孫 凱， 陳文華, 2▲， 張 穎， 李 燕， 安夢(mèng)瑤， 潘瑩瑩， 吳艷娜， 康 毅， 高衛(wèi)真， 婁建石△

(1天津醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院藥理學(xué)系，天津 300070； 2寧夏醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院藥劑科，寧夏 銀川 750004)

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無(wú)創(chuàng)性延遲肢體缺血預(yù)適應(yīng)對(duì)心肌梗死大鼠預(yù)后的影響*

孫 凱1， 陳文華1, 2▲， 張 穎1， 李 燕1， 安夢(mèng)瑤1， 潘瑩瑩1， 吳艷娜1， 康 毅1， 高衛(wèi)真1， 婁建石1△

(1天津醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院藥理學(xué)系，天津 300070；2寧夏醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院藥劑科，寧夏 銀川 750004)

目的： 研究無(wú)創(chuàng)性延遲肢體缺血預(yù)適應(yīng)(noninvasive delayed limb ischemic preconditioning，NDLIP)對(duì)動(dòng)物心肌梗死(myocardial infarction, MI)后的心臟功能、心肌形態(tài)以及心肌凋亡等方面的作用。方法: 取45只健康SD大鼠隨機(jī)分成3組: MI組：手術(shù)結(jié)扎動(dòng)物冠狀動(dòng)脈左前降支(left anterior descending artery，LAD)，2周后成模；NDLIP組：動(dòng)物MI模型成功后，每隔1 d進(jìn)行1次遠(yuǎn)端肢體缺血預(yù)適應(yīng)，直至第4、6、8周；假手術(shù)(sham)組：作為陰性對(duì)照組，心臟LAD只穿線不結(jié)扎，不實(shí)施NDLIP。將各組大鼠常規(guī)飼養(yǎng)，于第4、6、8周末進(jìn)行心室插管，監(jiān)測(cè)血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)；接著再進(jìn)行腹主動(dòng)脈取血、離心，用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測(cè)定血清Bcl-2和Bax水平；最后再取左心室前壁、勻漿，用ELISA法測(cè)定心肌組織線粒體呼吸鏈復(fù)合酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ的含量。結(jié)果: 與MI組相比，在實(shí)施心肌梗死4、6、8 周后，NDLIP組可使左心室收縮壓顯著升高(P<0.05)，左心室舒張末壓顯著降低(P<0.05)；線粒體呼吸鏈復(fù)合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ水平都顯著升高(P<0.05)；血清Bcl-2水平顯著升高(P<0.01)，Bax水平顯著降低(P<0.01)。結(jié)論: 大鼠心肌梗死后實(shí)施NDLIP干預(yù)可改善其血流動(dòng)力學(xué)，促進(jìn)線粒體呼吸功能，抑制細(xì)胞凋亡，從而起到改善預(yù)后的作用。

心肌梗死； 無(wú)創(chuàng)性延遲肢體缺血預(yù)適應(yīng)； 左心室收縮壓； 線粒體功能； 細(xì)胞凋亡

近年來，隨著心血管病危險(xiǎn)因素的不良變化以及人口老齡化的加速，使得心血管病發(fā)生率增加。急性心肌梗死(acute myocardial infarction，AMI)是當(dāng)前最常見的心血管疾病，其死亡率逐漸提高且發(fā)病年齡也呈年輕化，主要病因是冠狀動(dòng)脈粥樣斑塊脫落以及血栓栓塞使心肌組織大面積缺血缺氧而受損。目前心肌梗死的治療手段主要有藥物治療、介入治療及手術(shù)治療[1-3]等，雖然這些手段能使阻塞的血管再通、受損的心肌重新恢復(fù)血流供應(yīng)，但是并沒有從根本上改善已受損的心臟功能以及預(yù)后。因此，探索一種可以應(yīng)用于臨床上切實(shí)有效的方法或手段具有重要意義。

大量實(shí)驗(yàn)研究表明，心臟缺血預(yù)適應(yīng)(cardiac ischemic preconditioning，CIP)對(duì)心臟有一定的保護(hù)作用[4-6]，其中肢體缺血預(yù)適應(yīng)(limb ischemic preconditioning，LIP)也可對(duì)心臟引發(fā)保護(hù)作用，而無(wú)創(chuàng)性延遲肢體缺血預(yù)適應(yīng)(noninvasive delayed limb ischemic preconditioning，NDLIP)可長(zhǎng)效地保護(hù)心臟[7-9]。有關(guān)缺血預(yù)適應(yīng)對(duì)心肌梗死前的預(yù)防性心臟保護(hù)作用研究非常多[10-12]，但是到目前為止，對(duì)心肌梗死預(yù)后的相關(guān)研究幾乎沒有。因此，本實(shí)驗(yàn)將對(duì)NDLIP干預(yù)心肌梗死預(yù)后康復(fù)的情況進(jìn)行研究。

材 料 和 方 法

1 材料

1.1 實(shí)驗(yàn)對(duì)象 鼠齡相同、體重(250±10)g的SD雄性大鼠45只(SPF級(jí))，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量合格許可證號(hào)為SCXK-(軍)2012-0004，由中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院衛(wèi)生學(xué)環(huán)境醫(yī)學(xué)研究所實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。

1.2 藥品與試劑 0.9% NaCl、25%烏拉坦、肝素鈉、戊巴比妥鈉、蘇木素染液和伊紅染液；Bcl-2試劑盒、Bax試劑盒和線粒體呼吸鏈復(fù)合物試劑盒(Hermes Criterion Biotechnology)。

1.3 儀器 BL-420S生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)、HX-100E小動(dòng)物呼吸機(jī)(成都泰盟科技有限公司)；L420臺(tái)式低速離心機(jī)(長(zhǎng)沙湘儀離心機(jī)儀器有限公司)；HZS-H水浴振蕩器(哈爾濱市東聯(lián)電子技術(shù)開發(fā)有限公司)。

1.4 液體配制 肝素鈉注射液：臨用前用生理鹽水配制成1 mL 1.25×106U和1%的溶液，4 ℃，避光保存。1 mL 1.25×106U的肝素鈉注射液用于充滿動(dòng)脈插管體外抗凝；1%的肝素鈉注射液用于取血時(shí)肝素化試管。25%烏拉坦溶液：稱取烏拉坦12.5 g，加三蒸水至50 mL，攪拌使其溶解，室溫保存?zhèn)溆谩?%甲醛溶液：臨用前用雙蒸水將甲醛溶液稀釋成4%溶液，避光，室溫保存?zhèn)溆谩?/p>

2 方法

2.1 心肌梗死模型的建立 大鼠用3%戊巴比妥鈉(45 mg/kg)腹腔注射麻醉。常規(guī)備皮、消毒、鋪巾，沿胸骨左緣3 mm處剪開皮膚，鈍性分離前鋸肌和胸大肌。彎止血鉗于胸骨左緣處第4肋間進(jìn)入胸腔，并迅速沿肋間隙方向撐開止血鉗而鈍性分離肋間肌，右手用另一止血鉗垂直肋間隙撐開肋骨，暴露心臟。左手拇指與食指置于大鼠胸部?jī)蓚?cè)，中指與無(wú)名指置于左肋弓緣下，適當(dāng)用力快速擠出心臟，此時(shí)右手立刻將止血鉗取下，然后迅速在左心耳與肺動(dòng)脈圓錐交界處平左心耳下緣2 mm進(jìn)針，以7-0手術(shù)縫合線結(jié)扎冠狀動(dòng)脈左前降支(left anterior descending artery，LAD)。進(jìn)針深度1.5 mm左右，結(jié)扎完成后立即將心臟放回胸腔，置入塑料軟管并與注射器連接，迅速對(duì)合、捏緊皮膚，抽出胸腔內(nèi)氣體，立即拔管并進(jìn)行胸外按壓。觀察心電圖，心搏正常且動(dòng)物呼吸平穩(wěn)后，換用直鉗夾緊對(duì)合的皮膚，縫合。傷口消毒，保持體溫在36.5～38 ℃。肌肉注射2×105U青霉素鈉。2周后模型成功。

2.2 無(wú)創(chuàng)性肢體缺血預(yù)適應(yīng)模型的建立 用3%戊巴比妥鈉溶液腹腔注射麻醉大鼠，以改良的動(dòng)物無(wú)創(chuàng)血壓測(cè)試儀自制套管套住大鼠單側(cè)后肢根部，脈搏傳感器緊貼在足背動(dòng)脈上，啟動(dòng)動(dòng)物無(wú)創(chuàng)血壓測(cè)量系統(tǒng)軟件，連續(xù)監(jiān)測(cè)血壓和脈搏，加壓使脈搏消失、肢體遠(yuǎn)端體溫下降、皮膚發(fā)紺，即為阻斷股動(dòng)脈標(biāo)志，持續(xù)5 min；減壓，脈搏出現(xiàn)、體溫回升、皮膚潮紅，為再灌標(biāo)志，連續(xù)5 min，共3個(gè)循環(huán)，心肌梗死模型成功后開始，每隔1天進(jìn)行1次遠(yuǎn)端肢體缺血預(yù)適應(yīng)直至第4、6、8周。

2.3 血流動(dòng)力學(xué)參數(shù)的測(cè)定 大鼠經(jīng)烏拉坦腹腔注射麻醉后，實(shí)施右側(cè)頸總動(dòng)脈插管，導(dǎo)管插入右頸總動(dòng)脈約1～1.5 cm，等脈壓穩(wěn)定后記錄動(dòng)脈血壓，然后繼續(xù)向心臟方向插入導(dǎo)管，同時(shí)觀察壓力曲線，當(dāng)曲線振幅突然變大且形狀如正弦波形時(shí)，表明導(dǎo)管已通過主動(dòng)脈瓣進(jìn)入左心室，穩(wěn)定10 min，分別記錄左心室收縮壓(left ventricular systolic pressure，LVSP)、左心室舒張末壓(left ventricular end-diastolic pressure，LVEDP)、左室內(nèi)壓最大上升速率(+dp/dtmax)和左室內(nèi)壓最大下降速率(-dp/dtmax)。觀察各指標(biāo)變化情況并記錄心電圖。

2.4 心肌線粒體呼吸鏈復(fù)合物含量的測(cè)定 各組動(dòng)物于第4、6、8周實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，取心臟，放入預(yù)冷的生理鹽水中洗去殘血，用濾紙吸干多余水分；用刀片切取100 mg左右的心室肌，放入預(yù)冷的勻漿液中，將心肌組織剪碎并研磨成勻漿，然后立即低溫(4 ℃、3 000 r/min離心10 min)分離上清液，然后利用酶聯(lián)免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)測(cè)定心肌組織中的線粒體呼吸鏈復(fù)合物的含量。

2.5 血清Bcl-2和Bax含量的測(cè)定 大鼠在第4、6、8周實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，腹主動(dòng)脈取血約5 mL，離心取血清(3 000 r/min離心15 min)，置于-80 ℃保存。采用不同的試劑盒用ELISA法測(cè)定各自的含量。

2.6 實(shí)驗(yàn)分組 本實(shí)驗(yàn)分為MI組、NDLIP組和假手術(shù)(sham)組，每組15只。

3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

所有統(tǒng)計(jì)分析均使用SPSS 18.0軟件計(jì)算分析。數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(mean±SD)表示，均數(shù)間比較采用單因素方差分析(one-way ANOVA)，組間兩兩比較采用SNK-q檢驗(yàn)。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

1 NDLIP對(duì)動(dòng)物心肌梗死4、6、8周后心臟大體形態(tài)的影響

實(shí)施心肌梗死手術(shù)2周后可見梗死區(qū)變白，與周圍心肌形成明顯的分界，表明MI造模成功。在實(shí)施心肌梗死手術(shù)4、6、8 周后，心臟左心室前壁梗死區(qū)域明顯變白，與非梗死區(qū)域有明顯的區(qū)別；另外，觀察心臟的左心室前壁可見明顯變薄，發(fā)白，呈梗死狀，見圖1。心肌組織經(jīng)HE染色后，如圖2所示，MI 4周組可見標(biāo)本中有大片陳舊性心肌梗死灶，該區(qū)域心肌纖維被增生的纖維組織取代，其余部分心肌纖維排列紊亂且見斷裂、間質(zhì)輕度水腫、充血及少量炎細(xì)胞浸潤(rùn)，未見紅細(xì)胞滲出。心外膜水腫、充血及炎細(xì)胞浸潤(rùn)。MI 6周組可見小片陳舊性梗死灶，周邊部分心肌纖維排列紊亂，肌絲斷裂，散在及小灶性炎細(xì)胞浸潤(rùn)，心外膜病理改變同MI 4周組。MI 8周組可見大片新鮮及小片陳舊性梗死，前者水腫及炎細(xì)胞浸潤(rùn)明顯；后者纖維組織增生，周邊個(gè)別心肌梗死，炎細(xì)胞浸潤(rùn)，心外膜病理改變同MI 4周組。NDLIP 4周組可見病變減輕，小部分心肌纖維正常，心肌間水腫、少量炎細(xì)胞浸潤(rùn)，心外膜病理改變同MI 4周組。NDLIP 6周組未見大片心肌梗死灶。其余部分心肌纖維排列紊亂且見斷裂明顯、間質(zhì)輕度水腫、充血及炎細(xì)胞浸潤(rùn)，心外膜水腫、充血及炎細(xì)胞浸潤(rùn)。NDLIP 8周組可見外膜下有小片心肌纖維排列紊亂，肌絲斷裂，炎細(xì)胞浸潤(rùn)，外膜病變同MI 4周組但更明顯。Sham 4周組可見外膜下個(gè)別心肌梗死，炎細(xì)胞浸潤(rùn)，余心肌大致正常，未見顯著改變，心外膜病理改變同MI 4周組。Sham 6周組可見心肌纖維大致正常，未見顯著改變，心外膜病理改變同MI 4周組。Sham 8周組可見外膜下有小片心肌纖維排列紊亂，肌絲斷裂，炎細(xì)胞浸潤(rùn)。局部心肌纖維見規(guī)律的波紋狀變形，心外膜病理改變同MI 4周組。HE染色顯示MI組、NDLIP組和sham組都可見心外膜損傷，考慮為手術(shù)擠壓心臟時(shí)對(duì)心外膜造成的損傷。

Figure 1. The rat hearts after myocardial infarction. W: weeks.

圖1 心肌梗死4、6、8 周后心臟大體形態(tài)

2 NDLIP對(duì)動(dòng)物心肌梗死4、6、8 周后血流動(dòng)力學(xué)參數(shù)的影響

心肌梗死模型4、6、8 周缺血預(yù)適應(yīng)結(jié)束后監(jiān)測(cè)動(dòng)物血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)。與MI組相比，NDLIP組大鼠的LVSP有所上升，分別升高了16%、20%和12%(P<0.05)。與MI組相比，NDLIP組大鼠的LVEDP明顯降低，分別降低了42%、39%和30%(P<0.05)。與MI組相比， NDLIP組大鼠的+dp/dtmax有所升高，分別升高了20%、20%和7%(P<0.05)。與MI組相比，NDLIP組大鼠的-dp/dtmax有所降低，分別降低了13%、13%和17%(P<0.05)。4、6、8 周組間相互比較無(wú)顯著差異，見圖3。

Figure 2.The pathological changes of every experimental group after MI (HE staining, ×200). W: weeks.

圖2 HE染色后，MI組和NDLIP組以及sham組心肌組織的病理學(xué)變化

Figure 3.The changes of hemodynamic parameters in every experimental group 4, 6 and 8 weeks (W) after myocardial infarction (MI). Mean±SD.n=5.*P<0.05vsMI group.

圖3 NDLIP對(duì)動(dòng)物心肌梗死4、6、8周后血流動(dòng)力學(xué)參數(shù)改變的結(jié)果

3 NDLIP對(duì)動(dòng)物心肌梗死4、6、8 周后心肌線粒體功能的影響

動(dòng)物實(shí)施心肌梗死手術(shù)4、6、8周后，與MI組相比，NDLIP組心肌線粒體呼吸鏈復(fù)合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ的濃度都明顯上升。NDLIP組心肌線粒體呼吸鏈復(fù)合物Ⅰ的濃度比MI組分別增加了79%、91%和52%(P<0.01)；NDLIP組心肌線粒體呼吸鏈復(fù)合物Ⅱ的濃度比MI組分別增加了79%、64%和95%(P<0.05)；NDLIP組心肌線粒體呼吸鏈復(fù)合物Ⅲ的濃度比MI組分別增加128%、62%和66%(P<0.05)；NDLIP組心肌線粒體呼吸鏈復(fù)合物Ⅳ的濃度比MI組分別增加了52%、62%和103%(P<0.01)。4、6、8 周組間相互比較無(wú)顯著差異，見圖 4。

Figure 4.The changes of mitochondrial respiration chain complexesⅠ, Ⅱ, Ⅲ and Ⅳ in every experimental group 4, 6 and 8 weeks (W) after myocardial infarction (MI). Mean±SD.n=5.*P<0.05,**P<0.01vsMI group.

圖4 NDLIP對(duì)動(dòng)物心肌梗死4、6、8周后心肌線粒體功能的影響

4 NDLIP對(duì)動(dòng)物心肌梗死4、6、8周后凋亡相關(guān)蛋白的影響

動(dòng)物實(shí)施心肌梗死手術(shù)4、6、8周后，sham組Bcl-2的表達(dá)最高，MI組最低，NDLIP組Bcl-2的表達(dá)比MI組分別增加了43%、81%和67%(P<0.01)；MI組的Bax表達(dá)最高，sham組最低，NDLIP組Bax的表達(dá)比MI組分別降低了60%、67%和55%(P<0.01)；sham組的Bcl-2/Bax值最高，NDLIP組比MI組增加了252%、440%和267%(P<0.01)。雖然Bcl-2、Bax均來自血清，但這些凋亡相關(guān)蛋白的變化主要來源于心臟。4、6、8周組間相互比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性，見圖5。

討 論

急性心肌梗死是冠狀動(dòng)脈急性缺血缺氧所引起的一類嚴(yán)重危害人類身體健康的心血管疾病。近年來，研究者們開始關(guān)注心肌梗死患者的預(yù)后以及生活質(zhì)量問題。然而關(guān)于心臟缺血預(yù)適應(yīng)對(duì)心肌梗死患者的預(yù)后影響研究卻幾乎沒有，少量文獻(xiàn)從心電ST段變化和心肌酶的表達(dá)水平等方面對(duì)其進(jìn)行了描述[13-14]。本實(shí)驗(yàn)采用NDLIP的方法，通過觀察心臟收縮、舒張功能的變化，監(jiān)測(cè)心肌細(xì)胞線粒體呼吸功能以及心臟心肌凋亡相關(guān)蛋白水平等方面研究了NDLIP對(duì)心肌梗死預(yù)后的影響。

血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)是動(dòng)物心功能改變的最重要反映[15]。本實(shí)驗(yàn)通過建立大鼠心肌梗死模型，模擬人心肌梗死狀態(tài)，在大鼠預(yù)后過程中給予NDLIP隔天1次進(jìn)行干預(yù)。其血流動(dòng)力學(xué)結(jié)果顯示，NDLIP干預(yù)后，與MI組相比，LVSP明顯升高，LVEDP明顯降低，其±dp/dtmax絕對(duì)值明顯升高，且差異都有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性。這就表明NDLIP對(duì)大鼠心肌梗死預(yù)后有積極的意義，可以顯著改善其心功能。這一結(jié)果與高建波等[8]對(duì)正常大鼠進(jìn)行隔天1次、連續(xù)1周 NDLIP所產(chǎn)生的能減輕缺血再灌注(ischemia-reperfusion，I/R)所致?lián)p傷、減小心肌梗死面積、有強(qiáng)大的心肌保護(hù)作用的結(jié)果相同。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，NDLIP不僅對(duì)I/R所致的心肌損傷有保護(hù)作用，其對(duì)急性心肌梗死所致的損傷也有強(qiáng)大的保護(hù)作用，對(duì)改善心肌梗死的預(yù)后有積極的效果。

Figure 5.The serum concentrations of Bcl-2, Bax and Bcl-2/Bax in every experimental group 4, 6 and 8 weeks (W) after myocardial infarction (MI). Mean±SD.n=5.**P<0.01vsMI group.

圖5 NDLIP對(duì)動(dòng)物心肌梗死4、6、8 周后凋亡相關(guān)蛋白的影響結(jié)果

心肌梗死后線粒體功能障礙主要表現(xiàn)在線粒體呼吸功能喪失和呼吸酶活性降低。而已知有氧真核生物細(xì)胞呼吸產(chǎn)生能量的過程絕大部分都是在線粒體呼吸鏈末端細(xì)胞色素氧化酶上通過4步單電子將氧還原生成水完成的[16-19]，線粒體呼吸鏈的電子傳遞全程由電子傳遞鏈復(fù)合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ共同作用來完成的。本試驗(yàn)中，動(dòng)物實(shí)施心肌梗死4、6、8周后，sham組線粒體呼吸鏈復(fù)合物的水平最高，MI組最低，但實(shí)施NDLIP組的線粒體呼吸鏈復(fù)合物水平比MI組有顯著升高，表明實(shí)施NDLIP后可增加線粒體呼吸鏈復(fù)合物的水平，從而提高細(xì)胞的呼吸功能，增加ATP的產(chǎn)生，對(duì)改善動(dòng)物心肌梗死預(yù)后有積極作用。

發(fā)生心肌梗死后，梗死區(qū)會(huì)同時(shí)存在細(xì)胞凋亡和壞死，故設(shè)法阻斷凋亡信號(hào)傳導(dǎo)，減少細(xì)胞凋亡是保護(hù)心臟的重要手段。細(xì)胞凋亡調(diào)控途徑之一就是依賴于線粒體中的抗凋亡蛋白Bcl-2和促凋亡蛋白Bax對(duì)細(xì)胞凋亡起到信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和執(zhí)行的作用。近期有研究顯示，Bcl-2/Bax的比值可反映Bcl-2和Bax在細(xì)胞凋亡中的作用，若Bcl-2/Bax比值升高，則產(chǎn)生抑制細(xì)胞凋亡的作用，反之則會(huì)促進(jìn)細(xì)胞凋亡[20-21]。本實(shí)驗(yàn)通過分析Bcl-2和Bax的表達(dá)研究NDLIP對(duì)線粒體的保護(hù)作用。結(jié)果顯示，心肌梗死大鼠經(jīng)NDLIP干預(yù)后，Bcl-2的表達(dá)與MI組相比明顯升高，Bax的表達(dá)與MI組相比明顯降低，Bcl-2/Bax的值與MI組相比明顯升高，雖然Bcl-2、Bax均來自血清，但這些凋亡相關(guān)蛋白的變化主要來源于心臟。NDLIP可以逆轉(zhuǎn)急性心肌缺血引起的Bcl-2表達(dá)減少，說明Bcl-2可以調(diào)節(jié)NDLIP引起的心臟保護(hù)作用。同時(shí)，NDLIP也降低了Bax的活性。該結(jié)果說明NDLIP可以顯著調(diào)節(jié)Bcl-2和Bax的表達(dá)，NDLIP可通過線粒體途徑減少細(xì)胞凋亡。

綜上所述，NDLIP可通過改善心臟血流動(dòng)力學(xué)，促進(jìn)線粒體呼吸功能，抑制細(xì)胞凋亡等方面對(duì)心肌梗死大鼠起到長(zhǎng)期改善預(yù)后的作用。且該方法是無(wú)創(chuàng)性的，簡(jiǎn)單易操作，不良反應(yīng)小，對(duì)于患心肌梗死后病人，具有改善預(yù)后機(jī)體能力、提高帶病生活質(zhì)量的積極意義，所以在臨床應(yīng)用方面具有較大的應(yīng)用潛力和前景。

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(責(zé)任編輯： 林白霜， 羅 森)

Effects of noninvasive delayed limb ischemic preconditioning on prognosis of myocardial infarction

SUN Kai1, CHEN Wen-hua1, 2, ZHANG Ying1, LI Yan1, AN Meng-yao1, PAN Ying-ying1, WU Yan-na1, KANG Yi1,GAO Wei-zhen1, LOU Jian-shi1

(1DepartmentofPharmacology,BasicMedicalCollege,TianjinMedicalUniversity,Tianjin300070,China;2PharmacyDepartment,GeneralHospitalofNingxiaMedicalUniversity,Yinchuan750004,China.E-mail:jianshilou@126.com)

AIM: To study the effects of noninvasive delayed limb ischemia preconditioning (NDLIP) on animal cardiac function, myocardial morphology and myocardial apoptosis after myocardial infarction (MI). METHODS: Healthy SD male rats [n=45, weighing (250±10) g] were randomly divided into 3 groups: MI group: the animal model of MI was established by surgical ligation of left anterior descending artery (LAD) after 2 weeks; NDLIP group: after the success of the MI animal model, NDLIP was carried out every other day until the 4th, 6th and 8th weeks; sham group: as the negative control group, the animals were taken heart LAD threading but no ligation. All rats were fed conventionally. At the end of the 4th, 6th and 8th weeks, all rats were made ventricular intubation, and then the hemodynamic parameters were recorded. The blood samples were withdrawn from the abdominal aorta and the serum was separated via centrifugation. The serum contents of Bcl-2 and Bax were measured by ELISA. Left ventricular anterior wall was homogenized. The mitochondrial respiratory chain complexes Ⅰ, Ⅱ, Ⅲ and Ⅳ in the myocardial tissues were detected by ELISA. RESULTS: At the end of the 4th, 6th and 8th weeks, compared with MI group, left ventricular systolic pressure in NDLIP group was significantly increased, while left ventricular end-diastolic pressure in NDLIP group was significantly decreased (bothP<0.05). Mitochondrial respiratory chain complexesⅠ, Ⅱ, Ⅲ and Ⅳ in NDLIP group were significantly increased (P<0.05). The serum level of Bcl-2 in NDLIP group was significantly increased and Bax level was reduced remarkably (bothP<0.01). CONCLUSION: NDLIP improves the hemodynamic indexes, promotes the mitochondrial respiratory function and inhibits cell apoptosis, thus improving the prognosis of MI.

Myocardial infarction; Noninvasive delayed limb ischemic preconditioning; Left ventricular systolic pressure; Mitochondrial function; Apoptosis

1000- 4718(2017)01- 0116- 07

2016- 06- 23

2016- 10- 16

國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No. 81072631)；天津自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No. 09JCZDJC21100)

R363

A

10.3969/j.issn.1000- 4718.2017.01.019

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