韓春艷 韓晶晶

1.河南省中醫(yī)院中西醫(yī)結(jié)合生殖中心，河南 鄭州 450002

2.河南省鄭州人民醫(yī)院

毓麟珠對促排卵小鼠著床期子宮內(nèi)膜組織形態(tài)學(xué)的影響※

韓春艷1韓晶晶2

1.河南省中醫(yī)院中西醫(yī)結(jié)合生殖中心，河南 鄭州 450002

2.河南省鄭州人民醫(yī)院

毓麟珠；促排卵小鼠；著床期；子宮內(nèi)膜；組織形態(tài)學(xué)

不孕不育癥是影響育齡夫婦雙方身心健康的世界性問題,據(jù)統(tǒng)計(jì),在我國約有10%的育齡夫婦存在著生殖障礙,并有逐漸增加的趨勢,國內(nèi)研究中藥誘導(dǎo)排卵治療不孕癥,主要集中于臨床研究方面,以動物實(shí)驗(yàn)闡明其作用的報(bào)道不多。本研究通過動物實(shí)驗(yàn)，觀察促排卵藥物對著床期子宮內(nèi)膜厚度的影響，分析子宮內(nèi)膜組織形態(tài)學(xué)的變化及補(bǔ)腎中藥對其影響，以評價(jià)子宮內(nèi)膜容受性，為不斷改善促排卵方案，提高患者妊娠率提供理論依據(jù)。

一般資料

1.選用健康性成熟昆明種小鼠90只，隨機(jī)分為治療組(中藥配合HMG組)、模型組(HMG組)和正常組(生理鹽水組)，參考有關(guān)文獻(xiàn)建立促排卵動物模型，以HMG/HCG聯(lián)合應(yīng)用方案進(jìn)行。連續(xù)每日定時(shí)(下午6時(shí))灌胃給藥(治療組用毓麟珠顆粒，模型組及正常組用等量生理鹽水)，第11日(下午6時(shí))治療組與模型組同時(shí)腹腔注射HMG 12 IU，正常組給予等量生理鹽水，48 h后治療組與模型組小鼠同時(shí)腹腔注射HCG 12 IU，正常組仍給予等量生理鹽水，按雌雄比例為3∶1，分別合籠飼養(yǎng)，次晨陰道查有陰栓為妊娠第1日，于檢栓第4日上午10時(shí)脫頸處死小鼠，于70%酒精中浸泡消毒，剖腹取出子宮角，洗凈血跡后修去子宮頸部分，將已分離的子宮角移入平皿中備用，固定于10%中性甲醛溶液中，作石蠟包埋，切片，切片厚度4 μm。

2.小鼠子宮內(nèi)膜組織學(xué)分析常規(guī)HE染色，采用病理圖文分析系統(tǒng)，測量子宮內(nèi)膜厚度及子宮斷面所有視野內(nèi)腺體，鼠標(biāo)勾畫出被測腺體基底面(外側(cè)輪廓)和腺腔面，計(jì)算機(jī)自動測量每個(gè)腺體和腺腔的橫斷面積。

結(jié)果

模型組小鼠D4子宮內(nèi)膜發(fā)育明顯延遲，子宮內(nèi)膜發(fā)育成熟率為30%，顯著低于正常組，且內(nèi)膜與間質(zhì)發(fā)育可見不同步；治療組內(nèi)膜成熟率可達(dá)90%，與模型組比較，有極顯著性差異，且治療組子宮內(nèi)膜腺體面積及腺腔面積與正常組接近，較模型組明顯增加。

討論

子宮內(nèi)膜容受性是指子宮內(nèi)膜接受胚胎植入的能力,是保證孕卵著床，胎兒和胎盤發(fā)育的重要環(huán)節(jié)。在正常的月經(jīng)周期中,著床窗僅在月經(jīng)周期的短期內(nèi)開放,允許胚胎植入,之后便及時(shí)關(guān)閉,不再接受胚胎的植入。眾所周知,胚胎著床(Mebryontipalntation)是一個(gè)復(fù)雜的生理過程,胚泡植入是哺乳動物生殖的基本過程，胚胎脫透明帶和子宮內(nèi)膜容受性建立是著床的必要條件。胚胎在著床前必須歷經(jīng)生長、發(fā)育、卵裂、最終脫透明帶等環(huán)節(jié),才能在子宮內(nèi)膜著床,子宮內(nèi)膜只有建立了容受性才能接受胚胎植入,且二者必須同步進(jìn)行，胚胎與子宮內(nèi)膜都發(fā)生著形態(tài)、生理和生化的一系列改變,二者密切相關(guān),相互識別,相互容納,并相互作用。常用促排卵藥物包括克羅米酚(CC)、尿促性素(HMG)、促卵泡素(FSH)、促性腺激素激動劑(GnRHa)、人絨毛膜促性腺激素(HCG)等,上述藥物的應(yīng)用雖然為獲取多個(gè)卵子提供了保證,但多項(xiàng)研究表明[1-3]各種促排卵藥物的應(yīng)用,均對內(nèi)膜有不同程度的負(fù)面影響,不能促成理想的內(nèi)膜環(huán)境,可以直接或經(jīng)影響內(nèi)源激素平衡,間接干擾內(nèi)膜的正常發(fā)育和胚泡發(fā)育的同步性。

研究顯示,補(bǔ)腎中藥對子宮內(nèi)膜的增生、分化和分泌功能具有促進(jìn)作用,能使實(shí)驗(yàn)動物子宮增重,子宮內(nèi)膜增厚明顯,腺體增多,分泌現(xiàn)象有趨于明顯傾向,并隨喂藥天數(shù)而遞增[4]。補(bǔ)腎藥對老年金黃地鼠萎縮的子宮、輸卵管、卵巢組織有恢復(fù)和促進(jìn)細(xì)胞功能的作用,使內(nèi)膜厚度、子宮直徑、腺體數(shù)目及大小、皺襞等形態(tài)學(xué)指標(biāo)明顯趨于正常。對排卵障礙不孕者著床期子宮內(nèi)膜活檢的自身對照研究,亦顯示補(bǔ)腎藥有明顯促進(jìn)子宮內(nèi)膜分泌功能，內(nèi)膜腺體和間質(zhì)的同步化，改善內(nèi)膜局部環(huán)境狀態(tài)的作用,使內(nèi)膜組織形態(tài)向有利于植入方向發(fā)育,為妊娠提供組織形態(tài)學(xué)基礎(chǔ)[5]。毓麟珠由人參、白術(shù)、茯苓、白芍、當(dāng)歸、川芎、炙甘草等藥物組成，可明顯改善HMG促排卵周期子宮內(nèi)膜組織形態(tài)學(xué)指標(biāo)，提高子宮內(nèi)膜成熟度，這可能是該方補(bǔ)腎益天癸，改善子宮內(nèi)膜容受性作用機(jī)制的一個(gè)方面，也體現(xiàn)了中藥整體調(diào)節(jié)優(yōu)勢的一個(gè)方面。

[1]欒少紅,孫寶治,戴淑真.促排卵藥物對大白鼠子宮內(nèi)膜形態(tài)影響的研究[J].中原醫(yī)刊,2003,30(12):1-3.

[2]潘永苗,石一復(fù).GnRHa超排卵對小鼠子宮內(nèi)膜形態(tài)學(xué)和雌孕激素受體表達(dá)的影響[J].生殖與避孕,2002,22(4):195-198.

[3]潘永苗.促排卵藥物對子宮內(nèi)膜形態(tài)學(xué)的影響[J].國外醫(yī)學(xué)·婦產(chǎn)科學(xué)分冊,1999,26(6):340-343.

[4]羅頌平.中醫(yī)臨床家：羅元愷[M].北京:中國中醫(yī)藥出版社,2001.

[5]張樹成,張志洲,劉效群,等.補(bǔ)腎調(diào)經(jīng)方藥促進(jìn)人著床期子宮內(nèi)膜同步化的組織形態(tài)學(xué)觀察[J].中國中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志,2002,8(4):48-49.

河南中醫(yī)學(xué)院科研苗圃工程項(xiàng)目，項(xiàng)目編號：MP2013-05

2016-02-24)