蔣麗 張建平

·論著·

三陰性乳腺癌中p53和Ki67的表達(dá)情況及臨床意義

蔣麗 張建平

目的 研究三陰性乳腺癌中p53和Ki67的表達(dá)情況及臨床意義。方法 選擇接受治療的經(jīng)病理確診為浸潤(rùn)性乳腺癌患者102例，隨機(jī)分為2組，其中三陰性乳腺癌51例(觀察組)，非三陰性乳腺癌51例(對(duì)照組)，比較2組患者p53和Ki67的陽(yáng)性表達(dá)情況，分析三陰性乳腺癌p53和Ki67表達(dá)與年齡、組織學(xué)分級(jí)、脈管浸潤(rùn)、腫瘤直徑以及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移之間的關(guān)系，同時(shí)研究p53和Ki67表達(dá)與乳腺癌生存率之間的相關(guān)性。結(jié)果 觀察組患者的p53和Ki67的陽(yáng)性表達(dá)率高于對(duì)照組患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。觀察組的p53表達(dá)與組織學(xué)分級(jí)、脈管浸潤(rùn)、腫瘤直徑、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有密切聯(lián)系(P<0.05)，Ki67表達(dá)與組織學(xué)分級(jí)有密切聯(lián)系(P<0.05)。102例浸潤(rùn)性乳腺癌患者中，p53表達(dá)陽(yáng)性的生存率低于p53表達(dá)陰性者，且Ki67表達(dá)陽(yáng)性的生存率低于Ki67表達(dá)陰性者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。三陰性乳腺癌中p53和Ki67為陽(yáng)性患者的生存率低于陰性表達(dá)者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論 三陰性乳腺癌中p53和Ki67的陽(yáng)性表達(dá)率較高，p53和Ki67的表達(dá)情況對(duì)腫瘤增殖能力、腫瘤惡性程度以及預(yù)后有著重要意義。

三陰性乳腺癌；p53；Ki67；治療結(jié)果

三陰性乳腺癌是乳腺癌的類型之一，占乳腺癌所有病例的20%左右，主要是指患者孕激素受體(PR)、雌激素受體(ER)和人類表皮生長(zhǎng)因子受體2(HER-2) 均呈現(xiàn)出陰性[1]。三陰性乳腺癌具有組織學(xué)分級(jí)高、惡性程度較高、容易轉(zhuǎn)移以及預(yù)后差的特點(diǎn)，因而患者的復(fù)發(fā)率高、生存率低，是臨床上十分棘手的疾病?，F(xiàn)階段，臨床上對(duì)三陰性乳腺癌仍缺乏有效的治療方案，有研究發(fā)現(xiàn)三陰性乳腺癌與p53、Ki67表達(dá)狀況之間存在密切的聯(lián)系，通過了解p53和Ki67的表達(dá)有利于評(píng)估患者的腫瘤增殖能力、腫瘤惡性程度以及預(yù)后情況，具有十分重要的臨床意義[2]。本文主要研究三陰性乳腺癌中p53和Ki67的表達(dá)情況及臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2013年5月至2015年5月在江蘇省潭陽(yáng)市人民醫(yī)院接受治療的乳腺癌患者102例，均經(jīng)病理確診為浸潤(rùn)性乳腺癌。隨機(jī)分成2組，每組51例。對(duì)照組:年齡31～56歲，平均年齡(41.6±5.9)歲；月經(jīng)情況：絕經(jīng)前期41例，絕經(jīng)后期10例；腫瘤大?。旱陀? cm 13例，2～5 cm 15例，超過5 cm 23例；病理類型：浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌40例，浸潤(rùn)性微乳頭狀癌7例，浸潤(rùn)性小葉癌4例。觀察組：年齡33～58歲，平均年齡(41.9±5.2)歲；月經(jīng)情況：絕經(jīng)前期40例，絕經(jīng)后期11例；腫瘤大?。旱陀? cm 15例，2～5 cm 14例，超過5 cm 22例；病理類型：浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌38例，浸潤(rùn)性微乳頭狀癌8例，浸潤(rùn)性小葉癌5例。2組患者年齡、月經(jīng)情況、腫瘤大小、病理類型比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。見表1。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

1.2.1 納入標(biāo)準(zhǔn)：女性患者；乳腺癌的組織病理學(xué)分級(jí)G2～G3；無精神疾病，認(rèn)知功能正常者；簽署知情同意書且積極配合者。

1.2.2 排除標(biāo)準(zhǔn)：精神障礙者；不配合研究者；嚴(yán)重臟器功能異常者。

1.3 方法 接受新輔助化療的乳腺癌患者于化療前通過粗針穿刺的方式收集癌組織標(biāo)本，而未接受新輔助化療的乳腺癌患者則是在手術(shù)過程中收集癌組織標(biāo)本。將標(biāo)本放置在10%甲醛中固定，通過免疫組織化學(xué)二步法展開測(cè)定。病理標(biāo)準(zhǔn)常規(guī)處理，片厚切成3μm，脫蠟水化，置于枸櫞酸中煮沸8min，然后保溫10min左右，待其冷卻后滴加鼠抗人Ki67單克隆抗體和鼠抗人p53單克隆抗體(均由上海賓智生物科技有限公司生產(chǎn)提供)，置于溫度控制在5℃的濕盒內(nèi)過夜，第2天應(yīng)用磷酸緩沖液水洗，然后放置生物素標(biāo)記的二抗，并且在室溫下孵育20min，室溫下通過二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色10min，再次使用磷酸緩沖液沖洗，最后蘇木精復(fù)染并封片。測(cè)定過程中均包含陽(yáng)性對(duì)照，將辣根酶標(biāo)記鏈霉卵白素作為陰性對(duì)照組。細(xì)胞核著淺黃色、棕黃色以及棕褐色顆?？膳卸閜53和Ki67陽(yáng)性表達(dá)。同時(shí)根據(jù)陽(yáng)性細(xì)胞的比例計(jì)算p53和Ki67的表達(dá)程度，其中p53陽(yáng)性細(xì)胞比例0～25%為陰性，0～10%為“-”，10%～25%為“+”，p53陽(yáng)性細(xì)胞比例>25%則為陰性，26%～50%為“++”，而>50%則為“+++”；Ki67陽(yáng)性細(xì)胞的比例>14%屬于高表達(dá)，判定為陽(yáng)性，而Ki67陽(yáng)性細(xì)胞的比例≤14%則屬于低表達(dá)，判定為陰性。見圖1、2。

圖1 乳腺癌患者P53的陽(yáng)性表達(dá)(HE×400)

圖2 乳腺癌患者Ki-67的陽(yáng)性表達(dá)(HE×400)

1.4 觀察指標(biāo) 比較2組患者p53和Ki67的陽(yáng)性表達(dá)情況；分析三陰性乳腺癌p53和Ki67表達(dá)與年齡、組織學(xué)分級(jí)、脈管浸潤(rùn)、腫瘤直徑以及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移之間的關(guān)系；同時(shí)研究p53和Ki67表達(dá)與乳腺癌生存率之間的相關(guān)性，隨訪時(shí)間為3年。

2 結(jié)果

2.1 p53和Ki67的陽(yáng)性表達(dá)率比較 觀察組p53和Ki67的陽(yáng)性表達(dá)率高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

2.2p53和Ki67表達(dá)與相關(guān)因素的關(guān)系 三陰性乳腺癌患者的p53表達(dá)與組織學(xué)分級(jí)、脈管浸潤(rùn)、腫瘤直徑、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有密切聯(lián)系(P<0.05)，Ki67表達(dá)與組織學(xué)分級(jí)有密切聯(lián)系(P<0.05)。見表3。

表2 p53和Ki67的陽(yáng)性表達(dá)率比較 n=51,例(%)

表3 p53和Ki67表達(dá)與相關(guān)因素的關(guān)系 例(%)

3 討論

三陰性乳腺癌的發(fā)病率相對(duì)較低，約占乳腺癌的15%～25%[3]。由于三陰性乳腺癌PR、ER和HER-2均為陰性的特點(diǎn)[4]，使得患者無法接受針對(duì)HER-2 陽(yáng)性的靶向治療和激素受體PR、ER的內(nèi)分泌治療[5]，目前臨床上缺乏標(biāo)準(zhǔn)的治療措施，因而醫(yī)學(xué)界給予高度的重視。有研究認(rèn)為p53、Ki67高表達(dá)是三陰性乳腺癌特點(diǎn)之一，與患者病情的發(fā)展、預(yù)后存在密切聯(lián)系[3]，但是臨床上相關(guān)的報(bào)道并不多見。

有研究發(fā)現(xiàn)乳腺癌患者發(fā)生p53基因突變的風(fēng)險(xiǎn)十分高，約為60%左右，然而發(fā)生p53突變的乳腺癌腫瘤組織具有侵襲性強(qiáng)、易轉(zhuǎn)移、預(yù)后差的特點(diǎn)，且容易對(duì)化療藥物形成耐藥[6]。調(diào)查發(fā)現(xiàn)乳腺癌p53表達(dá)為陽(yáng)性患者的生存率受到嚴(yán)重影響，p53的表達(dá)情況是評(píng)估患者預(yù)后的重要指標(biāo)[7]。本研究結(jié)果顯示三陰性乳腺癌患者的p53的陽(yáng)性表達(dá)率高于非三陰性乳腺癌患者，且三陰性乳腺癌患者的p53表達(dá)與組織學(xué)分級(jí)、脈管浸潤(rùn)、腫瘤直徑、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有密切聯(lián)系(P<0.05)，一方面提示三陰性乳腺癌的病情更為嚴(yán)重，同時(shí)說明p53 可能與三陰性乳腺癌轉(zhuǎn)移率高、易復(fù)發(fā)、預(yù)后差存在關(guān)聯(lián)[8]。

Ki67抗原屬于核抗原，影響細(xì)胞的有絲分裂。Ki67的表達(dá)能夠體現(xiàn)出腫瘤的增殖能力，與腫瘤的進(jìn)展、轉(zhuǎn)移存在密切聯(lián)系，對(duì)于乳腺癌患者病情的評(píng)估、診治方面具有重要意義[9]。本次研究結(jié)果顯示三陰性乳腺癌患者的Ki67的陽(yáng)性表達(dá)率高于非三陰性乳腺癌患者，且三陰性乳腺癌患者的p53表達(dá)與組織學(xué)分級(jí)有密切聯(lián)系(P<0.05)，這說明三陰性乳腺癌患者的Ki67表達(dá)高，同時(shí)Ki67的表達(dá)受到組織學(xué)分級(jí)的影響，充分說明三陰性乳腺癌的細(xì)胞分化差、細(xì)胞增殖程度相對(duì)較高[10]，腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移和侵襲能力更強(qiáng)；Ki67的高表達(dá)是三陰性乳腺癌發(fā)生與發(fā)展的重要因素，也是誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞增殖、轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵因素，能夠有效評(píng)估三陰性乳腺癌的惡性程度[11]。

本研究結(jié)果顯示102例浸潤(rùn)性乳腺癌患者中，p53、Ki67表達(dá)陽(yáng)性患者的生存率低于p53、Ki67表達(dá)陰性性患者，且51例三陰性乳腺癌中p53和Ki67為陽(yáng)性患者的生存率更低，進(jìn)一步驗(yàn)證了三陰性乳腺癌的病情更加危重，且p53和Ki67的表達(dá)情況直接影響患者的預(yù)后。因而臨床上需要重視對(duì)乳腺癌患者p53和Ki67表達(dá)情況的檢測(cè)，尤其是三陰性乳腺癌患者，從而準(zhǔn)確掌握患者的病情、制定針對(duì)性的治療方案[12]。

1 田慧玲，周鳳華，鄭潔，等.Ki-67、AR及FRA在三陰性乳腺癌中的表達(dá)及意義.現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué)，2014，22:830-833.

2 管小青，鄭向欣，顧書成，等.三陰性乳腺癌組織中Ki67、p53的表達(dá)及臨床意義.現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué)，2015，23:786-791.

3 師衛(wèi)華，張艷.三陰性乳腺癌臨床病理特征及多種相關(guān)蛋白表達(dá)的意義.寧夏醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2015，37:181-184.

4 閆順朝，焦昕，李悅，等.p53 突變型乳腺癌中Ki67表達(dá)水平的臨床意義.現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué)，2014，22:310-313.

5 王齊敏，于香莉，呂麗，等.靶向治療藥物的分子靶點(diǎn)蛋白在三陰性乳腺癌中的表達(dá)及臨床意義.腫瘤學(xué)雜志，2014，20:710-714.

6 李志華，雷秋模，熊建萍.乳腺癌組織p53表達(dá)與新輔助化療療效相關(guān)性Meta分析.中華腫瘤防治雜志，2015，22:221-226.

7GongP，WangY，LiuG，etal.NewinsightintoKi67expressionattheinvasivefrontinbreastcancer.PLoSOne，2013，8:e54912.

8 徐婷，何奇，吳克瑾，等.三陰性乳腺癌中p53 和Ki67 表達(dá)的相關(guān)研究.上海交通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版)，2013，33:833-837.

9 宋魏，于慶凱.三陰乳腺癌組織中Ki67、KAI-1、c-kit的表達(dá)及臨床病理意義.中國(guó)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)管理，2016，7:182-183.

10 李鎖嚴(yán)，李占勇，李蕾，等.PARP-1和p53在三陰性乳腺癌中表達(dá)的相關(guān)性及臨床意義.現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué)，2014，22:70-74.

11KongB，LvZD，WangY，etal.Down-regulationofBRMS1byDNAhypermethylationanditsassociationwithmetastaticprogressionintriple-negativebreastcancer.Internationaljournalofclinicalandexperimentalpathology，2015，8:11076-11083.

12 程維剛，劉九洲，靳夢(mèng)琳，等.三陰性乳腺癌中p53蛋白產(chǎn)物的表達(dá)及其臨床意義.中華實(shí)驗(yàn)外科雜志，2016，33:939-941.

Expression and clinical significance of p53 and Ki67 in triple negative breast cancer

JIANGLi*,ZHANGJianping.

*DepartmentofPathology,People’sHospitalofLiyangCity,Jiangsu,Liyang213300,China

Objective To investigate the expression and clinical significance of p53 and Ki67 in patients with triple negative breast cancer.Methods One hundred and two patients with infiltrating breast carcinoma who were diagnosed by pathological examination in our hospital were randomly divided into two groups,in which 51 patients with triple negative breast cancer were in observation group,however, the other 51 patients with non-triple negative breast cancer were in control group.The expression levels of p53 and Ki67 were detected and compared between two groups.Moreover the correlation between the expressions of p53,Ki67 and patient’s age,histological grading,vascular invasion,tumor diameter and lymph node metastasis was analyzed,at the same time, the correlation between the expressions of p53,Ki67 and patient’s survival rate was analyzed.Results The positive expression rates of p53 and Ki67 in observation group were significantly higher than those in control group (P<0.05).Theexpressionofp53inobservationgroupwascloselycorrelatedtohistologicalgrading,vascularinvasion,tumordiameterandlymphnodemetastasis(P<0.05),andtheexpressionofKi67wascloselyrelatedwithhistologicalgrading(P<0.05).Among102patientswithinfiltratingbreastcarcinoma,thesurvivalrateinpatientswithpositiveexpressionofp53wasobviouslylowerthanthatofpatientswithnegativeexpressionofp53,moreover,thesurvivalrateinpatientswithpositiveexpressionofki67wassignificantlylowerthanthatofpatientswithnegativeexpressionofKi67 (P<0.05).Amongthepatientswithtriplenegativebreastcancer,thesurvivalrateinpatientswithpositiveexpressionofp53andki67wassignificantlylowerthanthatofpatientswithnegativeexpressionofp53andKi67 (P<0.05). Conclusion The positive expression rates of p53 and Ki67 are higher in patients with triple negative breast cancer,and the expressions of p53 and Ki67 play an important role in the ability of tumor proliferation,malignant degree of tumor and patient’s prognosis.

triple negative breast cancer; p53; Ki67;treatment outcome

10.3969/j.issn.1002-7386.2017.08.012

項(xiàng)目來源：上海市衛(wèi)生局青年科研項(xiàng)目(編號(hào):2011144)

213300 江蘇省溧陽(yáng)市人民醫(yī)院病理科(蔣麗)；復(fù)旦大學(xué)附屬華山醫(yī)院(張建平)

R

A

1002-7386(2017)08-1165-04

2016-11-11)