樊文娜 王占彬 李潤林 李 佳 李棟棟 王成章*

(1.河南科技大學(xué)動物科技學(xué)院，洛陽 471003；2.河南農(nóng)業(yè)大學(xué)牧醫(yī)工程學(xué)院，鄭州 450002)

一直以來，皂苷因造成反芻動物瘤胃脹氣而被認(rèn)為是抗?fàn)I養(yǎng)因子，但大量試驗(yàn)證明這種觀點(diǎn)是片面的，適量的皂苷不僅可以提高單胃動物的生長性能[1-2]，且在減少氨氣排放、改善畜舍環(huán)境衛(wèi)生方面也有重要作用，對單胃動物而言也是其活性成分。苜蓿皂苷是從苜蓿中提取的天然活性物質(zhì)，具有強(qiáng)大的生物活性及功能，研究表明，皂苷具有抗腫瘤、提高免疫力、保護(hù)心血管及降低血糖、血脂和膽固醇等生物活性功能[4-9]。本文研究了飼糧不同苜蓿皂苷添加水平對產(chǎn)蛋雞生產(chǎn)性能、蛋品質(zhì)及抗氧化能力的影響，研究苜蓿皂苷在蛋雞飼糧中的應(yīng)用，旨在為蛋雞飼糧中使用苜蓿皂苷提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)用苜蓿皂苷提取物購自河北滄州，經(jīng)紫外分光光度計法測定其中苜蓿皂苷含量為50%。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計

試驗(yàn)采用單因素完全隨機(jī)設(shè)計，選擇健康、體重接近的190日齡海藍(lán)褐殼蛋雞150只，隨機(jī)分成5個組，每個組5個重復(fù)，每個重復(fù)6只雞。對照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，Ⅰ～Ⅳ組分別在基礎(chǔ)飼糧中添加60、120、240、480 mg/kg的苜蓿皂苷。試驗(yàn)期77 d。

1.3 基礎(chǔ)飼糧及飼養(yǎng)管理

蛋雞基礎(chǔ)飼糧營養(yǎng)水平參照NRC(1994)產(chǎn)蛋雞營養(yǎng)需要標(biāo)準(zhǔn)，基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。采用3層階梯式籠養(yǎng)，每天光照16 h，05:00至21:00，早晚輔助人工光照。自由采食與飲水。按常規(guī)程序?qū)Φ半u進(jìn)行防疫與雞舍消毒。每日06:00與15:00進(jìn)行飼喂，18:00采收雞蛋。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

1)預(yù)混料為每千克飼糧提供 Premix provided the following per kilogram of the diet: VA 12 000 IU，VD36 000 IU，VE 30 IU，VK 4 mg，VB1215 μg，VB12.6 mg，VB26.5 mg，VB510 mg，VB68.5 mg，生物素 biotin 2.5 mg，葉酸 folic acid 3 mg，煙酸 niacin 35 mg，Mn 26.2 mg，Cu 6.8 mg，Zn 25.9 mg，F(xiàn)e 60.1 mg，Se 0.11 mg。

2)營養(yǎng)水平為計算值。Nutrient levels were calculated values.

1.4 測定指標(biāo)與方法

每日以重復(fù)為單位記錄產(chǎn)蛋數(shù)與蛋重，計算產(chǎn)蛋率。每7 d統(tǒng)計1次采食量，計算平均日采食量。在第15、30、45、60天每個重復(fù)選取4枚雞蛋，測定雞蛋蛋品質(zhì)。試驗(yàn)結(jié)束時每個重復(fù)隨機(jī)選取2只蛋雞取肝臟、腿肌、胸肌部分組織保存于-20 ℃冰箱，用于測定抗氧化指標(biāo)。

1.4.1 生產(chǎn)性能指標(biāo)的測定

平均日采食量=總采食量/試驗(yàn)天數(shù)；料蛋比=采食量/蛋重；產(chǎn)蛋率=實(shí)際產(chǎn)蛋數(shù)/雞總只數(shù)。

1.4.2 蛋品質(zhì)指標(biāo)測定

哈氏單位、蛋黃顏色通過多功能蛋品分析儀測定；采用蛋殼強(qiáng)度計測定蛋殼強(qiáng)度；采用蛋殼厚度計測定蛋殼厚度。

蛋形指數(shù)=雞蛋縱徑/雞蛋橫徑。

1.4.3 抗氧化指標(biāo)測定

肝臟、腿肌、胸肌的丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性采用試劑盒測定，試劑盒由南京建成生物工程研究所提供。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

采用SPSS 13.0進(jìn)行單因素方差分析(one-way ANOVA)，結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，并用Duncan氏多重比較法對各組數(shù)據(jù)進(jìn)行處理。

2 結(jié) 果

2.1 苜蓿皂苷對蛋雞生產(chǎn)性能的影響

由表2可以看出，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ組蛋雞的平均日采食量較對照組都有降低的趨勢，其中，Ⅱ組蛋雞的平均日采食量較對照組顯著降低(P<0.05)；各組之間蛋雞的產(chǎn)蛋率均差異不顯著(P>0.05)；Ⅱ、Ⅲ組蛋雞的蛋重顯著低于對照組(P<0.05)；Ⅱ組蛋雞的料蛋比顯著低于對照組(P<0.05)，其余3組蛋雞的料蛋比與對照組無顯著差異(P>0.05)。

2.2 苜蓿皂苷對蛋雞蛋品質(zhì)的影響

由表3可以看出，第30天，Ⅰ組蛋黃顏色顯著高于對照組(P<0.05)，Ⅳ組蛋黃顏色顯著低于對照組(P<0.05)，Ⅱ組蛋黃比例顯著低于對照組(P<0.05)；第45天，Ⅱ、Ⅲ組蛋黃顏色顯著低于對照組(P<0.05)；第60天，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ組蛋黃顏色顯著低于對照組(P<0.05)，Ⅲ組蛋殼厚度顯著高于對照組(P<0.05)。

2.3 苜蓿皂苷對蛋雞肝臟、肌肉抗氧化指標(biāo)的影響

由表4可以看出，GSH-Px活性依次為腿肌>胸肌>肝臟，各組之間的肝臟、胸肌、腿肌GSH-Px活性均差異不顯著(P>0.05)。各組之間的肝臟、胸肌、腿肌SOD活性均差異不顯著(P>0.05)。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ組的肝臟、胸肌MDA含量較對照組都有降低，但差異不顯著(P>0.05)；Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ組的腿肌MDA含量較對照組都有降低，但差異不顯著(P>0.05)。飼糧添加120 mg/kg苜蓿皂苷的Ⅱ組的肝臟、胸肌和腿肌的GSH-Px、SOD活性均增加，MDA含量降低，但都沒有達(dá)到顯著水平(P>0.05)。

表2 苜蓿皂苷對蛋雞生產(chǎn)性能的影響

同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)，相同或無字母表示差異不顯著(P>0.05)。

In the same row, values with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05), while with the same or no letter superscripts mean no significant difference (P>0.05).

表3 苜蓿皂苷對雞蛋蛋品質(zhì)的影響

同列數(shù)據(jù)肩標(biāo)不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)，相同或無字母表示差異不顯著(P>0.05)。下表同。

In the same column, values with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05), while with the same or no letter superscripts mean no significant difference (P>0.05). The same as below.

表4 苜蓿皂苷對蛋雞肝臟、肌肉抗氧化指標(biāo)的影響

3 討 論

3.1 苜蓿皂苷對蛋雞生產(chǎn)性能的影響

飼糧添加苜蓿皂苷組蛋雞平均日采食量較對照組略有所降低，這可能是由于苜蓿皂苷的苦澀味以及對口腔與消化道的刺激作用造成了蛋雞采食量下降。早在1959年Heywang等[10]就將苜蓿皂苷添加到蛋雞飼糧中，結(jié)果表明蛋雞飼糧中皂苷添加水平為0.26%或0.40%時，雞蛋產(chǎn)量和平均日采食量顯著降低。侯永剛等[11]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加30、60、90 mg/kg苜蓿皂苷飼喂400日齡海藍(lán)褐蛋雞60 d，蛋雞產(chǎn)蛋率、蛋品質(zhì)與不添加苜蓿皂苷組相比均有所提高，料蛋比與對照組相比分別降低了1.8%、3.7%和3.1%。Dong等[12]飼喂1日齡肉仔雞苜蓿提取物，發(fā)現(xiàn)肉仔雞的腹脂率降低，免疫力增強(qiáng)，而其生產(chǎn)性能并未受到影響。多數(shù)研究認(rèn)為飼糧中添加苜蓿皂苷畜禽生產(chǎn)性能不會下降[11-14]，Anderson[15]發(fā)現(xiàn)，在飼糧中添加苜蓿皂苷可以提高蛋雞的產(chǎn)蛋率。Gü?lü等[16]在鵪鶉飼糧中添加苜蓿草粉后發(fā)現(xiàn)，飼糧添加9%的苜蓿草粉可以改善蛋殼質(zhì)量而且對其生產(chǎn)性能無不良影響。 張麗娜[17]指出，苜草素添加水平為500、1 000 mg/kg時，能顯著提高蛋雞的產(chǎn)蛋率和料蛋比。

蛋雞產(chǎn)蛋率受許多因素影響，其中血清極低密度脂蛋白(VLDL)與激素是影響產(chǎn)蛋率的2個重要指標(biāo)。當(dāng)血清VLDL含量低時，產(chǎn)蛋率就隨之降低，而不是以減小卵黃體積來維持蛋雞產(chǎn)蛋率[18]。卵泡刺激素(FSH)可在促黃體素(LH)協(xié)同作用下刺激卵泡成熟、排卵，抑制卵泡閉鎖的發(fā)生，提高卵泡數(shù)量，增加蛋雞產(chǎn)蛋率，蛋雞后期產(chǎn)蛋率的下降就與血清中FSH與LH含量降低有關(guān)[19]。研究表明，飼糧添加苜蓿皂苷組的血清中VLDL含量較未添加的對照組都有降低[20]。本試驗(yàn)結(jié)果表明，飼糧添加苜蓿皂苷降低了蛋雞的料蛋比，這與苜蓿皂苷組的采食量以及蛋重有關(guān)。

3.2 苜蓿皂苷對蛋雞蛋品質(zhì)的影響

雞蛋的品質(zhì)不僅包括雞蛋的外觀質(zhì)量，內(nèi)部指標(biāo)如哈氏單位、蛋黃顏色、蛋黃比例等也決定雞蛋的好壞。哈氏單位是反映雞蛋新鮮程度的重要指標(biāo)，雞蛋越新鮮，蛋白越濃稠且厚度越大，哈氏單位隨之越大，一般新鮮雞蛋哈氏單位的正常變化范圍為75～85，有的也可達(dá)90[20]。蛋黃顏色一定程度上影響蛋禽的消費(fèi)，消費(fèi)者會認(rèn)為蛋黃顏色深的雞蛋品質(zhì)越好，由于蛋雞本身不能合成蛋黃色素沉積的物質(zhì)——葉黃素，所以理想蛋黃顏色依賴于飼糧中葉黃素的質(zhì)與量。本試驗(yàn)后期雞蛋的哈氏單位大部分在正常范圍內(nèi)且苜蓿皂苷組的哈氏單位比對照組略大，說明苜蓿皂苷在一定程度有維持雞蛋新鮮的作用。

蛋殼厚度是最早用于評價蛋殼質(zhì)量指標(biāo)，也是一直作為評價蛋殼質(zhì)量優(yōu)劣的主要指標(biāo)之一[21]。Deng等[22]在高產(chǎn)蛋雞飼糧中添加苜蓿提取物后發(fā)現(xiàn)，雞蛋蛋殼厚度得到改善。蛋殼厚度反映了蛋殼的致密程度，是反映蛋殼質(zhì)量的重要指標(biāo)，也是影響雞蛋破損率的重要因素。Tyler[23]報道稱，蛋殼厚度和蛋殼破損率之間存在顯著的非線性關(guān)系。王修啟等[24]認(rèn)為，蛋殼的正常厚度為0.20～0.48 mm，厚度微小的變化對蛋殼破損率有很大的影響。蛋雞的周齡大，夏季高溫及疫病感染等因素常會導(dǎo)致蛋殼厚度變薄，破蛋率升高。本試驗(yàn)蛋殼厚度都在正常值范圍內(nèi)，但苜蓿皂苷組整個試驗(yàn)期蛋殼強(qiáng)度有增加的趨勢。

蛋黃比例越大，雞蛋的營養(yǎng)價值也就越高[25-26]。本試驗(yàn)結(jié)果表明，苜蓿皂苷對雞蛋顏色無顯著影響，苜蓿皂苷本身不含有葉黃素。但本試驗(yàn)后期(第60天)對照組的蛋黃顏色顯著高于苜蓿皂苷組，蛋黃顏色隨著苜蓿皂苷添加水平的增加而呈下降的趨勢。

蛋形指數(shù)關(guān)系到種蛋價值與破蛋率[27-30]。一般蛋形指數(shù)正常值在1.30～1.35之間，大于1.35的細(xì)長形與小于1.30的球形都易在雞蛋的運(yùn)輸與包裝分級時破損。本試驗(yàn)的蛋形指數(shù)集中于1.25～1.27，雖然較正常值偏小近似于球形蛋，說明苜蓿皂苷對雞蛋的破損率無影響。

3.3 苜蓿皂苷對蛋雞肝臟、肌肉抗氧化指標(biāo)的影響

4 結(jié) 論

① 蛋雞飼糧中添加120 mg/kg苜蓿皂苷降低了蛋雞的平均日采食量和料蛋比，且蛋雞的產(chǎn)蛋率沒有下降，但蛋重有所降低。

② 蛋雞飼糧中添加苜蓿皂苷對蛋品質(zhì)的影響沒有明顯規(guī)律，試驗(yàn)后期(第60天)飼糧添加苜蓿皂苷的Ⅰ～Ⅳ組蛋黃顏色顯著降低。

③ 蛋雞飼糧中添加120 mg/kg苜蓿皂苷有提高肝臟、胸肌和腿肌的抗氧化指標(biāo)的趨勢。

④ 綜合分析，蛋雞飼糧中添加120 mg/kg的苜蓿皂苷效果較好。

[1] JOHNSTON N L,QUARLES C L,FAGERBERG D J,et al.Evaluation of yucca saponin on broiler performance and ammonia suppression.Poultry Science,1981,60(10):2289-2292.

[2] 王亞軍,王秀利.人參莖葉皂苷對肉仔雞生長性能和屠體品質(zhì)的影響.中國家禽,2007,29(10):38-40,41.

[3] 步長英.絲蘭皂甙、芽孢桿菌對肉雞生產(chǎn)性能、氮代謝和排泄物氨氣散發(fā)量的影響.碩士學(xué)位論文.泰安:山東農(nóng)業(yè)大學(xué),2008:42-54.

[4] 章學(xué)東,湯麗萍,錢定海.苜蓿在養(yǎng)雞生產(chǎn)中應(yīng)用的研究進(jìn)展.中國家禽,2007,29(23):36-39.

[5] SEN S,MAKKAR H P,BECKER K.Alfalfa saponins and their implication in animal nutrition.Journal of Agricultural and Food Chemistry,1998,46(1):131-140.

[6] CHEEKE P R.Biological effects of feed and forage saponins and their impacts on animal production.Advances in Experimental Medicine & Biology,1996,405:377-385.

[7] CHEEKE P R,PIACENTE S,OLESZEK W.Anti-inflammatory and anti-arthritic effects of yucca schidigera:a review.Journal of Inflammation,2006,3(1):6.

[8] MILGATE J,ROBERTS D C K.The nutritional & biological significance of saponins.Nutrition Research,1995,15(8):1223-1249.

[9] RAO A V,GURFINKEL D M.The bioactivity of saponins:triterpenoid and steroidal glycosides.Drug Metabolism & Drug Interactions,2000,17(1/2/3/4):211-235.

[10] HEYWANG B W,THOMPSON C R,KEMMERER A R.Effect of alfalfa saponin on laying chickens.Poultry Science,1959,38(4):968-971.

[11] 侯永剛,陳輝,黃仁錄,等.苜蓿皂甙對蛋雞生產(chǎn)性能、屠體指標(biāo)、膽固醇及血清脂質(zhì)的影響.中國畜牧雜志,2009,45(17):30-33.

[12] DONG X F,GAO W W,TONG J M,et al.Effect of polysavone (alfalfa extract) on abdominal fat deposition and immunity in broiler chickens.Poultry Science,2007,86(9):1955-1959.

[13] 王長康,劉昊,邵良平.苜草素對蛋雞生產(chǎn)性能和血液生化指標(biāo)的影響.福建農(nóng)業(yè)學(xué)報,2006,21(3):215-218.

[14] 侯永剛.苜蓿皂甙對蛋雞生產(chǎn)性能、膽固醇及腸道主要菌群的影響.碩士學(xué)位論文.保定:河北農(nóng)業(yè)大學(xué),2009:19-27.

[15] ANDERSON J O.Effect of alfalfa saponin on the performance of chicks and laying hens.Poultry Science,1957,36(4):873-876.

[16] Gü?Lü B K,ICAN K M,UYANIK F,et al.Effect of alfalfa meal in diets of laying quails on performance,egg quality and some serum parameters.Archives of Animal Nutrition,2004,58(3):255-263.

[17] 張麗娜.苜草素對蛋雞生產(chǎn)性能及其雞蛋與組織脂質(zhì)的影響.碩士學(xué)位論文.揚(yáng)州:揚(yáng)州大學(xué),2010:16-19.

[18] SHIVAPRASAD H L,JAAP R G.Egg and yolk production as influenced by liver weight,liver lipid and plasma lipid in three strains of small bodied chickens.Poultry Science,1977,56(5):1384-1390.

[19] CICCONE N A,SHARP P J,WILSON P W,et al.Changes in reproductive neuroendocrine mRNAs with decreasing ovarian function in ageing hens.General and Comparative Endocrinology,2005,144(1):20-27.

[20] 李佳.苜蓿皂苷對蛋雞膽固醇代謝影響.碩士學(xué)位論文.鄭州:河南農(nóng)業(yè)大學(xué),2012:14-29.

[21] KHATKAR M S,SANDHU J S,BRAH G S,et al.Estimation of egg shell breaking strength from egg characteristics in layer chickens.Indian Journal of Poultry Science,1997,32:111-113.

[22] DENG W,DONG X F,TONG J M,et al.Effects of an aqueous alfalfa extract on production performance,egg quality and lipid metabolism of laying hens.Journal of Animal Physiology and Animal Nutrition,2012,96(1):85-94.

[23] TYLER C.Shell strength:its measurement and its relationship to other factors.British Poultry Science,1961,2(1/2/3):3-19.

[24] 王修啟,鄭海剛,安汝義,等.影響蛋殼質(zhì)量的因素及改善措施.中國家禽,1999(7):39-40.

[25] 曲湘勇,中島隆.天然著色劑提高蛋黃色澤度的比較研究.中國畜牧雜志,1999,35(2):29-31.

[26] 郭文凱,陳志峰,霍明東,等.籽鵝種蛋蛋重與蛋形指數(shù)對孵化效果影響的研究.中國畜牧獸醫(yī),2016,43(10):2710-2715.

[27] 張慧君,李福林.蛋形指數(shù)對孵化效果的影響.北方農(nóng)業(yè)學(xué)報,2008(2):65-66.

[28] 姜小雨,張子元,吳勇,等.蛋形指數(shù)蛋重及種蛋貯放對孵化率的影響.四川畜牧獸醫(yī),1991(2):16-17.

[29] 房興堂,鄒俊國.蛋型指數(shù)對孵化率的影響.中國畜牧雜志,1992,5(1):5-6.

[30] 吳華東,吳志青,舒鄧群.鴻雁蛋重和蛋形指數(shù)對種蛋孵化率影響的研究.江西畜牧獸醫(yī)雜志,2010(5):14-15.

[31] KEANEY J F,Jr,VITA J A.Atherosclerosis,oxidative stress,and antioxidant protection in endothelium-derived relaning factor action.Progress in Cardiovascular Diseases,1995,38(2):129-154.

[32] CAMANDOLA S,POLI G,MATTSON M P.The lipid peroxidation product 4-hydroxy-2,3-nonenal increases ap-1-binding activity through caspase activation in neurons.Journal of Neurochemistry,2000,74(1):159-168.

[33] 王成章,王彥華,史瑩華,等.苜蓿皂苷對斷奶仔豬脂質(zhì)代謝、抗氧化和免疫的影響.草業(yè)學(xué)報,2011,20(4):210-218.

[34] 雒愛玲.苜蓿皂甙和大黃素對肉仔雞生長性能、肉品質(zhì)及膽固醇代謝影響研究.碩士學(xué)位論文.鄭州:河南農(nóng)業(yè)大學(xué),2008:16-30.