張立娟，武佳蕾，孫樹榮

（航空總醫(yī)院檢驗(yàn)科，北京 100012）

北京市北苑地區(qū)女性HPV感染現(xiàn)狀及基因型分布研究

張立娟，武佳蕾，孫樹榮

（航空總醫(yī)院檢驗(yàn)科，北京 100012）

目的 調(diào)查我院轄區(qū)范圍內(nèi)即北京市北苑地區(qū)成年女性人乳頭狀瘤病毒（HPV）感染現(xiàn)狀及亞型分布情況。方法采用核酸分子快速導(dǎo)流雜交基因芯片分型技術(shù)對本院轄區(qū)范圍內(nèi)（北苑地區(qū)）來我院婦科門診就診的14582例女性患者采集宮頸脫落細(xì)胞標(biāo)本進(jìn)行HPV及 21種亞型檢測。結(jié)果 ①HPV感染陽性檢出2419例，感染陽性率 16.59%（2419／14582），在HPV感染陽性人群中，以單一高危型HPV感染為主，單一感染HPV陽性 1951例，占HPV陽性感染人群80.65%（1951／2419）；多重感染以二重感染為主，多重感染HPV陽性468例，二重感染 HPV陽性 361例，占 HPV陽性感染人群14.92%（361／2419），以高危型感染以為主。②各HPV基因亞型檢出總和為 3035項(xiàng) 次，高危型HPV感染占91.73%（2784／3035），排在前五位由高到低依次是 HPV16（17.36%，527／3035）、HPV52（11.89%，361／3035）、HPV58（11.80%，358／3035）、HPV53（8.27%，251／3035）、CP8304（7.05%，214／3035），以HPV16型 為主；低危型HPV感染占8.27%（251／3035），由高到低依次是HPV11（3.95%，120／3035）、HPV6（3.57%，108／3035）、HPV44（0.43%，13／3035）、HPV42（0.16%，5／3035）、HPV43（0.16%，5／3035），以HPV11為主。③按年齡段劃分，≤20歲年齡組陽性率最高，陽性率31.30%（36／115）；其次是≥61歲年齡組，陽性率21.05%（64／304）。結(jié)論 本院轄區(qū)范圍內(nèi)（北苑地區(qū)）成年女性HPV感染陽性率16.59%（2419／14582），以單一高危型HPV感染為主，高危型 HPV16、HPV52、HPV58、HPV53、CP8304是本院轄區(qū)范圍內(nèi)成年女性HPV感染的主要亞型。

人乳頭狀瘤病毒（HPV）； 感染； 基因型

材料與方法

1 研究對象

選取2013年8月至 2014年8月間我院轄區(qū)范圍內(nèi)（北京市北苑地區(qū)）到我院婦科門診就診的女性患者14582例，年齡分布范圍18～82歲，取宮頸脫落上皮細(xì)胞檢測21種HPV基因型。

2 標(biāo)本采集

采用窺陰器或陰道擴(kuò)張器充分暴露子宮頸，將宮頸刷置于宮頸口，順時(shí)針旋轉(zhuǎn)宮頸刷 4～5圈，取出后沿刷柄折痕處折斷刷頭，將刷頭放入洗脫管中，貼上標(biāo)識(shí)，放入2～8℃冰箱內(nèi)待測。

3 試劑與儀器

人乳頭狀瘤病毒（HPV）分型檢測試劑盒（PCR＋膜雜交法）及細(xì)胞裂解液（分離法）由潮州凱普生物化學(xué)有限公司提供，儀器使用醫(yī)用核酸分子快速雜交儀。

4 方法

采用基因擴(kuò)增技術(shù)及導(dǎo)流雜交原理，通過反向點(diǎn)雜交檢測擴(kuò)增產(chǎn)物與包被有型特異性探針膜雜交結(jié)果，采用堿性磷酸酶系統(tǒng)定性檢測，從而對 21種HPV基因型（6、11、16、18、31、33、35、39、42、43、44、45、51、52、53、56、58、59、66、68和 CP8304）進(jìn)行分型檢測。

5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)采用SPSS 20.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，采用卡方檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α＝0.05。

人乳頭狀瘤病毒（HPV）是一種能引起人類皮膚黏膜病變的雙鏈DNA病毒，流行病學(xué)與基礎(chǔ)研究已經(jīng)證明，HPV是引起宮頸癌及其癌前病變的主要因素［1-2］，在宮頸癌患者中HPV DNA的檢出率為99.7%［3-4］。而且，HPV感染具有較強(qiáng)的地域性［5］，不同國家和地區(qū)HPV感染率及亞型分布具有較大的差異。因此，了解本轄區(qū)內(nèi)女性HPV感染現(xiàn)狀及亞型分布特征，對HPV感染分子流行病學(xué)的調(diào)查研究具有重要意義，為有效防治子宮頸癌提供科學(xué)依據(jù)。

結(jié) 果

1 HPV感染率及基因亞型檢測結(jié)果

在14582例患者中共檢出HPV陽性2419例，感染陽性率為16.59%（2419／14582）；各亞型檢出總和為3035項(xiàng)次，其中高危亞型共檢出 2784項(xiàng)次，占91.73%（2784／3035），以HPV16、52、58、53及CP8304為主；低危亞型共檢出251項(xiàng)次，占8.27%（251／3035），以HPV11、6為主。各亞型分布情況見表1。

表1 2419例HPV（＋）各亞型感染的分布情況（總項(xiàng)次3035）

2 不同年齡段HPV感染分布情況及構(gòu)成比

2419 例HPV感染者年齡分布見表2。以10歲為一組進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，≤20歲年齡組HPV感染陽性率最高，陽性率為31.30%（36／115），其次是≥61年齡組，陽性率為21.05%（64／304）。各年齡組均以單一高危型HPV亞型感染為主。HPV陽性感染者在感染人群中分布，以21～30歲年齡組為主，其次是31～40歲年齡組。

表2 不同年齡段HPV感染分布情況及構(gòu)成比

3 HPV基因型多重感染情況

HPV各亞型多重感染分布情況見表3。在2419例HPV感染者中以高危型單一感染為主，在多重感染者中，以高危型二重感染為主。

表3 HPV基因型多重感染情況（n＝2419例）

討 論

子宮頸癌是婦科最常見的惡性腫瘤之一，其病死率位居全球第二位，其發(fā)病率僅次于乳腺癌，高危型人乳頭狀瘤病毒（HPV）持續(xù)感染是宮頸癌及癌前病變發(fā)生發(fā)展的必要條件。目前，可檢測的人乳頭狀瘤病毒（HPV）基因型有100多種，HPV感染基因型和宮頸病變的級(jí)別存在一定的關(guān)系，根據(jù)病毒的致癌性的大小可分為兩大類：①低危型HPV，包括HPV6、11、42、43、44等，常引起生殖器濕疣，及低度宮頸鱗狀上皮內(nèi)瘤變（LSL）等良性病變；高危型HPV，包括HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、 56、58、59、66、68及CP8304等，與宮頸癌及高度宮頸鱗狀上皮內(nèi)瘤變（HSL）的發(fā)生有關(guān)［6］。由于不同國家和地區(qū)HPV感染率及亞型分布具有較大的差異，HPV感染具有較強(qiáng)的地域性［5］，因此，了解本地區(qū)HPV流行的主要亞型，有效監(jiān)測HPV感染的現(xiàn)狀及基因型的分布情況，可有針對性地對本地區(qū)HPV流行的主要亞型進(jìn)行預(yù)防接種，同時(shí)對高發(fā)人群給與積極有效的監(jiān)測與干預(yù)，可大大減少本地區(qū)成年女性患子宮頸癌的風(fēng)險(xiǎn)，這種有針對性的監(jiān)測和預(yù)防成為有效預(yù)防宮頸癌發(fā)生發(fā)展的有效手段。

本研究采用核酸分子快速導(dǎo)流雜交基因芯片分型技術(shù)對我院婦科門診14582例患者進(jìn)行HPV基因亞型檢測，HPV感染2419例，總陽性率16.59%，這與何桂榮［7］等報(bào)道深圳地區(qū)的陽性率 17.5%接近，即使同在北京地區(qū)，由于我院所處的地理位置以外來流動(dòng)人口為主，而且所篩選的人群是普通門診患者，HPV感染陽性率與楊英捷［8］等報(bào)道高危人群的57.1%也有較大差別，這也充分體現(xiàn)了HPV感染對宮頸病變的高致病性。本研究結(jié)果顯示，在HPV感染陽性人群中，高危型HPV感染排在前5位的依次是HPV16（17.36%，527／3035）、HPV52（11.89%，361／3035）、HPV58（11.80%，358／3035）、HPV53（8.27%，251／3035）、CP8304（7.05%，214／3035），以HPV16型為主，HPV16在總體及各年齡組均占首位，這與世界范圍的研究結(jié)果一致［9］，HPV52、58僅次于HPV16，符合亞洲人群研究結(jié)果［10-12］；低危型HPV感染占 8.27%（251／3035），由高到低依次是HPV11（3.95%，120／3035）、HPV6（3.56%，108／3035）、HPV44（0.43%，13／3035）、HPV42（0.16%，5／3035）、HPV43（0.16%，5／3035），以HPV11為主。在所檢出的HPV各亞型陽性總體項(xiàng)次中，高危型HPV共檢出 2784項(xiàng)次，占總體亞型陽性項(xiàng)次的91.73%（2784／3035），這表明高危型HPV是本地區(qū)人乳頭狀瘤病毒感染的主要亞型，在治療中應(yīng)給與足夠的重視。由于HPV感染亞型分布具有較強(qiáng)的地域性，本研究中HPV亞型與其他地區(qū)報(bào)道的亞型不盡相同，Chan［13］等報(bào)道香港地區(qū)高危型HPV居前五位的是：HPV16、58、CP8304、33、18；靳瓊［14］等報(bào)道西藏地區(qū)HPV感染前五位的是HPV16、33、58、52、31；研究結(jié)果表明，盡管HPV16亞型在各個(gè)地區(qū)占主要地位，但其他亞型存在明顯的地域性，因此，明確一個(gè)地區(qū)HPV流行的主要亞型，對本地區(qū)宮頸癌及其他HPV相關(guān)性女性生殖道疾病的預(yù)防和治療具有重要意義。

單一高危型HPV感染是本地區(qū)成年女性患者HPV感染的主要類型，本研究中，單一亞型HPV感染1951例，HPV感染陽性率 13.38% （1951／14582），在HPV陽性感染人群中占80.65%（1951／2419），其中單一高危型感染 1840例，在感染人群中占76.06%（1840／2419）；多重感染468例，感染陽性率3.21%（468／14582），在HPV感染人群中占19.35%（468／2419），二重感染HPV陽性 361例，占HPV陽性感染人群14.92%（361／2419）；多重感染中以高危型二重感染為主。因此，在本地區(qū)HPV感染中應(yīng)加強(qiáng)單一高危亞型的治療、隨訪，而多重感染則以二重感染的監(jiān)控為主。

年齡是HPV感染和宮頸癌發(fā)生的相關(guān)因素，在本研究中，≤20歲年齡組 HPV感染陽性率最高，陽性率31.30%（36／115），與其他年齡組相比有顯著差異（P＜0.05），而其他年齡組間 HPV感染陽性率無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；在HPV陽性感染人群分布中，21～30歲年齡組HPV檢出率最高，占感染人群的39.85%（964／2419），其次是31-40歲年齡組，占感染人群的31.29%（757／2419），這與21～40歲人群的生理特性相關(guān)。雖然 30歲以前HPV感染多為一過性，一般在8-10個(gè)月清除，但隨著年齡的增長子宮頸癌的發(fā)病率明顯上升［15-16］，因此應(yīng)高度重視21～40歲人群中HPV感染者的處理，給與積極的干預(yù)，減少這部分人群發(fā)展為子宮頸癌的幾率。

隨著HPV基因分型檢測技術(shù)的普及，HPV作為一種常規(guī)篩查項(xiàng)目可以提高本地區(qū)高危型HPV感染的檢出率，通過我院婦科門診患者HPV感染分型及分布的研究，我院轄區(qū)范圍內(nèi)成年女性HPV感染以單一高危型為主，高危型 HPV在感染人群中排在前5位的依次是HPV16（17.36%）、HPV52（11.89%）、HPV58（11.80%）、HPV53（8.27%）、CP8304（7.05%），人群分布以 21～40歲人群為主，因此有針對性地對本地區(qū)HPV流行的主要亞型進(jìn)行預(yù)防接種，同時(shí)對21～40歲高發(fā)人群給與積極有效的監(jiān)測與干預(yù)，可大大減少本地區(qū)成年女性患子宮頸癌的風(fēng)險(xiǎn)。

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（李 凌編輯）

The Prevalence and Genotype Distribution of Human Papillomavirus Infection in Women in Beiyuan Area of Beijing

ZHANG Li-juan，WU Jia-lei，SUN Shu-rong
（Department of Clinical Laboratory，Aviation General Hospital，Beijing 100012，China）

Objective To survey the prevalence and genotype distribution of human papillomavirus HPV）infection in the women of Beijing Beiyuan area.Methods A total of 14582 outpatient women who accepted cervical cancer screening were selected and carried out 21 genotypes HPV detection by DNA flow-through hybridization genotyping technique.Results For 14582 cases of cervical cell specimens，the number of HPV positive specimens was 2419，and the total HPV infection rate was 16.59%.Among the HPV positive women，the most common type of HPV infection was single type and high-risk HPV.The number of single type HPV infection was 1951，with the infection rate 80.65%.The total multiple HPV infection was 468 and double type infection was the most common infection with the infection rate of 14.92%（361／2419）.In the genotypes detected by 3035，the high-risk genotype HPV was the most common infection with the infection rate of 91.73%（2784／3035），of which HPV16（17.36）was the most common type，followed by HPV52（11.89%），HPV58（11.80%），HPV53（8.27%），CP8304（7.05%）.The low-risk HPV infection rate was 8.27%（251／3035），of which HPV11（3.95%）was the most common type，followed by HPV6（3.57%），HPV44（0.43%），HPV42（0.16%）and HPV43（0.16%）.The objects were divided into six groups according to age，a peak of HPVprevalence detected among the women was less than 20 years.In this group，the infection rate was 31.30%（36／115 and was significantly higher than that in the other age groups.The second peak was in the older females aged more than 60 years，with the infection rate 21.05%（64／304）.The HPV infection rate of females in Beijing Beiyuan area was 16.59%.Conclusion The most common types of HPV infection in Beijing Beiyuan area were high-risk and single type HPV infection，and the leading high-risk HPV genotypes were HPV16，HPV52，HPV58，HPV53 and CP8304.

Human papillomavirus； Infection； Genotype

10.11748／bjmy.issn.1006－1703.2016.01.005

2015-09-25；

2015-10-14

張立娟，女，碩士研究生，副主任檢驗(yàn)師，從事免疫學(xué)檢驗(yàn)工作近20年。Tel：13521838358；E-mail：immunitylab361＠163.com

孫樹榮。E-mail：immunitylab361＠163.com