李雪花莫炫永王衍洪

順氣化痰片中馬來(lái)酸氯苯那敏的溶出度分析

李雪花1莫炫永2王衍洪3

目的為提高順氣化痰片質(zhì)量，對(duì)順氣化痰片中馬來(lái)酸氯苯那敏的溶出度含量采用高效液相色譜法（HPLC）進(jìn)行測(cè)定。方法以0.1 mol/L HC1 100 ml為溶劑，轉(zhuǎn)速為100 r/min，進(jìn)行了溶出度測(cè)定法操作，45分鐘取樣，采用Waters C18色譜柱（3.0 mm×100 mm，3.5 μm），以甲醇-0.05 mol/L磷酸二氫鈉（40:60）10%磷酸調(diào)節(jié)pH為3.0為流動(dòng)相，0.3 ml/min的流速，波長(zhǎng)264 nm。結(jié)果順氣化痰片中馬來(lái)酸氯苯那敏的平均回收率為99.74%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）=0.7%，馬來(lái)酸氯苯那敏的線性范圍為0.75～60 μg/ml（r=0.9997）。結(jié)論HPLC法簡(jiǎn)便、靈敏、準(zhǔn)確，適用于順氣化痰片馬來(lái)酸氯苯那敏的溶出度測(cè)定。

溶出度；高效液相色譜法；順氣化痰片；馬來(lái)酸氯苯那敏

順氣化痰片為祛痰類中西成藥[1]，包括馬來(lái)酸氯苯那敏、氨茶堿兩種西藥及中藥松塔、黃荊子、車前草、甘草，臨床主要用于治療上呼吸道感染、急慢性氣管炎咳嗽痰多、胸悶氣急。其中含馬來(lái)酸氯苯那敏劑量為0.5 mg，易受干擾而不易檢測(cè)。為地方標(biāo)準(zhǔn)上升為國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)（試行）后轉(zhuǎn)正的標(biāo)準(zhǔn)，標(biāo)準(zhǔn)中馬來(lái)酸氯苯那敏的溶出度沒有測(cè)定方法[2-5]。本實(shí)驗(yàn)采用溶出度方法，再用高效液相色譜法（HPLC）對(duì)馬來(lái)酸氯苯那敏的溶出量進(jìn)行檢測(cè)，該方法重復(fù)性良好、簡(jiǎn)單，為控制其在順氣化痰片的劑量提供了依據(jù)。

1 儀器及試藥

1200 RRLC型高效液相色譜儀帶二極管陣列檢測(cè)器及OPANLABEZChrom工作站（Agilent公司）；CPA 225 D電子天平（賽多利斯公司）；甲醇為色譜純（德國(guó)CNW technologies），超純水，其他試劑為分析純；馬來(lái)酸氯苯那敏對(duì)照品（中國(guó)食品藥品檢定研究院，批號(hào)：100047-201507）；順氣化痰片（江蘇中興藥業(yè)有限公司，批號(hào)：150221、150611、150802）。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件 色譜柱：XBridge C18（3.0 mm×100 mm，3.5 μm）；流動(dòng)相：甲醇-0.05 mol/L磷酸二氫鈉（40:60），10%磷酸調(diào)節(jié)pH為3.0；流速：0.3 ml/min；波長(zhǎng)：265 nm；進(jìn)樣量：2 μl。

2.2 線性關(guān)系 精密稱取馬來(lái)酸氯苯那敏對(duì)照品10.03 mg，置于100 ml容量瓶中加甲醇溶解并稀釋至刻度作為對(duì)照品儲(chǔ)備液。精密量取0.075、0.15、0.3、1.5、3.0、6.0 ml對(duì)照品儲(chǔ)備液，分別置于10 ml容量瓶中，加流動(dòng)相定容，搖勻。即按照2.1項(xiàng)下色譜條件檢測(cè)。以峰面積（Y）為縱坐標(biāo)，濃度（X）為橫坐標(biāo)，進(jìn)行線性回歸分析，得曲線方程為：Y=3.895×103X－4.680×104，r=0.9997。結(jié)果：在0.75～60 μg/ml范圍內(nèi)馬來(lái)酸氯苯那敏對(duì)照品濃度與峰面積具有良好的線性關(guān)系。

2.3 對(duì)馬來(lái)酸氯苯那敏進(jìn)行定性分析 在對(duì)照品和供試品色譜圖中氯苯那敏峰用二極管陣列檢測(cè)器掃描（掃描范圍190-400nm）確認(rèn)其掃描結(jié)果一致，從而確定為兩者是同一物質(zhì)，峰純度一致，未有其他雜質(zhì)，氯苯那敏對(duì)照品和樣品圖見圖1-2。

2.4 精密度與穩(wěn)定性試驗(yàn) 取2.2項(xiàng)下馬來(lái)酸氯苯那敏對(duì)照品溶液，濃度為15 μg/ml，連續(xù)進(jìn)針6次，測(cè)定峰面積，若主峰峰面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）小于2.0%，符合《中國(guó)藥典2015年版》四部通則0512高效液相色譜法的規(guī)定，則本法精密度良好。取同一供試品溶液分置6個(gè)進(jìn)樣瓶，然后室溫放置，每2小時(shí)測(cè)定1份。計(jì)算結(jié)果RSD為0.51%（n=6）；表明供試品溶液在12 h內(nèi)具良好穩(wěn)定性。

2.5 加樣回收率試驗(yàn) 精密量取已知含量的供試品溶液5 ml各5份，分別置于10 ml量瓶中，每份依次精密加入不同濃度的馬來(lái)酸氯苯那敏對(duì)照品溶液1 ml，加流動(dòng)相定容，搖勻，檢測(cè)。計(jì)算加樣回收率，結(jié)果見表1。

圖1 氯苯那敏對(duì)照品圖

圖2 順氣化痰片樣品圖

表1 加樣回收率試驗(yàn)(n=9)

2.6 樣品測(cè)定 順氣化痰片除去包衣20片，精密稱定，精密稱取研細(xì)粉適量（約為本品一片的量）置于25 ml容量瓶中，加甲醇15 ml，超聲30 min使溶解，放冷，加甲醇定容，搖勻，濾過。取續(xù)濾液10 ml置于25 ml量瓶中，加流動(dòng)相定容，搖勻，即得。取供試品溶液20 μl注入色譜儀，測(cè)定，按外標(biāo)法分別計(jì)算含量，結(jié)果見表2。

表2 樣品測(cè)定結(jié)果

2.7 溶出度測(cè)定

2.7.1 溶出度和均一性試驗(yàn) 按照溶出度與釋放度測(cè)定法（《中國(guó)藥典2015年版》四部通則0931第三法）操作，以0.1 mol/L HC1 100 ml為溶劑，轉(zhuǎn)速為每分鐘100 r，溫度（37.0±0.5）℃，在5、10、20、30、45 min分別取樣0.5 ml，濾過，按2.1項(xiàng)下測(cè)定并計(jì)算溶出量，結(jié)果見表3。

表3 溶出量和均一性試驗(yàn)結(jié)果

2.7.1 溶出介質(zhì)及攪拌槳轉(zhuǎn)速影響試驗(yàn) 分別用水及0.1 mol/L HC1為溶劑，轉(zhuǎn)速分別在50 r/min、100 r/min、150 r/min條件下，其他條件同3.1項(xiàng)，計(jì)算溶出量，結(jié)果見表4。

表4 不同溶出介質(zhì)、轉(zhuǎn)速對(duì)溶出量的影響

3 討論

對(duì)馬來(lái)酸氯苯那敏對(duì)照品溶液進(jìn)行190～400 nm掃描，在215 nm和265 nm波長(zhǎng)處均有最大吸收，檢測(cè)波長(zhǎng)選用265 nm波長(zhǎng)處的干擾少、HPLC圖譜分離效果較好。二級(jí)電離后其pKa值分別為2.00和6.26，在酸性pH下，馬來(lái)酸氯苯那敏離解為氯苯那敏陽(yáng)離子和馬來(lái)酸陰離子，為達(dá)理想的分離效果選用pH值為3的溶液。由于順氣化痰片中馬來(lái)酸氯苯那敏的含量較少，為提高檢測(cè)準(zhǔn)確度采用《中國(guó)藥典2015年版》四部通則0931溶出度與釋放度測(cè)定法第3法（小杯法）測(cè)定其溶出度。溶出介質(zhì)采用水和0.1 mol/L HC1對(duì)馬來(lái)酸氯苯那敏的溶出量影響不大，由于采用0.1 mol/L HC1作為溶劑更接近胃液pH值，其中由于中藥成分干擾，則10min溶出量達(dá)65%，30 min溶出量達(dá)86%，45 min溶出量達(dá)100%，且每片之間偏差越來(lái)越小。轉(zhuǎn)速越快，溶出速度越快，據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，轉(zhuǎn)速以100 r/min為佳。取樣時(shí)間點(diǎn)根據(jù)文獻(xiàn)[6]確定為45 min。由于順氣化痰片為中西成藥，中藥成分多，黏度較大，可影響馬來(lái)酸氯苯那敏溶出情況，從而影響藥物吸收和臨床療效。

因此，采用HPLC法測(cè)定順氣化痰片中的馬來(lái)酸氯苯那敏的溶出度研究具重要意義，準(zhǔn)確可靠，簡(jiǎn)單易行，可作為順氣化痰片的質(zhì)量控制依據(jù)。

[1] 陳黎,張紅梅.順氣化痰片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[J].江蘇大學(xué)學(xué)報(bào)醫(yī)學(xué)版,2003,13(2):164.

[2] 張紅梅,高潔麗.HPLC法測(cè)定順氣化痰片的含量及含量均勻度[J].中國(guó)藥師,2012,15(6):848-850.

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[6] 吳光辰,岳志偉.藥物固體制劑的溶出度[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1994:125.

HPLC determination of the dissolution of chlorphenamine maleate in Shunqi Huatan tablets

Li Xuehua Mo Xuanyong Wang Yanhong

ObjectiveTo establish an HPLC method for determination of chlorphenamine maleate in Shunqi Huatan tablets.Granules.MethodsThe dissolution rate was determined by HPLC,with 0.1 mol/L hydrochloric acid as dissolution medium and rotation speed at 1 00 r/min.The samples were separated by an Waters C18column(100×3.0 mm,3.5 μm)with methanol-0.05 mol/L NaH2PO4(40∶60),(adjusted pH to 3 with H3PO4)as nobile phase and detected at 264 nm for chlorphenamine maleate with a flow rate of 0.3ml/min.ResultsThe method had good linear relationship in the ranges of 0.75～60 μg/ml for chlorphenamine maleate(r=0.9997).The average recovery of chlorphenamine maleate was 99.74%(RSD=0.7%)in tablets.ConclusionThe HPLC method is simple,sensitive and accurate, suitable for shunqihuatan tablets of Chlorphenamine Maleate dissolution.

Dissolution;HPLC;Shunqi Huatan tablets;Chlorphenamine maleat

10.12010/j.issn.1673-5846.2017.06.007

1東城人民醫(yī)院，廣東東莞 523000

2東莞市國(guó)藥質(zhì)量檢測(cè)中心，廣東東莞 523010

3中山大學(xué)附屬東華醫(yī)院，廣東東莞 523000