劉曉靜，郝永蘭，劉若巖，劉愛菊，吳云海，閆志剛，田樹軍,3*

（1.河北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，河北保定 071000； 2. 河北省畜牧良種工作站，河北石家莊 050000；3. 河北省牛羊胚胎工程技術(shù)研究中心，河北保定 071000）

季節(jié)對不同品種種公牛精液品質(zhì)的影響

劉曉靜1，郝永蘭1，劉若巖1，劉愛菊1，吳云海2，閆志剛2，田樹軍1,3*

（1.河北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，河北保定 071000； 2. 河北省畜牧良種工作站，河北石家莊 050000；3. 河北省牛羊胚胎工程技術(shù)研究中心，河北保定 071000）

為探討季節(jié)對不同品種種公牛精液品質(zhì)的影響，實(shí)驗(yàn)采集了中國荷斯坦牛、西門達(dá)爾牛和日本和牛的種公牛精液周年生產(chǎn)數(shù)據(jù)，進(jìn)行分析比較。結(jié)果表明：荷斯坦牛春、冬季原精活力達(dá)標(biāo)率顯著高于夏季（P<0.05）,冬季極顯著高于夏季（P<0.01）；冬、秋季凍精活力達(dá)標(biāo)率顯著高于夏季（P<0.05），秋季極顯著高于春、夏（P<0.01），春、冬季射精量顯著高于秋季（P<0.05），春季極顯著高于秋季（P<0.01）；春、秋、冬季精液密度顯著高于夏季（P<0.05）；西門達(dá)爾牛在春季原精活力達(dá)標(biāo)率呈現(xiàn)最高，顯著高于夏、秋季（P<0.05）；日本和牛冬季原精活力和凍精活力均最高，射精量四季之間無顯著差異（P>0.05），夏季精液密度顯著高于春季（P<0.05），極顯著高于秋、冬季（P<0.01）。春、冬季種公牛原精和凍精的達(dá)標(biāo)率最佳；肉牛品種精液品質(zhì)優(yōu)于奶牛品種，肉牛品種中的西門達(dá)爾種公牛的精液品質(zhì)優(yōu)于和牛。

精液品質(zhì)；季節(jié)；西門達(dá)爾；和牛；荷斯坦牛

季節(jié)變化對豬[1]、犬[2]、牛[3]精液品質(zhì)都有顯著影響，夏季熱應(yīng)激對牛精液品質(zhì)影響極為嚴(yán)重[4]。另外，同一物種內(nèi)不同品種精液品質(zhì)同一季節(jié)也會(huì)存在差異。倪俊娟等[5]報(bào)道，夏南牛精液品質(zhì)明顯優(yōu)于夏洛萊牛；劉永文等[6]對西門達(dá)爾牛、和牛、利木贊等6種品種種公牛精液品種檢驗(yàn)后，得出西門達(dá)爾牛精液品質(zhì)最優(yōu)。研究不同品種和不同季節(jié)對精液品質(zhì)的影響，對指導(dǎo)冷凍精液生產(chǎn)具有重要意義。

河北省西北部地勢偏高、東南部偏低，由西北部向東南部傾斜，屬于溫帶大陸性季風(fēng)氣候，大部分地區(qū)四季分明。近年來，河北省肉牛養(yǎng)殖呈上升趨勢，冷凍精液的市場需求量也逐漸增大。充分利用品種優(yōu)勢和季節(jié)特點(diǎn)，高效率生產(chǎn)冷凍精液，對于凍精生產(chǎn)企業(yè)的高效生產(chǎn)以及滿足市場需求具有現(xiàn)實(shí)意義。

本研究以河北省某種公牛場的荷斯坦、西門達(dá)爾、日本和牛共256頭種公牛作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，采集2015年8月—2016年7月原精活力達(dá)標(biāo)率、凍精活力達(dá)標(biāo)率、射精量、精液密度等數(shù)據(jù)，分析比較季節(jié)對不同品種種公牛精液品質(zhì)的影響，旨在為高效率生產(chǎn)種公牛精液提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 選擇健康、精液生產(chǎn)性能正常的種公牛256頭，其中荷斯坦130頭、日本和牛35頭、西門達(dá)爾91頭。

1.2 器材 IMV型假陰道、OVYXCELL精液稀釋液、Mrs1 Dual V2通用型單頭灌裝機(jī)、卡蘇細(xì)管、低溫操作柜、Digitcool 程序化自動(dòng)冷凍儀、MCA自動(dòng)計(jì)數(shù)包裝機(jī)、MCA專用移動(dòng)式液氮槽等冷凍精液生產(chǎn)器械，以及ACCUCELL精子密度測定儀、Hamilton Microlab 620精液稀釋儀、EASYCYTE精子質(zhì)量分析儀等精子質(zhì)量檢測設(shè)備。

1.3 采精 于2015年8月—2016年7月采集參加實(shí)驗(yàn)牛新鮮精液。采精頻率為每頭種公牛1周采精2次，每次采精間隔8 min連續(xù)采精2次。種公牛每次采精順序保持一致，臺(tái)牛及采精場地固定，并保證采精環(huán)境安靜衛(wèi)生。

1.4 凍精制作 將采集到的合格新鮮精液，儀器測定精液稀釋量并進(jìn)行稀釋，然后4℃平衡3 h，用細(xì)管分裝儀進(jìn)行分裝，利用程序化自動(dòng)冷凍儀進(jìn)行凍精制作。再用精子活力分析儀檢測凍精活力，活力達(dá)標(biāo)測的細(xì)管進(jìn)行加工包裝。

1.5 精液品質(zhì)評定指標(biāo)

1.5.1 精液射精量 用假陰道采集精液，根據(jù)集精杯刻度直接讀出精液量。

1.5.2 精液密度 用生理鹽水:精液以1:5的比例稀釋精液，再用精子密度儀對稀釋好的精液進(jìn)行檢測，精子密度檢測參考張淑二等[2]報(bào)道方法。對每頭牛每天每次精液的密度加權(quán)平均，計(jì)算得到精液密度。

1.5.3 精液活力達(dá)標(biāo)率 取出5μL新鮮精液置于載玻片上，蓋上蓋玻片后馬上放到顯微鏡下觀察精子活力，活力達(dá)標(biāo)（>60%）的留用并記錄每天達(dá)標(biāo)精液量。以每頭牛1周精液達(dá)標(biāo)量和采精總量計(jì)算出原精達(dá)標(biāo)率。同理，以每周每頭牛精液解凍后達(dá)標(biāo)量和凍精生產(chǎn)總量計(jì)算出凍精活力達(dá)標(biāo)率。

1.6 統(tǒng)計(jì)分析 根據(jù)精液采集季節(jié)（春季3—5月，夏季6—8月，秋季9—11月，冬季12月至次年2月）運(yùn)用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS 21.0 One-Way ANOVA進(jìn)行均值方差差異顯著分析。以P<0.05為差異顯著，P<0.01為差異極顯著，P>0.05為差異不顯著。結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同品種種公牛精液品質(zhì) 由表1可知，西門達(dá)爾的原精活力達(dá)標(biāo)率最高，極顯著高于日本和牛（P<0.01），與荷斯坦牛無顯著差（P>0.05）；西門達(dá)爾的凍精活力達(dá)標(biāo)率最高，極顯著高于荷斯坦牛（P<0.01），與日本和牛無顯著差異（P>0.05）；西門達(dá)爾的射精量最高，極顯著高于日本和牛（P<0.01），與荷斯坦牛無顯著差異（P>0.05）；西門達(dá)爾射精密度最高，極顯著高于日本和牛（P<0.01），顯著高于荷斯坦牛（P<0.05）。

2.2 同一品種不同季節(jié)種公牛精液品質(zhì) 由表2可以看出，在射精量、原精活力和凍精活力指標(biāo)上只有荷斯坦牛受到季節(jié)的影響，其他2個(gè)品種種公牛均未達(dá)到顯著水平（P>0.05）。總體來看，荷斯坦牛、西門達(dá)爾、日本和牛的精液密度均以夏季最高、秋季最低，且3個(gè)品種種公牛夏季的精液密度均顯著高于秋季（P<0.05），而春、秋2個(gè)季節(jié)沒達(dá)到顯著水平（P>0.05）。

2.3 同一季節(jié)不同品種種公牛精液品質(zhì) 由表3可以看出，原精活力在春、冬季差異極顯著（P<0.01）或顯著（P<0.05），在夏、冬季沒有達(dá)到顯著水平（P>0.05）。在春季，西門達(dá)爾原精活力達(dá)標(biāo)率、凍精活力達(dá)標(biāo)率、射精量和精液密度均最高，原精活力、射精量、射精密度均極顯著高于日本和牛（P<0.01），凍精活力極顯著高于荷斯坦牛（P<0.01）。

表1 3個(gè)品種種公牛精液品質(zhì)比較

表2 同一品種不同季節(jié)種公牛精液品質(zhì)分析

在夏季，西門達(dá)爾牛原精活力達(dá)標(biāo)率最高，3個(gè)品種無顯著性差異（P>0.05）；荷斯坦牛的凍精活力達(dá)標(biāo)率極顯著低于日本和牛、西門達(dá)爾（P<0.01），日本和牛與西門達(dá)爾之間無顯著差異（P>0.05）；西門達(dá)爾、荷斯坦牛射精量顯著高于日本和牛（P<0.05），西門達(dá)爾、荷斯坦的精液密度極顯著高于日本和牛（P<0.01），西門達(dá)爾、荷斯坦之間無顯著差異（P>0.05）。

在秋季，3個(gè)品種原精液活力達(dá)標(biāo)率無顯著差異（P>0.05）；日本和牛的凍精活力達(dá)標(biāo)率顯著高于西門達(dá)爾（P<0.05），與荷斯坦無顯著性差異（P>0.05）；荷斯坦、西門達(dá)爾的射精量極顯著高于日本和牛（P<0.01）；西門達(dá)爾精液密度最高，西門達(dá)爾、荷斯坦牛的精液密度極顯著高于日本和牛（P<0.01）。

在冬季，西門達(dá)爾、荷斯坦牛的原精活力達(dá)標(biāo)率顯著高于日本和牛（P<0.05）；西門達(dá)爾、日本和牛的凍精活力達(dá)標(biāo)率極顯著高于荷斯坦牛（P<0.01），西門達(dá)爾與日本和牛之間無顯著差異（P>0.05）；西門達(dá)爾、荷斯坦的射精量顯著高于日本和牛（P<0.05），荷斯坦與西門達(dá)爾之間無顯著差異（P>0.05）；西門達(dá)爾、荷斯坦牛的精液密度極顯著高于日本和牛（P<0.01）。

3 討 論

荷斯坦牛在我國分布廣泛，是良好的奶牛品種之一，在華北地區(qū)具有良好的適應(yīng)性。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，原精活力達(dá)標(biāo)率和射精量在春、冬季較秋、夏更佳，這一結(jié)果與張磊等[6]報(bào)道一致，凍精活力達(dá)標(biāo)率和精液密度在春、秋、冬季均無顯著差異，但在夏季最差，這一結(jié)果與劉永文等[6]報(bào)道一致。通過對這幾個(gè)指標(biāo)的比較，西門達(dá)爾牛的射精量、精液密度在夏、秋季呈較穩(wěn)定趨勢，夏季精液密度最高，說明在夏季較其他季節(jié)性欲旺盛，秋季精液品質(zhì)的各個(gè)指標(biāo)普遍偏低可能與秋季注射口蹄疫疫苗有關(guān)[3]，原精、凍精活力達(dá)標(biāo)率在夏季呈現(xiàn)普遍偏低的狀態(tài)，可能與夏季熱應(yīng)激有關(guān)[7]。

西門達(dá)爾牛被我國引入后就非常受歡迎，產(chǎn)乳量和產(chǎn)肉量普遍較高，將成為我國未來牛肉生產(chǎn)重要利用的品種。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，該品種凍精活力達(dá)標(biāo)率和射精量在春、夏、秋、冬4個(gè)季節(jié)呈現(xiàn)穩(wěn)定趨勢。原精活力達(dá)標(biāo)率和精液密度在春、秋、冬季呈穩(wěn)定趨勢。夏季偏低，說明西門達(dá)爾牛對季節(jié)變化的適應(yīng)能力較強(qiáng)，有一定的抗應(yīng)激能力。在夏季原精活力達(dá)標(biāo)率和精液密度呈現(xiàn)偏低趨勢可能是夏季溫度偏高導(dǎo)致公牛陰囊溫度與直腸溫度有較大溫差[1]，對采精產(chǎn)生影響，環(huán)境溫度過高導(dǎo)致精子活力降低。

表3 同一季節(jié)不同品種種公牛精液品質(zhì)分析

日本和牛是我國十分珍貴的優(yōu)質(zhì)肉牛品種資源，所生產(chǎn)的牛肉品質(zhì)獨(dú)樹一幟，牛肉外觀具有極強(qiáng)的大理石花紋，鮮嫩可口，稱得上是牛肉產(chǎn)品中的極品，也是華北地區(qū)近年來引進(jìn)的主要推廣品種。通過本實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以發(fā)現(xiàn)，日本和牛四季的精液品質(zhì)呈現(xiàn)較穩(wěn)定的趨勢，但與其他品種相比，各個(gè)指標(biāo)普遍較低，尤其是射精量和精液密度在春、夏、秋、冬四季中與其他品種相比均呈現(xiàn)最低狀態(tài)，說明該品種還需要對本地環(huán)境有一個(gè)逐漸訓(xùn)化的過程。

綜上可以看出，季節(jié)變化對西門達(dá)爾和日本和牛精液品質(zhì)的影響較小，但對荷斯坦牛影響較大。與此同時(shí)，各個(gè)季節(jié)對各品種種公牛精液的各個(gè)指標(biāo)影響不同，總體來看，在春、冬兩季種公牛的精液品質(zhì)最好，也說明了這2個(gè)季節(jié)是種公牛繁殖機(jī)能較為旺盛的季節(jié)。夏季高溫對種公牛產(chǎn)生熱應(yīng)激對精液品質(zhì)的影響嚴(yán)重[8-9]，種公牛性腺機(jī)能紊亂[10-11]，性欲低下，要針對不同品種加強(qiáng)各個(gè)季節(jié)的飼養(yǎng)管理，尤其在夏季應(yīng)降低環(huán)境對種公牛精液品質(zhì)的影響。秋季是夏季熱應(yīng)激影響的恢復(fù)季節(jié)，也要加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，多通風(fēng)，適當(dāng)加強(qiáng)種公牛的運(yùn)動(dòng)量，盡快恢復(fù)種公牛的性腺機(jī)能，為春、冬季節(jié)精液品質(zhì)的提高奠定一定基礎(chǔ)。

4 結(jié) 論

春、冬季的種公牛原精和凍精活力達(dá)標(biāo)率高，是華北區(qū)精液生產(chǎn)的理想季節(jié)；肉牛品種的精液品質(zhì)優(yōu)于奶牛品種；肉牛品種中的西門達(dá)爾種公牛的精液品質(zhì)優(yōu)于和牛。

[1]朱志付, 柳云華, 周健雄, 等. 不同品種和季節(jié)對種公豬精液品質(zhì)的影響[J]. 養(yǎng)豬, 2016, (5): 36-38.

[2]李紅. 環(huán)境溫度對公犬精液品質(zhì)的影響研究[J]. 畜牧與飼學(xué), 2017, 38(1): 30-31.

[3]張淑二, 尹許升, 田寧寧, 等. 季節(jié)變化對不同品種種公牛精液品質(zhì)及產(chǎn)能的影響[J]. 中國畜牧獸醫(yī), 2012, 39(12):150-153.

[4]王寶全, 孔偉, 馬志遠(yuǎn), 等. 高溫對種公牛精液品質(zhì)的影響研究[J]. 中國牛業(yè)科學(xué), 2013, 30(5): 13-15.

[5]倪俊娟, 王華, 王紹偉. 夏南牛與夏洛萊公牛精液品質(zhì)的對比分析研究[J]. 中國牛業(yè)科學(xué), 2011, (6): 22-23.

[6]劉永文, 王力生. 不同品種公牛精液品質(zhì)[J]. 現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技, 2015, (21): 262-265.

[7]李俊杰, 桑潤滋, 田樹軍. 高溫對荷斯坦公牛精液品質(zhì)及血清生化指標(biāo)的影響研究[J]. 畜牧與獸醫(yī), 2005, 37(11):10-121.

[8]DzyubaV, Cosson J, Dzyuba B,et al. The antioxidant system of seminal fl uid during in vitro storage of sterlet Acipenser ruthenus sperm[J]. Fish Physiol Biochem, 2016, 42: 563-568.

[9]Ramn S A, Edward D A, Claydon A J,et al. Sperm competition risk drives plasticity in seminal fl uid composition[J]. BMC Biology, 2015, 13(1):87.

[10]Brom fi eld J J. Seminal fl uid and reproduction: much more thanpreviously thought[J]. J Assist Reprod Genet, 2014,31(6): 627-636.

[11]Jiwakanon J, Persson E, Dalin A M. Seminal plasma did not influence the presence of transforming growth factor-β1,interleukine-10 and interleukin-6 in porcine follicles shortly after insemination[J]. Acta Vet Scand, 2013, 55(1):66.

Effects of Season on Semen Quality of Different Breed Bulls

LIU Xiao-jing1, HAO Yong-lan1, LIU Ruo-lan1, LIU Ai-ju1, WU Yun-hai2, YAN Zhi-gang2, TIAN Shu-jun1,3*

(1. College of Animal Science and Technology, Hebei Agricultural University, Hebei Baoding 071000, China;2. Livestock Breeding Station of Hebei Province, Hebei Shijiazhuang 050000, China;3. Cattle and Sheep Embryo Engineering Technology Research Center of Hebei Province, Hebei Baoding 071000, China)

To explore seasonal influence on the bull semen quality from different breeds, the annual results of frozen semen production from Chinese Holstein, Simmental and Japanese Black Cattle, were collected and analysed. The results showed that the standard rate of fresh semen from Chinese Holstein bulls in spring and winter were higher than in summer(P<0.05), the standard rate was signi fi cantly higher in winter than in summer(P<0.01). The survival rate of frozen semen was higher in winter and autumn than in summer(P<0.05) and that was signi fi cantly higher in autumn than in spring and summer(P<0.01). The ejaculation semen volume of all breeds in spring and winter was higher than in autumn(P<0.05)and that was signi fi cantly higher in spring than in autumn(P<0.01).The density of semen from all breeds in spring, autumn and winter was higher than in summer. The standard rate of Simmental fresh semen in spring reached the highest level and that was higher in spring than in summer and autumn(P<0.05). The survival rates of fresh and frozen semen of Japanese black cattle was the best in winter than the other three seasons and there was no difference about ejaculation semen volume among the seasons(P>0.05)and the semen density was higher in summer than in spring(P<0.05)and signi fi cantly higher than in autumn and winter(P<0.01). In conclusion, the standard rates of fresh and frozen semen were better in spring and winter than in autumn and summer and the semen quality of beef cattle was superior to that of dairy cow and the semen quality of Simmental was better than that of Japanese black cattle.

Semen quality; Bull; Season; Simmental; Japanese black cattle; Chinese Holstein

S823.3

A

10.19556/j.0258-7033.2017-12-045

2017-05-14；

2017-09-10

河北省現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系奶牛高效綜合養(yǎng)殖技術(shù)崗位（HBCT2013080205）

劉曉靜（1993-），女，河北石家莊人，碩士研究生，研究方向?yàn)閯?dòng)物遺傳育種與繁殖，E-mail：1148081694@qq.com* 通訊作者：田樹軍（1970-），男，教授，E-mail：tsj7890@126.com