范 亞， 吳 麗， 尹 嫻， 張 浪， 何 峰， 向梅先

(中南民族大學 藥學院， 武漢 430074)

豬殃殃酚類成分研究

范 亞， 吳 麗， 尹 嫻， 張 浪， 何 峰， 向梅先*

(中南民族大學 藥學院， 武漢 430074)

采用正相、反相硅膠柱色譜、葡聚糖凝膠柱、半制備高效液相色譜(HPLC)對豬殃殃氯仿和乙酸乙酯部位進行了化學成分的研究，分離得到了9個酚類化合物，分別為：對苯二甲酸二丁酯(1)，原兒茶酸丁酯(2)，原兒茶酸乙酯(3)，二氫咖啡酸乙酯(4)，順式咖啡酸乙酯(5)，沒食子酸甲酯(6)，7-羥基-6-甲氧基色酮(7)，1-丙烯酸-3-(3，4-二羥苯基)戊酯(8)，1-(3，4-二羥基苯)丙酮(9).這9個化合物都是首次從該屬植物中分離得到.

豬殃殃； 氯仿部位； 乙酸乙酯部位； 化學成分

豬殃殃(GaliumaparineLinn.var.tenerum(Gren.et Godr)Rchb.)是茜草科(Rubiaceae) 拉拉藤屬植物豬殃殃的干燥全草；又名拉拉藤、鋸鋸藤、活血草、鋸耳草、細葉茜草等.為多枝、蔓生或攀緣狀草本，常生于山坡、曠野、溝邊、河灘、田中、林緣、草地；豬殃殃為越年生或一年生草本攀援植物，經常和早熟禾、繁縷、野豌豆等農作物爭光、爭肥、爭水，主要危害小麥、蔬菜、油菜等植物.我國中南、華北、東北等地分布廣泛[1].據(jù)中華人民共和國藥典(1977年版)記載，豬殃殃的性味辛、苦、微涼，具有清熱解毒、敗毒抗癌、利尿消腫、化瘀等功效[2].民間主要用于醫(yī)治感冒、牙齦出血、泌尿感染、水腫、痛經、白帶等；其外用可治乳腺炎初起，跌打損傷.拉拉藤屬植物主要含有環(huán)烯醚萜類、蒽醌類、三萜類成分，此外還包括苯丙素類、生物堿類和其他類化合物.拉拉藤屬藥用植物的作用非常廣泛，多數(shù)具有清熱解毒，利尿通淋、活血通絡的作用，用于治療水腫、癰腫疔瘡、尿路感染、蟲蛇咬傷等.在民間廣泛用于治療感冒、急慢性闌尾炎、牙齦出血、崩漏、白血病及癌癥(乳腺癌、食道癌、子宮頸癌)；外用可治療乳腺炎初起、跌打瘀腫等，因此該屬植物是具有重要藥用價值的一個植物資源[3].豬殃殃這種農業(yè)常見雜草，卻擁有良好的抗腫瘤、抗氧化、殺菌抗炎等藥理作用，如果能夠將其加以利用，深入研究其所含的藥理成分以及藥效關系，將它開發(fā)成一味成熟的民族藥.這樣就可以收到既為農業(yè)除害、增加收成的同時，又能制成藥物、治病救人的雙贏效果.從目前文獻調研情況來看，有關豬殃殃的研究不是很多.基于此，本文對豬殃殃的化學成分進行了相關研究，采用正、反相硅膠柱層析、薄層色譜、半制備高效液相色譜、葡聚糖凝膠色譜等多種方法，從豬殃殃氯仿和乙酸乙酯部位分離得到并鑒定了9個化合物.化合物結構都經過EI-MS，13C NMR，1H NMR等確證.

1材料和方法

1.1材料

豬殃殃藥材采購自湖北天濟中藥飲片廠，經中南民族大學藥學院萬定榮教授鑒定為拉拉藤屬植物豬殃殃GaliumaparineL.var.tenerum(Gren.et Godr.)Rebb的干燥全草.

1.2儀器

Waters/Micromass Q-Tof-Ultima型質譜儀；Ultimate 3000型色譜儀；BrukerAM-500型核磁共振儀；101-OAB型電熱鼓風干燥箱；ZF-6型三用紫外光譜儀；YMC-Pack ODS-A(250×10mmL.D)色譜柱；上海亞榮生化儀器廠RE-52AA型旋轉蒸發(fā)儀；SHB-型循環(huán)水真空泵；KQ-500E型超聲波清潔器；CP 214型電子天平．

1.3試劑

二氯甲烷、氯仿、丙酮、甲酸、正丁醇(天津博迪)、石油醚、乙酸乙酯(國藥集團)為分析純，95%的乙醇為工業(yè)級，色譜級甲醇、乙腈(天地公司).柱層析用硅膠(100～200目，200～300目)，硅膠H高效預制板(青島海洋化工廠)．

1.4提取與分離

10 kg豬殃殃干燥全株打成粗粉，用95%乙醇加熱回流提取3次，第1次回流4 h，酒精量20 L；第2次回流3 h，酒精量為15 L；第3次2 h，酒精量為10 L.合并3次濾液，用旋蒸減壓濃縮，回收乙醇，干燥，得乙醇提取物總浸膏.總浸膏加蒸餾水(1∶1)制成混懸液，然后依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇進行萃取，回收溶劑后，得到各部分萃取濃縮物.

氯仿部位經硅膠柱色譜分離，用氯仿-甲醇梯度洗脫(100∶1， 80∶1， 50∶1， 40∶1， 30∶1， 20∶1， 10∶1， 9∶1， 8∶2， 7∶3， 6∶4， 4∶6， 0∶1)，流份再經葡聚糖凝膠柱、HPLC等反復純化，得化合物對苯二甲酸二丁酯(4.0 mg)、原兒茶酸丁酯(4.8 mg)、原兒茶酸乙酯(6.0 mg)、二氫咖啡酸乙酯(10 mg)、順式咖啡酸乙酯(7.2 mg)、沒食子酸甲酯(3.8 mg).

乙酸乙酯部位用正相硅膠柱分離，以氯仿-甲醇梯度洗脫(1∶0， 20∶1， 12∶1， 8∶1， 6∶1， 4∶1， 1∶1， 0∶1)，流份再經凝膠柱、正反硅膠柱色譜等分離純化，得化合物7-羥基-6-甲氧基色酮(9.8 mg)、1-丙烯酸-3-(3，4-二羥苯基)戊酯(12 mg)、1-(3′，4′-二羥基苯)丙酮(5.0 mg).

2結構鑒定與結果

2.1化合物(1)對苯二甲酸二丁酯(Dibutyl Phthalate)

EI-MS(m/z) :279[M+H]+1，149[M+H-C8H17O]+，121[M+H-C9H17O2]+.1H NMR(CD3OD，400M)δ:4.28(4H，t，H-1′，1″)，1.71(4H，m，H-2′，2″)，1.45(4H，m，H-3′，3″)，0.97(6H，td，H-4′，4″)，7.62(2H，m，H-3，7)，7.70(2H，m，H-4，6).13C NMR(CD3OD，100M)δ:167.67(C-1，8)，130.89(C-2，5)，132.40(C-3，7)，128.84(C-4，6)，5.53(C-1′，1″)，30.58(C-2′，2″)，19.12(C-3′，3″)，13.66(C-4′，4″).1H NMR和13C NMR數(shù)據(jù)與文獻[4]報道基本一致，故鑒定化合物1為對苯二甲酸二丁酯.

2.2化合物(2)原兒茶酸丁酯(Butyl protocatechuate)

EI-MS(m/z):210[M-H]-.1H NMR(CD3OD，400M)δ:0.99(3H，t，CH3-4′)，1.48(2H，m，CH2-3′)，1.72(2H，t，CH2-2′)，4.24(2H，t，CH2-1′)，6.79(1H，d，J=7.99，H-5)，7.39(1H，d，J=7.99，H-6)，7.41(1H，s，H-2).13C NMR(CD3OD，100M)δ:123.5(C-1)，117.6(C-2)，152.1(C-3)，145.8(C-4)，116.4(C-5)，122.3(C-6)，165.3(C-7)，65.9(C-1′)，31.7(C-2′)，19.3(C-3′)，16.1(CH3).1H NMR和13C NMR數(shù)據(jù)與文獻[5]報道基本一致，故鑒定化合物2為原兒茶酸丁酯.

2.3化合物(3)原兒茶酸乙酯(Ethyl protocatechuate)

EI-MS(m/z):181[M-H]-.1H NMR(CD3OD，400M)δ:1.31(3H，t，CH3)，3.67(2H，m，CH2)，6.73(1H，d，J=8.02，H-5)，7.35(1H，dd，J=2.15，8.02，H-6)，7.40(1H，d，J=2.15，H-2).13C NMR(CD3OD，100M)δ:14.8(CH3)，61.3(CH2)，123.7(C-1)，115.2(C-2)，151.3(C-3)，145.7(C-4)，117.6(C-5)，122.1(C-6)，166.5(C-7).1H NMR和13C NMR數(shù)據(jù)與文獻[6]報道基本一致，故鑒定化合物3為原兒茶酸乙酯.

2.4化合物(4)二氫咖啡酸乙酯(ethyl dihydrocaffeate)

EI-MS(m/z):209[M-H]-.1H NMR(CD3OD，400M)δ:1.31(3H，t，CH3)，2.83(2H，t，CH2-7)，2.92(2H，t，CH2-8)，4.65(2H，q，CH2-1′)，6.80(1H，d，J=8.11，H-5)，7.27(1H，dd，J=2.16，8.11，H-6)，7.34(1H，d，J=2.16，H-2).13C NMR(CD3OD，100M)δ:14.4(CH3)，61.0(C-1′)，127.6(C-1)，116.3(C-2)，146.4(C-3)，147.3(C-4)，119.5(C-5)，132.1(C-6)，31.8(C-7)，37.6(C-8)，171.2(C-9).1H NMR和13C NMR數(shù)據(jù)與文獻[7]報道基本一致，故鑒定化合物4為二氫咖啡酸乙酯.

2.5化合物(5)順式咖啡酸乙酯(cis-Caffeic acid ethyl ester)

EI-MS(m/z):207[M-H]-.1H NMR(CD3OD，400M)δ:1.56(3H，t，H-2′)，4.18(2H，q，H-1′)，5.93(1H，d，J=12.6，H-8)，6.78(1H，J=8.1，H-5)，6.97(1H，d，J=8.1，H-6)，7.34(1H，J=12.6，H-7)，7.21(1H，d，J=2.42，H-2).13C NMR(CD3OD，100M)δ:124.6(C-1)，117.6(C-2)，146.5(C-3)，144.3(C-4)，116.3(C-5)，128.3(C-6)，149.1(C-7)，118.4(C-8)，167.6(C-9)，59.6(C-1′)，13.7(C-2′).1H NMR和13C NMR數(shù)據(jù)與文獻[8]報道基本一致，故鑒定化合物5為順式咖啡酸乙酯.

2.6化合物(6)沒食子酸甲酯(methyl gallate)

EI-MS(m/z):184[M].1H NMR(CD3OD，400M)δ:3.8(3H，s，CH3)，7.02(2H，d，J=1.98，H-2，6).13C NMR(CD3OD，100M)δ:53.2(CH3)，121.5(C-1)，111.7(C-2，6)，145.6(C-3，5)，139.2(C-4)，169.4(C-7).1H NMR和13C NMR數(shù)據(jù)與文獻[9]報道基本一致，故鑒定化合物6為沒食子酸甲酯.

2.7化合物(7)7-羥基-6-甲氧基色酮(7-Hydroxy-6-methoxychromone)

EI-MS顯示分子離子峰為192.1H NMR(CD3OD，400M)δ:3.81(3H，s，CH3)，6.29(1H，d，J=9.63，H-2)，6.87(1H，s，H-8)，6.94(1H，s，H-5)，7.62(1H，d，J=9.63，H-1).13C NMR(CD3OD，100M)δ:56.4(OCH3)，107.5(C-1)，103.2(C-2)，161.1(C-3)，143.3(C-4)，113.4(C-5)，150.2(C-6)，144.0(C-7)，111.5(C-8)，149.7(C-9).1H NMR和13C NMR數(shù)據(jù)與文獻[10]報道基本一致，故鑒定化合物7為7-羥基-6-甲氧基色酮.

2.8化合物(8)1-丙烯酸-3-(3，4-二羥苯基)戊酯(1-Propenoic acid， 3-(3，4-dihydroxyphenyl)-pentyl ester)

EI-MS(m/z):249[M-H]-.1H NMR(CD3OD，400M)δ:0.97(3H，t，H-5′)，1.45(4H，m，H-3′，4′)，1.68(2H，t，H-2′)，4.17(2H，t，H-1′)，6.27(1H，d，J=16.14，H-8)，6.78(1H，d，J=8.41，H-5)，6.93(1H，dd，J=2.10，8.41，H-6)，7.02(1H，d，H-2)，7.50(1H，d，J=16.14，H-7).13C NMR(CD3OD，100M)δ:129.6(C-1)，117.4(C-2)，147.9(C-3)，145.0(C-4)，115.3(C-5)，123.1(C-6)，146.3(C-7)，114.1(C-8)，169.2(C-9)，64.2(C-1′)，29.6(C-2′)，22.7(C-3′)，21.4(C-4′)，13.7(C-5′).1H NMR和13C NMR數(shù)據(jù)與文獻[11]報道基本一致，故鑒定化合物8為1-丙烯酸-3-(3，4-二羥苯基)戊酯.

圖1 化合物的結構Fig.1 Structure of the compounds

2.9化合物(9)1-(3，4-二羥基苯)丙酮(3，4-Dihydroxypropiophenone)

EI-MS(m/z):166[M].1H NMR(CD3OD，400M)δ:1.31(3H，t，H-9)，3.67(2H，q，H-8)，6.72(1H，d，J=8.36，H-5)，7.35(1H，dd，J=2.01，8.36，H-6)，7.41(1H，d，J=2.01，H-2).13C NMR(CD3OD，100M)δ:131.4(C-1)，116.4(C-2)，151.3(C-3)，146.6(C-4)，123.7(C-5)，130.2(C-6)，201.0(C-7)，32.6(C-8)，9.3(C-9).1H NMR和13C NMR數(shù)據(jù)與文獻[12]報道基本一致，故鑒定化合9為1-(3，4-二羥基苯)丙酮.

3討論

茜草科拉拉藤屬植物豬殃殃原本為農業(yè)園林的害草，因其具有清熱解毒、消腫通淋的作用，民間較為常用.處于變廢為寶的考慮，擴大生藥基礎資源以及為治療疾病提供新的藥物研發(fā)途徑，本文系統(tǒng)地對豬殃殃進行了提取分離，囿于時間，只對其氯仿和乙酸乙酯部位進行了系統(tǒng)分離，鑒定出了9個化合物，分別為：對苯二甲酸二丁酯(1)，原兒茶酸丁酯(2)，原兒茶酸乙酯(3)，二氫咖啡酸乙酯(4)，順式咖啡酸乙酯(5)，沒食子酸甲酯(6)，7-羥基-6-甲氧基色酮(7)，1-丙烯酸-3-(3，4-二羥苯基)戊酯(8)，1-(3′，4′-二羥基苯)丙酮(9).所有化合物的結構如圖1所示.查閱文獻資料可知這9個化合物均為首次從該屬植物中得到，且除化合物(1)外，都是酚酸類成分，酚酸類成分大都具有抗炎、抗病毒、清除自由基、抗腫瘤等藥理作用[13].結合前人研究，說明豬殃殃作為民間草藥，其藥用價值大有開發(fā)潛力.如果對其進一步研究，也許會發(fā)現(xiàn)其更多的藥用成分，為進一步開發(fā)新藥提供思路，更加豐富我國的民族天然藥物儲備[14].

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Studies on chemical constituents ofGaliumaparine

FAN Ya， WU Li， YIN Xian， ZHANG Lang， HE Feng， XIANG Meixian

(School of Pharmaceutical Sciences， South-central University for Nationalities， Wuhan 430074)

Separation of chloroform and ethyl acetate fromGaliumversicolorL. was carried out by high performance liquid chromatography (HPLC) with normal phase， reverse phase silica gel column， sephadex column and semi-preparative high performance liquid chromatography. Nine compounds were isolated， dibutyl terephthalate (1)， protocatechuic acid ethyl ester (2)， ethyl protocatechuate (3)， dihydrocaffine ethyl ester (4)， cis-caffeic acid ethyl ester (5)， methyl gallate (6)， 7-hydroxy-6-methoxycarbonylketone (7)， 3-(3，4-dihydroxyphenyl) pentyl 1-propenoate (8) ，3′，4′-dihydroxybenzene) acetone (9)， all of which were isolated from this genus for the first time．

Galiumaparine; chloroform; ethyl acetate; chemical constituents

2017-01-08.

湖北省自然科學基金科技支撐項目(2015BCA268)；武漢市科技計劃項目(創(chuàng)新團隊)(2016070204020162); 湖北省自然科學基金項目(2016CFB648)．

10.19603/j.cnki.1000-1190.2017.04.008

1000-1190(2017)04-0461-04

O629.9

A

*通訊聯(lián)系人. E-mail: xiangmeixian99@163.com．