黃飛龍+侯超+王成

[摘要]目的 建立山莊降脂片中橙黃決明素和大黃酚的含量測(cè)定方法，優(yōu)化山莊降脂片薄膜衣片的制備工藝。方法 采用高效液相色譜法（HPLC）測(cè)定山莊降脂片中橙黃決明素和大黃酚的含量，色譜柱以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，流動(dòng)相為乙腈-0.1%磷酸溶液（梯度洗脫），流速為1.0 ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為284 nm，進(jìn)樣量為10 μl。在保持原提取工藝不變的情況下，考察山莊降脂片薄膜包衣工藝。 結(jié)果 橙黃決明素和大黃酚分別在4.11～102.80 μg/ml和6.82～170.40 μg/ml范圍內(nèi)線性關(guān)系良好（r=0.9998，r=0.9997），精密度、穩(wěn)定性均良好，加樣回收率試驗(yàn)RSD分別為1.47%與0.81%，優(yōu)選出的薄膜衣片浸膏干燥方法是噴霧干燥。結(jié)論 所建立的方法準(zhǔn)確、靈敏、簡(jiǎn)便，可用于山莊降脂片中橙黃決明素和大黃酚的含量測(cè)定，薄膜包衣工藝可以用于大生產(chǎn)中。

[關(guān)鍵詞]山莊降脂片；高效液相色譜法；橙黃決明素；大黃酚；薄膜包衣工藝

[中圖分類(lèi)號(hào)] R927.2 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-4721（2017）12（a）-0004-05

[Abstract]Objective To establish a method for the content determinations of Aurantio-obtusin and Chrysophanol in Shanzhuang Jiangzhi Tablets and test its film-coating technology.Methods The high performance liquid chromatography method （HPLC） was used to determine the content of Aurantio-obtusin and Chrysophanol in Shanzhuang Jiangzhi Tablets.The octadecylsilane chemically bonded silica was used as the filling agent in chromatographic column.The mobile phase was acetonitrile 0.1% phosphoric acid solution （gradient elution） at a flow velocity of 1.0 ml/min.The detection wavelength was 284 nm and sample size was 10 μl.At premise of not changing the original extraction process，the film-coating technology of Shanzhuang Jiangzhi Tablets was tested.Results The great linear relationships were obtained when Aurantio-obtusin and Chrysophanol being ranged from 4.11-102.80 μg/ml and 6.82-170.40 μg/ml respectively （r=0.9998，r=0.9997）.The precision and stability test were both good.The RSD value of average recovery rates were 1.47% and 0.81% respectively.Spray-drying was optimized for the concrete drying of film-coating tablets.Conclusion The method is accurate，sensitive and simple，and can be used for the content determinations of Aurantio-obtusin and Chrysophanol in Shanzhuang Jiangzhi Tablets.The film-coating process can be used in large-scale production.

[Key words]Shanzhuang Jiangzhi Tablets；High performance liquid chromatography；Aurantio-obtusin；Chrysophanol；Film-coating process

山莊降脂片由決明子、山楂、荷葉三味藥材[1]組成，具有清熱活血、降濁通便等作用，多年臨床觀察本品療效顯著，無(wú)明顯毒副作用及不良反應(yīng)，具有較好的應(yīng)用前景?，F(xiàn)收載于中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑第十九冊(cè)（WS3-B-3544-98），目前該藥物的部頒標(biāo)準(zhǔn)比較簡(jiǎn)單，只有決明子薄層鑒別一項(xiàng)，達(dá)不到對(duì)藥品安全、有效、可控的質(zhì)量要求。另外，山莊降脂片為糖衣片，有生產(chǎn)周期長(zhǎng)、粉塵大、生產(chǎn)效率低、服用總量大等缺點(diǎn)，根據(jù)市場(chǎng)需求，并參考其他相關(guān)文獻(xiàn)[2-15]，本研究在保持原提取工藝不變的前提下，試驗(yàn)山莊降脂片薄膜包衣工藝，并應(yīng)用高效液相色譜法測(cè)定其有效成分橙黃決明素和大黃酚的含量，以保證藥品質(zhì)量和滿足臨床需要，現(xiàn)報(bào)道如下。

1儀器與材料

1.1儀器

Agilent 1260高效液相色譜儀，紫外檢測(cè)器；色譜柱（以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑）；AE 240十萬(wàn)分之一電子分析天平（瑞士梅特勒）；ZDHW調(diào)溫電熱套（北京中興偉業(yè)儀器有限公司）；202-3-BS電熱恒溫干燥箱（上海躍進(jìn)醫(yī)療器械有限公司）；R2002旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海申生科技有限公司）；RE-5286A旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海雅榮生化儀器有限公司）；F071026提取機(jī)組（中國(guó)武漢制藥機(jī)械有限責(zé)任公司）；SODA-16噴霧干燥機(jī)（上海大川原干燥設(shè)備有限公司）；DLB-3多功能制粒包衣機(jī)（重慶廣廈）；ZPS016旋轉(zhuǎn)式壓片機(jī)（中外合資上海天祥健臺(tái)制藥機(jī)械公司）。endprint

1.2材料

橙黃決明素對(duì)照品（批號(hào)111900-201001）、大黃酚對(duì)照品（批號(hào)110796-200716）均購(gòu)于中國(guó)藥品生物制品檢定所；決明子（Y312-100601）、山楂（Y352-090401）、荷葉（Y442-090901），由頸復(fù)康藥業(yè)集團(tuán)有限公司提供，且經(jīng)頸復(fù)康藥業(yè)集團(tuán)有限公司工程師商春麗鑒定為正品。乙腈（美國(guó)Fisher）、磷酸（天津市光復(fù)精細(xì)化工研究所）為色譜純；甲醇、無(wú)水乙醇、乙酸乙酯、稀鹽酸、三氯甲烷（天津佳興化工玻璃儀器工貿(mào)有限公司）分析純；水（純化水）。糖衣片（批號(hào)100301、 100302、100303）；薄膜衣片（批號(hào)100401、100402、100403）；陰性樣品及陰性樣品制備所用原料均由頸復(fù)康藥業(yè)集團(tuán)有限公司提供（由頸復(fù)康藥業(yè)集團(tuán)有限公司工程師中藥鑒別師商春麗鑒定為正品）。

2方法與結(jié)果

2.1橙黃決明素和大黃酚的含量測(cè)定方法

2.1.1色譜條件 色譜柱以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以乙腈為流動(dòng)相A，以0.1%磷酸溶液為流動(dòng)相B，進(jìn)行提速洗脫（表1），檢測(cè)波長(zhǎng)為284 nm。理論板數(shù)按橙黃決明素峰計(jì)算≥3000。

2.1.2對(duì)照品溶液的制備 取大黃酚對(duì)照品、橙黃決明素對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，加無(wú)水乙醇-乙酸乙酯（2：1）混合溶液制成每1 ml含大黃酚30 μg、橙黃決明素20 μg的混合溶液，即得對(duì)照品溶液。

2.1.3供試品溶液的制備 取重量差異項(xiàng)下的本品，去除薄膜衣，精密稱(chēng)定，研細(xì)，取約1 g，精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50 ml，稱(chēng)定重量，加熱回流1 h，放冷，再稱(chēng)定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液25 ml，蒸干，加稀鹽酸30 ml，三氯甲烷30 ml，置水浴中加熱水解30 min，立即冷卻，分出下層三氯甲烷液，再用三氯甲烷振搖提取3次，每次30 ml，合并三氯甲烷液，回收溶劑至干，殘?jiān)脽o(wú)水乙醇-乙酸乙酯（2：1）混合溶液使溶解，轉(zhuǎn)移至25 ml量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得供試品溶液。

2.1.4陰性對(duì)照溶液的制備 按處方中的藥味比例，配制不含決明子的陰性樣品，按“2.1.3”項(xiàng)下方法制備陰性對(duì)照溶液。

2.1.5專(zhuān)屬性試驗(yàn) 按“2.1.1”項(xiàng)下色譜條件，精密吸取對(duì)照品溶液、供試品溶液及陰性對(duì)照溶液各10 μl進(jìn)樣分析，結(jié)果，在該色譜條件下，陰性樣品無(wú)干擾（圖1）。

2.1.6線性關(guān)系的考察 精密吸取對(duì)照品溶液0.4、0.8、2.0、5.0、12.5 ml，配制成系列濃度的標(biāo)準(zhǔn)品溶液，分別精密量取10 μl注入色譜儀，記錄峰面積（表2），以5個(gè)峰面積對(duì)相應(yīng)濃度作圖（圖2～3），得到橙黃決明素回歸方程：A=62 019C+59 522（r=0.9998），在4.11～102.80 μg/ml范圍內(nèi)，線性關(guān)系顯著；大黃酚回歸方程：A=21 668C+44 677（r=0.9997），在6.82～170.40 μg/ml范圍內(nèi)，線性關(guān)系顯著，測(cè)定結(jié)果可信。

2.1.7精密度試驗(yàn) 取供試品溶液10 μl連續(xù)注針6次，記錄峰面積，計(jì)算RSD值（表3），結(jié)果大黃酚、橙黃決明素的RSD值分別為0.8%和1.8%，表明儀器精密度良好。

2.1.8穩(wěn)定性試驗(yàn) 取供試品溶液，分別在制備后0、1、2、4、8、12、24 h進(jìn)樣10 μl，記錄色譜峰面積（表4），橙黃決明素和大黃酚色譜峰面積的RSD值分別為0.9%和1.9%，供試品溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.1.9加樣回收率試驗(yàn) 精密稱(chēng)取100401批薄膜衣片的粉末9份，分為3組，分別用液相進(jìn)樣針精密加入橙黃決明素及大黃酚的低、中、高3個(gè)濃度的對(duì)照品溶液，按“2.1.3”項(xiàng)供試品溶液制備方法操作，得3個(gè)濃度的9個(gè)供試品溶液，分別精密量取供試品溶液、對(duì)照品溶液各10 μl，注入色譜儀，記錄峰面積，計(jì)算回收率（表5、6）。結(jié)果橙黃決明素平均回收率為98.84%，RSD值為1.47%，大黃酚平均回收率為100.62%，RSD值為0.81%。

2.2山莊降脂片薄膜衣片制備工藝的優(yōu)化

按原制劑工藝包薄膜衣后的片劑，其該薄膜衣片的崩解時(shí)限不符合制劑要求，試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)浸膏干燥方法是影響本品崩解的主要因素。浸膏干燥方法的選擇：考察浸膏在常壓烘箱干燥、減壓烘箱干燥、帶式連續(xù)減壓干燥、噴霧干燥四個(gè)干燥方法的差異，分別對(duì)干燥溫度、浸膏受熱時(shí)間、干燥總工時(shí)、決明子有效成分含量和片劑的崩解時(shí)間等指標(biāo)進(jìn)行考察，每批取6 kg浸膏，共進(jìn)行3個(gè)批次的平行試驗(yàn)，取平均值（表7）。在保證產(chǎn)品質(zhì)量前提下綜合各參數(shù)，選噴霧干燥作為本品薄膜衣片的浸膏干燥方法。

2.3優(yōu)化后工藝

2.3.1浸膏干燥及壓片工藝 將提取后的藥液濃縮到相對(duì)密度為1.08～1.12（65℃）的浸膏，按理論干膏量的1%加入二氧化硅（150目），充分?jǐn)嚢杌旌?0 min，過(guò)80目濾網(wǎng)，進(jìn)行噴霧干燥。噴霧干燥控制進(jìn)塔溫度156℃，出塔溫度83℃，控制物料泵轉(zhuǎn)速35 Hz左右，塔內(nèi)壓力為20～30 cm水柱的條件下進(jìn)行噴霧干燥，得干膏粉。濕法制粒，顆粒80℃干燥2～3 h，水分控制在6%～9%以?xún)?nèi)。壓片：片劑硬度在5.0～8.0 kg，脆碎度<1.0%。

2.3.2薄膜包衣工藝 包薄膜衣：包衣液濃度為13%。進(jìn)風(fēng)溫度控制為65℃，出風(fēng)溫度控制在40℃左右，片床溫度達(dá)43℃后開(kāi)始包衣，包衣鍋轉(zhuǎn)速開(kāi)始控制在4 r/min，30 min后控制在8 r/min，包衣液噴霧速度為5 g/min（換算成體積為33 ml/min），霧化壓力0.5 mPa，在此條件下進(jìn)行包衣。

2.3.3中試試驗(yàn)及驗(yàn)證試驗(yàn) 中試在小試基礎(chǔ)上放大到3.2萬(wàn)片，中試試驗(yàn)表明此工藝穩(wěn)定可行，產(chǎn)品質(zhì)量可控性較好，工藝可以用于大生產(chǎn)中（表8）。endprint

3討論

浸膏干燥方法對(duì)浸膏片的有效成分和崩解有較大影響，在含大黃蒽醌類(lèi)物質(zhì)的產(chǎn)品中表現(xiàn)尤甚。大黃蒽醌類(lèi)物質(zhì)有升華現(xiàn)象，常壓90℃干燥大黃蒽醌類(lèi)物質(zhì)升華現(xiàn)象不明顯，有效成分含量高，但片劑崩解時(shí)間長(zhǎng)。帶式連續(xù)減壓干燥時(shí)間比較短，片劑崩解時(shí)間也短，但由于其100℃以上直接加熱方式與烘箱有較大區(qū)別，大黃蒽醌類(lèi)物質(zhì)升華嚴(yán)重，有效成分比常壓干燥損失超過(guò)50%。試驗(yàn)結(jié)果提示，浸膏干燥方法與片劑的崩解時(shí)間有直接關(guān)系，干燥溫度和減壓與否對(duì)決明子有效成分大黃酚和橙黃決明素含量影響顯著。

本研究試驗(yàn)了一步制粒工藝，有效成分損失約40%，在本品生產(chǎn)中不能使用。分析認(rèn)為一步制粒工藝雖然先進(jìn)，但制粒過(guò)程中有大量新鮮熱空氣，以20 m3/min左右體積通過(guò)干膏粉時(shí)，加速大黃蒽醌類(lèi)物質(zhì)升華效應(yīng)，造成有效成分損失。所以，提示改進(jìn)工藝時(shí)需驗(yàn)證設(shè)備的適用性，這也是本研究獲得的寶貴經(jīng)驗(yàn)。

隨著制藥技術(shù)的發(fā)展，薄膜包衣技術(shù)大量應(yīng)用于中藥片劑的生產(chǎn)中[16-18]，與糖衣片比較，薄膜衣片具有生產(chǎn)周期短，產(chǎn)生粉塵少，生產(chǎn)效率高，輔料用量少，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定，外觀美觀且不含糖，不含滑石粉等優(yōu)點(diǎn)。本實(shí)驗(yàn)優(yōu)化薄膜衣制備工藝后，按照新藥研究要求，相應(yīng)提高了質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，優(yōu)化了生產(chǎn)工藝參數(shù)。

綜上所述，本研究所建立的山莊降脂片中橙黃決明素和大黃酚的含量測(cè)定方法準(zhǔn)確、靈敏、簡(jiǎn)便，可推廣應(yīng)用，優(yōu)化后的薄膜包衣工藝穩(wěn)定，質(zhì)量可控，可以用于大生產(chǎn)中。

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（收稿日期：2017-09-01 本文編輯：孟慶卿）endprint