劉榮，劉長(zhǎng)明，崔樂樂，周正，韋曉丹

（河北省唐山工人醫(yī)院眼科，河北 唐山 063000）

論著

玻璃酸鈉和Omega-3必需脂肪酸混合滴眼液對(duì)去勢(shì)雄兔干眼癥模型的療效觀察

劉榮，劉長(zhǎng)明，崔樂樂，周正，韋曉丹

（河北省唐山工人醫(yī)院眼科，河北 唐山 063000）

目的探討玻璃酸鈉和Omega-3必需脂肪酸（Omega-3 EFAs）混合滴眼液對(duì)去勢(shì)雄兔干眼癥治療的有效性。方法將15只新西蘭成年雄兔隨機(jī)分為正常對(duì)照組（A）、非治療組（B）、玻璃酸鈉治療組（C）、Omega-3 EFAs治療組（D）、玻璃酸鈉和Omega-3 EFAs聯(lián)合治療組（E），每組3只。對(duì)B、C、D、E組行去勢(shì)術(shù)復(fù)制動(dòng)物模型，造模成功后C、D、E組雄兔雙眼分別以玻璃酸鈉滴眼液、Omega-3 EFAs滴眼液、玻璃酸鈉及Omega-3 EFAs混合滴眼液治療，每日10次，連續(xù)1個(gè)月。全部實(shí)驗(yàn)兔行Schirmer 1試驗(yàn)，測(cè)定淚膜破裂時(shí)間，行角膜熒光素染色評(píng)分，Western blot檢測(cè)兔淚腺組織中的腫瘤壞死因子-α（TNF-α）表達(dá)。結(jié)果各組指標(biāo)經(jīng)LSD-t檢驗(yàn)顯示，藥物干預(yù)后玻璃酸和Omega-3 EFAs混合滴眼液組淚液分泌量、淚膜穩(wěn)定性高于其他實(shí)驗(yàn)組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；淚腺組織內(nèi)TNF-α的表達(dá)低于其他實(shí)驗(yàn)組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論局部應(yīng)用玻璃酸鈉和Omega-3 EFAs混合滴眼液治療去勢(shì)雄兔干眼癥可明顯改善雄兔眼表體征，降低淚腺組織TNF-α的表達(dá)。

干眼癥；玻璃酸鈉；Omega-3必需脂肪酸；腫瘤壞死因子-α

干眼癥（dry eye，DE）是一種常見的具有潛在危害的眼表疾病，包括多種眼表癥狀如眼表干燥、發(fā)紅、燒灼感、視力波動(dòng)，以及眼表病理學(xué)改變?nèi)缃悄ど掀さ娜睋p和淚腺細(xì)胞的鱗狀化生。研究顯示[1-2]，造成DE的重要機(jī)制是淚膜功能障礙導(dǎo)致的炎癥[3]。Omega-3必需脂肪酸（Omega-3 essential fatty acids，Omega-3 EFAs）是具有多種生物學(xué)功能的必需脂肪酸，研究證實(shí)其具有調(diào)節(jié)抗氧化酶的活性，阻斷炎癥因子的基因編碼的作用[4-5]，包括白介素-1α、白介素-6、干擾素-γ、腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor，TNF-α）等[6]。玻璃酸鈉滴眼液是臨床治療干眼癥的常用藥物，但是單獨(dú)使用并不能完全解決干眼癥癥狀。本實(shí)驗(yàn)用去勢(shì)雄兔復(fù)制干眼癥模型，探討玻璃酸鈉和Omega-3 EFAs混合滴眼液治療干眼癥的療效及對(duì)眼表炎癥因子表達(dá)的影響。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和藥物

健康1月齡新西蘭雄兔15只，體重（0.5±0.2）kg，由天津醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物中心提供。玻璃酸鈉滴眼液（德國(guó)URSAPHARTM Arzne），Omega-3 EFAs（美國(guó)Sigma Aldrich公司），淚液分泌測(cè)定濾紙、熒光素鈉染色劑（天津晶明新技術(shù)開發(fā)有限公司），山羊抗兔TNF-α抗體、β-actin、人抗山羊IgG（Santa Cruz），PIPA蛋白裂解液、Trizol試劑（碧云天生物技術(shù)研究所），抗體稀釋液、蛋白封閉液（北京博奧森公司），SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液（北京普利來基因技術(shù)有限公司），PVDF膜（北京索萊寶科技有限公司），蛋白質(zhì)Marker（Fermentas公司），甲醇、濃鹽酸等其他化學(xué)試劑均為國(guó)產(chǎn)。

1.2 動(dòng)物模型復(fù)制

將實(shí)驗(yàn)兔固定于兔架上，氯胺酮（0.05ml）50mg/kg肌內(nèi)注射全身麻醉，陰囊局部加用鹽酸利多卡因局部麻醉，將一側(cè)睪丸由腹腔擠入陰囊，用刀片作一陰囊切口，用力擠出睪丸，結(jié)扎精索靜脈及輸精管后，切除睪丸及附睪，另一側(cè)睪丸及附睪同法切除，術(shù)后預(yù)防感染。檢查均由同一人完成，每次檢查時(shí)間、地點(diǎn)、照明亮度、濕度及溫度相同，于實(shí)驗(yàn)前和實(shí)驗(yàn)后2、3、4周，2、3個(gè)月行SchirmerⅠ試驗(yàn)、BUT檢測(cè)及角膜熒光素染色。1.3實(shí)驗(yàn)分組及給藥方法

0.2%Omega-3 EFAs溶液配制：0.2%Omega-3 EFAs溶于三蒸水中；玻璃酸鈉和0.2%Omega-3 EFAs混合液配制：0.2%Omega-3 EFAs溶于玻璃酸鈉滴眼液中。將15只新西蘭成年雄兔隨機(jī)分為正常對(duì)照組（A）、非治療組（B）、玻璃酸鈉治療組（C）、0.2% Omega-3 EFAs治療組（D）、玻璃酸鈉和0.2% Omega-3 EFAs混合治療組（E），每組3只。對(duì)B、C、D、E組行去勢(shì)術(shù)復(fù)制動(dòng)物模型，術(shù)后3個(gè)月動(dòng)物模型成功復(fù)制后，C、D、E組雄兔雙眼分別以玻璃酸鈉滴眼液、0.2%Omega-3 EFAs滴眼液、玻璃酸鈉和0.2%Omega-3 EFAs混合滴眼液治療（混合后滴眼），每日自9～18點(diǎn)每小時(shí)滴雙眼1次，每次30μl，每日10次，連續(xù)1個(gè)月。

1.4 檢查方法

①SchirmerⅠ試驗(yàn)：用5 mm×35 mm淚液檢測(cè)濾紙條，一端彎折5 mm，置于下瞼外側(cè)1/3淚腺囊內(nèi)，余部分懸垂于皮膚表面。5 min后測(cè)量濾紙濕潤(rùn)長(zhǎng)度。②淚膜破裂時(shí)間（BUT）：熒光素鈉濾紙生理鹽水浸潤(rùn)后涂抹于模型兔下瞼淚腺囊內(nèi)，眼瞼閉合數(shù)次使熒光素均勻分布于角膜表面，于鈷藍(lán)光下觀察，從最后一次瞬目開始計(jì)時(shí)，記錄淚膜上出現(xiàn)第一個(gè)破裂點(diǎn)的時(shí)間。③角膜熒光素染色評(píng)分（FL）：熒光素染色后鈷藍(lán)光下觀察，采用0～12分制方法記錄染色結(jié)果，將角膜分為4個(gè)象限，0分：無染色（-）；1分：1～30個(gè)點(diǎn)狀著色；2分：＞30個(gè)點(diǎn)狀著色但染色未融合；3分：角膜點(diǎn)狀著色融合、絲狀物及潰瘍等。

1.5 Western blot檢測(cè)TNF-α的表達(dá)

1.5.1 組織總蛋白提取每組雄兔以空氣栓塞法處死后立即取適量淚腺組織（1～2 ml），反復(fù)用單去污劑裂解液（PMSF）400μl裂解制成組織勻漿（于冰上），將組織勻漿移至1.5 ml離心管中離心（12 000 r/min×5 min，4℃），取上清液置于-20℃冰箱冷凍保存。

1.5.2 Western blot步驟配制分離膠及濃縮膠，灌膠上樣，調(diào)整各組蛋白的含量約50μg，加入200μl EP管中，每管7μl的蛋白上樣緩沖液，調(diào)整體積為45μl，電泳（先恒壓80 V，待溴酚藍(lán)跑至分離膠后改為橫流35 mA，距離底部0.5 cm時(shí)，停止電泳），轉(zhuǎn)膜：PVDF膜浸泡于甲醇中60 min激活，轉(zhuǎn)膜條件橫流200 mA，60 min。取出PVDF膜放入TBST中漂洗（3×10 min），將膜浸入封閉液中，置于搖床上室溫封閉60 min。一抗孵育4℃過夜約12 h，室溫下繼續(xù)孵育2 h。TBST清洗3×7 min。二抗孵育：將膜放入稀釋好的二抗（1∶1 000）中置于搖床上室溫孵育3 h。TBST清洗3×7 min。按比例（1∶1）配好顯色液，將膜平鋪于玻璃板上，吸取適量顯色液滴加于膜上，反應(yīng)約1 min后，放入凝膠成像分析儀器中，曝光照相保存。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，采用方差分析，組間兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 造模成功

去勢(shì)模型兔術(shù)后3周，淚液分泌開始減少,淚膜穩(wěn)定性下降，3個(gè)月后，模型雄兔體重較對(duì)照組無明顯變化，角膜干燥，角膜表面染色，淚液分泌及淚膜穩(wěn)定性降低，并呈時(shí)間依賴性，與對(duì)照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。去勢(shì)后3個(gè)月雄兔作為去勢(shì)干眼癥模型用于實(shí)驗(yàn)。

2.2 實(shí)驗(yàn)檢測(cè)

2.2.1 SchirmerⅠ治療后，玻璃酸鈉和0.2% Omega-3 EFAs混合治療組（E）與玻璃酸鈉治療組（C）、0.2%Omega-3 EFAs治療組（D）以及非治療組（B）比較，經(jīng)LSD-t檢驗(yàn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t= 14.225、10.060和14.361，P=0.000）；玻璃酸鈉和0.2%Omega-3 EFAs混合治療組（E）與正常對(duì)照組（A）比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=0.624，P=0.567）。見附表。

附表各組治療前后眼表實(shí)驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果及淚腺組織內(nèi)TNF-α表達(dá)比較（n=3±s）

附表各組治療前后眼表實(shí)驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果及淚腺組織內(nèi)TNF-α表達(dá)比較（n=3±s）

注：1）與非治療組（B）比較，P＜0.05；2）與玻璃酸鈉治療組（C）比較，P＜0.05；3）與Omega-3 EFAs治療組（D）比較，P＜0.05；4）與同組治療前比較，P＜0.05；5）與玻璃酸鈉和Omega-3 EFAs混合治療組（E）比較，P＜0.05；6）與正常對(duì)照組（A）比較，P＜0.05

SchirmerⅠBUTFLTNF-α治療前治療前治療前治療后A組18.067±0.51317.467±1.1501）2）3）15.000±1.00015.000±1.7321）2）3）4）001）2）3）5）0.195±0.0101）2）B組3.700±0.7813.334±1.3052）3）5）6）5.000±1.0002.000±1.0002）3）4）5）6）7.333±1.5289.000±1.0002）3）5）6）0.461±0.0382）3）5）6）C組4.800±0.65615.367±0.6661）3）4）5）6）4.333±0.57711.667±2.5171）4）6）6.334±1.5281.667±0.5771）3）4）6）0.338±0.0191）3）5）6）D組4.633±0.55113.300±1.1141）2）4）5）6）4.333±0.88210.000±1.0001）4）5）6）6.667±0.5773.667±0.5771）2）4）5）6）0.212±0.0151）2）E組4.300±0.80018.067±1.2061）2）3）4）4.667±0.57713.334±1.5281）3）4）6.000±1.0001.333±0.5771）3）4）0.180±0.01131）2）F值252.0887.2794.841.94__3.64 P值0.0000.0000.0000.000__0.0442治療后治療后治療后

2.2.2 BUT經(jīng)LSD-t檢驗(yàn)，玻璃酸鈉治療組（C）、0.2%Omega-3 EFAs治療組（D）、玻璃酸鈉和0.2% Omega-3 EFAs混合治療組（E）經(jīng)藥物治療后淚膜穩(wěn)定性均有提高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=19.579、16.232和22.182，P=0.000）；玻璃酸鈉治療組（C）、0.2%Omega-3 EFAs治療組（D）、玻璃酸鈉和0.2% Omega-3 EFAs混合治療組（E）與非治療組（B）比較淚膜穩(wěn)定性差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=6.182、5.173和10.750，P=0.004、0.013和0.000），玻璃酸鈉和0.2% Omega-3 EFAs混合治療組（E）與正常對(duì)照組（A）、玻璃酸鈉治療組（C）比較淚膜穩(wěn)定性差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=1.249和0.981，P=0.280和0.382）。見附表。

2.2.3 FL經(jīng)LSD-t檢驗(yàn)，玻璃酸鈉治療組（C）、0.2%Omega-3 EFAs治療組（D）、玻璃酸鈉和0.2% Omega-3 EFAs混合治療組（E）藥物治療后角膜染色較治療前減少（t=4.949、2.828和7.002，P=0.008、0.047和0.002）。見附表。

2.2.4 TNF-α表達(dá)相應(yīng)藥物治療后，玻璃酸鈉治療組（C）、0.2%Omega-3 EFAs治療組（D）、玻璃酸鈉和0.2%Omega-3 EFAs混合治療組（E）與非治療組（B）TNF-α表達(dá)經(jīng)LSD-t檢驗(yàn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=5.014、10.557和12.277，P=0.007、0.000和0.000），0.2%Omega-3 EFAs治療組（D）及玻璃酸鈉和0.2%Omega-3 EFAs混合治療組（E）治療后TNF-α表達(dá)與正常對(duì)照組（A）相當(dāng)（t=1.633和0.229，P=0.178和0.830），玻璃酸鈉和0.2%Omega-3 EFAs混合治療組（E）與玻璃酸鈉治療組（C）TNF-α表達(dá)比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=12.379，P= 0.000）。見附表和附圖。

附圖檢測(cè)淚腺組織中TNF-α的表達(dá)

3 討論

炎癥是干眼癥發(fā)生、發(fā)展的重要因素，炎癥因子的產(chǎn)生不僅可刺激淋巴細(xì)胞增生對(duì)淚腺造成免疫攻擊，自身也會(huì)干擾淚腺的正常分泌。淚腺的腺泡細(xì)胞可以表現(xiàn)為一種抗原表達(dá)細(xì)胞，刺激淋巴細(xì)胞的增生，因此淚腺可能是最先具有免疫應(yīng)答的組織，并產(chǎn)生異常調(diào)節(jié)[7]。研究顯示在干眼癥患者淚腺組織中TNF-α的表達(dá)增高，而給予外生性TNF-α，會(huì)抑制神經(jīng)遞質(zhì)的釋放，減弱淚腺的分泌，因此減少炎癥因子的表達(dá)是干眼癥治療的重點(diǎn)[8]。

Omega-3 EFAs是一種天然的調(diào)節(jié)劑，除了可以調(diào)節(jié)抗氧化酶，如超氧化物歧化酶、過氧化氫酶及抑制促氧化酶的產(chǎn)生外，還可以通過向類花生四烯酸的轉(zhuǎn)化代謝過程中調(diào)節(jié)炎癥性和免疫應(yīng)答[7，9]。Omega-3 EFAs的代謝產(chǎn)物包括α亞麻酸及它的去飽和產(chǎn)物二十碳五烯酸（eicosapentaenoic acid，EPA）和二十六碳六烯酸（docosahexaenoic acid，DHA）[6]。EPA是抗炎因子的前體，可抑制IL-α、β和TNF-α的生成。DHA是具有神經(jīng)保護(hù)作用的D1的前體，可以保護(hù)淚腺組織和眼表細(xì)胞免于由TNF-α介導(dǎo)的凋亡[10]。實(shí)驗(yàn)證實(shí)[6，9]單獨(dú)使用Omega-3 EFAs可在細(xì)胞和分子水平減少炎癥因子如CD11b+、IL-1α和TNF-α的表達(dá)。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)單獨(dú)使用Omega-3 EFAs組及玻璃酸鈉和Omega-3 EFAs混合組均減少淚腺組織內(nèi)TNF-α的蛋白表達(dá)，兩組間TNF-α的表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說明Omega-3 EFAs可能有抑制眼表炎癥的作用。

玻璃酸鈉滴眼液廣泛應(yīng)用于干眼癥的臨床治療中，玻璃酸鈉具有非牛頓液體的特性和極好的生物相容性，其溶液具有高度的黏彈性，分子鏈越長(zhǎng)，黏彈性越好，黏度隨切變的增大而明顯減小，即使藥液的黏度很高，眼瞼仍然可眨眼自如沒有黏糊感。同時(shí)玻璃酸鈉除潤(rùn)滑眼表面，改善眼表刺激癥狀外還可改善干眼癥患者角膜表面規(guī)律從而改善其視功能并減輕畏光現(xiàn)象[11-12]，但單獨(dú)使用玻璃酸鈉滴眼液并不能完全解決干眼癥患者的所有癥狀。本實(shí)驗(yàn)證實(shí)，單獨(dú)使用玻璃酸鈉治療可有效地改善淚膜質(zhì)量，減少角膜染色并可局部控制炎癥，玻璃酸鈉治療組及玻璃酸鈉和Omega-3 EFAs混合組在BUT和FL檢測(cè)中差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。應(yīng)用玻璃酸鈉和Omega-3 EFAs混合滴眼液后有效改善干眼癥雄兔臨床癥狀并減少炎癥因子的表達(dá)，角膜熒光素染色評(píng)分、淚腺組織內(nèi)TNF-α均明顯低于其他實(shí)驗(yàn)組，通過Western blot檢測(cè)證實(shí)玻璃酸鈉和Omega-3 EFAs混合制劑可明顯降低炎癥因子TNF-α的表達(dá)。

綜上所述，玻璃酸鈉和Omega-3 EFAs混合滴眼液可改善干眼癥雄兔的角膜失代償，減少炎癥因子的產(chǎn)生。綜合玻璃酸鈉對(duì)角膜的保護(hù)作用和Omega-3 EFAs的抗炎作用，玻璃酸鈉和Omega-3 EFAs混合滴眼液以協(xié)同的方式改善干眼癥的癥狀和體征。實(shí)驗(yàn)證實(shí)，使用玻璃酸鈉和Omega-3 EFAs混合滴眼液的臨床治療效果更好。

[1]STERN M E,PFLUGFELDER S C.Inflammation in dry eye[J]. Ocul Surf,2004,2(2):124-130.

[2]YOON K C,PARK C S,YOU I C,et al.Expression of CXCL9, -10,-11,and CXCR3 in the tear film and ocular surface of patients with dry eye syndrome[J].Invest Ophthalmol Vis Sci, 2010,51(2):643-650.

[3]CALONGE M,ENRIQUEZ-DE-SALAMANCA A,DIEBOLD Y, et al.Dry eye disease as an inflammatory disorder[J].Ocul Immunol Inflamm,2010,18(4):244-253.

[4]DE ASSIS A M,RECH A,LONGONI A,et al.Omega3-Polyun saturated fatty acids prevent lipoperoxidation,modulate antioxidant enzymes,and reduce lipid content but do not alter glycogen metabolism in the livers of diabetic rats fed on a high fat thermolyzed die t[J].Mol Cell Biochem,2012,361(1/2):151-160.

[5]TAKAHASHI M,TSUBOYAMA-KASAOKA N,NAKATANI T,et al.Fish oil feeding alters liver gene expressions to defend against PPARalpha activation and ROS production[J].Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol,2002,282(2):G338-348.

[6]RASHID S,JIN Y,ECOIFFIER T,et al.Topical omega-3 and omega-6 fatty acids for treatment of dry eye[J].Arch Ophthalmol, 2008,126(2):219-225.

[7]ROSENBERG E S,ASBELL P A.Essential fatty acids in the treatment of dry eye[J].Ocul Surf,2010,8(1):18-28.

[8]OH H J,LI Z,PARK S H,et al.Effect of hypotonic 0.18% sodium hyaluronate eyedrops on inflammation of the ocular surface in experimental dry eye[J].J Ocul Pharmacol Ther,2014, 32(11):4424-4428.

[9]PINAZO-DURAN M D,GALBIS-ESTRADA C,PONS-VAZQUEZ S,et al.Effects of a nutraceutical formulation based on the combination of antioxidants and omega-3 essential fatty acids in the expression of inflammation and immune response mediators in tears from patients with dry eye disorders[J].Clin Interv Aging,2013,8:139-148.

[10]ARAGONA P,BUCOLO C,SPINELLA R,et al.Systemic omega-6 essential fatty acid treatment and pge1 tear content in Sjogren's syndrome patients[J].Invest Ophthalmol Vis Sci,2005, 46(12):4474-4479.

[11]LEKHANONT K,CHUCKPAIWONG V,VONGTHONGSRI A, et al.Effects of sodium hyaluronate on wavefront aberrations in dry eye patients[J].Optom Vis Sci,2014,91(1):39-46.

[12]HASEGAWA T,AMAKO H,YAMAMOTO T,et al.Cornealprotectiveeffectsofanartificialtearcontainingsodium hyaluronate and castor oil on a porcine short-term dry eye model[J].J Vet Med Sci,2014,76(3):49-56.

（申海菊編輯）

Effects of mixed eye drops of omega-3 essential fatty acids and sodium hyaluronate on ocular surface of dry eye model of castrated male rabbits

Rong Liu,Chang-ming Liu,Le-le Cui,Zheng Zhou,Xiao-dan Wei
(Department of Ophtalmology,Tangshan Gongren Hospital,Tangshan,Hebei 063000,China)

Objective To investigate the efficacy of the topical application of omega-3 essential fatty acids (EFAs)and sodium hyaluronate mixture in a rabbit model of experimental dry eye(EDE).Methods Fifteen healthy New Zealand rabbits were randomly divided into 5 groups with 3 rabbits in each group,i.e.normal group(A),non-treatment group(B),sodium hyaluronate therapy group(C),omega-3 EFAs therapy group(D), and mixed sodium hyaluronate and omega-3 EFAs therapy group(E).The rabbits in the groups B,C,D and E had bilateral testis and epididym resected.After successful building of xerophthalmia model,the groups C, D and E were treated with sodium hyaluronate,omega 3 EFAs and combined sodium hyaluronate and omega 3 EFAs in two eyes,10 times a day for a month.All the experimental rabbits received SchirmerⅠtest,the breakup time of tear film and corneal fluorescein staining scores were determined.Tumor necrosis factor α (TNF-α)in lacrimal tissue was detected by Western blot.Results LSD-ttest showed the rabbits in the group E showed a significant improvement in lacrimal secretion and tear film stability compared with other groups, the differences were statistically significant(P＜0.05).A significant decrease in the TNF-α level was observed in the group E,the differences were statistically significant from other groups(P＜0.05).Conclusions Topical application of mixed eye drops containing sodium hyaluronate and omega 3 EFAs could improve the ocularsurface signs and decrease the expression of TNF-α in lacrimal gland of xerophthalmia model of castrated male rabbits.

dry eye;sodium hyaluronate;omega-3 essential fatty acids;TNF-α

R777.2

A

10.3969/j.issn.1005-8982.2016.23.004

1005-8982（2016）23-0016-05

2016-03-17