喬連生+陳艷昆+雒剛剛+路芳+劉思佳+李貢宇+張燕玲

[摘要] 協(xié)同效應(yīng)是中藥發(fā)揮藥效的主要作用機(jī)制，結(jié)合關(guān)鍵靶標(biāo)組合探討中藥的協(xié)同效應(yīng)是闡釋中藥協(xié)同機(jī)制的有效方法之一。寡肽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（peptide transporter 1，PepT1）是藥物吸收入血的關(guān)鍵靶標(biāo)之一，約占總轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白含量的50%。過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體α（peroxisome proliferator-activated recepror α，PPARα）是貝特類(lèi)降脂藥物的作用靶點(diǎn)，其激動(dòng)劑具有良好的降血脂藥效。研究表明PPARα可反式激活PepT1的基因表達(dá)，PPARα激動(dòng)劑可促進(jìn)PepT1底物的吸收，從而共同發(fā)揮協(xié)同作用。因此，本研究擬基于PepT1和PPARα的靶標(biāo)組合，發(fā)現(xiàn)中藥活性成分中的PepT1底物和PPARα激動(dòng)劑，并在一定程度上探討中藥活性成分吸收入血與降低血脂的協(xié)同機(jī)制。該研究基于前期實(shí)驗(yàn)室已構(gòu)建的PPARα激動(dòng)劑的融合藥效團(tuán)模型，篩選潛在的具有PPARα激動(dòng)效應(yīng)的中藥活性成分，并追溯其來(lái)源中藥。同時(shí)構(gòu)建PepT1底物的支持向量機(jī)模型，預(yù)測(cè)中藥中潛在的PepT1底物。通過(guò)分析2組篩選結(jié)果，發(fā)現(xiàn)三七-靈芝、三七-丹參組合可能通過(guò)PepT1和PPARα協(xié)同機(jī)制發(fā)揮降脂藥效。該研究基于PepT1-PPARα的靶標(biāo)組合，探索中藥活性成分吸收與降脂藥效的協(xié)同機(jī)制，為基于靶標(biāo)組合探討中藥藥代動(dòng)力學(xué)參與的協(xié)同機(jī)制研究提供了一條新思路。

[關(guān)鍵詞] PepT1；PPARα；協(xié)同機(jī)制；SVM；融合藥效團(tuán)；分子對(duì)接；虛擬篩選

[Abstract] Synergistic effect is main pharmacological mechanism of traditional Chinese medicine（TCM）. The research method based on the key targets combination is an important method to explore the synergistic effect of TCM. Peptide transporter 1 （PepT1） is an essential target for drug uptake into the bloodstream，accounting for about 50% of the total transporter protein content from the small intestine. Peroxisome proliferator-activated receptor α（PPARα） is the lipid-lowering target of fibrates，which have a good hypolipidemic effect by activating PPARα. It has been reported that PPARα could activate the gene expression of PepT1s，and PPARα agonists can promote the uptake of PepT1 substrates，indicating their synergistic effect. In this paper，PepT1 substrates and PPARα agonists from TCM were discovered，and their synergistic mechanism was also been discussed based on the target combination of PepT1 and PPARα. The support vector machine（SVM） model of PepT1 substrates was first constructed and utilized to predict potential TCM components. Meanwhile，merged pharmacophore and docking model of PPARα agonists was used to screen the potential active ingredients from TCM. According to the analysis results of two groups，the TCM combination of Panax notoginseng and Ganoderma lucidum，as well as TCM combination of P. notoginseng and Salvia miltiorrhiza were identified to have the synergistic mechanism based on target combination of PepT1 and PPARα. In this study，synergistic mechanism of TCM was analyzed for absorption and hypolipidemic effect based on target combination，which provides a new way to explore the synergetic mechanism of TCM related to pharmacokinetics.

[Key words] PepT1；PPARα；synergistic mechanism；SVM；merged pharmacophore；docking；virtual screening

中藥協(xié)同效應(yīng)研究是中藥物質(zhì)基礎(chǔ)與作用機(jī)制研究的關(guān)鍵，已有研究多是從經(jīng)典方劑或藥對(duì)出發(fā)，解析其化學(xué)組成與物質(zhì)基礎(chǔ)，進(jìn)一步探討其發(fā)揮藥理作用的分子機(jī)制，并闡明其協(xié)同效應(yīng)[1-2]。本研究擬采用逆向的研究思路，即從藥物靶標(biāo)組合出發(fā)，結(jié)合分子模擬技術(shù)，發(fā)現(xiàn)潛在的中藥活性成分，并在靶標(biāo)組合的基礎(chǔ)上探討中藥的協(xié)同機(jī)制。傳統(tǒng)的靶標(biāo)組合概念特指具有治療效應(yīng)的靶標(biāo)之間的組合，隨著概念的延伸，治療靶標(biāo)與吸收、轉(zhuǎn)運(yùn)、代謝等靶標(biāo)之間組合也被稱為靶標(biāo)組合[3-4]。本研究選擇的研究載體為寡肽轉(zhuǎn)運(yùn)體（peptide transporter 1，PepT1）和過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體α（peroxisome proliferator-activated receptor α，PPARα）的靶標(biāo)組合。PepT1主要存在于生物體的小腸部位，是經(jīng)典的藥物轉(zhuǎn)運(yùn)體，具有極寬泛的底物譜，是多種藥物吸收入血的重要途徑，約占總轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白含量的50%[5]。PPARα是經(jīng)典的降脂靶標(biāo)，其激動(dòng)劑貝特類(lèi)藥物具有明確的降脂藥效，其降脂機(jī)制有別于抑制膽固醇合成通路的HMG-CoA還原酶抑制劑，PPARα激動(dòng)劑可通過(guò)調(diào)節(jié)血脂的代謝通路從而發(fā)揮降脂的藥效。研究表明PPARα具有調(diào)節(jié)多種腸道轉(zhuǎn)運(yùn)體，尤其是PepT1表達(dá)的效應(yīng)，部分PPARα激動(dòng)劑也被證明具有促進(jìn)PepT1底物吸收的效應(yīng)[6-8]，因此，基于此靶標(biāo)組合探討中藥吸收入血與降低血脂的協(xié)同機(jī)制對(duì)中藥藥代動(dòng)力學(xué)參與的中藥協(xié)同機(jī)制分析具有重要意義。

本研究針對(duì)PepT1和PPARα的靶標(biāo)組合，首先構(gòu)建PepT1底物預(yù)測(cè)的支持向量機(jī)模型（support vector machine，SVM），并通過(guò)多種內(nèi)測(cè)及外測(cè)參數(shù)挑選最優(yōu)的SVM模型?；谧顑?yōu)的SVM模型篩選中藥中潛在的PepT1底物成分。隨后，進(jìn)一步結(jié)合實(shí)驗(yàn)室已構(gòu)建的PPARα激動(dòng)劑的融合藥效團(tuán)模型和分子對(duì)接模型，篩選中藥中潛在的PPARα激動(dòng)活性成分。追溯2個(gè)靶標(biāo)篩選到的活性成分的來(lái)源中藥，并結(jié)合文獻(xiàn)探討高頻中藥在方劑和藥對(duì)中可能存在的協(xié)同機(jī)制，從PepT1和PPARα靶標(biāo)組合的角度出發(fā)，闡釋中藥吸收入血與降低血脂的協(xié)同機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 PepT1支持向量機(jī)模型的構(gòu)建與驗(yàn)證

1.1.1 數(shù)據(jù)收集與整理 本文從文獻(xiàn)[9-11]中收集PepT1底物共計(jì)90個(gè)，以此作為陽(yáng)性化合物構(gòu)建PepT1支持向量機(jī)模型。陰性化合物來(lái)源于Drugbank數(shù)據(jù)庫(kù)（http：//www.drugbank.ca/）中的非PepT1轉(zhuǎn)運(yùn)的已上市藥物。首先，利用Discovery Studio 4.0軟件計(jì)算所有化合物的8個(gè)類(lèi)藥性質(zhì)描述符，包括AlogP、相對(duì)分子質(zhì)量、氫鍵供體數(shù)目、氫鍵受體數(shù)目、可旋轉(zhuǎn)鍵數(shù)目、脂環(huán)數(shù)目、芳環(huán)數(shù)目、分子極性比表面積。隨后利用8個(gè)描述符，基于主成分分析方法描述化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)空間分布[12]。通過(guò)比較陽(yáng)性化合物和陰性化合物化學(xué)空間的差異，利用隨機(jī)選取和等距離抽樣的方式挑選用于建模的陰性化合物，并利用KS方法實(shí)現(xiàn)化合物數(shù)據(jù)集的劃分。為使訓(xùn)練集具有較好的代表性，數(shù)據(jù)集劃分應(yīng)保證訓(xùn)練集中陽(yáng)性化合物和陰性化合物的比例約為1∶1，內(nèi)部測(cè)試集中陽(yáng)性樣本和陰性樣本的比例約為1∶3，外部測(cè)試集中陽(yáng)性樣本和陰性樣本的比例約為1∶3。

1.1.2 模型的建立 本文利用Dragon 2.1軟件計(jì)算用于構(gòu)建模型的化合物的1 481個(gè)分子描述符，并利用Weka 3.6.10的BestFirst-D1-N5搜索方法和CfsSubsetEval-P1-E1評(píng)估方法，針對(duì)訓(xùn)練集和內(nèi)部測(cè)試集的分子描述符，進(jìn)行降維并去除冗余，得到與所構(gòu)建模型最相關(guān)的分子描述符子集。本研究基于訓(xùn)練集化合物利用SVM建立定性預(yù)測(cè)模型。實(shí)驗(yàn)所用SVM算法采用臺(tái)灣大學(xué)林智仁提供的網(wǎng)絡(luò)共享算法libsvm3.1（http：//www.csie.ntu.edu.tw/～cjlin/libsvm/），并將3種歸一化數(shù)據(jù)處理方法和4種模型參數(shù)尋優(yōu)方法組合并進(jìn)行建模，通過(guò)比較各模型訓(xùn)練集、內(nèi)部測(cè)試集和外部測(cè)試集的評(píng)價(jià)參數(shù)，得到最優(yōu)建模組合。歸一化數(shù)據(jù)處理中包括3種處理方法：不處理、[0，1]歸一化和[-1，1]歸一化。模型參數(shù)尋優(yōu)處理中選用RBF核函數(shù)，4種參數(shù)尋優(yōu)方法包括：不處理，GS，PSO和GA。3種數(shù)據(jù)處理方式與4種參數(shù)尋優(yōu)方法排列組合共計(jì)構(gòu)建12個(gè)SVM模型[13]。其中，尋優(yōu)參數(shù)（C，γ）的選擇采用逐一交叉驗(yàn)證的方法確定C和γ，取均方根（RMS）最小時(shí)的C和γ值，以防止訓(xùn)練集在過(guò)擬合的情況下找到最優(yōu)參數(shù)。綜合考慮各模型間訓(xùn)練集、外部測(cè)試集和內(nèi)部測(cè)試集的優(yōu)劣，選擇最優(yōu)實(shí)驗(yàn)方案。

1.1.3 模型的驗(yàn)證 針對(duì)已構(gòu)建的12個(gè)SVM模型，首先利用內(nèi)部測(cè)試集對(duì)模型進(jìn)行評(píng)價(jià)，評(píng)價(jià)指標(biāo)包括準(zhǔn)確率（ACC）、靈敏度（SE）和特異性（SP）。各項(xiàng)指標(biāo)數(shù)值越大，模型性能越好。計(jì)算公式為（1）～（3）[14]。其中TP為真陽(yáng)化合物數(shù)目，TN為真陰化合物數(shù)目，F(xiàn)P為假陽(yáng)化合物數(shù)目，F(xiàn)N為假陰化合物數(shù)目。

ACC=（TP+TN）/（TP+FN+TN+FP）（1）

SE=TP/（TP+FN）（2）

SP=TN/（TN+FP）（3）

隨后利用外部測(cè)試集對(duì)模型進(jìn)行評(píng)價(jià)。評(píng)價(jià)指標(biāo)同樣包括：ACC，SE和SP。同時(shí)，繪制外部測(cè)試集的ROC曲線，并計(jì)算其曲線下面積（AUC）值，從而共同說(shuō)明模型的準(zhǔn)確性。隨后，利用獲得的最優(yōu)PepT1底物判別模型預(yù)測(cè)中藥化學(xué)成分?jǐn)?shù)據(jù)庫(kù)（TCMD）的成分，追溯其來(lái)源中藥，分析高頻中藥的藥性及功能主治，通過(guò)文獻(xiàn)驗(yàn)證，說(shuō)明篩選結(jié)果的合理性。

1.2 基于PepT1-PPARα的協(xié)同機(jī)制解析

利用實(shí)驗(yàn)室前期已構(gòu)建的PPARα激動(dòng)劑的融合藥效團(tuán)模型，篩選TCMD數(shù)據(jù)庫(kù)[15]。同時(shí)，結(jié)合PPARα激動(dòng)劑的分子對(duì)接篩選模型（PDB：3KDU），進(jìn)一步篩選藥效團(tuán)命中的潛在活性成分，并追溯篩選結(jié)果的來(lái)源中藥。隨后，針對(duì)PPARα激動(dòng)劑與PepT1底物的來(lái)源中藥，分析其相互關(guān)系，并討論具有PPARα激動(dòng)效應(yīng)的中藥成分對(duì)PepT1中藥底物吸收和藥效發(fā)揮的促進(jìn)作用，進(jìn)一步闡釋中藥協(xié)同作用機(jī)制。

2 結(jié)果與討論

2.1 PepT1的支持向量機(jī)模型

基于陰性化合物與陽(yáng)性化合物的化學(xué)空間分析，結(jié)合隨機(jī)選取和等距離抽樣的方式，共挑選150個(gè)陰性化合物用于SVM模型的構(gòu)建與驗(yàn)證，基于8個(gè)類(lèi)藥描述符進(jìn)行陰性與陽(yáng)性化合物的主成分分析結(jié)果見(jiàn)圖1。結(jié)果顯示，陽(yáng)性化合物的化學(xué)空間可以被陰性化合物所覆蓋，說(shuō)明研究所用數(shù)據(jù)集中的陰性和陽(yáng)性化合物在類(lèi)藥性質(zhì)上沒(méi)有明顯差異，能夠確保構(gòu)建的SVM模型的可靠性[16]。隨后基于KS方法進(jìn)行數(shù)據(jù)集的劃分，結(jié)果如下：訓(xùn)練集中包括60個(gè)陽(yáng)性化合物和60個(gè)陰性化合物，內(nèi)部測(cè)試集中包括15個(gè)陽(yáng)性化合物和45個(gè)陰性化合物，外部測(cè)試集中包括15個(gè)陽(yáng)性化合物和45個(gè)陰性化合物。本研究進(jìn)一步利用weka機(jī)器平臺(tái)進(jìn)行描述符的篩選，共獲得28個(gè)描述符，模型的描述符名稱見(jiàn)表1。

本研究進(jìn)一步結(jié)合3種數(shù)據(jù)處理方法與4種尋優(yōu)算法，構(gòu)建了12個(gè)SVM模型，12個(gè)模型的訓(xùn)練集、內(nèi)部測(cè)試集和外部測(cè)試集的準(zhǔn)確率見(jiàn)表2。通過(guò)綜合考慮各模型間訓(xùn)練集、內(nèi)部測(cè)試集和外部測(cè)試集的優(yōu)劣，選取6號(hào)模型為最優(yōu)模型。該模型對(duì)數(shù)據(jù)采用[0，1]歸一化處理和GS參數(shù)尋優(yōu)方法進(jìn)行建模，C為5.278，γ為1.741 1，得到模型自身預(yù)測(cè)ACC為96.67%。歸一化與參數(shù)尋優(yōu)結(jié)果見(jiàn)圖2。6號(hào)模型內(nèi)部測(cè)試集的SE和SP值分別為86.67%，80.00%，外部測(cè)試集的SE和SP值分別為86.67%，86.66%。根據(jù)測(cè)試集與訓(xùn)練集數(shù)據(jù)，對(duì)PepT1底物模型進(jìn)行ROC曲線分析，所得曲線下面積（AUC）為0.939，曲線見(jiàn)圖2。PepT1底物模型的ACC，SE，SP均在80%以上，AUC大于0.9，結(jié)果表明PepT1底物模型具有較好的預(yù)測(cè)能力。

2.2 PepT1底物與PPARα激動(dòng)劑的中藥活性成分篩選

利用已構(gòu)建的PepT1底物的SVM模型，篩選經(jīng)過(guò)類(lèi)藥五原則處理的TCMD數(shù)據(jù)庫(kù)，共獲得194個(gè)潛在的PepT1中藥底物，結(jié)果表明其可通過(guò)PepT1轉(zhuǎn)運(yùn)吸收入血，通過(guò)追溯來(lái)源中藥，排名前9的來(lái)源中藥見(jiàn)表3，其中，三七和鉤藤為常用降脂中藥[17]。同時(shí)，本研究通過(guò)PPARα激動(dòng)劑的藥效團(tuán)和分子對(duì)接模型的聯(lián)合篩選，共獲得潛在的中藥活性成分182個(gè)，結(jié)果表明其具有潛在的降脂藥理活性，排名前9的來(lái)源中藥見(jiàn)表3，其中，靈芝、五味子、羅漢果、茯苓、甘草和丹參為常用降脂中藥。由于PPARα激動(dòng)劑降脂機(jī)制有別于抑制膽固醇合成通路的HMG-CoA還原酶抑制劑，PPARα激動(dòng)劑可通過(guò)調(diào)節(jié)血脂的代謝途徑從而發(fā)揮降脂的藥效。因此，本文篩選結(jié)果中并未發(fā)現(xiàn)常用降脂中藥紅曲，中藥紅曲的降脂機(jī)制已經(jīng)部分解析，其主要成分洛伐他汀可通過(guò)抑制HMG-CoA還原酶阻斷膽固醇合成通路發(fā)揮降脂藥效，與本文所述機(jī)制激活甘油三酯與膽固醇的代謝通路不同。

本研究以命中的13個(gè)靈芝三萜中綜合打分最高的靈芝酸ε（CAS：294674-05-8）為例，展示靈芝三萜與PPARα激動(dòng)劑融合藥效團(tuán)及分子對(duì)接的匹配結(jié)果，結(jié)果見(jiàn)圖3。靈芝酸ε與藥效團(tuán)的匹配度（Fitvalue）為8.54，與分子對(duì)接打分（libdock score）為112.4。C-15的羰基氧與藥效團(tuán)的氫鍵受體特征具有良好匹配并與關(guān)鍵氨基酸SER280產(chǎn)生氫鍵作用[18]。同時(shí)，C-25的羧基與藥效團(tuán)的負(fù)電特征具有良好的匹配，且其羥基氧與THR279和CYS275產(chǎn)生氫鍵相互作用。

三七和靈芝分別是包含2個(gè)靶標(biāo)潛在活性成分?jǐn)?shù)最多的中藥。三七是常用的止血活血藥，具有明確的降血脂活性[19]，三七環(huán)肽是其主要成分之一[20]。

本研究PepT1底物預(yù)測(cè)模型命中了大量的三七環(huán)肽成分，說(shuō)明三七中環(huán)肽成分可能主要通過(guò)PepT1吸收入血，從而發(fā)揮藥效作用。靈芝具有明確的降血脂藥效[21]，本研究發(fā)現(xiàn)靈芝中大量的靈芝三萜具有較好的PPARα激動(dòng)效應(yīng)，說(shuō)明靈芝可能是通過(guò)激動(dòng)PPARα來(lái)調(diào)節(jié)血漿中甘油三酯和膽固醇的含量，從而發(fā)揮降脂藥效。靈芝-三七藥對(duì)是近年來(lái)發(fā)現(xiàn)的具有良好降脂藥效的藥對(duì)組合，如三七-靈芝孢子粉提取物[22]以及靈芝三七降壓片[23]均被證明有良好的降低甘油三酯和膽固醇的作用?；诒狙芯康念A(yù)測(cè)結(jié)果，靈芝中具有的潛在PPARα激動(dòng)效應(yīng)的靈芝三萜既能發(fā)揮良好的降脂效應(yīng)，同時(shí)又能調(diào)節(jié)PepT1轉(zhuǎn)運(yùn)體的表達(dá)，從而促進(jìn)三七環(huán)肽等PepT1底物的吸收入血，從而加強(qiáng)其降脂效應(yīng)。因此，靈芝與三七藥對(duì)的協(xié)同效應(yīng)，可能是其發(fā)揮藥效的主要機(jī)制之一。

丹參-三七配伍具有活血散瘀，理氣止痛之功效[24]。丹參-三七藥對(duì)是臨床常用治療心腦血管疾病的核心藥對(duì)之一，其主要參與組成包括復(fù)方丹參方和芪參益氣方等丹七類(lèi)方。基于本研究的預(yù)測(cè)結(jié)果，三七環(huán)肽可通過(guò)PepT1吸收入血，而丹參中部分成分也被發(fā)現(xiàn)具有潛在的PPARα激動(dòng)效應(yīng)，說(shuō)明激動(dòng)PPARα可能是丹參發(fā)揮降脂藥效的作用機(jī)制之一。針對(duì)丹七類(lèi)方的多項(xiàng)研究表明，丹七類(lèi)方具有良好的治療心腦血管疾病的藥效，其可以顯著降低血漿中膽固醇及甘油三酯含量[25-26]。通過(guò)本研究的篩選結(jié)果分析，丹七類(lèi)方發(fā)揮協(xié)同藥效的作用機(jī)制之一，可能是通過(guò)丹參中部分成分激動(dòng)PPARα，從而上調(diào)PepT1轉(zhuǎn)運(yùn)體的表達(dá)，促進(jìn)三七中環(huán)肽及其他成分的加速吸收，增強(qiáng)三七的藥理活性，因此進(jìn)一步針對(duì)丹七類(lèi)方的研究可以從其吸收機(jī)制出發(fā)，探討其吸收入血與降低血脂的協(xié)同機(jī)制。

3 結(jié)論

中藥協(xié)同機(jī)制的闡釋是中藥作用機(jī)制解析的關(guān)鍵。本研究從PepT1和PPARα的靶標(biāo)組合出發(fā)，構(gòu)建其底物及激動(dòng)劑的辨識(shí)模型。進(jìn)一步通過(guò)篩選中藥活性成分，追溯其來(lái)源中藥，在整體中藥的層次探討其協(xié)同機(jī)制。研究發(fā)現(xiàn)三七-靈芝和三七-丹參藥對(duì)含有可有效激活PepT1-PPARα靶標(biāo)組合的藥效成分，可能是協(xié)同發(fā)揮其吸收入血與降低血脂的藥效的機(jī)制之一，研究結(jié)果尚需進(jìn)一步的生物活性驗(yàn)證。本研究為從靶標(biāo)組合角度出發(fā)探討中藥協(xié)同機(jī)制提供了一個(gè)研究范例，為結(jié)合中藥活性成分的藥代動(dòng)力學(xué)性質(zhì)探討中藥增效機(jī)制提供了一個(gè)新的研究方法。

[參考文獻(xiàn)]

[1] Liu Y，Kong J M，Chia L S，et al. Synergistic effect of traditional Chinese medicine[J]. Asian J Chem，2007，19（2）：867.

[2] Jing Z，Zhou T，Chen M，et al. Research progress on synergistic anti-tumor mechanisms of compounds in traditional Chinese medicine[J]. J TCM，2014，34（1）：100.

[3] Tiwari A K，Sodani K，Dai C L，et al. Nilotinib potentiates anticancer drug sensitivity in murine ABCB1-，ABCG2-，and ABCC10-multidrug resistance xenograft models [J]. Cancer Lett，2013，328（2）：307.

[4] Cavalli A，Bolognesi M. Neglected tropical diseases： multi-target-directed ligands in the search for novel lead candidates against trypanosoma and leishmania[J]. J Med Chem，2009，52（23）：7339.

[5] Drozdzik M，Grer C，Penski J，et al. Protein abundance of clinically relevant multidrug transporters along the entire length of the human intestine[J]. Mol Pharm，2014，11（10）：3547.

[6] Okamura A，Koyanagi S，Dilxiat A，et al. Bile acid-regulated PPARα activity underlies circadian expression of intestinal peptide absorption transporter PepT1/Slc15a1[J]. J Biol Chem，2014，289（36）：25296.

[7] Shimakura J，Terada T，Saito H，et al. Induction of intestinal peptide transporter 1 expression during fasting is mediated via peroxisome proliferator-activated receptor alpha[J]. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol，2006，291（5）：851.

[8] Madsen S L，Wong E A. Expression of the chicken peptide transporter 1 and the peroxisome proliferator-activated receptor α following feed restriction and subsequent refeeding[J]. Poultry Sci，2011，90（10）：2295.

[9] Biegel A，Knütter I，Hartrodt B，et al. The renal type H+/peptide symporter PEPT2： structure-affinity relationships[J]. Amino Acids，2006，31（2）：137.

[10] 孫冬黎，曾蘇，蔣惠娣.人寡肽轉(zhuǎn)運(yùn)體hPepT1及其在前藥設(shè)計(jì)中的應(yīng)用[J].中國(guó)藥學(xué)雜志，2011，46（3）：161.

[11] Xuan S，Wang M，Kang H，et al. Support vector machine（SVM） models for predicting inhibitors of the 3′processing step of HIV-1 integrase[J]. Mol Informatics，2013，32（9/10）：811.

[12] Zheng C S，Xu X J，Ye H Z，et al. Computational approaches for exploring the potential synergy and polypharmacology of Duhuo Jisheng Decoction in the therapy of osteoarthritis[J]. Mol Med Rep，2013，7（6）：1812.

[13] Qiao L S，Zhang X B，Jiang L D，et al. Identification of potential ACAT-2 selective inhibitors using pharmacophore，SVM and SVR from Chinese herbs[J]. Mol Divers，2016，20：933.

[14] 張景芳，蔣蘆荻，張燕玲. 支持向量機(jī)在中藥神經(jīng)毒性成分篩查中的應(yīng)用[J]. 中國(guó)中藥雜志，2014，39（17）：3330.

[15] Qiao L S，He Y S，Huo X Q，et al. Construction and evaluation of merged pharmacophore based on peroxisome proliferator receptor-alpha agonists[J]. Chin J Chem Physics，2016，29（4）：508.

[16] 鄭春松，葉蕻芝，劉獻(xiàn)祥，等. 海桐皮湯治療骨性關(guān)節(jié)炎的化學(xué)空間及多靶點(diǎn)效應(yīng)分析[J]. 中國(guó)臨床藥理學(xué)與治療學(xué)，2009，14（1）：67.

[17] 鐘周，周鴻圖，胡志希，等. 140味降脂中藥治療高脂血癥的用藥規(guī)律分析[J]. 湖南中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2015，35（1）：64.

[18] Dhoke G V，Gangwal R P，Sangamwar A T. A combined ligand and structure based approach to design potent PPAR-alpha agonists[J]. J Mol Struct，2012，1028（28）：22.

[19] 孫欣峰，吳立明，郝芬蘭.降脂中藥的研究現(xiàn)狀及展望[J].中國(guó)中醫(yī)藥信息雜志，2001，8（1）：25.

[20] 蘇磊，姜艷艷，劉斌.《中國(guó)藥典》收錄的植物類(lèi)中藥中含有的寡肽類(lèi)成分[J].中國(guó)中藥雜志，2016，41（16）：2943.

[21] 唐粉芳，郭豫，張靜，等.靈芝菌絲體降脂作用的實(shí)驗(yàn)研究[J].食品科學(xué)，2003，24（4）：145.

[22] 王亞?wèn)|，王海玉，張桂霞，等. 三七和靈芝孢子粉提取物對(duì)高血脂模型大鼠降血脂作用的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 實(shí)用預(yù)防醫(yī)學(xué)，2006，13（6）：1452.

[23] 雷曉林，劉偉，王瑞丞.靈芝三七降脂片對(duì)高脂血癥大鼠降血脂作用的實(shí)驗(yàn)研究[J].中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥，2009，4（16）：24.

[24] 陳銳娥，申?yáng)|艷，李鵬，等.中藥藥對(duì)的系統(tǒng)研究（Ⅴ）——丹參三七藥對(duì)研究[J].世界科學(xué)技術(shù)——中醫(yī)藥現(xiàn)代化，2012，14（2）：1342.

[25] 羅穎穎，陳蘭英，龔琴，等.冠心丹參片對(duì)高脂大鼠球囊損傷術(shù)后血管內(nèi)膜增生的影響[J]. 中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2011（23）：203.

[26] 佘奕鈿.丹七湯治療痰瘀互結(jié)型血脂異常的臨床觀察[D]. 廣州：廣州中醫(yī)藥大學(xué)，2010.

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