徐劍培，徐群為，王曉琪，辛洪亮

(南京醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，南京 211166)

目前，在納米遞藥系統(tǒng)研究中，存在著諸如生物相容性差、血液循環(huán)壽命短、主動靶向性不足、生物膜屏障透過率不高等問題。尤其在血液循環(huán)中，會吸附大量非特異性蛋白質(zhì)和生物分子在其表面形成蛋白質(zhì)干擾層[1-2]，極大地影響了納米載體按照設(shè)計(jì)預(yù)期到達(dá)病灶部位并發(fā)揮應(yīng)有的療效。因此，基于機(jī)體循環(huán)系統(tǒng)中各種細(xì)胞仿生的新型遞藥系統(tǒng)應(yīng)運(yùn)而生，逐漸成為近年來生命科學(xué)領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)[3-4]。其中，血小板及其膜仿生遞藥系統(tǒng)(platelet and platelet membrane biomimetic drug delivery system)引起了研究者們極大的關(guān)注。血小板作為生物體內(nèi)的固有成分，可以逃避免疫系統(tǒng)清除，且和血管內(nèi)皮損傷修復(fù)[5-6]、免疫應(yīng)答[7-8]、動脈粥樣硬化形成[9]、神經(jīng)退行性變[10]、腫瘤生長轉(zhuǎn)移[11]等生理過程密不可分。血小板在參與這些機(jī)體反應(yīng)的過程中，能很好地靶向富集到反應(yīng)部位。所以，血小板及其膜仿生遞藥系統(tǒng)在腫瘤靶向、病原微生物吸附、血管內(nèi)皮損傷修復(fù)以及凝血等領(lǐng)域展現(xiàn)出巨大的應(yīng)用前景。本文綜述了基于血小板及其膜仿生遞藥系統(tǒng)的研究現(xiàn)狀與應(yīng)用，以期促進(jìn)血小板及其膜仿生載體在藥物遞送領(lǐng)域的研究與開發(fā)。

1 血小板的性質(zhì)和特點(diǎn)

血小板是由成熟巨核細(xì)胞分化出的無核細(xì)胞，平均粒徑在2～5 μm，是血液中體積最小的成分，其平均生命周期為7～10 d。隨著對血小板研究的深入，人們發(fā)現(xiàn)血小板在許多生理和病理過程中起到至關(guān)重要的作用，如參與血管內(nèi)皮損傷的修復(fù)過程：凝血和止血，維持血管完整性和誘導(dǎo)血栓形成等[5]。此外，還與組織修復(fù)[6]、免疫應(yīng)答[7-8]、動脈粥樣硬化形成[9]、神經(jīng)退行性變[10]以及腫瘤生長和轉(zhuǎn)移[11]等密切相關(guān)。

在血小板膜表面，富含多種特異性膜蛋白，如免疫調(diào)節(jié)蛋白CD47、CD55、CD59；整合素αⅡb、α2、α5、α6、β1、β3；穿膜蛋白GPIbα、GPIV、GPV、GPVI、GPIX、GLEC-2等。這些膜蛋白為血小板發(fā)揮特定生理作用提供了強(qiáng)有力的支持。例如在血管損傷時(shí)，血小板表面GPIb-IX-V受體上的GPIbα糖蛋白，損傷內(nèi)皮細(xì)胞分泌的血管性血友病因子(vWF)相結(jié)合，同時(shí)血小板表面的GPIa-IIa和GPVI 糖蛋白結(jié)合到損傷部位的內(nèi)皮下膠原蛋白，激活血小板及許多信號通路，使大量血小板聚集黏附于損傷血管處，形成纖維蛋白堵塞損傷部位[12]。

2 血小板及其膜仿生遞藥系統(tǒng)的種類

根據(jù)載藥方式與組裝方法，血小板及其膜仿生遞藥系統(tǒng)可以分為3類：(1)藥物共價(jià)偶聯(lián)在血小板膜上的載體；(2)藥物直接包載于血小板內(nèi)的載體；(3)血小板膜包覆的納米載體。

2.1 藥物共價(jià)偶聯(lián)在血小板膜上的載體

藥物共價(jià)偶聯(lián)在血小板膜上的載體，是以天然血小板為媒介，通過化學(xué)共價(jià)結(jié)合或生物工程手段將藥物偶聯(lián)或表達(dá)于血小板膜上的遞送載體(圖1)。其利用血小板在腫瘤組織、循環(huán)腫瘤細(xì)胞(CTC)、損傷血管等部位的靶向結(jié)合能力，將藥物遞送至病灶，隨后血小板激活，釋放含藥微粒起到治療作用。

Wang等[13]將程序化死亡配體1(PDL1)抑制劑修飾于未激活狀態(tài)的活體血小板上，用于腫瘤術(shù)后復(fù)發(fā)的免疫治療研究。Li等[14]通過基因工程手段在血小板表面表達(dá)誘導(dǎo)腫瘤凋亡的壞死因子，通過自體血小板與遷移腫瘤細(xì)胞的作用關(guān)系為靶向機(jī)制來抑制腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移。

圖1 藥物共價(jià)偶聯(lián)在血小板膜上的載體

2.2 藥物直接包載于血小板內(nèi)的載體

藥物直接包載于血小板內(nèi)的載體，是通過化學(xué)法、電穿孔法、胞吞法、低滲法和脂質(zhì)融合法等手段[15]，將藥物包載于天然血小板內(nèi)的遞送載體(圖2)。利用天然血小板的保護(hù)，可以提高藥物的穩(wěn)定性，減少不良反應(yīng)，增強(qiáng)治療效果。

Xu等[15]首次利用血小板上開放的微管系統(tǒng)，將阿霉素(DOX)物理包載于血小板內(nèi)，利用血小板對腫瘤部位的靶向結(jié)合特性，靶向治療淋巴瘤。應(yīng)用該遞藥載體對荷瘤小鼠給藥治療10 d后，與游離DOX相比，腫瘤體積縮小至原來的二分之一。

圖2 藥物直接包載于血小板內(nèi)的載體

2.3 血小板膜包覆的納米載體

血小板膜包覆的納米載體，是通過靜電吸附作用將血小板膜包覆于納米載體表面，亦可對其膜表面進(jìn)一步修飾的功能性遞送載體(圖3)。

從新鮮血液中提取的血小板，經(jīng)過分離、純化、凍融或漲破、離心等過程后，仍能較好地保留血小板膜蛋白，并在包覆于納米載體表面后發(fā)揮其原有的生理特性[16]。該類遞藥系統(tǒng)為納米載體提供一層生物偽裝外衣，在提高生物相容性和免疫逃逸能力的同時(shí)，還可以利用血小板膜上的游離氨基或者羧基進(jìn)行化學(xué)修飾，賦予該載體系統(tǒng)更加豐富的功能。

在血小板膜包覆的納米仿生遞藥系統(tǒng)研究中，加州大學(xué)圣地亞哥分校張良方教授團(tuán)隊(duì)開展了具有開創(chuàng)性的研究。他們利用靜電吸附，通過物理超聲的方法在聚乳酸-羥基乙酸共聚物(PLGA)納米粒表面包覆了一層約15 nm厚的單層血小板膜外衣，免疫印跡試驗(yàn)(Western blot)檢測結(jié)果顯示血小板膜蛋白(包括免疫調(diào)節(jié)蛋白、整合素以及其他穿膜蛋白等)大多數(shù)較完整的保留于血小板膜上[16]。

圖3 血小板膜包覆的納米載體

3 血小板及其膜仿生遞藥系統(tǒng)的特點(diǎn)

3.1 提高生物相容性，延長藥物體內(nèi)循環(huán)時(shí)間

普通治療藥物在體內(nèi)循環(huán)過程中，容易被機(jī)體免疫系統(tǒng)和代謝機(jī)制所清除，因而存在體內(nèi)循環(huán)時(shí)間短，藥物治療量不足等問題，而采用聚乙二醇(PEG)修飾的方法進(jìn)行改善，仍然可能產(chǎn)生“加速血液清除”(ABC)現(xiàn)象[17]。制備納米粒的材料，雖具有一定的生物相容性，但在血液循環(huán)過程中，仍易激活血液中的補(bǔ)體系統(tǒng)，吸附血液中的蛋白形成蛋白干擾層[3-4]，弱化了功能性納米粒的特異性，使其易被免疫系統(tǒng)所識別和清除。

血小板及其膜仿生遞藥系統(tǒng)可以利用血小板膜上調(diào)節(jié)免疫逃逸的CD47、抑制補(bǔ)體激活的CD55和CD59等提高其生物相容性，延長藥物體內(nèi)循環(huán)時(shí)間[16,18]。Hu等[16]通過阻斷包裹在納米粒表面的血小板膜上CD47受體，發(fā)現(xiàn)其被THP-1巨噬細(xì)胞吞噬量提高了1.6倍。在補(bǔ)體激活實(shí)驗(yàn)中，血小板膜包覆納米粒也未出現(xiàn)明顯補(bǔ)體激活現(xiàn)象。Wang等[13]通過將程序化死亡配體1(PDL-1)抑制劑接枝于未激活的天然血小板膜上，顯著延長了PDL-1抑制劑在體內(nèi)的半衰期，由原來的5 h延長到35 h。

3.2 增加藥物的穩(wěn)定性，減少不良反應(yīng)

蛋白多肽類藥物在體內(nèi)容易被酶水解失活，如組織中的蛋白質(zhì)水解酶、組織蛋白酶、溶酶體、膜結(jié)合的氨肽酶，血液中的二肽酶Ⅳ(DAP IV)，后脯氨酶斷裂酶(PPCE)等。將蛋白多肽類藥物包裹或修飾在血小板膜仿生遞藥系統(tǒng)中，可以減少酶及外界條件的降解，從而增加藥物的穩(wěn)定性。

細(xì)胞毒性化療藥物對正常細(xì)胞具有嚴(yán)重的不良反應(yīng)，將其裝于血小板及其膜仿生遞藥系統(tǒng)中，可以有效減少化療藥物的脫靶毒性。例如，Xu等[15]將DOX包載于天然血小板內(nèi)，在體外心臟毒性試驗(yàn)中，72 h共孵育后，仍有80%心肌細(xì)胞存活，表現(xiàn)出較小的細(xì)胞毒性。

3.3 增加藥物的主動靶向性

血小板膜表面富含許多功能性蛋白，在腫瘤的生長與遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移、血管損傷修復(fù)和病原微生物吸附結(jié)合方面有重要的作用。利用這些特點(diǎn)，可以增加血小板及其膜仿生遞藥系統(tǒng)的相關(guān)靶向性。

3.3.1 腫瘤靶向性 研究表明，血小板與腫瘤生長和轉(zhuǎn)移過程密切相關(guān)[19]。腫瘤細(xì)胞會分泌激活因子直接激活血小板，并通過GPIIb-IIIa-纖維蛋白原(fibrinogen)以及P選擇素-CD44與活化血小板結(jié)合，形成血小板-腫瘤異質(zhì)聚集體，這種聚集體更易被微脈管所截留，從而為腫瘤生長提供了有利的場所[20]。同時(shí)，血小板形成的保護(hù)層為腫瘤細(xì)胞遷移提供了良好的免疫逃逸環(huán)境，并為腫瘤細(xì)胞遷移嫁接了MHC Ⅰ型配體，從而避免其被自然殺傷細(xì)胞(NK cell)識別和清除。

Hu等[18]用羅丹明標(biāo)記血小板膜包覆的納米粒，與人乳腺癌細(xì)胞(MDA-MB-231)孵育2 h后，用激光共聚焦顯微鏡觀察到，包覆有血小板膜的納米粒通過P選擇素靶向腫瘤細(xì)胞膜上CD44受體的機(jī)制，不僅在細(xì)胞質(zhì)聚集，在腫瘤細(xì)胞膜表面也有大量分布，而裸納米粒僅在細(xì)胞質(zhì)中聚集。體內(nèi)動物實(shí)驗(yàn)表明，給藥48 h后，血小板膜包覆的納米粒在腫瘤部位的蓄積量為裸納米粒的1.9倍。

Li等[21]將腫瘤壞死因子凋亡相關(guān)配體(TRAIL)接枝于血小板膜包覆的二氧化硅納米粒上，在肺轉(zhuǎn)移瘤動物模型評價(jià)中，表現(xiàn)出高度的CTCs結(jié)合性，顯著減少了肺轉(zhuǎn)移瘤的形成。

3.3.2 血管內(nèi)皮損傷及血栓靶向性 血小板在體內(nèi)最主要的功能是參與血管損傷修復(fù)而止血。在血管損傷后凝血的第一階段，血小板通過損傷血管壁釋放的vWF結(jié)合到暴露的血管內(nèi)皮下膠原蛋白上，同時(shí)血小板膜表面的GP-Ib-V-IX糖蛋白復(fù)合物介導(dǎo)其結(jié)合至vWF因子A1區(qū)的GPIbα配體結(jié)合蛋白，GPIbα促進(jìn)血小板在高血流剪切力環(huán)境下吸附到損傷血管處[22-23]。隨后被激活的血小板如同蜘蛛網(wǎng)般黏附到血管壁上并相互粘連，形成血小板栓，堵塞損傷部位。此外，血小板的激活提高了其表面GPIIb-IIIa整合蛋白的表達(dá)，作為和纖維蛋白原相結(jié)合的受體，促進(jìn)了纖維蛋白和血小板的結(jié)合[24]。Hu等[16]利用該特性，將多西他賽擔(dān)載于血小板膜包覆的聚合物納米粒中，用于術(shù)后冠狀動脈再狹窄的治療。在SD大鼠血管損傷模型中，血小板膜包覆的多西他賽聚合物納米?？梢栽谘軆?nèi)皮損傷處大量蓄積，并可以滯留至少5 d。Hu等[25]將溶栓藥物組織纖維溶酶原激活劑(tPA)接枝于載有抗腫瘤藥物的血小板膜包覆聚合物納米粒表面，協(xié)同治療多發(fā)性骨髓瘤及并發(fā)血栓。在肺血栓模型評價(jià)中，接枝有tPA的血小板膜包覆聚合物納米粒表現(xiàn)出高于游離tPA組2倍的溶栓效果，這主要是由于血小板膜增強(qiáng)了tPA的血栓結(jié)合力，從而增加了tPA在血栓部位的蓄積量。

3.3.3 病原微生物靶向性 血小板幾乎和所有的病原微生物都有交互作用，并引起血小板的激活和聚集，如病毒、細(xì)菌、真菌和原生動物等。這些交互作用種類繁多，病原微生物表面的蛋白可以和血小板膜上的受體發(fā)生直接結(jié)合，也可以在二者之間通過血漿蛋白發(fā)生間接結(jié)合。在感染病原微生物后，病原微生物通過這種交互作用激活血小板，并引起大量血小板的吸附聚集。例如：鏈球菌通過其表面含有膠原蛋白樣表位的血小板激活蛋白結(jié)合并激活血小板[26]；幽門螺桿菌結(jié)合血漿中的vWF因子，再結(jié)合到血小板膜上的GPIbα[27]等。血小板膜仿生遞藥系統(tǒng)可以利用這種交互作用靶向病原微生物。

Hu等[16]將血小板膜包裹于PLGA納米粒表面，作為萬古霉素的遞送載體。以MRSA252(一種耐甲氧西林的金黃色葡萄球菌)為模型，該血小板膜仿生遞藥系統(tǒng)展現(xiàn)出良好的病原微生物靶向性。和裸納米粒相比，血小板膜包裹的萬古霉素納米粒的結(jié)合力提高了12倍，只需要1/6游離萬古霉素的劑量，就能達(dá)到同等的抑菌效果。

4 血小板及其膜仿生遞藥系統(tǒng)的應(yīng)用

4.1 在腫瘤靶向治療中的應(yīng)用

Hu等[18]利用血小板膜和腫瘤細(xì)胞間的相互作用，構(gòu)建了一種pH敏感殼-核結(jié)構(gòu)型血小板膜包覆的聚合物納米載體，用于靶向遞送TRAIL和DOX程序化雙重殺傷腫瘤細(xì)胞。當(dāng)該體系進(jìn)入血液循環(huán)后，在惡性腫瘤增強(qiáng)滲透和滯留(EPR)效應(yīng)下富集于腫瘤組織，通過載體表面血小板膜上高度表達(dá)的P選擇素主動靶向于腫瘤細(xì)胞表面高表達(dá)的CD44受體。接著血小板膜上接枝的TRAIL傳遞細(xì)胞凋亡信號到腫瘤細(xì)胞膜，引發(fā)細(xì)胞凋亡。隨后載體系統(tǒng)內(nèi)吞進(jìn)入腫瘤細(xì)胞內(nèi)，聚合物納米粒在細(xì)胞內(nèi)弱酸環(huán)境下解聚，釋放DOX，再次殺傷腫瘤細(xì)胞。該遞藥系統(tǒng)在作用腫瘤組織的同時(shí)，對循環(huán)腫瘤細(xì)胞同樣起到殺傷作用，從而抑制了腫瘤的遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移。

在多發(fā)性骨髓瘤治療中，經(jīng)常會出現(xiàn)血栓并發(fā)癥，從而使得多發(fā)性骨髓瘤患者死亡率提高了3倍[28]。Hu等[25]在血小板膜包覆納米粒的基礎(chǔ)上，聯(lián)合運(yùn)用tPA協(xié)同治療多發(fā)性骨髓瘤及并其并發(fā)血栓。他們將硼替佐米通過納米沉淀法包載于pH敏感聚合物納米粒中，然后在納米粒表面包被一層約20 nm厚的血小板膜，通過生物素-鏈親和素將tPA接枝于膜表面，同時(shí)修飾鈣離子螯合劑阿侖膦酸鈉作為靶向配體以增強(qiáng)載藥納米粒在骨髓微環(huán)境的靶向性。該載藥系統(tǒng)通過阿侖膦酸鈉靶向到骨髓瘤部位后，借助于血小板膜上P選擇素-CD44結(jié)合作用聚集于腫瘤細(xì)胞，釋放硼替佐米殺傷腫瘤細(xì)胞。而血小板膜上接枝的tPA發(fā)揮溶栓的治療作用，以應(yīng)對可能出現(xiàn)的血栓并發(fā)癥。

Li等[14]采用基因工程的方法在血小板膜上表達(dá)誘導(dǎo)腫瘤凋亡的壞死因子，通過血小板與循環(huán)腫瘤細(xì)胞的作用為靶向機(jī)制，抑制腫瘤細(xì)胞的遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移。他們采用血小板靶向慢病毒轉(zhuǎn)移基因法(platelet-targeted lentiviral transgene approach)，通過對造血干細(xì)胞和祖細(xì)胞(HSPCs)的基因改造，隨后進(jìn)行骨髓移植。在血小板膜上表達(dá)特異性TRAIL，通過HSPCs自我更新，由成熟巨核細(xì)胞持續(xù)產(chǎn)生表達(dá)TRAIL的血小板。在前列腺腫瘤轉(zhuǎn)移模型的評價(jià)中，這種基因工程修飾后的血小板明顯減少了腫瘤細(xì)胞的肝轉(zhuǎn)移率。

4.2 在抗病原微生物方面的應(yīng)用

Hu等[16]考察了血小板膜包覆的聚合物納米粒在病原微生物吸附方面的性能。在全身性細(xì)菌感染疾病模型中，用血小板膜包覆的聚合物納米粒包載萬古霉素進(jìn)行治療，和未包膜載藥納米粒及紅細(xì)胞膜包覆的載藥納米粒對比，治療效果得到明顯提高。

此外，Li等[29]開發(fā)了一種血小板膜仿生納米機(jī)器人(Nanorobot)用于清除體內(nèi)病原微生物。通過模板輔助的復(fù)合電沉積法制備磁性納米機(jī)器人，用超聲法將血小板膜包覆該納米機(jī)器人。借助外界磁場為其提供體內(nèi)航行能力，血小板膜為其提供免疫逃逸能力和病原吸附結(jié)合能力。在抗志賀病菌(Stx)的治療研究中，志賀病菌會特異性與血小板膜表面的鞘糖脂受體結(jié)合，從而在溶血性尿毒癥中造成血小板減少和激活，形成微血栓。正是利用了這一結(jié)合特性，該納米機(jī)器人能競爭性吸附結(jié)合志賀病菌，從而減少其對體內(nèi)正常血小板的結(jié)合以及對機(jī)體的損傷。在以外界磁場為動力的驅(qū)動下，能類似于清道夫在體內(nèi)快速、精準(zhǔn)地吸附清除相關(guān)病原微生物，從而起到治療的作用。

4.3 在治療血小板減少癥方面的應(yīng)用

免疫型血小板缺少性紫癜(immune thrombocytopenia purpura，ITP)是先天性免疫調(diào)節(jié)的血液功能紊亂，通常是由體內(nèi)的抗血小板自體抗體導(dǎo)致機(jī)體血小板含量過低，從而極易引發(fā)過量出血的疾病[30]。自身血小板抗體會特異性結(jié)合體內(nèi)的血小板，從而導(dǎo)致血小板被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)所清除，使得體內(nèi)大量血小板減少，影響機(jī)體正常生理功能?；诖?，Wei等[31]用PLGA納米粒為載體，運(yùn)用靜電吸附在其表面包覆一層血小板膜，將納米粒偽裝成血小板。通過制備的這種人造血小板，誘捕患者體內(nèi)的抗血小板自體抗體，替代天然血小板與該抗體的結(jié)合，從而保護(hù)了健康血小板。在其隨后的體內(nèi)外藥效學(xué)評價(jià)中，該血小板膜仿生納米藥物也表現(xiàn)出良好的治療效果，為免疫型血小板缺少性紫癜的治療提供了新的研究思路。

4.4 在血管內(nèi)皮損傷修復(fù)方面的應(yīng)用

Hu等[16]用血小板膜包覆聚合物納米粒遞送多西他賽，應(yīng)用于術(shù)后冠狀動脈再狹窄的治療。該系統(tǒng)利用包被在納米粒上的血小板膜上GPIV結(jié)合到損傷血管暴露的膠原蛋白，能有效防止血管內(nèi)膜的過度生長以及血流量的減少。

Modery-Pawlowski等[32]通過接枝功能性多肽于納米粒上，模仿血小板在血管損傷修復(fù)時(shí)的功能。他們以脂質(zhì)體作為模型粒子，通過雜化多原子配體的方法將膠原蛋白結(jié)合多肽(CBP)和vWF結(jié)合多肽(vBP)共修飾到粒子表面，模仿血小板的吸附，再修飾上仿纖維蛋白原多肽(FMP)提高血小板的聚集。通過調(diào)整vBP和CBP修飾的密度和比例，優(yōu)化體系在不同血流剪切力作用下的吸附能力。調(diào)整FMP的密度，優(yōu)化血小板的聚集作用，表現(xiàn)出較好的止血效果。Brown等[33]開發(fā)了質(zhì)地極軟的微凝膠仿生血小板形態(tài)學(xué)的功能。他們通過沉淀聚合法合成了超低交聯(lián)度(<0.5%)的異丙基丙烯酰胺-丙烯酸(pNIPAm-AAc)微凝膠。這種極低的交聯(lián)度為微凝膠提供了比天然血小板更優(yōu)的可變形性。同時(shí)通過噬菌體展示技術(shù)，篩選出了纖維蛋白特異性的sdFvs多肽，賦予該微凝膠特異性選擇損傷位點(diǎn)的纖維蛋白，而不與血液循環(huán)中的纖維蛋白原及血小板作用的能力。此外，該微凝膠在參與纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的形成后，其良好的可變形性能模擬出血小板的凝塊收縮能力，從而主動促進(jìn)傷口愈合后栓子的解聚清除。

4.5 在免疫治療中的應(yīng)用

免疫治療成為近年來的研究熱點(diǎn)，尤其是針對T細(xì)胞免疫檢查點(diǎn)PD-1/PD-L1的抗體療法在臨床上取得了顯著的療效，然而，在提高患者應(yīng)答率及療效，同時(shí)降低系統(tǒng)不良反應(yīng)方面，仍需更加深入的研究。由于手術(shù)切除是目前治療實(shí)體腫瘤的主要手段之一，利用血小板能在手術(shù)傷口富集止血的天然生理屬性，Wang等[13]將抗PD-L1(aPDL1)抗體通過偶聯(lián)劑共價(jià)連接于未激活的血小板膜上，該載體系統(tǒng)能夠在黑色素瘤術(shù)后位點(diǎn)富集并激活，從其膜上釋放出含有aPDL1的微粒，從而提高aPDL1向腫瘤術(shù)后部位的遞送。此外，該課題組還結(jié)合基因工程技術(shù)使血小板表達(dá)PD-1受體，使得工程化的血小板能在手術(shù)后的傷口處靶向富集并可活化成微小納米顆粒，識別并阻斷腫瘤細(xì)胞表面的PD-L1配體，從而激活CD8+T細(xì)胞來清除術(shù)后潛在的殘余腫瘤細(xì)胞。同時(shí)，將環(huán)磷酰胺直接包載于血小板內(nèi)，通過低濃度的環(huán)磷酰胺使得其在病灶處能夠特異性地殺傷調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Treg)，實(shí)現(xiàn)在阻斷腫瘤細(xì)胞PD-L1配體的基礎(chǔ)上，清除Treg細(xì)胞，雙管齊下激活T細(xì)胞，顯著增強(qiáng)了黑色素瘤的治療效果[34]。

5 展 望

血小板及其膜仿生遞藥系統(tǒng)是目前新型遞藥系統(tǒng)的研究熱點(diǎn)。將血小板及其膜與遞藥系統(tǒng)相結(jié)合，彌補(bǔ)了普通遞藥系統(tǒng)在生物性能方面的不足，為新型遞藥系統(tǒng)的研究提供了新的思路。

目前血小板及其膜仿生遞藥系統(tǒng)的研究大多應(yīng)用于腫瘤和病原微生物清除方面，對于心腦血管疾病方面的研究還不多。該類疾病，如缺血性腦卒中、腦血栓、動脈粥樣硬化等，會對周圍血管造成損傷，從而引發(fā)血小板的吸附和聚集。這為血小板及其膜仿生遞藥系統(tǒng)的應(yīng)用提供了靶向條件，如果將治療藥物包載或修飾于血小板中，或許可以極大提升藥物的遞送效果。

血小板及其膜仿生納米遞藥系統(tǒng)的研究與開發(fā)，其最終目的是為了應(yīng)用于臨床治療，為患者服務(wù)。然而，該遞藥系統(tǒng)在投入臨床研究前，還有較多困難和問題需要克服解決。如血小板是否必須來自患者本身，不同個體或種族的血小板是否影響療效，是否會產(chǎn)生個體排異現(xiàn)象等。又如，工業(yè)化生產(chǎn)時(shí)，如何獲取大量血小板，如何在生產(chǎn)過程中保留血小板的生物特性，如何確保制備工藝的穩(wěn)定等，這些問題還有待于科學(xué)家進(jìn)一步研究與探討。