李紅林，劉小寧，郭愛(ài)霞，時(shí)峰俊

（南京醫(yī)科大學(xué)附屬淮安第一醫(yī)院1.檢驗(yàn)科，2.中心實(shí)驗(yàn)室，3.婦產(chǎn)科，4.感管科，江蘇 淮安 223300）

淮安地區(qū)6 228例女性感染人乳頭瘤病毒的基因型分布

李紅林1，劉小寧2，郭愛(ài)霞3，時(shí)峰俊4

（南京醫(yī)科大學(xué)附屬淮安第一醫(yī)院1.檢驗(yàn)科，2.中心實(shí)驗(yàn)室，3.婦產(chǎn)科，4.感管科，江蘇 淮安 223300）

目的探討淮安地區(qū)女性感染人乳頭瘤病毒（HPV）及其基因亞型分布情況，為HPV感染防治和流

人乳頭瘤病毒；基因分型；宮頸癌；多重感染

人乳頭瘤病毒（human papillomavirus，HPV）是一類(lèi)嗜上皮性小雙鏈環(huán)狀DNA病毒的總稱(chēng)，人類(lèi)的黏膜鱗狀上皮細(xì)胞是其天然宿主。主要通過(guò)性行為、母嬰垂直、直接皮膚接觸等方式傳播。目前發(fā)現(xiàn)的HPV亞型有200多種，其中大約40多種能引起人的生殖道感染，是尖銳濕疣、宮頸上皮內(nèi)瘤樣病變及宮頸癌的主要發(fā)病原因[1]。流行病學(xué)研究顯示，不同地區(qū)、種族的人群之間HPV亞型分布具有顯著的差異[2]?；窗驳貐^(qū)位于江蘇省北部，橫貫秦玲-淮河一帶，是我國(guó)地理文化的南北分界線(xiàn)，具有獨(dú)特的人文地理環(huán)境和居民生活方式[3]。但目前關(guān)于淮安地區(qū)女性HPV基因型感染的相關(guān)研究卻鮮有報(bào)道。本研究應(yīng)用核酸分子快速雜交基因分型技術(shù)對(duì)淮安地區(qū)女性患者進(jìn)行HPV基因型檢測(cè)，以便為該地區(qū)HPV感染的防治提供實(shí)驗(yàn)室依據(jù)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象

選取2013年11月-2015年10月在淮安市第一人民醫(yī)院就診且臨床資料完整的6 228例女性患者作為研究對(duì)象。年齡16～84歲，平均（38.9±9.5）歲，其中≤25歲患者577例，26～35歲患者1 663例，36～45歲患者2 473例，46～55歲患者1 290例，≥56歲患者225例。在征得患者同意并承諾保護(hù)患者隱私的情況下，由婦產(chǎn)科醫(yī)師專(zhuān)人采集宮頸分泌物，并置于專(zhuān)用的細(xì)胞保存液4℃中保存，1周內(nèi)檢測(cè)。標(biāo)本采集前3 d內(nèi)患者沒(méi)有陰道內(nèi)用藥或?qū)﹃幍肋M(jìn)行沖洗；24 h內(nèi)無(wú)性行為，且標(biāo)本采集時(shí)患者不處于月經(jīng)期。排除復(fù)查患者的檢測(cè)結(jié)果。

1.2 HPV檢測(cè)

采用凱普醫(yī)用核酸分子雜交技術(shù)及其配套試劑檢測(cè)21種常見(jiàn)HPV基因型，其中高危型15種：16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66和68；低危型6種：6、11、42、43、44和CP8304（81）。經(jīng)DNA分離提取，聚合酶鏈反應(yīng)擴(kuò)增，導(dǎo)流雜交等檢測(cè)步驟后顯色判定結(jié)果。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料以率或百分比表示，用χ2檢驗(yàn)，多組間的兩兩比較時(shí)用Bonferroni法校正檢驗(yàn)水準(zhǔn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，

2 結(jié)果

2.1 不同年齡段HPV陽(yáng)性檢出率比較

HPV總陽(yáng)性檢出率為37.73%（2 350/6 228），其中單純低危亞型感染率為4.88%（304/6 228），單純高危亞型感染率為27.76%（1 729/6 228），混合型感染率為5.09%（317/6 228）?！?5歲、26～35歲、36～45歲、46～55歲、≥56歲年齡段女性HPV陽(yáng)性檢出率分別為41.07%（237/577）、35.38%（588/1 663）、37.73%（933/2 473）、37.91%（489/1 290）、45.78%（103/225），經(jīng)χ2檢驗(yàn)，不同年齡段的陽(yáng)性檢出率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=12.950，P=0.012）；且≥56歲年齡段與26～35歲年齡段比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2= 9.273，P=0.002），≥56歲年齡段感染率高于26～35歲年齡段?！?5歲及≥56歲年齡段感染率略高，而26～35歲、36～45歲、46～55歲等3個(gè)年齡段的感染率偏低；HPV陽(yáng)性檢出率與年齡段呈近似U形分布。見(jiàn)附圖。

附圖不同年齡段HPV感染率曲線(xiàn)

2.2HPV陽(yáng)性的基因亞型重?cái)?shù)構(gòu)成比

將檢出1種HPV基因亞型作為單重感染、檢出2種HPV基因亞型作為二重感染、檢出3種HPV基因亞型作為三重感染，以此類(lèi)推，分別統(tǒng)計(jì)HPV陽(yáng)性的基因亞型重?cái)?shù)構(gòu)成比。2 350例HPV陽(yáng)性標(biāo)本中，單重、雙重、三重、四重、五重及以上感染構(gòu)成比分別為66.03%（1 555例）、22.76%（536例）、7.09%（167例）、2.93%（69例）、1.19%（23例）。各年齡段均以單重感染為主，其中≤25歲年齡段的五重及以上感染構(gòu)成比最高（2.14%），但與其他年齡段比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；36～45歲年齡段的單重感染構(gòu)成比最高（68.38%），≥56歲年齡段的單重感染構(gòu)成比（51.46%）低于其他年齡段（χ2=14.242，P= 0.006）；≥56歲年齡段的二重（31.07%）感染構(gòu)成比高于其他年齡段（χ2=11.634，P=0.020），三重（9.71%）和四重（5.84%）感染構(gòu)成比與其他年齡段比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見(jiàn)表1。

表1 不同年齡段HPV基因亞型陽(yáng)性重?cái)?shù)構(gòu)成比例（%）

2.3HPV陽(yáng)性的基因亞型種類(lèi)分布

HPV陽(yáng)性標(biāo)本中，高危型HPV陽(yáng)性數(shù)為2861例（81.12%）；前5位分別為HPV16（15.23%）、HPV52（11.79%）、HPV58（9.58%）、HPV53（7.00%）和HPV33（6.95%）；低危型陽(yáng)性數(shù)為666例（18.88%），前3位為CP8304（HPV81）（7.14%）、HPV11（5.30%）和HPV6（4.31%）。見(jiàn)表2。

表2 HPV陽(yáng)性的基因型分布

3 討論

HPV感染能引起生殖道黏膜上皮發(fā)生增生性損傷，現(xiàn)已成為最常見(jiàn)的性傳播疾病之一。＞70%女性一生中至少感染1次HPV，但其中大多數(shù)是一過(guò)性的，一般會(huì)在2年內(nèi)為機(jī)體自身免疫系統(tǒng)清除；若2年內(nèi)沒(méi)有被清除，則稱(chēng)為HPV的持續(xù)感染[4]。根據(jù)HPV對(duì)宮頸致癌的危險(xiǎn)程度，可將HPV基因型分為高危型和低危型。低危型主要引起生殖道尖銳濕疣；高危型則通過(guò)產(chǎn)生E6和E7癌蛋白，結(jié)合宿主細(xì)胞中的抑癌基因p53和Rb，誘導(dǎo)細(xì)胞周期調(diào)控失常，引發(fā)宮頸癌變[5]。高危型HPV的持續(xù)感染是宮頸癌變的主要因素。因此，HPV分型檢測(cè)已成為目前早期篩查宮頸癌、判斷疾病類(lèi)型和選擇診治方案的重要手段之一[6]。

本研究結(jié)果顯示，①淮安地區(qū)女性的HPV感染率為37.73%；高于文獻(xiàn)報(bào)道的青島地區(qū)（32.2%）[7]、成都地區(qū)24.83%[8]、廣東地區(qū)（7.3%）[9]，以及海南少數(shù)民族地區(qū)（25.96%）[10]；但低于湖南地區(qū)（44.45%）[11]和遼寧地區(qū)（45.6%）[12]，這可能與不同研究所選擇的目標(biāo)人群和研究方法不同有關(guān)；但也進(jìn)一步證明HPV的分布存在地域差異性。②淮安地區(qū)女性的HPV感染以基因型單重感染為主，但多重基因型感染也存在較大的比例，并且單純高危亞型HPV感染率（27.76%）高于全國(guó)37個(gè)城市的綜合平均水平（21.07%）[2]，提示淮安地區(qū)女性宮頸癌的潛在發(fā)生率較高，應(yīng)引起當(dāng)?shù)丶部夭块T(mén)和居民的重視，盡早采取預(yù)防措施。③淮安地區(qū)不同年齡段女性HPV感染率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。在≤25歲和≥56歲年齡段感染率較高，分別為41.07%和45.78%；而在26～35歲、36～45歲和46～55歲等3個(gè)年齡段的感染率略低，分別為35.38%、37.73%和37.91%；HPV感染率與年齡段呈近似U形分布，與廣東地區(qū)報(bào)道的結(jié)果相似[9]。這可能是因?yàn)椤?5歲年輕女性性生活較為活躍，易于發(fā)生HPV感染；而≥56歲女性HPV感染率顯著高于26～35歲年齡段，則可能是由于≥56歲女性雌激素水平和機(jī)體免疫力均較為低下，易于感染HPV；另外本研究所選擇的老年人群多是到婦科就診的宮頸疾病患者，而單純進(jìn)行宮頸癌篩查的人群較少，這可能也是引起≥56歲年齡組HPV感染率較高的原因之一。因此，應(yīng)加強(qiáng)對(duì)老年女性HPV感染和宮頸癌篩查知識(shí)的宣教力度。④淮安地區(qū)女性感染的高危HPV亞型以HPV16、52和58為主，與廣東、青島地區(qū)報(bào)道的結(jié)果相似，而與成都，遼寧地區(qū)報(bào)道結(jié)果稍有不同；另外國(guó)內(nèi)其他地區(qū)較少見(jiàn)的低危型HPV81在淮安地區(qū)女性中感染率較高；提示未來(lái)淮安地區(qū)HPV疫苗的研制和選擇均應(yīng)結(jié)合當(dāng)?shù)氐牡赜蛱攸c(diǎn)進(jìn)行。但因本文研究結(jié)果均來(lái)自淮安地區(qū)一家最大的綜合性三甲醫(yī)院，初步提示當(dāng)?shù)厝巳篐PV基因型感染具有獨(dú)特的地域特點(diǎn)，但對(duì)于該地區(qū)各種HPV基因型感染率的確切水平及其與宮頸癌等婦科疾病的相關(guān)性，還有待當(dāng)?shù)亻_(kāi)展多中心，大樣本的進(jìn)一步合作研究。

綜上所述，淮安地區(qū)女性HPV感染率較高，且高于國(guó)內(nèi)37個(gè)城市的平均水平。當(dāng)?shù)貞?yīng)重點(diǎn)做好對(duì)≤25歲和≥56歲2個(gè)高峰年齡段女性的宣教篩查工作，早診斷、早治療，預(yù)防和控制HPV感染及宮頸癌等相關(guān)疾病的發(fā)生，提高女性的衛(wèi)生保健水平。

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（童穎丹 編輯）

Distribution of genotypes of human papillomavirus among 6,228 infected women in Huaian district

Hong-lin Li1,Xiao-lin Liu2,Ai-xia Guo3,Feng-jun Shi4
(1.Clinical Laboratory,2.Central Laboratory,3.Department of Gynecology and Obstetrics, 4.Department of Infection Management,Huaian First Hospital,Nanjing Medical University,Huaian,Jiangsu 223300,China)

Objective To investigate the human papillomavirus(HPV)infection prevalence and subtype distribution among women in Huaian district,in order to provide a scientific basis for intervention,prevention and epidemiological studies of HPV infection.Methods A total of 21 vaginal HPV DNA types were tested among 6,228 women using DNA flow-though hybridization genotyping technique.Results The overall HPV infection rate of involved women in Huaian district was 37.73%(2,350/6,228).The infection rate of single lowrisk HPV subtype was 4.88%(304/6,228),that of single high-risk HPV subtype rate was 27.76%(1,729/ 6,228)and the multiple-infection rate was 5.09%(317/6,228).There were significant differences in HPV infection rates among different age groups(P＜0.05),the paragraph of HPV infection rate in different age group presented as"U"shaped curve.Among the 2,350 HPV-positive specimens,positive infection rates of single, double,three,four and five(including more than five)genotypes were 66.03%(1,555),22.76%(536),7.09% (167),2.93%(69)and 1.19%(23),respectively.The top five high-risk HPV subtypes were HPV16(15.23%), HPV52(11.79%),HPV58(9.58%),HPV53(7.00%)and HPV33(6.95%).The top three low-risk HPV subtypes were CP8304(HPV81,7.14%),HPV11(5.30%)and HPV6(4.31%).Conclusions The rate of HPV in－fection is high in the women of Huaian district.HPV16,52 and 58 are the most common subtypes among high-risk HPV infections,while HPV81,11 and 6 are the most common subtypes among low-risk HPV infections.The peak infection age is≤25 years and≥56 years.

human papillomavirus;genotype;cervical cancer;multiple infection

R737.33

B

10.3969/j.issn.1005-8982.2016.23.027

1005-8982（2016）23-0128-04

2016-04-11

時(shí)峰俊，E-mail：406329841@qq.com

行病學(xué)研究提供依據(jù)。方法采用核酸分子雜交法篩查6 228例淮安女性生殖道21種HPV基因亞型。結(jié)果

淮安地區(qū)女性HPV總感染率為37.73%（2 350/6 228），其中單純低危亞型感染率為4.88%（304/6 228），單純高危亞型感染率為27.76%（1 729/6 228），混合型感染率為5.09%（317/6 228）。不同年齡段之間HPV感染率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），感染率與年齡段呈近似U形曲線(xiàn)。2 350例HPV陽(yáng)性標(biāo)本中，單重、雙重、三重、四重、五重及以上基因型陽(yáng)性構(gòu)成比分別為66.03%（1 555例）；22.76%（536例）、7.09%（167例）、2.93%（69例）和1.19%（23例）；高危亞型陽(yáng)性構(gòu)成比前5位分別為HPV16（15.23%）、HPV52（11.79%）、HPV58（9.58%）、HPV53（7.00%）和HPV33（6.95%）；低危亞型陽(yáng)性構(gòu)成比前3位分別為CP8304（HPV81）（7.14%）、HPV11（5.30%）、HPV6（4.31%）。結(jié)論淮安地區(qū)女性HPV感染率較高，高危亞型感染以HPV16、52和58為主，低危亞型感染以HPV81、11和6為主。感染高峰年齡段為≤25歲和≥56歲。