 24.10%， 42.17% and 64.46% compared with controls，respectively. The BLA content of mice in the high-dose JMKP group administered for 2 weeks decreased by 21.44%， and that of mice from the medium-dose and high-dose JMKP groups administered for 4 weeks decrease by 13.02% and 23.48%，respectively， compared with controls. The GLU content of mice from the medium-dose and high-dose JMKP groups administered for 2 and 4 weeks increased by 15.41%-16.29% and 18.35%-20.81%， respectively compared with controls. High-dose administration of JMKP for 2 and 4 weeks led to a 20.41% and 28.59% in serum MDA content， respectively. The levels of GSH-Px， CAT and SOD activity could be significantly improved by JMKP administration， especially for 4-week high-dose JMKP compared with controls （P < 0.01）. Therefore， JMKP could evidently alleviate physical fatigue in mice.

Juglans mandshurica Maxim； protein isolate； in vivo tests； fatigue relief； antioxidant activity

10.7506/spkx1002-6630-201609038

TS255.1

A

1002-6630（2016）09-0203-05

崔玲玉， 閔偉紅， 劉威， 等. 長白山核桃楸分離蛋白緩解小鼠體力疲勞的作用［J］. 食品科學(xué)， 2016， 37（9）： 203-207. DOI：10.7506/spkx1002-6630-201609038. http：//www.spkx.net.cn

CUI Lingyu， MIN Weihong， LIU Wei， et al. Effect of Juglans mandshurica Maxim kernel protein isolate on alleviating physical fatigue in mice［J］. Food Science， 2016， 37（9）： 203-207. （in Chinese with English abstract） DOI：10.7506/spkx1002-6630-201609038. http：//www.spkx.net.cn

2015-07-02

國家高技術(shù)研究發(fā)展計劃（863計劃）項目（2013AA102206）

崔玲玉（1990—），女，碩士研究生，主要從事發(fā)酵工程研究。E-mail：45451642@qq.com

*通信作者：閔偉紅（1971—），女，教授，博士，主要從事發(fā)酵工程、糧油科學(xué)與深加工技術(shù)研究。E-mail：minwh2000@163.com