李旭蓉，李珊，陳麗，段華賓，胡立國(guó)

（張掖市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，甘肅張掖734000）

規(guī)模肉牛養(yǎng)殖場(chǎng)主要疫病免疫抗體檢測(cè)試驗(yàn)報(bào)告

李旭蓉，李珊＊，陳麗，段華賓，胡立國(guó)

（張掖市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，甘肅張掖734000）

為了進(jìn)一步掌握張掖市規(guī)模肉牛養(yǎng)殖場(chǎng)的疫情監(jiān)測(cè)工作，及時(shí)掌握疫情動(dòng)態(tài)和免疫效果，采集注射牛口蹄疫O型、A型、亞洲I型三價(jià)滅活疫苗；牛多殺性巴氏桿菌病滅活疫苗；牛無(wú)莢膜炭疽芽孢疫苗后的血清監(jiān)測(cè)免疫抗體，對(duì)我市甘州區(qū)和臨澤縣選擇規(guī)模肉牛繁育場(chǎng)，其中甘州2個(gè)（一場(chǎng)、二場(chǎng)）、臨澤一個(gè)（3場(chǎng)），每場(chǎng)分別采集3月齡以下哺乳犢牛、6-9月齡青年母牛或育成牛、15-18月齡青年母牛或育肥牛和生產(chǎn)母牛血清各108份，共1296份。應(yīng)用口蹄疫O型、A弄、亞洲I型抗體液相阻斷ELISA檢測(cè)方法，O型、I型、A型免疫抗體陽(yáng)性率分別為36.11%、34.57%、33.02%；95.37%、94.75%、92.9%；95.37%、95.06%、92.28%；96.6%、95.68%、93.83%。應(yīng)用牛多殺性巴氏桿菌抗體液相阻斷ELISA檢測(cè)方法，免疫抗體陽(yáng)性率為23.77%、91.98%、91.36%、92.9%、62.22%。應(yīng)用牛炭疽抗體液相阻斷ELISA檢測(cè)方法，免疫抗體陽(yáng)性率為21.91%、91.98%、91.67%、92.28%。除3月齡以下哺乳犢牛外，其他均達(dá)到農(nóng)業(yè)部和省獸醫(yī)局關(guān)于動(dòng)物群體免疫合格率≥70%為合格的規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)。

口蹄疫；牛多殺性巴氏桿菌；牛無(wú)莢膜炭疽芽孢；抗體；檢測(cè)

多年來(lái)，隨著農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)化經(jīng)濟(jì)的興起，我市的規(guī)模肉牛養(yǎng)殖生產(chǎn)進(jìn)入了加速發(fā)展的快車道，基本實(shí)現(xiàn)了由傳統(tǒng)的千家萬(wàn)戶散養(yǎng)、農(nóng)村適度規(guī)模飼養(yǎng)向集約化、規(guī)模化肉牛養(yǎng)殖轉(zhuǎn)變，在穩(wěn)定市場(chǎng)、增加農(nóng)民收入和建設(shè)社會(huì)主義新農(nóng)村方面發(fā)揮了重要作用。但是，隨著規(guī)模化、集約化程度的提高，牛病的發(fā)生，流行情況也變的更為復(fù)雜，給防控工作帶來(lái)了新的困難和挑戰(zhàn)，不僅制約著養(yǎng)牛業(yè)的健康可持續(xù)發(fā)展，也嚴(yán)重威脅著消費(fèi)者的身體健康。據(jù)調(diào)查：目前對(duì)我市肉牛產(chǎn)業(yè)存在嚴(yán)重威脅或潛在威脅的疫病主要為口蹄疫、巴氏桿菌病、炭疽病等疫病，因此，我們對(duì)以上疫病制定了免疫程序，并在生產(chǎn)中開展了較大規(guī)模的推廣應(yīng)用。為了驗(yàn)證制定的免疫程序在生產(chǎn)實(shí)踐中可靠和安全性，為今后進(jìn)一步開展綜合防控工作提供科學(xué)依據(jù)，我們于2014年開展了本試驗(yàn)研究，現(xiàn)將情況報(bào)告如下：

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 免疫疫苗口蹄疫O型、A型、亞洲I型三價(jià)滅活疫苗和牛多殺性巴氏桿菌病滅活疫苗，均由新疆天康畜牧生物技術(shù)股份有限公司生產(chǎn)；無(wú)莢膜炭疽芽孢疫苗，由青海生物藥品廠生產(chǎn)。以上疫苗均在2-8℃保存，其中口蹄疫O型、A型、亞洲I型三價(jià)滅活疫苗免疫期和有效期期分別為6個(gè)月、12個(gè)月，牛多殺性巴氏桿菌病滅活疫苗分別為為9個(gè)月、12個(gè)月，無(wú)莢膜炭疽芽孢疫苗分別為為12個(gè)月、24個(gè)月。

1.1.2 被檢血清 在我市甘州區(qū)和臨澤縣選擇3個(gè)年飼養(yǎng)一萬(wàn)頭以上的規(guī)模肉牛繁育場(chǎng)，其中甘州2個(gè)（一場(chǎng)、二場(chǎng)）、臨澤一個(gè)（3場(chǎng)），每場(chǎng)分別采集3月齡以下哺乳犢牛、6-9月齡青年母?；蛴膳?、15-18月齡青年母牛或育肥牛和生產(chǎn)母牛血清各108份，共1296份。每份血清不少于3ml,保存于4℃?zhèn)錂z，防止反復(fù)凍融。

1.1.3 檢測(cè)試劑 口蹄疫O型、A型、亞洲I型抗體液相阻斷ELISA檢測(cè)試劑盒，由中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所生產(chǎn);牛多殺性巴氏桿菌抗體ELISA檢測(cè)試劑盒和牛炭疽抗體ELISA檢測(cè)試劑盒，均由上海潤(rùn)裕生物科技有限公司生產(chǎn)。

1.2 方法

1.2.1 免疫程序及方法 新生犢牛3月齡斷奶時(shí)分別依次免疫口蹄疫O型、A型、亞洲I型三價(jià)滅活疫苗、牛多殺性巴氏桿菌病滅活疫苗和無(wú)莢膜炭疽芽孢疫苗各一次，每種疫病免疫間隔時(shí)間一周。青年母牛和育肥牛9月齡免疫口蹄疫O型、A型、亞洲I型三價(jià)滅活疫苗一次，以后每半年免疫一次；15月齡分別依次免疫牛多殺性巴氏桿菌病滅活疫苗和無(wú)莢膜炭疽芽孢疫苗各一次，免疫間隔時(shí)間一周。妊娠母牛在配種前免疫口蹄疫O型、A型、亞洲I型三價(jià)滅活疫苗一次，妊娠后120天再免疫一次；分娩7天后，分別依次免疫A、O和亞洲I型三聯(lián)苗、牛巴氏桿菌苗、無(wú)莢膜炭疽芽孢疫苗各一次，免疫間隔時(shí)間一周。口蹄疫O型、A型、亞洲I型三價(jià)滅活疫苗每頭牛每次頸部肌肉注射3ml；牛多殺性巴氏桿菌病滅活疫苗皮下或肌肉注射，體重100kg以下牛每頭4ml，體重100 kg以上牛每頭6ml；無(wú)莢膜炭疽芽孢疫苗皮下注射，一歲以下牛每頭0.5ml，一歲以上牛每頭1ml。所有免疫牛佩戴免疫標(biāo)示牌，并做好免疫檔案登記工作。免疫時(shí)仔細(xì)觀察牛群，對(duì)發(fā)病牛、懷孕牛和哺乳犢牛謹(jǐn)慎免疫；免疫前，仔細(xì)觀察疫苗瓶，檢查封口、膠蓋是否封閉嚴(yán)密，若有裂紋、瓶中含有異物、霉團(tuán)及搖不散的凝塊等，均不能使用；觀察瓶簽是否完整，是否注明名稱、廠名、批號(hào)、使用方法及有效期，不使用過期疫苗；稀釋過的疫苗要在規(guī)定時(shí)間內(nèi)用完，超時(shí)應(yīng)廢棄。

1.2.2 血清學(xué)檢測(cè)方法 O型、A型、亞洲I型口蹄疫應(yīng)用相阻斷ELISA方法檢測(cè)，牛多殺性巴氏桿菌和炭疽病應(yīng)用ELISA方法檢測(cè)；診斷試劑均在有效期內(nèi)使用，并嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行操作和結(jié)果判定。

2 結(jié)果

從檢測(cè)結(jié)果統(tǒng)計(jì)表中可以看出，口蹄疫免疫抗體O型陽(yáng)性率為80.86%、亞洲I型為80.02%，A型為78.01%；巴氏桿菌病免疫抗體陽(yáng)性率為75%，炭疽病免疫抗體陽(yáng)性率為74.46%。按照農(nóng)業(yè)部和省獸醫(yī)局關(guān)于動(dòng)物群體免疫合格率≥70%為合格的規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)，說明群體合格率都已超出規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)。特別是生產(chǎn)母牛、6-12月齡、13-18月齡的母牛，口蹄疫O型、亞洲I型、A型免疫抗體陽(yáng)性率均在92%以上；巴氏桿菌病免疫抗體陽(yáng)性率均在91%%以上；炭疽病免疫抗體陽(yáng)性率均在91%以上。免疫效果非常好，3月齡以下的哺乳犢牛，口蹄疫O型陽(yáng)性率為36.11%、亞洲I型為34.57%，A型為33.02%；巴氏桿菌病陽(yáng)性率為23.77%；炭疽病陽(yáng)性率為21.91%。由于在哺乳期，沒有進(jìn)行免疫，雖然它的母源抗體是存在的，但也不排除感染疫病的風(fēng)險(xiǎn)。

3 小結(jié)與討論

3.1 通過免疫抗體監(jiān)測(cè)可以準(zhǔn)確掌握疫情動(dòng)態(tài)，科學(xué)指導(dǎo)臨床免疫，合理選擇疫苗，制定免疫程序，保證免疫的有效性。從以上表中可以看出口蹄疫、巴氏桿菌病、炭疽病免疫抗體陽(yáng)性率均達(dá)到農(nóng)業(yè)部和省獸醫(yī)局關(guān)于動(dòng)物群體免疫合格率≥70%為合格的規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)，說明此試驗(yàn)制定的免疫程序及方法是科學(xué)合理的，雖沒有統(tǒng)一的免疫程序，但各場(chǎng)應(yīng)根據(jù)實(shí)際不斷總結(jié)實(shí)踐，進(jìn)行免疫抗體監(jiān)測(cè)，制定或修改免疫程序。并通過免疫抗體監(jiān)測(cè)能有效評(píng)估疫苗的免疫效果，能及時(shí)發(fā)現(xiàn)問題并開展補(bǔ)免工作，不容易給防控工作帶來(lái)漏洞以便找到更適于生產(chǎn)實(shí)踐操作的免疫方法，為動(dòng)物疫病防控提供一定的指導(dǎo)意義。

3.2 3 月齡以下的哺乳犢牛，在哺乳期，犢牛免疫系統(tǒng)非常幼稚，其免疫應(yīng)答反應(yīng)過程也不完善，來(lái)不及免疫就有可能發(fā)病，存在發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)，到底母源抗體能起多大保護(hù)作用和保護(hù)多長(zhǎng)時(shí)間還真不好說，所以能否研制出適合哺乳期更安全，更可靠的弱毒疫苗，在哺乳期間進(jìn)行疫苗免疫還不受母源抗體的干擾而導(dǎo)致免疫應(yīng)答受阻。這樣在哺乳期就可以進(jìn)行疫苗免疫，從而大大降低一些疫病對(duì)犢牛的侵害。

3.3 免疫接種是防止疫病發(fā)生的一種即經(jīng)濟(jì)又簡(jiǎn)便的有效手段，是預(yù)防和控制該幾類病的根本措施。必須使用經(jīng)國(guó)家批準(zhǔn)生產(chǎn)或已注冊(cè)的疫苗，做好免疫接種工作，建立完整的免疫檔案。此外，還應(yīng)加強(qiáng)各項(xiàng)科學(xué)管理措施，提高飼養(yǎng)水平，盡量減少和防止這幾類病的傳播。

口蹄疫、巴氏桿菌病、炭疽病免疫抗體統(tǒng)計(jì)表 單位：頭、%

[1]賀奮義,郭慧琳.肉牛接種口蹄疫O、A、亞I型三價(jià)滅活疫苗的免疫效果試驗(yàn)[J].中國(guó)牛業(yè)科學(xué),2016,(01): 49-50.

[2]依穎新,齊景文,雷蕾,楊蘊(yùn)力.牛炭疽疫苗兩種免疫方式血清免疫抗體陽(yáng)性率對(duì)比研究[J].黑龍江畜牧獸醫(yī),2015,22:103-10435(5):19-21

[3]張麗鴻,張紅亮,田發(fā)益.西藏林芝地區(qū)黃牛多殺性巴氏桿菌病的流行病學(xué)調(diào)查及鑒定[J].甘肅畜牧獸醫(yī), 2014,11:44-46+50.

[4]王晉升,張晉.牛炭疽桿菌病的實(shí)驗(yàn)室診斷與防治[J].養(yǎng)殖技術(shù)顧問,2013,05:76

[5]徐春志,藺俐仲,方英,袁翠霞,白璧,余啟茂.奶?？谔阋吣冈纯贵w測(cè)定及三價(jià)滅活疫苗免疫效果評(píng)價(jià)[J].貴州畜牧獸醫(yī),2015,(02):1-3.

S858.23

B

1003-8655（2017）02-0094-02

李旭蓉(1970-),女,高級(jí)獸醫(yī)師,主要從事動(dòng)物疫病化驗(yàn).

＊執(zhí)筆作者：李珊(1986-),女,獸醫(yī)師,主要從事動(dòng)物疫病化驗(yàn).