路晶晶 郭 冉* 夏 輝 解 偉 王美雪 楊品賢 李 娜

(1.河北農(nóng)業(yè)大學(xué)海洋學(xué)院，秦皇島 066000；2.山東省高唐縣第一中學(xué)，聊城 252000)

近年來，隨著水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的迅速發(fā)展，凡納濱對蝦集約化養(yǎng)殖也在極力推進，隨之作為優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)源的魚粉需求量急劇上升，價格與日俱增。無論從養(yǎng)殖成本還是對養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展要求考慮，探索新的飼料蛋白質(zhì)源已經(jīng)成為研究的熱點[2-4]。動物對飼料中各種氨基酸的吸收并不僅僅受到單一限制性氨基酸的影響。20世紀60年代，Newey等[6-8]通過研究表明甘氨酸二肽可以完整吸收，這為消化道可以吸收肽的理論提供了有力的證據(jù)。許培玉等研究發(fā)現(xiàn)，在南美白對蝦飼料中添加小肽制品后蛋白酶活性顯著提高，提高蛋白質(zhì)的利用率。國內(nèi)外大量研究表明，可以通過酶降解技術(shù)來制備肽含量豐富的飼用羽毛粉肽，其中姚清華等[10]用不同技術(shù)成功制取風味和口感均較好的飼用羽毛粉肽。家禽副產(chǎn)物羽毛粉、血粉是很好的蛋白質(zhì)原料，但存在角蛋白、硬質(zhì)蛋白等消化吸收率極低的蛋白質(zhì)，影響了蛋白質(zhì)的吸收利用。以酶解大豆蛋白為載體，采用生物酶工程技術(shù)將家禽羽毛粉和血粉分解為多肽、小肽和單個氨基酸，制成功能性蛋白肽家禽副產(chǎn)物酶解肽(peptides hydrolyzed from poultry by-products，PHFP)，可提高消化吸收率[11]。此外，作為替代魚粉的飼料原料還要考慮一個重要的問題——氨基酸平衡問題。雖然家禽副產(chǎn)物酶解肽含有豐富的半胱氨酸、蘇氨酸、異亮氨酸等必需氨基酸，但對于凡納濱對蝦的限制性氨基酸蛋氨酸的含量卻遠低于魚粉。有研究表明，在水產(chǎn)動物中用羽毛粉搭配氨基酸可以節(jié)省部分魚粉，來降低飼料成本[12]。因此，本試驗采用家禽副產(chǎn)物酶解肽為原料搭配包膜蛋氨酸，以凡納濱對蝦為研究對象，研究其在飼料中部分替代魚粉對凡納濱對蝦生長性能和非特異性免疫指標的影響。

1 材料與方法

1.1 飼料的制作

家禽副產(chǎn)物酶解肽由秦皇島益爾生物科技有限公司生產(chǎn)，小肽含量在12%以上，粗蛋白質(zhì)含量在60%以上，酸溶蛋白含量在30%以上，其主要營養(yǎng)成分含量見表1，分子質(zhì)量分布見表2。由于家禽副產(chǎn)物酶解肽中的限制性氨基酸蛋氨酸含量較國產(chǎn)魚粉低，因此試驗中在家禽副產(chǎn)物酶解肽基礎(chǔ)上添加包膜蛋氨酸，使其蛋氨酸含量達到國產(chǎn)魚粉蛋氨酸含量(1.7%)，制成預(yù)混家禽副產(chǎn)物酶解肽。以預(yù)混家禽副產(chǎn)物酶解肽分別替代基礎(chǔ)飼料中0(對照)、2%、4%、6%、8%的魚粉，共制成5種試驗飼料，分別命名為T0、T1、T2、T3、T4。飼料原料經(jīng)粉碎機粉碎后過80目篩網(wǎng)，按飼料配方(表3)混合均勻，用雙螺桿壓條機擠壓成直徑為1.2 mm的顆粒飼料，經(jīng)60 ℃熟化40 min，30 ℃恒溫干燥3 h冷卻后封入自封袋，于-20 ℃冰箱中保存。

1.2 飼養(yǎng)管理

蝦苗采購于黃驊市鑫海生物技術(shù)有限公司，為進口凡納濱對蝦自交系F1代。蝦苗暫養(yǎng)2周以適應(yīng)養(yǎng)殖環(huán)境后，選取900尾健康活潑的蝦苗[平均]體重為(0.31±0.10) g]，隨機分到15個水族箱(60 cm×40 cm×50 cm)，每箱放養(yǎng)60尾，隨機選3箱為1組，共5組，每組飼喂1種試驗飼料，進行為期8周的養(yǎng)殖試驗。養(yǎng)殖試驗期間每日定時(08：00、14:00、20:00)按體重的7%～10%定量投喂，每日吸污2次，換水1/3～1/2，并記錄投喂量和死亡情況，每2周測定1次養(yǎng)殖水體的鹽度、pH及溶解氧和氨氮含量。試驗過程中養(yǎng)殖水體的鹽度為(30.5±0.5)‰，溫度為(27±1) ℃，溶解氧含量為(7.6±0.7) mg/L，氨氮含量為(0.48±0.13) mg/L，pH穩(wěn)定在8.0～8.6。飼養(yǎng)6周后，每次投喂2 h后采用虹吸法收集糞便于培養(yǎng)皿中，挑取包膜完整的糞便于稱量瓶中，70 ℃烘干后保存于-20 ℃冰箱中用于飼料中營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的測定。

表1 家禽副產(chǎn)物酶解肽的主要營養(yǎng)成分含量(干物質(zhì)基礎(chǔ))

表2 家禽副產(chǎn)物酶解肽的分子質(zhì)量分布

表3 試驗飼料組成及營養(yǎng)水平(干物質(zhì)基礎(chǔ))

其他包含Contained the following of the others：蝦粉 chrimp meal 11%，發(fā)酵花生粕fermented peanut meal 13%，豆粕 soybean meal 26%，維生素C磷酸酯 vitamin C phosphate 0.5%，Ca(H2PO4)22%，玉米油 corn oil 1%，大豆磷脂油 soybean lecithin oil 1%，膽堿 choline 0.5%，羧甲基纖維素 CMC 1%，誘食劑 attractant 0.1%，三氧化二鉻 Cr2O30.02%，復(fù)合維生素 multi-vitamins 2%，復(fù)合礦物鹽 multi-minerals 1%。其中，復(fù)合維生素的組成為Composition of multi-vitamins：氯化膽堿 choline chloride 5.55%，肌醇 inositol 2.22%，VC 1.11%，泛酸鈣 calcium pantothenate 0.83%，VB10.22%，VB20.56%，VB60.06%，VK 0.06%，葉酸 folic acid 0.02%，VB120.012%，生物素 biotin 0.006%，醋酸α-生育酚 alpha tocopherol acetate 0.44%，纖維素 cellulose 88.912%。復(fù)合礦物鹽的組成為Composition of multi-minerals：Ca(H2PO4)·2H2O 12.29%，乳酸鈣 calcium lactate 47.41%，NaH2PO4·2H2O 4.20%，NaCl 3.23%，K2SO416.38%，KCl 6.58%，F(xiàn)eSO4·7H2O 1.07%，檸檬酸鐵 ferric citrate 3.83%，MgSO4·7H2O 4.42%，ZnSO40.47%，MnSO4·H2O 0.033%，CuSO4·5H2O 0.022%，CoCl2·6H2O 0.043%，KIO40.022%。

1.3 樣品采集

養(yǎng)殖試驗結(jié)束后，饑餓24 h后每箱分別計數(shù)和稱重，然后每箱隨機取6尾蝦，擦干體表水分后稱重，用于全蝦營養(yǎng)成分分析；每箱再隨機取10尾蝦，以2.5 mL一次性注射器于頭胸甲后緣圍心腔內(nèi)吸取0.5 mL血淋巴，再加入1.5 mL抗凝劑混合均勻后立即以100×g、4 ℃離心10 min，棄血細胞和沉淀留上清液即為血漿，4 ℃保存；取完血淋巴后，于冰盤上將對蝦解剖，取肝胰腺稱重后液氮迅速冷凍，-80 ℃保存。

1.4 指標測定

1.4.1 肝胰腺組織勻漿的制備

取肝胰腺組織于冰冷的生理鹽水中漂洗(除去血液)，用濾紙拭干后稱取0.5 g放入10 mL離心管中，加入勻漿介質(zhì)[含0].01 mol/L Tris-HCl、0.000 1 mol/L乙二胺四乙酸二鈉(EDTA-2Na)、0.01 mol/L蔗糖、0.137 mol/L氯化鈉的溶液，pH=7.4]，采用內(nèi)切式組織勻漿機勻漿5次(冰水浴下)，每次10 s，制備成10%的肝胰腺組織勻漿，用于消化及免疫指標的測定。

1.4.2 測定方法

飼料和蝦糞便中的三氧化二鉻(Cr2O3)含量采用SCT 1089—2006《魚類消化率測定方法》中的酸消化比色法測定，水分含量采用105 ℃烘干減重法測定，粗蛋白質(zhì)含量采用凱氏定氮法測定，粗脂肪含量采用索氏抽提法測定，粗灰分含量采用550 ℃馬弗爐灰化法測定。血漿葡萄糖(GLU)、甘油三酯(TG)含量由秦皇島海港醫(yī)院檢驗中心測定，淀粉酶(碘-淀粉比色法)、脂肪酶(比濁法)、胃蛋白酶(福林試劑比色法)、胰蛋白酶[N-]苯甲酰-L-精氨酸乙酯(BAEE)法]、溶菌酶(LZM，自身對照法)、過氧化物酶(POD，酚比色法)活性和總抗氧化能力(T-AOC，F(xiàn)RAP法)的測定均采用南京建成生物工程研究所生產(chǎn)的試劑盒檢測。

凡納濱對蝦的生長性能及飼料中營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率等指標根據(jù)以下公式計算：

存活率(SR，%)=100×Nt/N0；增重率(WGR，%)=100×(Wt-W0)/W0；特定生長率(SGR,%/d)=100×(lnWt-lnW0)/t；蛋白質(zhì)效率(PER,%)=100×(Wt-W0)/(F×P)；飼料系數(shù)(FCR)=F/(Wt-W0)；肥滿度(CF,%)=100×Wt/L3；粗蛋白質(zhì)表觀消化率(ADCP,%)=100×[1-](A’/A)×(C/C’)]；粗脂肪表觀消化率(ADCF,%)=100×[1-](B’/B)×(C/C’)]。

式中：N0為初始蝦尾數(shù)；Nt為終末蝦尾數(shù)；W0為蝦初始體重(g)；Wt為蝦終末體重(g)；t為試驗天數(shù)(d)；P為飼料中粗蛋白質(zhì)含量(%)；F為飼料攝食量(g)；L為蝦體長(cm)；A為飼料中粗蛋白質(zhì)含量(%)；A’為糞便中粗蛋白質(zhì)含量(%)；B為飼料中粗脂肪含量(%)；B’為糞便中粗脂肪含量(%)；C為飼料中Cr2O3含量(%)；C’為糞便中Cr2O3含量(%)。

1.5 數(shù)據(jù)分析

試驗結(jié)果用平均值±標準差(mean±SD)表示，數(shù)據(jù)利用SPSS 17.0軟件進行單因素方差分析(one-way ANOVA)，并采用Duncan氏法進行組間的多重比較，差異顯著性水平為P<0.05。

2 結(jié) 果

2.1 家禽副產(chǎn)物酶解肽對凡納濱對蝦生長性能的影響

由表4可知，隨著家禽副產(chǎn)物酶解肽替代魚粉水平的增加，凡納濱對蝦的終末體重、增重率、特定生長率、蛋白質(zhì)效率均表現(xiàn)出逐漸降低趨勢，但T1、T2、T3組與T0組無顯著差異(P>0.05)，T4組顯著低于T0、T1組(P<0.05)；飼料系數(shù)則呈現(xiàn)上升趨勢，但T1、T2、T3組與T0組無顯著差異(P>0.05)，T4組顯著低于T0組(P<0.05)；各組凡納濱對蝦的存活率和肥滿度無顯著差異(P>0.05)，肥滿度隨著家禽副產(chǎn)物酶解肽替代魚粉水平的增加呈現(xiàn)先增加后降低的趨勢，以T2組肥滿度的值最大。

表4 家禽副產(chǎn)物酶解肽對凡納濱對蝦生長性能的影響

同行數(shù)據(jù)肩標無字母或相同字母表示差異不顯著(P>0.05)，不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)。下表同。

In the same row, values with no letter or the same letter superscripts mean no significant difference (P>0.05), while with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05). The same as below.

2.2 家禽副產(chǎn)物酶解肽對凡納濱對蝦體成分的影響

由表5可知，隨著家禽副產(chǎn)物酶解肽替代魚粉水平的增加，凡納濱對蝦全蝦粗脂肪含量呈現(xiàn)逐漸降低趨勢，當替代水平超過2%時(T2、T3、T4組)與T0組的差異達到顯著水平(P<0.05)；全蝦粗灰分呈現(xiàn)逐漸增加趨勢，當替代水平超過2%時(T2、T3、T4組)與T0組的差異達到顯著水平(P<0.05)；全蝦水分、粗蛋白質(zhì)含量均無顯著差異(P>0.05)。

表5 家禽副產(chǎn)物酶解肽對凡納濱對蝦體成分的影響

2.3 家禽副產(chǎn)物酶解肽對凡納濱對蝦血漿中GLU、TG含量的影響

由表6可知，各替代組(T1、T2、T3、T4組)血漿中GLU含量均顯著低于T0組(P<0.05)；血漿中TG含量除T3組與T0組無顯著差異(P>0.05)外，其余替代組均顯著低于T0組(P<0.05)。

表6 家禽副產(chǎn)物酶解肽對凡納濱對蝦血漿中GLU、TG含量的影響

2.4 家禽副產(chǎn)物酶解肽對凡納濱對蝦消化指標的影響

2.4.1 家禽副產(chǎn)物酶解肽對凡納濱對蝦營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響

由表7可知，隨著家禽副產(chǎn)物酶解肽替代魚粉水平的增加，粗蛋白質(zhì)表觀消化率呈現(xiàn)逐漸降低的趨勢，粗脂肪表觀消化率則呈先增加后降低的趨勢，但組間差異均不顯著(P>0.05)。

2.4.2 家禽副產(chǎn)物酶解肽對凡納濱對蝦肝胰腺中消化酶活性的影響

由表8可知，隨著家禽副產(chǎn)物酶解肽替代魚粉水平的增加，凡納濱對蝦肝胰腺中胃蛋白酶和胰蛋白酶活性均逐漸降低。其中，T1、T2、T3組胃蛋白酶活性與T0組無顯著差異(P>0.05)，T4組則顯著低于T0組(P<0.05)；T2、T4組胰蛋白酶活性顯著低于T0組(P<0.05)，其他替代組與T0組無顯著差異(P>0.05)。各替代組肝胰腺中脂肪酶活性均高于T0組，以T1組最高，但各組間無顯著差異(P>0.05)。各組肝胰腺中淀粉酶活性無顯著差異(P>0.05)。

表7 家禽副產(chǎn)物酶解肽對凡納濱對蝦營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響

表8 家禽副產(chǎn)物酶解肽對凡納濱對蝦肝胰腺中消化酶活性的影響

2.5 家禽副產(chǎn)物酶解肽對凡納濱對蝦血漿和肝胰腺中LZM活性的影響

由表9可知，隨著家禽副產(chǎn)物酶解肽替代魚粉水平的增加，凡納濱對蝦血漿中LZM活性呈現(xiàn)出先增加后降低的趨勢，T1、T2、T3組血漿中LZM活性顯著高于T0組(P<0.05)，以T3組血漿中LZM活性最高，T4組血漿LZM活性與T0組無顯著差異(P>0.05)；肝胰腺中LZM活性隨著家禽副產(chǎn)物酶解肽替代魚粉水平的增加也呈現(xiàn)先增加后降低的趨勢，T1、T2、T3組分別比T0組高出19.3%、42.5%和5.0%，但差異未達顯著水平(P>0.05)，T4組較T0組有所低，但差異未達顯著水平(P>0.05)。

表9 家禽副產(chǎn)物酶解肽對凡納濱對蝦血漿和肝胰腺中LZM活性的影響

2.6 家禽副產(chǎn)物酶解肽對凡納濱對蝦血漿和肝胰腺中POD活性的影響

由表10可知，T1組血漿中POD活性與T0組無顯著差異(P>0.05)，但T2、T3、T4組則顯著低于T0組(P<0.05)；隨著家禽副產(chǎn)物酶解肽替代魚粉水平的增加，肝胰腺中POD活性逐漸降低，但各組間無顯著差異(P>0.05)。

表10 家禽副產(chǎn)物酶解肽對凡納濱對蝦血漿和肝胰腺POD活力的影響

2.7 家禽副產(chǎn)物酶解肽對凡納濱對蝦血漿和肝胰腺中T-AOC的影響

由表11可知，各替代組血漿和肝胰腺中T-AOC與T0組無顯著差異(P>0.05)。除T1組血漿T-AOC略低于對照組外，其他替代組血漿T-AOC均高于T0組。肝胰腺中T-AOC隨著家禽副產(chǎn)物酶解肽替代魚粉水平的增加表現(xiàn)為先增加后降低的趨勢，T-AOC最高組為T2組。

3 討 論

3.1 家禽副產(chǎn)物酶解肽對凡納濱對蝦生長、攝食、體成分的影響

Teshima等[13]、Zambonino等[14]、Erba等[15]均認為小肽制品對蝦苗具有明顯的促進生長作用。姜柯君[16]發(fā)現(xiàn)適量小肽的添加可提高星斑川鰈幼魚的肌肉品質(zhì)，提高對蛋白質(zhì)的吸收利用。本試驗將預(yù)混家禽副產(chǎn)物酶解肽以不同水平替代飼料中的魚粉，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，家禽副產(chǎn)物酶解肽替代2%、4%、6%的魚粉沒有表現(xiàn)出明顯的促生長作用，其增重率、特定生長率無顯著變化，但各替代組全蝦粗蛋白質(zhì)含量均略高于對照組，替代水平超過2%后全蝦粗脂肪含量顯著低于對照組，全蝦粗灰分顯著高于對照組，即替代組對蝦全蝦的粗蛋白質(zhì)含量與粗脂肪含量的比值較對照組增高了，這對于作為高蛋白質(zhì)食品的凡納濱對蝦來講是個好現(xiàn)象。本試驗中各替代組較對照組沒有表現(xiàn)出明顯的促生長作用可能與試驗對象凡納濱對蝦獨特的攝食、消化特點以及單獨添加游離氨基酸有關(guān)。Newey等證實，含2～3個氨基酸的小肽可以通過載體直接被小腸細胞吸收，于多數(shù)動物而言腸道是小肽吸收的主要場所。麥康森等[17]和劉襄河[18]的試驗均證明凡納濱對蝦對蛋白質(zhì)原料的消化、酶解和吸收集中在中腸腺(即肝胰腺)，飼料中游離氨基酸在進入腸道以前，絕大部分被中腸腺吸收。據(jù)此推測小肽和游離氨基酸的吸收可能存在空間差異，這可能是本次試驗中家禽副產(chǎn)物酶解肽對凡納濱對蝦沒有產(chǎn)生顯著性促生長作用的原因之一，鑒于對蝦獨特的攝食和消化特點，今后有必要進行小肽在對蝦中腸腺、腸道吸收轉(zhuǎn)運機制的深入研究。另外，有研究提出晶體氨基酸可被機體直接吸收，不能與飼料中蛋白質(zhì)態(tài)氨基酸同步吸收[19]，因此試驗飼料中預(yù)混家禽副產(chǎn)物酶解肽中選擇添加了包膜蛋氨酸而非晶體氨基酸，擬解決氨基酸吸收不同步的問題，至于結(jié)果沒有明顯促生長作用，除了氨基酸包膜材料的種類對氨基酸的吸收存在一定的影響外，可能對蝦對于小肽和不同形式游離氨基酸的吸收在空間和時間上均存在一定差異。由家禽副產(chǎn)物酶解肽的分子質(zhì)量分布可知，本試驗所用家禽副產(chǎn)物酶解肽的分子質(zhì)量小于1 000 u的小肽約占76%，而分子質(zhì)量小于1 000 u的小肽具有極強的活性和多樣性，多數(shù)可直接被機體吸收，因此推測本試驗中的小肽可能不存在與晶體蛋氨酸吸收不同步的問題，包膜蛋氨酸反而導(dǎo)致了吸收的不同步，或許加入晶體蛋氨酸后家禽副產(chǎn)物酶解肽對凡納濱對蝦的促生長作用更顯著，后續(xù)會進行在家禽副產(chǎn)物酶解肽中添加晶體蛋氨酸的試驗來驗證推論。至于家禽副產(chǎn)物酶解肽替代魚粉水平達到8%時增重率顯著降低除上述幾種原因外，也可能是由于替代水平的增加削弱了魚粉中某些促生長因子的作用，具體原因有待進一步研究。總之，家禽副產(chǎn)物酶解肽替代魚粉水平小于6%時，增重率、特定生長率等生長指標在統(tǒng)計學(xué)上無顯著性差異，結(jié)合資源節(jié)約和成本效益等因素考慮，家禽副產(chǎn)物酶解肽部分替代凡納濱對蝦飼料中的魚粉是可行的。

表11 家禽副產(chǎn)物酶解肽對凡納濱對蝦血漿和肝胰腺中T-AOC的影響

3.2 家禽副產(chǎn)物酶解肽對凡納濱對蝦肝胰腺消化酶活性及營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響

水產(chǎn)動物對飼料營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收主要依靠消化器官中的酶，機體消化能力、生長性能和免疫力均與消化酶的活性有關(guān)[20]。肝胰腺是蝦類主要的消化酶分泌器官，因此肝胰腺中消化酶的活性是衡量蝦消化能力的重要指標[21]，同時理論上認為消化酶活性的提高會引起相應(yīng)蛋白質(zhì)、脂肪等營養(yǎng)物質(zhì)消化率的增加[22]。本試驗發(fā)現(xiàn)，各替代組肝胰腺中脂肪酶活性均高于對照組，且以2%替代組最高；肝胰腺中胃蛋白酶和胰蛋白酶活性隨著家禽副產(chǎn)物酶解肽替代魚粉水平的增加均呈下降趨勢，當替代水平為8%時，顯著低于對照組；肝胰腺中淀粉酶活性各組間無顯著性差異；并且各組的蛋白質(zhì)表觀消化率、脂肪表觀消化率的變化趨勢與相應(yīng)酶活性的變化趨勢大致吻合，符合理論觀點。本試驗未能得出胡先勤等[23]認為的小肽能提高魚體內(nèi)某些消化酶活性，使水產(chǎn)動物的消化方式盡早由胞液消化轉(zhuǎn)變?yōu)槟は?，促進消化功能發(fā)育提前，使機體能更加充分有效地利用營養(yǎng)物質(zhì)這一結(jié)論，原因仍是與甲殼動物自身消化吸收方式有關(guān)。

3.3 家禽副產(chǎn)物酶解肽對凡納濱對蝦血漿生化指標的影響

血液中的GLU含量反映了凡納濱對蝦體內(nèi)糖代謝的情況，同時也可反映飼料中營養(yǎng)指標含量是否合適，以及肝臟機能的情況[24]。在一定閾值內(nèi)血漿GLU含量越高，表明蝦的狀態(tài)越好，血漿GLU含量超過一定閾值后會造成機體的營養(yǎng)生理脅迫，損害機體健康[25]。血漿TG含量反映機體脂肪代謝的情況，其含量升高表明肝臟中脂肪堆積較多，易引發(fā)脂肪肝、肝肥大等病理癥狀[26]。本試驗結(jié)果表明，家禽副產(chǎn)物酶解肽替代凡納濱對蝦飼料中2%～8%的魚粉時可降低血漿中GLU和TG含量，說明家禽副產(chǎn)物酶解肽替代部分魚粉對凡納濱對蝦糖、脂代謝有一定的影響。血漿中GLU和TG的含量會隨著飼料組成的不同發(fā)生明顯變化，血漿中GLU含量的降低，一方面可能是因為家禽副產(chǎn)物酶解肽中小肽對糖分解代謝的促進作用大于糖合成代謝，加速了機體內(nèi)糖的利用，降低了血漿中GLU含量；另一方面，甲殼動物所特有的多功能神經(jīng)內(nèi)分泌激素——甲克類高血糖素(crustacean hyperglycemic hormone，CHH)的主要功能是調(diào)節(jié)血漿GLU含量，家禽副產(chǎn)物酶解肽中的小肽有可能通過提高機體對CHH的敏感性來提高其效率，使血漿GLU含量降低。若脂類在體內(nèi)運輸發(fā)生障礙，則會導(dǎo)致血漿中TG的含量升高，各替代組血漿中TG的含量較對照組下降有可能是因為家禽副產(chǎn)物酶解肽中某些小肽可以促進血漿中脂質(zhì)的代謝，加速TG的水解和清除，或者是機體抗氧化能力的增強或減弱對血漿中脂質(zhì)代謝過程產(chǎn)生了影響，具體還有待進一步研究和論證。

3.4 家禽副產(chǎn)物酶解肽對凡納濱對蝦血漿和肝胰腺中非特異性免疫指標的影響

LZM又稱胞壁質(zhì)酶，是一種穩(wěn)定的堿性蛋白酶。Rojtinnakorn等[27]用表達序列標簽法研究日本囊對蝦免疫基因表達情況時發(fā)現(xiàn)LZM是重要的抗菌蛋白之一。滕玉清等[28]發(fā)現(xiàn)飼料中添加5%的魚蛋白水解物替代魚粉可顯著提高中國對蝦肝胰腺中LZM的活性；柳茜等[29]發(fā)現(xiàn)在飼料中添加2%酵母蛋白水解物替代魚粉時可顯著提高大菱鲆幼魚血清中LZM的活性。本試驗研究表明，隨著家禽副產(chǎn)物酶解肽替代魚粉水平的增加，肝胰腺中LZM的活性逐漸升高，但各組間無顯著差異；而血漿中LZM的活性則呈現(xiàn)出先增加后降低的趨勢，2%、4%和6%替代組顯著高于對照組，推測家禽副產(chǎn)物酶解肽通過增強凡納濱對蝦血漿中LZM的活性來提高自身抗菌、抗病毒能力。

POD是一類可以催化過氧化氫、氧化酚類和胺類的化合物，具有消除過氧化氫、酚類和胺類毒性的雙重作用，存在于過氧化物酶體中，是機體的抗氧化酶，對細胞起保護作用。本試驗結(jié)果表明2%替代組血漿中POD活性與對照組無顯著差異，但4%、6%及8%替代組血漿中POD的活性顯著低于對照組；肝胰腺中POD活性各組間無顯著差異。

測定T-AOC可以間接分析機體防御體系抗氧化的主要途徑，T-AOC是反映機體整體抗氧化水平高低的重要指標[30]。石廣舉等[31]研究發(fā)現(xiàn)抗菌肽可以顯著提高對蝦血清中T-AOC。在本試驗中，隨著家禽副產(chǎn)物酶解肽替代魚粉水平的增加，各替代組血清和肝胰腺中T-AOC均高于對照組(除2%替代組略低于對照組)，推測家禽副產(chǎn)物酶解肽可能有助于機體提高自身的抗氧化能力來增強機體的防御能力。另外，機體抗氧化能力在脂質(zhì)代謝中也具有重要的作用，抗氧化能力的增強有助于緩解機體應(yīng)激狀態(tài)，提高脂蛋白脂酶(LPL)活性，從而降低血漿中TG的含量[32-33]。因此，機體T-AOC的增強可能為本試驗血漿TG含量的降低提供了一個可能的原因。

4 結(jié) 論

在本試驗條件下：

① 家禽副產(chǎn)物酶解肽替代飼料中2%～6%的魚粉時，對凡納濱對蝦的存活率、增重率、特定生長率等生長指標及飼料利用指標無顯著影響。

② 家禽副產(chǎn)物酶解肽替代飼料中超過2%的魚粉時，會顯著降低凡納濱對蝦全蝦粗脂肪含量，顯著提高全蝦粗灰分含量，對其他體成分含量無顯著影響。

③ 家禽副產(chǎn)物酶解肽替代飼料中2%的魚粉時，凡納濱對蝦肝胰腺中脂肪酶活性最高，并可顯著降低血漿中GLU和TG的含量，顯著提高血漿中LZM的活性。

④ 以生長性能為基礎(chǔ)，綜合考慮消化、非特異性免疫等指標，家禽副產(chǎn)物酶解肽替代凡納濱對蝦飼料中魚粉的適宜水平為2%。

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