王保有周雙海

（1天津?qū)幒釉N豬場(chǎng)，天津?qū)幒?301504；2北京農(nóng)學(xué)院，北京 102206）

兩種豬圓環(huán)病毒2型疫苗臨床免疫效果的比較

王保有1周雙海2*

（1天津?qū)幒釉N豬場(chǎng)，天津?qū)幒?301504；2北京農(nóng)學(xué)院，北京 102206）

選取國(guó)內(nèi)商業(yè)PCV2疫苗A和B，在一個(gè)大型豬場(chǎng)進(jìn)行小型田間試驗(yàn)。將36頭母豬隨機(jī)平均分成3組，每組母豬所產(chǎn)仔豬在14日齡分別接種疫苗A（A組）、疫苗B（B組）、生理鹽水 （C組，對(duì)照）。采集免疫后不同時(shí)間的仔豬血清，檢測(cè)PCV2抗體，比較各組的發(fā)病率、死亡率與增重。結(jié)果顯示，接種疫苗組與對(duì)照組的仔豬發(fā)病率與死亡率都低、且無(wú)差異；但接種PCV2疫苗的兩組都顯著 （＜0.05）提高了增重，并改善了血清中PCV2抗體變化趨勢(shì)。另外，A組的臨床數(shù)據(jù)稍優(yōu)于B組。檢測(cè)結(jié)果表明，仔豬免疫PCV2疫苗的臨床效果明顯優(yōu)于未免疫組，PCV2疫苗A的臨床免疫效果稍好于疫苗B，為試驗(yàn)豬場(chǎng)今后進(jìn)行PCV2疫苗免疫提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

PCV2；PCV2疫苗；仔豬；臨床免疫效果

豬圓環(huán)病毒2型（PCV2）是引起豬的斷奶后多系統(tǒng)衰竭綜合征（PMWS），繁殖障礙、皮炎與腎炎綜合征（PDNS），豬呼吸道病綜合征（PRDC）等多種豬圓環(huán)病毒病（PCVD）的病原。其中以PMWS的危害最為嚴(yán)重，給世界養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大經(jīng)濟(jì)損失[1,2]。目前，以PMWS為主的PCVD仍在不少國(guó)家發(fā)生和流行[3]，是當(dāng)前國(guó)內(nèi)養(yǎng)豬生產(chǎn)需要重點(diǎn)注意和防控的一種主要傳染病。

疫苗免疫已成為控制PMWS的重要措施。目前國(guó)外有5種商業(yè)PCV2疫苗投入臨床使用，包括2種全病毒滅活疫苗和3種亞單位疫苗，這些疫苗都可用于仔豬免疫，其中1種還可用于母豬免疫[4,5]。臨床試驗(yàn)資料顯示，這些商業(yè)疫苗都顯示出較好的免疫保護(hù)效力，能夠有效地降低免疫仔豬的死亡率與淘汰率、增加平均增重、提高生產(chǎn)性能和經(jīng)濟(jì)效益[6-11]。但是，這些國(guó)外的商業(yè)化PCV2疫苗的價(jià)格比較昂貴，難以被中國(guó)養(yǎng)豬企業(yè)廣泛接受。

目前，一些國(guó)內(nèi)疫苗企業(yè)也有商業(yè)化PCV2疫苗，多是全病毒滅活疫苗，主要有江蘇南農(nóng)高科技股份有限公司和普萊柯生物工程股份有限公司（SH株）及上海海利生物技術(shù)股份有限公司和中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所（LG株）等。這些疫苗應(yīng)用于斷奶仔豬已經(jīng)顯示出一定臨床效果，但仍需進(jìn)行進(jìn)一步的試驗(yàn)。因此，本試驗(yàn)旨在基于國(guó)內(nèi)PCV2 LG株和SH株兩種毒株來(lái)源的商業(yè)PCV2滅活疫苗進(jìn)行小型臨床免疫效果的比較試驗(yàn)，以期為一些規(guī)?；i場(chǎng)選用國(guó)內(nèi)商業(yè)PCV2疫苗提供試驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)用豬

試驗(yàn)豬為長(zhǎng)白仔豬。從50頭懷孕母豬中選擇年齡、胎次、營(yíng)養(yǎng)狀況、抗體水平、飼養(yǎng)條件相近的36頭經(jīng)產(chǎn)母豬，每12頭母豬產(chǎn)下的仔豬作為一組，共分成三組。第一組仔豬在14日齡肌肉注射1頭份PCV2疫苗A（A組）；第二組仔豬在14日齡注射1頭份PCV2疫苗B（B組）；第三組仔豬在14日齡注射2 mL滅菌生理鹽水（C組，作為對(duì)照組）。仔豬均于28日齡斷奶、30日齡轉(zhuǎn)入保育豬舍，每組占用一個(gè)單元豬舍。試驗(yàn)全程對(duì)仔豬的飼養(yǎng)管理按照相關(guān)規(guī)程進(jìn)行。在試驗(yàn)期間每天觀察仔豬的健康狀況，并統(tǒng)計(jì)死淘情況。在仔豬注射PCV2疫苗或生理鹽水后0天、14天、28天、42天、56天，從每組仔豬中隨機(jī)挑選20頭分別從前腔靜脈采血5 mL，室溫靜置6小時(shí)，4 000轉(zhuǎn)/分離心6分鐘，分離出血清注入1.5 mL的EP錐形管中，做好標(biāo)記，于-80℃保存，用于ELISA抗體檢測(cè)。

1.2 抗體檢測(cè)

對(duì)采集分離的懷孕母豬和試驗(yàn)組、對(duì)照組待檢血清按照試劑盒的說(shuō)明書(shū)進(jìn)行PCV2抗體檢測(cè)。在使用前，試劑盒的各個(gè)組分都必須恢復(fù)到室溫，試劑應(yīng)充分混勻。

分別統(tǒng)計(jì)不同處理組數(shù)據(jù)，用方差分析對(duì)相關(guān)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 仔豬的增重

數(shù)據(jù)顯示，A組與B組之間的平均增重沒(méi)有顯著差異（＞0.05），但A組與B組的平均增重均顯著高于C組（ ＜0.05）。由此可見(jiàn)，接種PCV2疫苗沒(méi)有對(duì)仔豬的生長(zhǎng)發(fā)育造成不良影響，并且A、B組豬群的增重情況高于C組。

表1 PCV2疫苗接種豬的增重

2.2 豬血清中PCV2抗體變化

圖1 仔豬血清中PCV2抗體水平變化

表2 不同時(shí)間段仔豬血清中PCV2抗體的OD值及陽(yáng)性率

抗體檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表2、圖1。在14日齡（免疫后0天）時(shí)，不同組仔豬血清中PCV2抗體水平接近，抗體陽(yáng)性率都為100%。A、B兩組在14日齡注射PCV2疫苗，到28日齡（免疫后14天）時(shí)PCV2抗體水平輕微下降，抗體陽(yáng)性率也不到100%；C組抗體水平明顯下降，顯著（＜0.05）低于A組與B組，抗體陽(yáng)性率明顯低于100%。之后，三個(gè)組的PCV2抗體水平都上升，A組與B組的抗體水平與抗體陽(yáng)性率都高于C組，其中A組抗體水平顯著（＜0.05）高于C組；同時(shí)，A組抗體水平整體高于B組，其中在42日齡達(dá)到顯著水平。

2.3 豬的臨床變化與死淘情況

在試驗(yàn)期間，個(gè)別瘦弱仔豬有腹瀉癥狀，其他仔豬臨床表現(xiàn)正常，采食量正常。在試驗(yàn)階段，A組有3頭瘦弱仔豬出現(xiàn)腹瀉、氣喘后死亡，B組死亡5頭，C組死亡5頭?？偟膩?lái)看，各組之間仔豬的發(fā)病率、死亡率與淘汰率等都小，且無(wú)明顯差異。

3 討論

由PCV2引起的豬斷奶后多系統(tǒng)衰竭綜合征（PMWS）等多種豬圓環(huán)病毒?。≒CVD）是當(dāng)前中外養(yǎng)豬業(yè)面臨的、需要著重防控的一種主要的病毒性疾病，控制該病的一種重要措施就是進(jìn)行疫苗免疫。目前國(guó)外有5種可用于仔豬免疫的商業(yè)PCV2疫苗，其臨床免疫保護(hù)效果雖好，但價(jià)格較高。國(guó)內(nèi)疫苗廠商自2010年也陸續(xù)推出了國(guó)產(chǎn)商業(yè)PCV2疫苗，價(jià)格相對(duì)低廉，但不同廠商PCV2疫苗的選用毒株、生產(chǎn)工藝及佐劑等不盡相同，臨床使用效果反映不一，故本研究選取了2種國(guó)內(nèi)廠家生產(chǎn)的商業(yè)PCV2疫苗在一家PCV2陽(yáng)性豬場(chǎng)進(jìn)行了仔豬的臨床免疫比較試驗(yàn)。

臨床生產(chǎn)數(shù)據(jù)顯示，疫苗A免疫組135頭，死亡5頭，死亡率3.7%；疫苗B免疫組131頭，死亡5頭，死亡率3.8%；對(duì)照組128頭，死亡5頭，死亡率3.9%。各組之間基本接近，說(shuō)明在本次試驗(yàn)環(huán)境下，是否接種PCV2疫苗對(duì)仔豬的發(fā)病率與死亡、淘汰率沒(méi)有明顯影響。增重?cái)?shù)據(jù)顯示，疫苗A組與疫苗B組之間的平均增重基本接近，兩個(gè)疫苗免疫組的平均增重均顯著高于對(duì)照組。很多臨床研究報(bào)道，進(jìn)行PCV2疫苗免疫后明顯降低了仔豬死亡率、提高了仔豬增重[12]，但本研究中僅提高了仔豬增重。出現(xiàn)這種差異的原因很可能主要與豬場(chǎng)的健康狀況有關(guān)，這些試驗(yàn)研究都是在發(fā)生嚴(yán)重PMWS的豬場(chǎng)進(jìn)行的[13]，但本研究的試驗(yàn)豬場(chǎng)在試驗(yàn)期及其前后3個(gè)月內(nèi)的所有疾病的發(fā)病率與死亡率都很低，可以說(shuō)是處于一個(gè)相對(duì)穩(wěn)定、健康的狀態(tài)，因此未能觀察到疫苗免疫降低仔豬死亡率的明顯效果。由于豬圓環(huán)病毒病是一種多因子疾病，單獨(dú)的PCV2感染很難引起臨床疾病，往往需要與豬細(xì)小病毒、豬繁殖與呼吸綜合征病毒、豬肺炎支原體等病原共同感染才能引起明顯發(fā)病[14-16]，這也間接說(shuō)明該試驗(yàn)豬場(chǎng)在試驗(yàn)期前后一段時(shí)間內(nèi)與PCV2具有協(xié)同致病作用的病原的感染數(shù)量少或無(wú)。另外一個(gè)可能原因是本試驗(yàn)的樣本數(shù)不太大。但即使這樣，仍然觀察到仔豬增重明顯提高的現(xiàn)象，這說(shuō)明即使在健康狀況良好的豬場(chǎng)進(jìn)行PCV疫苗免疫，仍然可以促進(jìn)仔豬生長(zhǎng)，提高仔豬生產(chǎn)性能，從而增加經(jīng)濟(jì)效益。章紅兵等[17]的試驗(yàn)研究也有類(lèi)似報(bào)道。

4 小結(jié)

對(duì)2種國(guó)產(chǎn)商業(yè)PCV2疫苗進(jìn)行了一次小型田間試驗(yàn)，結(jié)果顯示：2個(gè)PCV2疫苗免疫組都顯著提高了仔豬增重，明顯改善了抗體水平及其整齊度；另外，接種疫苗A的數(shù)據(jù)稍優(yōu)于接種疫苗B。田間試驗(yàn)表明，仔豬免疫PCV2疫苗的臨床效果優(yōu)于未免疫組，PCV2疫苗A的臨床免疫效果稍好于疫苗B。

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S852.65

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：1673-4645(2017)08-0067-04

2017-05-23

王保有（1981-），男，天津市寧河人，主要從事豬場(chǎng)疾病防控，E-mail：djtliuyujie@126.com

*通訊作者：周雙海（1972-），男，博士，副教授，主要從事動(dòng)物分子病毒學(xué)與免疫學(xué)研究、動(dòng)物傳染病診斷與防治，E-mail：shhaizhou@bac.edu.cn