魏守超， 劉君玲， 趙興軍， 孟 穎， 劉志輝

缺血性卒中患者血清抗磷脂蛋白抗體濃度與頸動脈粥樣硬化的相關(guān)性

魏守超， 劉君玲， 趙興軍， 孟 穎， 劉志輝

目的 探究缺血性卒中患者血清抗心磷脂抗體濃度與頸動脈粥樣硬化斑塊及其危險因素的相關(guān)性。方法 連續(xù)納入310例頸內(nèi)動脈系統(tǒng)IS患者，應(yīng)用血管彩色多普勒超聲儀進行頸部血管超聲檢測，根據(jù)有無CAS斑塊及頸內(nèi)動脈狹窄程度將患者分為3組:其中A組(無斑塊無狹窄)80例;B組(有斑塊無狹窄)101例;C組(有斑塊有狹窄)129例,C組中1°狹窄42例，2°狹窄36例，3°狹窄33例，4°狹窄18例。采用ELISA檢測患者血清ACA濃度，同時檢測常規(guī)生化指標(biāo)。結(jié)果 A、B、C組患者血清ACA濃度依次為(8.21±7.86)PLU/ml、(13.57±8.04) PLU/ml、(26.54±10.35)PLU/ml；B組、C組患者血清ACA水平明顯高于A組(P<0.05)，C組患者血清ACA水平明顯高于B組(P<0.05)；血清ACA水平隨CAS狹窄程度的增加而增高。Logistic回歸分析顯示，血清ACA是否為陽性與TG水平密切相關(guān)。結(jié)論 血清ACA參與動脈粥樣硬化的形成、發(fā)展，TG是血清ACA陽性的重要危險因素，血清ACA可作為CAS的血清生化指標(biāo)。

抗心磷脂蛋白抗體； 頸動脈粥樣硬化； 缺血性卒中

頸動脈粥樣硬化(carotid atherosclerosis,CAS)為缺血性卒中(ischemic stroke,IS)的重要原因[1,2]，早期檢測、診斷CAS對IS一級預(yù)防有重大意義。近年來，炎癥及免疫反應(yīng)在動脈硬化斑塊研究中占據(jù)著獨特的地位，而抗心磷脂抗體(anticardiolipin antibody,ACA)作為抗磷脂抗體中的一種，被視為連接自身免疫反應(yīng)及凝血過程的關(guān)鍵橋梁[3]。近年來，國內(nèi)外關(guān)于抗磷脂抗體參與腦血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷及IS相關(guān)性的研究正成為神經(jīng)科的新熱點，但鮮有血清ACA濃度與缺血性卒中患者CAS相關(guān)性研究的報道。本研究通過對310例頸內(nèi)動脈系統(tǒng)IS患者血清ACA濃度及超聲CAS檢測，探討血清ACA濃度與CAS斑塊及相關(guān)危險因素之間的相關(guān)性，為早期預(yù)防和及時治療缺血性卒中提供循證醫(yī)學(xué)依據(jù),現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2014年9月-2016年9月在濰坊醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科住院的310例頸內(nèi)動脈系統(tǒng)缺血性卒中患者作為研究對象，所有納入試驗的患者均由神經(jīng)內(nèi)科醫(yī)生6 h內(nèi)完成個人基本信息、現(xiàn)病史、家族史(尤其是腦血管病史)、個人史(尤其是吸煙、飲酒史)、服藥史。其中男性168例，女性142例，年齡40～86(64.23±9.37)歲。入選標(biāo)準(zhǔn)：首次發(fā)病，入選時病程24 h～72 h；符合“中國急性缺血性腦卒中診治指南2014”診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]，并經(jīng)頭部MR平掃證實。排除標(biāo)準(zhǔn)：有惡性腫瘤、嚴(yán)重心、肝、腎功能不全等慢性病者；既往出現(xiàn)嚴(yán)重全身感染及自身免疫性疾病者；有其他腦部器質(zhì)性病變者，安裝心臟起搏器等金屬植入物者及其他檢查不合作患者。

1.2 血清ACA測定 患者于入院次晨空腹抽取2 ml肘靜脈血至EDTA抗凝管中，于采血后2 h內(nèi)離心，3 000 r/min離心5 min，取上清存于-20 ℃冰箱待測。所有受試標(biāo)本均在采血后1 w內(nèi)測定。采用ELISA定量法檢測血清ACA水平，3種標(biāo)準(zhǔn)ACA濃度依次為2 PLU/ml、12 PLU/ml和120 PLU/ml，≥12 PLU/ml為陽性。以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)，相應(yīng)吸光值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，樣品的ACA含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)濃度。選擇奧地利anthos2010酶標(biāo)儀進行血清ACA檢測，ACA試劑盒主要由上海艾研生物技術(shù)有限公司提供。

1.3 常規(guī)生化指標(biāo)檢測 住院患者次日清晨空腹取肘靜脈血(抽血前禁食時間不少于8 h)，血樣分析采用進口全自動生化儀，測定總膽固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(Triglyceride,TG)、高密度脂蛋白膽固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDLC)、低密度脂蛋白膽固醇(low density lipoprotein cholesterin,LDLC)等常規(guī)生化指標(biāo)。

1.4 頸動脈彩色多普勒超聲檢測 患者入院1～3 d內(nèi)采用西門子公司西門子2000血管超聲多普勒檢測，檢測指標(biāo)：(1)頸動脈內(nèi)-中膜厚度(Intima-medial thickness,IMT)：頸內(nèi)動脈IMT在頸總動脈分叉處1.0 cm遠(yuǎn)處測量遠(yuǎn)場血管壁的IMT厚度，取3次測量平均值；(2)斑塊：頸動脈IMT不規(guī)則增厚>1.2 mm均認(rèn)為有斑塊形成。根據(jù)超聲結(jié)果將所有入組患者分為3組：A組(無斑塊且無狹窄者)、B組(有斑塊但無狹窄者)、C組(斑塊、狹窄均有者)。采用歐洲協(xié)作組制定標(biāo)準(zhǔn)[4]測定狹窄程度：狹窄程度(%)=1-病變部位最窄端直徑/狹窄遠(yuǎn)端正常動脈管徑×100%，0級：血管直徑正常；1°：狹窄程度<50%； 2°：狹窄程度50%～90%；3°：狹窄程度91%～99%；4°：血管完全閉塞。

2 結(jié) 果

2.1 不同組缺血性卒中患者血清ACA濃度比較 3組IS患者血清ACA濃度(見表1)，其中B組、C組血清ACA濃度明顯高于A組(P<0.05);C組血清ACA濃度明顯高于B組(P<0.05)。

2.2 血清ACA濃度與CAS狹窄程度的關(guān)系 在129例C組患者中，在1°～3°CAS狹窄患者血清ACA濃度(見表2)，其3組濃度差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；但在3°～4°CAS狹窄患者中，血清ACA濃度無顯著性差異(P>0.05)。

2.3 血清ACA陽性及各相關(guān)危險因素關(guān)系 以高血壓、糖尿病、HDLC、LDLC等相關(guān)危險因素為自變量，以血清ACA是否為陽性作為因變量，依Logistic回歸模型進行多因素分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)血清ACA陽性與高血壓病、糖尿病、HDLC、TG、性別、年齡、飲酒無明顯相關(guān)(均P>0.05)，而只與HDLC相關(guān)(P<0.05)。提示TG是患者發(fā)生ACA陽性的獨立危險因素(見表3)。

表1 不同組IS患者血清ACA濃度比較

與A組相比*P<0.05；與B組相比#P<0.05

表2 不同CAS狹窄患者(C組)血清ACA濃度比較

與1°相比*P<0.05；與2°相比#P<0.05

表3 血清ACA與相關(guān)危險因素的Logistic回歸分析

注：B：回歸系數(shù)；SE：標(biāo)準(zhǔn)誤；Walds：回歸系數(shù)的Wald 檢驗卡方值；Exp(B)：優(yōu)勢比OR的估計值

3 討 論

近年來，隨著檢驗手段的進步，認(rèn)為免疫、炎癥反應(yīng)產(chǎn)生的眾多致病因子可參與動脈硬化過程?？沽字贵w在腦血管病生物標(biāo)志家族中占有獨特的地位，Arad A等[5]指出ACA參與血管內(nèi)皮損傷，是腦血栓形成的危險因素。ACA影響動脈粥樣硬化斑塊形成的可能環(huán)節(jié)有[6～9]：(1)損傷內(nèi)皮細(xì)胞結(jié)構(gòu)致細(xì)胞防御功能減弱，誘發(fā)免疫反應(yīng)的發(fā)生，繼發(fā)血小板沉積；(2)ACA影響蛋白C活性，使其引發(fā)的凝血功能受阻，機體處于高凝狀態(tài)，促進血栓在頸動脈形成；(3)與內(nèi)皮細(xì)胞膜磷脂發(fā)生抗原-抗體反應(yīng)，提高花生四烯酸水平，阻礙前列環(huán)素(PGI2)產(chǎn)生，加速血小板聚集；(4)激活內(nèi)皮細(xì)胞，誘導(dǎo)產(chǎn)生內(nèi)皮細(xì)胞E、選擇素及各種黏附分子；(5)促進血小板黏附、聚集及凝血因子活化內(nèi)皮細(xì)胞的損害使纖溶酶原激活物釋放減少，血液纖溶活性減低，促進血栓形成。

本試驗通過對A、B和C組患者血清ACA濃度檢測發(fā)現(xiàn)，血清ACA濃度在C組中最高，B組次之，而在A組中濃度最低。進一步將C組患者按照程度分度，不難發(fā)現(xiàn)在1°～3°CAS狹窄患者血清ACA濃度隨著狹窄程度的增加而升高，提示ACA參與了CAS的形成、發(fā)展過程。但在中3°、4°CAS狹窄患者中，血清ACA濃度并無顯著性差異，尚不能認(rèn)為在CAS管腔狹窄>91%時，血清ACA濃度對CAS狹窄程度有進一步的影響，但限于1°、2°CAS狹窄患者樣本量較小，統(tǒng)計學(xué)偏倚不可避免，尚需擴大樣本。高血壓、糖尿病、高脂血癥作為動脈粥樣硬化形成的傳統(tǒng)危險因素[10～12]，對IS發(fā)生發(fā)展、轉(zhuǎn)歸、預(yù)后具有不可估量的作用，本文采用多元逐步回歸分析發(fā)現(xiàn)，僅可將TG視為ACA陽性獨立危險因素。由于相關(guān)性研究國內(nèi)外鮮有報道，需廣泛的基礎(chǔ)和臨床研究進一步探索?？沽字贵w綜合征(antiphospholipid syndrome,APS)是一種非炎癥性自身免疫性血栓性疾病，臨床上以反復(fù)發(fā)作性動脈、靜脈血栓形成、習(xí)慣性流產(chǎn)等為主要表現(xiàn)[13]，其中，動脈血栓形成為其基本病理表現(xiàn)之一[14]，抗磷脂抗體的不同亞群針對以ACA為代表的抗原以免疫-炎癥反應(yīng)形式參與動脈硬化形成及進展，可繼發(fā)神經(jīng)系統(tǒng)功能障礙[15,16]。近年研究已經(jīng)檢測到人和動物動脈硬化斑塊處存在抗磷脂抗體[13,17]，進一步對部分無明顯自身免疫性疾病背景的患者進行研究，結(jié)果顯示抗磷脂抗體陽性有可能導(dǎo)致動脈粥樣硬化的亞臨床狀態(tài)[18]。而屈繼波等[19]臨床試驗更是表明ACA陽性患者頸動脈顱外段狹窄程度和狹窄率高于陰性對照組，且ACA陽性組和ANCA陽性組左、右兩側(cè)IMT均大于陰性對照組，提示ACA可以影響血管狹窄程度。綜上可以推斷，在部分無明顯高危因素的IS患者中，血清ACA檢測是提前預(yù)防及明確病因的方法之一。國內(nèi)外關(guān)于血清ACA參與動脈粥樣硬化病理過程的確切機制研究相對較少，但就當(dāng)前來看，以ACA為代表的抗磷脂抗體亞群參與了其發(fā)生發(fā)展的多個環(huán)節(jié)。重視監(jiān)測血清ACA濃度變化，不僅能為動脈粥樣硬化提供輔助診斷依據(jù)，對做好IS的一級預(yù)防有積極意義，同時以定性向定量的研究模式轉(zhuǎn)換，也符合精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)的國際趨勢[20]。

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The relationship between serum level of anticardiolipin antibody and carotid atheroscleros IS in patients with acute cerebral infarction

WEIShouchao,LIUJunling,ZHAOXingjun,etal.

(DepartmentofNeurology,WeifangMedicalUniversity,Weifang261531,China)

Objective To investigate the relationship between serum levels of anticardiolipin antibody (ACA) and carotid atherosclerosis (CAS) and its risk factors in patients with acute cerebral infarction (IS).Methods A total of 310 IS patients of internal carotid artery system were recruited and carotid arteries were measured by vascular doppler ultrasound instrument．According to the presence of carotid atherosclerotic plaque and the degree of carotid stenosis,the patients were divided into three groups： group A (no plaque and stenosis) with 80 cases,group B (plaque but having no stenosis) with 101 cases,group C (plaque and stenosis) with 129 cases.Among the 129 patients of group C,case number of 1,2,3 and 4 grade of carotid stenos IS was 42,36,33 and 18 respectively.The serum levels of ACA were measured by ELISA and the routine biochemical indicators were detected at the same time.Results The serum level of ACA in patients of groups A,B,C was (8.21±7.86) PLU/ml,(13.57±8.04) PLU/ml,(26.54±10.35) PLU/ml respectively.Serum level of ACA between patients of group B and C was significantly higher than group A (P<0.05) and serum level of ACA was the highest in patients of group C.As carotid atherosclerosis stenosis progressed,serum level of ACA antibody increased.Serum level of ACA antibody was positively associated with Triglyceride (TG).Conclusion Serum levels of ACA antibody play a role in the occurrence and development of carotid stenosis and TG was the independent risk factor of increased serum levels of ACA.Serum ACA may be used as one of the serum biochemical indexes of carotid artery atherosclerosis.

Serum anticardiolipin antibody； Carotid atherosclerosis； Ischemic stroke

2016-10-12；

2016-11-29

山東省自然科學(xué)基金(聯(lián)合專項，No.ZR2015HL042)；濰坊市科技技術(shù)發(fā)展計劃項目(No.2015WS050)；濰坊市衛(wèi)生局科技項目(No.2014039)

(濰坊醫(yī)學(xué)院神經(jīng)病學(xué)教研室，山東 濰坊 261031)

劉志輝，E-mail：lzhh1956@126.com

1003-2754(2017)02-0108-04

R743.3

A