張成喜，劉吉山，孫國強*

（1.青島農(nóng)業(yè)大學動物科技學院，山東青島266109；2.山東省濱州畜牧獸醫(yī)研究院，山東濱州256618）

過瘤胃蛋氨酸對奶牛血液生化指標和養(yǎng)分消化率的影響

張成喜1，劉吉山2，孫國強1*

（1.青島農(nóng)業(yè)大學動物科技學院，山東青島266109；2.山東省濱州畜牧獸醫(yī)研究院，山東濱州256618）

為研究過瘤胃蛋氨酸（RPMet）對奶牛血液生化指標和養(yǎng)分消化率的影響。本試驗選取年齡、體重、胎次、產(chǎn)奶量、乳成分及泌乳期（90±15）d相近的荷斯坦奶牛40頭，隨機分為4組，每組10頭。對照組和試驗1組、2組、3組日糧中分別添加0、15、25、35 g/（d·頭)過瘤胃蛋氨酸。預試期15 d，正式期60 d。結(jié)果表明：（1）在血液生化指標方面，過瘤胃蛋氨酸能夠顯著提高血清中總蛋白質(zhì)和生長激素的含量（P＜0.05），其中試驗1組、2組、3組的總蛋白質(zhì)含量分別比對照組提高2.79%、7.35%、5.28%，生長激素含量分別比對照組提高11.78%、17.81%、13.69%；能夠極顯著降低血清中尿素氮的含量（P＜0.01），試驗1組、2組、3組的尿素氮含量分別比對照組降低9.18%、13.50%、11.37%。（2）在養(yǎng)分表觀消化率方面，過瘤胃蛋氨酸能顯著提高干物質(zhì)和粗蛋白質(zhì)的表觀消化率（P＜0.05），極顯著提高中性洗滌纖維和酸性洗滌纖維的表觀消化率（P＜0.01），其中試驗1組、2組、3組的干物質(zhì)表觀消化率分別比對照組提高4.10%、7.81%、6.57%，粗蛋白質(zhì)表觀消化率分別比對照組提高2.71%、6.60%、5.24%，中性洗滌纖維表觀消化率分別比對照組提高7.59%、15.37%、10.68%，酸性洗滌纖維表觀消化率分別比對照組提高8.29%、16.61%、12.35%。在本試驗條件下，綜合考慮血液生化指標和養(yǎng)分表觀消化率，奶牛日糧中過瘤胃蛋氨酸的最適添加量為25 g/（d·頭）。

過瘤胃蛋氨酸；血液生化指標；養(yǎng)分消化率

過瘤胃蛋氨酸（RPMet）又被稱為瘤胃保護性蛋氨酸，是指通過物理或化學方法將蛋氨酸修飾處理保護起來，避免其在瘤胃中被微生物所降解，而在瘤胃后消化道中有效釋放被消化吸收（熊春梅，2004）。段紅偉（2000）研究發(fā)現(xiàn)，在綿羊日糧中添加N-羥甲基蛋氨酸鈣（HMM-Ca）可以顯著提高其干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)和酸性洗滌纖維的消化率。孫華等（2010）研究過瘤胃蛋氨酸對奶牛血液生化指標的影響發(fā)現(xiàn)，在日糧中添加RPMet可以明顯提高血漿中血糖、總蛋白質(zhì)、白蛋白和球蛋白的含量，增強谷丙轉(zhuǎn)氨酶的活性，明顯降低血漿中尿素氮的含量。目前，過瘤胃蛋氨酸在奶牛生產(chǎn)中的研究主要集中在提高奶牛產(chǎn)奶性能方面，而補飼過瘤胃蛋氨酸對奶牛血液生化指標和養(yǎng)分消化率影響的研究卻鮮有報道。本試驗擬在日糧中添加不同水平的過瘤胃蛋氨酸，研究其對奶牛血液生化指標和養(yǎng)分消化率的影響，并確定過瘤胃蛋氨酸在奶牛日糧中的最適添加量，為過瘤胃蛋氨酸在奶牛生產(chǎn)中的廣泛應用提供理論依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 試驗設計本試驗采用單因素隨機分組設計，選用青島奧特奶牛良種場年齡、體重、胎次、產(chǎn)奶量、乳成分和泌乳期（90±15）d相近的荷斯坦奶牛40頭，隨機分為4組，每組10頭。對照組和試驗1組、2組、3組分別飼喂0、15、25、35 g/（d·頭)過瘤胃蛋氨酸。每頭奶牛每天預留0.5 kg精料作為載體與過瘤胃蛋氨酸混合，剩余的精料與粗飼料混勻后制成全混合日糧（TMR），過瘤胃蛋氨酸與精料混勻后隨TMR料一起飼喂。整個試驗期為75 d，其中預試期15 d，正式期60 d。試驗所用的過瘤胃蛋氨酸由青島潤博特生物科技有限公司提供，為白色顆粒狀物質(zhì)，其組成為DL-蛋氨酸、棕櫚油、二氧化硅，其中DL-蛋氨酸≥60%，水分≤12%。

1.2 飼養(yǎng)管理試驗牛采用舍飼飼養(yǎng)，每日使用利拉伐擠奶機擠奶2次（4:00和16:00），每日飼喂TMR料2次（4:30和16:30），并且確保試驗牛每天有20 h以上的時間可以接觸到TMR料。試驗牛采食后可以在運動場自由飲水和運動。TMR料組成及營養(yǎng)水平見表1。

1.3 試樣采集及處理

1.3.1 飼料樣和糞樣按四分法收集TMR料樣，并在烘箱中65℃烘干制成風干樣，粉碎后備用。分別在預試期第1～3天，正式期第28～30天，正式期第58～60天采用全收糞法采集3次糞樣，每次連續(xù)3 d進行24 h全收糞。將每天收集

表1 TMR料組成及營養(yǎng)水平（干物質(zhì)基礎）

的全部糞樣混勻后稱重，按四分法收集當天的糞樣，并按每100 g糞樣添加25 mL 10%的硫酸固氮處理后放入冰箱，-20℃冷凍保存（吳丹丹等，2016），采樣結(jié)束后將3 d內(nèi)所留的糞樣按樣重比例均勻混合，然后放入烘箱中65℃烘至恒重后保存，用于測定養(yǎng)分的表觀消化率。

1.3.2 血樣分別在預試期第1天，正式期第30天，正式期第60天，早上飼喂前頸靜脈采血20 mL/頭，在2000 g下離心15 min，取上層血清，-20℃冷凍保存。

1.4 測定指標與方法

1.4.1 飼料樣和糞樣采用GB/T6435-2006測定水分含量，計算干物質(zhì)（DM）含量；采用凱氏定氮法（GB/T6432-1994）測定粗蛋白質(zhì)（CP）含量；采用NY/T1459-2007測定酸性洗滌纖維（ADF）含量；采用GB/T20806-2006測定中性洗滌纖維（NDF）含量；采用高錳酸鉀滴定法（GB/T6436-2002）測定鈣（Ca）含量；采用分光光度法（GB/ T6437-2002）測定磷（P）含量。

1.4.2 血液生化指標將處理好的血清樣品送至青島金域醫(yī)學檢驗所有限公司，檢測血清中血糖、總蛋白質(zhì)、白蛋白、球蛋白、谷丙轉(zhuǎn)氨酶等指標的含量。

表2 過瘤胃蛋氨酸對奶牛血液生化指標的影響

1.5 數(shù)據(jù)處理使用Excel 2016軟件對試驗數(shù)據(jù)進行初步處理。使用SPSS 20.0軟件進行單因素方差分析，Duncan’s多重比較檢驗組間差異顯著性，以P＜0.05和P＜0.01分別表示差異顯著和極顯著，結(jié)果以“平均值±標準誤”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 過瘤胃蛋氨酸對奶牛血液生化指標的影響由表2可知，在總蛋白質(zhì)含量方面，試驗1組、2組、3組分別比對照組提高2.79%、7.35%、5.28%，其中試驗2組和3組均顯著高于對照組（P＜0.05），試驗1組與對照組相比差異不顯著（P＞0.05），各試驗組之間無顯著差異（P＞0.05）。在尿素氮含量方面，試驗1組、2組、3組分別比對照組降低9.18%、13.50%、11.37%，其中試驗1組和3組均顯著低于對照組（P＜0.05），試驗2組極顯著低于對照組（P＜0.01），各試驗組之間無顯著差異（P＞0.05）。在生長激素含量方面，試驗1組、2組、3組分別比對照組提高11.78%、17.81%、13.69%，其中試驗2組和3組均顯著高于對照組（P＜0.05），試驗1組與對照組相比差異不顯著（P＞0.05），各試驗組之間無顯著差異（P＞0.05）。

2.2 過瘤胃蛋氨酸對奶牛主要養(yǎng)分表觀消化率的影響由表3可知，在DM表觀消化率方面，試驗1組、2組、3組分別比對照組提高4.10%、7.81%、6.57%，其中試驗2組和3組均顯著高于對照組（P＜0.05），試驗1組與對照組相比差異不顯著（P＞0.05），各試驗組之間無顯著差異（P＞0.05）。在CP表觀消化率方面，試驗1組、2組、3組分別比對照組提高2.71%、6.60%、5.24%，其中試驗2組顯著高于對照組（P＜0.05），試驗1組和3組與對照組相比差異不顯著（P＞0.05），各試驗組之間無顯著差異（P＞0.05）。在NDF表觀消化率方面，試驗1組、2組、3組分別比對照組提高7.59%、15.37%、10.68%，其中試驗2組極顯著高于對照組（P＜0.01），試驗3組顯著高于對照組（P＜0.05），試驗1組與對照組相比差異不顯著（P＞0.05），各試驗組之間無顯著差異（P＞0.05）。在ADF表觀消化率方面，試驗1組、2組、3組分別比對照組提高8.29%、16.61%、12.35%，其中試驗2組極顯著高于對照組（P＜0.01），試驗3組顯著高于對照組（P＜0.05），試驗1組與對照相比差異不顯著（P＞0.05），各試驗組之間無顯著差異（P＞0.05）。

表3 過瘤胃蛋氨酸對奶牛主要養(yǎng)分表觀消化率的影響

3 討論

3.1 過瘤胃蛋氨酸對奶牛血液生化指標的影響白蛋白（ALB）和球蛋白（GLOB）是血漿蛋白的主要成分，血漿總蛋白（TP）是指肝臟內(nèi)合成的ALB和GLOB含量之和，其含量升高反映了機體蛋白質(zhì)的合成代謝增強（孫華等，2010）。本試驗日糧中補飼過瘤胃蛋氨酸后，可以顯著提高血清中TP和生長激素（GH）的含量，顯著降低血清中尿素氮（BUN）的含量，這與劉艷豐（2007）和耿忠誠等（2011）的研究結(jié)果一致，說明補飼過瘤胃蛋氨酸可以增強機體蛋白質(zhì)的合成代謝。GH是腺垂體分泌的具有種屬特性的蛋白質(zhì)激素，是調(diào)節(jié)動物機體生長發(fā)育和三大代謝過程的一個重要內(nèi)分泌因子。牛GH能夠調(diào)節(jié)機體物質(zhì)代謝，促進血糖（GLU）吸收以及碳水化合物和脂肪的分解，調(diào)節(jié)核酸與蛋白質(zhì)的合成，提高飼料的轉(zhuǎn)化率，還能提高奶牛的產(chǎn)奶量（韓英東等，2015）。血清中BUN的含量是反映機體氮代謝的重要指標之一，是機體各種組織蛋白質(zhì)分解代謝的終產(chǎn)物，其很容易受瘤胃液中氨態(tài)氮的濃度以及小腸所吸收的氨基酸是否平衡等因素的影響；對于反芻動物而言，血清中的BUN一部分可通過血液循環(huán)經(jīng)唾液和瘤胃壁的滲透作用進入瘤胃再次被吸收利用，另一部分則可通過腎臟隨尿液排出體外（賈文彬，2006）。本試驗日糧中添加過瘤胃蛋氨酸后顯著降低了血清中BUN的含量，說明過瘤胃蛋氨酸改善了奶牛小腸氨基酸的平衡，提高了氨基酸和日糧蛋白質(zhì)的利用率，減少了氮排泄。楊維仁等（2004）研究不同形式的蛋氨酸對肉牛血液指標的影響時也指出，瘤胃投飼動物油包被的蛋氨酸可以顯著降低血漿中BUN的含量。

3.2 過瘤胃蛋氨酸對奶牛主要養(yǎng)分消化率的影響高紅建（2002）研究了氮-羥甲基蛋氨酸鈣（N-HMM-Ca）對綿羊營養(yǎng)物質(zhì)消化代謝的影響，結(jié)果表明，向瘤胃內(nèi)投飼N-HMM-Ca可以顯著提高日糧中DM、CP、ADF和NDF的消化率。賈文彬（2006）研究發(fā)現(xiàn)，在奶牛日糧中添加過瘤胃蛋氨酸可以顯著提高日糧中CP的表觀消化率。在本試驗條件下，試驗牛補飼過瘤胃蛋氨酸后顯著提高了日糧中DM、CP、NDF和ADF的表觀消化率。日糧中添加過瘤胃蛋氨酸后增加了到達瘤胃后消化道的蛋氨酸數(shù)量，促進了小腸的消化吸收功能；同時，蛋氨酸等含硫氨基酸是纖維分解菌和細菌蛋白合成所必需的，過瘤胃蛋氨酸在瘤胃中降解的部分可以為瘤胃補充額外的蛋氨酸，從而刺激纖維分解菌的生長，進而促進瘤胃的發(fā)酵性能（馬婷婷，2016）。過瘤胃蛋氨酸還能改善瘤胃內(nèi)的營養(yǎng)環(huán)境，促進瘤胃微生物的生長與繁殖，提高瘤胃微生物蛋白（MCP）的產(chǎn)量（段紅偉，2000），將低品質(zhì)的氮源轉(zhuǎn)化為優(yōu)質(zhì)的瘤胃MCP，瘤胃MCP的消化率高達80%（盧玉飛等，2014），進而提高了蛋白質(zhì)的表觀消化率。

4 結(jié)論

綜合考慮奶牛血液生化指標和養(yǎng)分表觀消化率，在本試驗條件下，過瘤胃蛋氨酸的最適添加量為25 g/（d·頭）。參考文獻

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This experiment was conducted to determine the effect of rumen-protected methionine（RPMet）on blood biochemical parameter and nutrient digestibility of dairy cows.A total of 40 Holstein cows with similar age，body weight，parity，milk yield，milk composition and lactation stage（90±15 days in milk）were divided into 4 groups with 10 cows per group.The supplement levels of rumen-protected methionine in control and test groups 1，2 and 3 were 0，15，25，35 g/（d·head），respectively.The pretest lasted for 15 days，and the test lasted for 60 days.The results showed as follows：（1）In terms of blood biochemical parameter，compared with the control group the total protein（TP）in test groups 1，2，3 were significantly increased by 2.79%，7.35%，5.28%（P＜0.05），growth hormone（GH）in test groups 1，2，3 were significantly increased by 11.78%，17.81%，13.69%（P＜0.05）；blood urea nitrogen（BUN）in test groups 1，2，3 were significantly reduced by 9.18%，13.50%，11.37%（P＜0.01）.（2）In terms of apparent nutrient digestibility，compared with the control group the apparent digestibility of dry matter（DM）in test groups 1，2，3 were significantly increased by 4.10%，7.81%，6.57%（P＜0.05）；the apparent digestibility of crude protein（CP）in test groups 1，2，3 were significantly increased by 2.71%，6.60%，5.24%（P＜0.05）；the apparent digestibility of neutral detergent fiber（NDF）in test groups 1，2，3 were significantly increased by 7.59%，15.37%，10.68%（P＜0.01）；the apparent digestibility of acid detergent fiber（ADF）in test groups 1，2，3 were significantly increased by 8.29%，16.61%，12.35%（P＜0.01）.Based on the data of blood biochemical parameter and nutrient apparent digestibility，it concluded that the suitable supplement level of rumen-protected methionine was 25 g/（d·head）in the diet of dairy cows under the condition in the present study.

rumen-protected methionine；blood biochemical parameters；nutrient digestibility

S816.7

A

1004-3314（2017）16-0020-04

10.15906/j.cnki.cn11-2975/s.20171605

山東省現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術體系牛產(chǎn)業(yè)創(chuàng)新團隊（SDAIT-09-08）

*通訊作者